用酶联免疫吸附试验间接法检测猪瘟抗体

酶联免疫吸附试验间接法检测猪瘟抗体系用纯化抗原包被聚苯乙烯微量反应板,洗涤三次;加入待检血清,孵育后洗涤三次;再加入按工作效价稀释的HRP—SPA(辣根过氧化物酶标记的葡萄球菌蛋白A),孵育后洗涤三次;用OPD(邻苯二胺)配制酶的底物溶液。如血清中有猪瘟抗体存在,     

间接酶联免疫吸附试验检测黄曲霉毒素抗体的评价

本研究用一种新的简便的酶联免疫吸附试验程序检测黄曲霉毒素抗体。为证实所用的间接ELlSA新技术,用黄典霉毒素M_1—牛血清蛋白结合物免疫BALBlCT雌性小鼠,制备黄曲霉毒素M_1抗体。试验中。采用易于获得的黄曲霉毒素M_1—牛血清白蛋白和黄曲霉毒素B_1—牛血清白蛋白包被检测板,而不用纯抗体包被检测板(直接ELlSA)。也不用合成第二蛋白—黄曲霉毒素结合物(黄曲霉毒素M_1—聚—L—赖氨酸),这一方法,适用于经普通环戊羧基甲酸肟技术吸附的任何黄曲霉毒素,解决了早期直接和间接ELlSA费时及某些技术上的难题。这一新技术对进一步发展和改进黄曲霉毒素代谢产物的免疫学测定方法有一定的价值。     

应用间接酶联免疫吸附试验检测鸡传染性鼻炎抗体

本文应用聚苯乙烯塑料微量滴定板作为固液载体，辣根过氧物酶标记的羊抗鸡IgG为第二抗体，邻苯二胺为底物建立检测鸡传染性鼻炎抗体的间接酶联免疫吸附试验。对大庆市A、B、C三个种禽场的鸡群抽样采血检测，结果在被检的154份血清样品中，IC抗体阳性血样为35份，阳性检出率为22．8％。该方法具有快速、简便、敏感、特异等优点，适合于临床诊断和大批量样品检验。     

应用间接酶联免疫吸附试验检测鸡传染性鼻炎抗体

应用间接酶联免疫吸附试验对来自哈尔滨市Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ４个种禽场鸡群１８４份血清进行了鸡传染性鼻炎血清学调查,共检出阳性血清３３份,血清阳性率达１７．９％。４个种禽场都检出血清阳性,说明鸡传染性鼻炎在哈尔滨市感染率较高。     

应用间接酶联免疫吸附试验检测鸡传染性鼻炎抗体

应用聚苯乙烯塑料微量滴定板作为固相载体，辣极过氧物酶标记的羊抗鸡IgG为第二抗体，邻苯二胺为底物建检测鸡传染性处炎抗体的间接酶联免疫吸附试验，对大庆市A、B、C三个种禽场的鸡群抽样采血检测，结果在被检的154份血清样品中，IC抗体阳性血样为35份，阳性检出率为22.8%，该方法具有快速、简便、敏感、特异等优点，适合于临床诊断和大批量样品检疫。     

应用间接酶联免疫吸附试验检测鸡抗球虫早熟株三价苗抗体

将无球虫雏鸡随机分为２组,在７日龄和１４日龄分别经口接种鸡球虫早熟株三价苗３０００个／只卵囊和５０００个／只卵囊,用间接酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测血清抗球虫抗体的变化情况。结果。在首免后的第３、５和７ｄ用间接ＥＬＩＳＡ检测ＯＤ值为０．３３１、０．３４２和０．４１８,上升缓慢;二免后体水平稍有下降（ＯＤ值０．３８３）,随后迅速上升（ＯＤ值０．４７２）,于二兔后第１２ｄ达最高峰（ＯＤ值０．８５     

间接酶联免疫吸附试验检测禽流感抗体的最佳工作条件

禽流感病毒（ＡＩＶ）感染的鸡胚尿囊液经差速离心后,再经蔗糖密度梯度离心,提纯ＡＩＶ,纯化的ＡＩＶ经ＮＰ４０处理并反复冻融,即为ＡＩＥＬＩＳＡ抗原,用该抗原包被聚苯乙烯微量反应板。将健康鸡ＩｇＧ提纯后免疫兔,制备兔抗鸡ＩｇＧ,用过碘酸钠法制备辣根过氧化物酶标记的兔抗鸡ＩｇＧ。确立了间接酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测禽流感抗体的最适工作条件,即：抗原包被浓度１．９～３．８μｇ／ｍｌ,每孔１００μｌ,４℃冰箱过夜;用含０．５％牛血清白蛋白（ＢＳＡ）的磷酸盐缓冲液,３７℃封闭６０分钟;待检血清最佳稀释度为１８０～１６４０,作用６０分钟;酶标抗体作１２０００稀释,作用６０分钟。根据对５２份ＳＰＦ鸡血清的检测结果制定了判定标准。     

间接酶联免疫吸附试验检测禽流感抗体的最佳工作条件

禽流感病毒（ＡＩＶ）感染的鸡胚囊液经差速离心后,再经蔗糖密度梯度离心,提纯ＡＩＶ,纯化的ＡＩＶ经ＮＰ４０处理并反复冻融,即为ＡＩＥＬＩＳＡ抗原,用该抗原包被聚苯乙烯微量反应板,将健康鸡ＩｇＧ提纯后免疫兔,制备兔抗鸡ＩｇＧ用过碘酸钠法制备辣根过氧化物酶标记的兔抗鸡ＩｇＧ,确立了间接酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测禽流感抗最适工作条件,即：抗原包被浓度１．９～３．８μｇ／ｍｌ,每孔１００μｌ４℃冰箱     

用酶联免疫吸附和正向间接血凝试验检测猪瘟抗体

应用ELISA和IHA对我省两种猪场的66份血清进行了检测,结果表明用ELISA检测两猪场免疫合格率分别为83.33%、80.5%,用IHA检测分别为90%、97.2%;两者检测结果符合率为84.8%,具有较高的群体相关性。     

间接酶联免疫吸附测定法的第二抗体取代试验

间接酶联免疫吸附测定法(ELISA)的第二抗体,根据国内外文献记载,必须与第一抗体相对应。如检测患马血清的抗体,必须制备兔抗马IgG;检测患牛血清的抗体,必须制备兔抗牛IgG。从1980年以来,我们用ELISA检测牛伊氏锥虫病抗体,发现第二抗体可用免抗马IgG;用ELISA检测马伊氏锥虫病抗体,第二抗体亦可用兔抗牛IgG,现将结果报道如下。     

应用间接酶联免疫吸附试验检测鸡传染性支气管炎抗体的研究

建立了辣根过氧化物酶标记兔抗鸡ＩｇＧ检测鸡传染性支气管炎抗体的间接ＥＩＳＡ法，其抗原包被浓度为４ｍｇ／Ｌ，待检血清与酶结合物的最佳稀释度各为１：８０，酶结合物，抗原抗体的作用时间分别为６０ｍｉｎ，３０ｍｉｎ，封闭液的浓度和作用时间分别为１％和６０ｍｉｎ，ＯＤ值大于０．２８７的判为阳性。用此法检测经ＩＢＶ灭活苗免疫鸡所产蛋孵出的雏鸡的母原抗体，ＯＤ值的Ｐ／Ｎ值为６．０，１５ｄ后降至２．０以下。检测１     

用酶联免疫吸附和正向间接血凝试验检测猪温抗体

应用ELISA和IHA对我省两种猪场的66份血清进行了检测，结果表明用ELISA检测两猪场免疫合格率分别为83．33％、80．5％，用IHA检测分别为90％、97．2％；两者检测结果符合率为84．8％，具有较高的群体相关性。     

应用间接酶联免疫吸附试验检测鸡传染性支气管炎抗体的研究

本文建立了间接酶联免疫吸附试验(ELISA),用于检测鸡传染性支气管炎抗体。采用不连续蔗糖密度梯度离心法提纯鸡传染性支气管炎病毒作为包被抗原,确定了试验最佳工作条件:抗原包被浓度为2.6μg/ml,被检血清稀释度为1:128;酶标抗体工作浓度为1:6000。确定了血清样品阴、阳性的临界值为0.196。与美国KPL IBV-ELISA诊断盒相比较,结果表明建立的IBV-ELISA具有较高的敏感性和特异性。对北京、天津、河北、山东4个地区的12个非免疫鸡群的检测,结果表明阳性率高达74.3%。     

用酶联免疫吸附试验检测蓝舌病血清抗体

我们应用农业部动物检疫所蓝舌病组提供的酶联免疫吸附试验方法检测251份山羊蓝舌病血清抗体,通过特异性试验,阻断试验利重复性试验证明其特异性和重复性较好,用本方法和琼扩对比,ELISA比琼扩的敏感性高21.5个百分点,ELISA对琼扩的     

间接酶联免疫吸附试验检测猪生殖与呼吸系统综合征血清抗体的研究

本研究建立了检测猪生殖与呼吸系统综合征（ＰＲＲＳ）血清抗体的间接酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ），其抗原包被浓度为２μｇ／ｍｌ，血清最适稀释度为１∶１００。试验结果表明：ＥＬＩＳＡ的敏感性高于间接免疫荧光抗体试验（ＩＦＡ），是一种切实可行的诊断方法。     

利用重组抗原建立间接酶联免疫吸附试验检测猪传染性胃肠炎血清抗体

随着分子生物学的发展 ,重组抗原用于疾病的血清学诊断的报道越来越多 [3 ] 。周仲芳等报道了采用杆状病毒表达系统生产的TGE病毒纤突蛋白 ( S)建立了一种竞争ELISA检测猪 TGE血清抗体 ,获得了较为理想的特异性和准确性。本文报道了采用同样的重组抗原建立了一种间接 ELISA用于TGE血清抗体的检测 ,同时由于在结果判定中采用终点滴度技术 ( End- titer) ,使得检测结果的判定更直观和迅速。1　材料与方法1.1　 EL ISA操作方法　本研究中的抗原制备和包被方法见周仲芳等 ( 1997)的报道。ELISA板经抗原包被后可立即使用 ,也可保存…     

检测牛乳样品生物素酶联免疫吸附法特异性高于间接酶联免疫吸附法

印度DRKalorey等人用高纯度李斯特溶血素O作为抗原,通过与细菌学检查作比较,评估检测牛乳样品中单增李斯特菌抗体的间接酶联免疫吸附法（1ndirect ELISA）和生物素酶联免疫吸附法（A—BELISA）。     

猪乙型脑炎病毒间接酶联免疫吸附试验抗体检测试剂盒的研制及其应用

为研制一种快速猪乙型脑炎病毒抗体检测试剂盒,本研究参照已发表的JEV（乙型脑炎病毒）基因组序列,RT—PCR扩增了长约1000bp的E基因片段,连接pET30a表达载体后获得了以包涵体形式表达的重组E蛋白,以该蛋白作为诊断抗原,研制了检测乙型脑炎病毒抗体的间接ELISA（酶联免疫吸附试验）诊断试剂盒。该试剂盒与其它7种常见猪病病毒（圆环病毒2型、伪狂犬病病毒、蓝耳病病毒、细小病毒、流行性腹泻病毒、传染性胃肠炎病毒、猪瘟病毒）的阳性血清不发生交叉反应;批内重复性试验的变异系数小于5％,批间重复性试验的变异系数小于10％;与HI（血凝抑制试验）相比,符合率、敏感性和特异性分别为83．1％、84.3％和80．0％。本研究制备的重组蛋白具有良好的反应活性,以其作为包被抗原研制的JEVE—ELISA诊断试剂盒具有良好的重复性、敏感性和特异性,为JEV的快速诊断、免疫猪群抗体监测和JEV流行病学调查提供了一种快速、简便的血清学诊断试剂盒。