氨基酸对胚胎体外发育的影响

1 前言 氨基酸是胚胎培养液的重要成分,在培养液中添加氨基酸可促进胚胎发育[1],提高囊胚率、孵化率和胚胎质量,使胚胎的细胞数增加[2].但不同氨基酸对胚胎发育的作用不同,不同添加方式其效果也不一样.Bavister和他的同事对小鼠的研究工作,第一次揭示了氨基酸在体外胚胎培养中的作用.     

氨基酸和半胱胺对绵羊胚胎体外发育的影响

将从绵羊卵巢采集的卵母细胞成熟培养22-24h;成熟卵母细胞去除颗粒细胞,选择排出第一极体的卵母细胞,用5μmol／LA23187（5min）联合2mmol／L 6-DMAP（4h）进行孤雌激活;激活后的卵母细胞在培养液中进行培养。研究氨基酸和半胱胺对绵羊胚胎早期体外发育的影响。结果显示：（1）氨基酸能促进胚胎体外发育,0-24h培养添加抑制卵母细胞的卵裂,24h后培养添加比全过程培养添加更能促进胚胎体外发育;（2）24～72h培养添加必需氨基酸（EAA）,能促进胚胎体外发育;（3）半胱胺添加量0～100μmol／L,随浓度增高各项发育指标呈增高趋势,添加100～200μmol／L,随浓度增高各项发育指标呈下降趋势。     

氨基酸和半胱胺对绵羊胚胎体外发育的影响

将从绵羊卵巢采集的卵母细胞成熟培养22~24h;成熟卵母细胞去除颗粒细胞,选择排出第一极体的卵母细胞,用5μmol/L A23187(5min)联合2mmol/L 6-DMAP(4h)进行孤雌激活;激活后的卵母细胞在培养液中进行培养。研究氨基酸和半胱胺对绵羊胚胎早期体外发育的影响。结果显示:(1)氨基酸能促进胚胎体外发育,0~24h培养添加抑制卵母细胞的卵裂,24h后培养添加比全过程培养添加更能促进胚胎体外发育;(2)24~72h培养添加必需氨基酸(EAA),能促进胚胎体外发育;(3)半胱胺添加量0~100μmol/L,随浓度增高各项发育指标呈增高趋势,添加100~200μmol/L,随浓度增高各项发育指标呈下降趋势。     

氨基酸和牛磺酸对绵羊体外受精胚胎体外培养的影响

本文在KSOM培养液中添加牛磺酸和NEAA、EAA ,研究氨基酸对绵羊胚胎体外培养的影响。研究表明 :①牛磺酸、NEAA可以显著提高胚胎的桑椹胚和囊胚发育率 ;②EAA能促进胚胎由囊胚向孵化囊胚发育 ;③NEAA和EAA可促进胚胎的囊胚发育和孵化囊胚的发育。     

动物胚胎体外培养研究进展

近年来动物胚胎体培养取得了新进展，致密化前期胚胎利用葡萄糖作为能量底物的能力有限，但致密化后胚胎培养中葡萄糖的添加是必须的，由于氨基酸在早期胚胎的发育中是必需的，非必须氨基酸在致密化前发挥作用，致密化后期胚胎则需要所有氨基酸，血清对早期胚胎的发育有多重影响，BSA等一些生物大分子物质的配合添加可以取代血清的胚胎营养作用，并消除血清的负作用，在无血清培养液中，一些生长因子和细胞因子的加入是必须的，GSH等抗氧化物质添加进培养液可以对抗反应氧的作用，对胚胎发育起到保护作用。     

超数排卵对家兔早期胚胎体外发育的影响

为探讨超数排卵对家兔早期胚胎体外发育能力的影响,收集自然发情组和超数排卵处理组交配72 h后家兔胚胎,对经筛选合格的胚胎以小鼠成纤维细胞为饲养层进行体外培养,以自然发情交配的家兔胚胎为对照,观察培养96 h贴壁情况和内细胞团传代能力.超数排卵处理的家兔交配后经筛选所获得的可用胚胎数量增多;其96 h贴壁率和成功传代内细...     

氨基酸、维生素对水牛体外受精胚胎体外发育的影响

通过在培养液中添加不同浓度的氨基酸或维生素,探讨其对水牛体外受精(IVF)胚胎体外发育的影响.结果表明:(1)非必需氨基酸可显著提高水牛卵母细胞IVF后胚胎的分裂率,但对囊胚发育率无显著影响;(2)低浓度的必需氨基酸对水牛IVF胚胎的发育具有一定促进作用,但高浓度则有抑制作用;(3)维生素对水牛IVF胚胎发育则有促进作用.在培养液中添加维生素,水牛IVF胚胎的分裂率和第7天囊胚发育率显著提高.     

哺乳动物早期胚胎体外发育阻滞的产生与克服

哺乳动物早期胚胎发育阻滞是体外培养条件下普遍存在的现象。文中就离体情况下由于生长环境的变化使早期胚胎所遭受到外界因素的影响进行了探析。综合国内外研究报道，提出通过改善培养条件和利用体细胞共培养，克服早期胚胎的体外发育阻滞。旨在为哺乳动物胚胎的体外培养提供一些参考。     

猪孤雌胚胎体外培养影响因素

对NCSU-23和PZM-3等2种培养基体外培养猪孤雌激活(PA)胚胎的效果进行了比较,结果显示,PZM-3组与NCSU-23组PA胚胎囊胚孵化率差异显著(32.6%vs 18.9%,P<0.05);NCSU-23中添加2%必需氨基酸(EAA)显著降低猪PA胚胎的囊胚发育率(20.1%vs 25.1%,P<0.05);添加1%非必需氨基酸(NEAA)显著提高猪PA胚胎的囊胚率(24.7%vs 19.7%,P<0.05),但是联合添加NEAA和EAA对猪PA胚胎体外发育无显著影响(P>0.05).     

添加不同发情时期山羊血清对牛胚胎体外发育的影响

为了提高牛体外胚胎囊胚发育率,添加不同发情时期山羊血清对牛胚胎进行体外培养。分别采集发情周期D0、D2、D4和D7山羊血清（发情当天为D0）,灭活除菌备用。结果表明不同发情时期羊血清对孤紫激活胚胎孵裂率影响差异不显著,囊胚发育率分别为29.5%、32.4%、33.9%和41.3%,D7血清能显著提高囊胚发育率（P＜0.05）,且扩张和孵化胚出现较早。添加D0血清体外受精胚胎卵裂率较高,但对囊胚发育率影响差异不显著。说明孤紫激活和体外受精胚胎发育有差异,D7血清对胚胎后期发育有利。受精胚无血清培养3d后添加D7血清,囊胚发育率为42.9%,是较为理想的培养方法。     

哺乳动物卵母细胞、胚胎体外培养营养研究进展

文章概述了哺乳动物卵母细胞、胚胎体外培养营养研究进展，包括血清及血清蛋白、共培养体系、生长因子、碳水化合物和氨基酸、无机盐离子等方面的研究。     

哺乳动物体外胚胎染色体分析的现状

所谓动物体外胚胎是指动物的卵母细胞在体外条件下进行发育、成熟、受精 (或核移植 )和培养所产生的胚胎。该过程主要是依靠体外受精、胞质内单精子注射及核移植等技术来实现的。从第一例体外受精 (IVF)犊牛的出生 ,到体细胞克隆羊“多莉”的诞生 ,动物体外胚胎技术自建立以来 ,在医学和农业上己经取得了许多惊人的成就 ,成为了家畜改良的重要技术。但由于该技术还不十分完善 ,存在一些缺陷 ,因而妨碍了它在实际中的应用。因为从目前越来越多的研究发现 ,体外生产的胚胎发育成功率低 ,流产率高。另外 ,人们在研究中还发现 ,通过核移植 (NT…     

活性氧对兔早期胚胎体外发育的影响

研究旨在探讨活性氧-过氧化氢(H2O2)对兔2-细胞期胚胎体外发育的影响。在添加不同浓度过氧化氢的含胎牛血清的TCM-199培养液中,培养兔2-细胞期胚胎的对照组、≤88μmol/L、94μmol/L、103μmol/L≥118μmol/L组的囊胚发育率分别为86%、75%、34%、26%和5%;不同发育时间添加H2O2时对兔2-细胞期胚胎体外发育的影响为第1天处理组(37.14%)、第2天处理组(54.29%)与对照组(91.42%)差异显著。不同发育时间停止H2O2处理对兔2-细胞期胚胎体外发育的影响为第1天不处理组(82.26%)与对照组(97.14%)无显著性差异,但与第2天不处理组(52.50%)和第3天不处理组(30.00%)有差异。可以抑制兔2-细胞期胚胎体外发育的最低过氧化氢浓度为94μmol/L。兔2-细胞胚胎体外发育过程中,16-细胞之前的胚胎对环境中的过氧化氢都敏感,尤其是8-细胞之前的胚胎对环境中的过氧化氢更为敏感。     

影响牛早期胚胎体外发育的因素

早期胚胎的体外培养系统比较复杂，包括培养液、温度、气相、湿度、pH值、渗透压、离子浓度、能量来源、血清成分、光、水质和培养皿等等。不同物种的早期胚胎代谢具有差异性，而培养液的组成又极为复杂，这可能是造成各种胚胎培养基差异的根本原因。因为简单培养液不能较大限度地满足胚胎发育的需求成分，所以现在一般培养胚胎都用复合培养液。     

抗氧化剂对家畜胚胎体外发育影响的研究进展

现在研究普遍认为活性氧自由基是导致胚胎体外发育阻滞的主要原因。本文主要综述了不同抗氧化剂对牛胚胎体外发育的影响,并分析其作用机制。     

不同培养体系对延边黄牛胚胎体外发育的影响

近年来,随着卵母细胞体外成熟(IVM)、体外受精(IVF)以及细胞核移植技术的发展,胚胎体外培养(IVC)的方法也不断完善,使胚胎体外生产(IVP)成为可能。IVC体系的建立不仅是胚胎工程发展最基本的条件之一,而且有助于研究早期胚胎的发生、合     

动物胚胎体外培养研究进展

近年来动物胚胎体外培养取得了新进展.致密化前期胚胎利用葡萄糖作为能量底物的能力有限,但致密化后胚胎培养中葡萄糖的添加是必须的.自由氨基酸在早期胚胎的发育中是必需的,非必须氨基酸在致密化前发挥作用,致密化后期胚胎则需要所有氨基酸.血清对早期胚胎的发育有多重影响,BSA等一些生物大分子物质的配合添加可以取代血清的胚胎营养作用,并消除血清的负作用.在无血清培养液中,一些生长因子和细胞因子的加入是必须的.GSH等抗氧化物质添加进培养液可以对抗反应氧的作用,对胚胎发育起到保护作用.     

体外培养体系对牛体外受精胚胎性比的影响

研究了不同体外培养体系对牛体外受精胚胎性比的影响。结果表明，添加血清的2组培养系统中所得雄性囊胚与雌性囊胚的性比虽偏离了1：1，但差异不显著（P〉0．05），而总的体外胚胎的性比则显著偏离了1：1（P〈0．05）。这说明在体外培养系统中雄性胚胎比雌性胚胎发育能力更强，并且血清的存在对于雄性胚胎的发育有明显的促进作用。     

颗粒细胞单层对黄牛孤雌胚胎体外发育的影响

为优化颗粒细胞单层共培养体系,实验研究了颗粒细胞单层体外培养时间、颗粒细胞单层的种属及更换培养单层时间对黄牛孤雌胚胎体外发育的影响。结果表明:将培养0、2d和4d后的颗粒细胞单层用于胚胎的体外共培养,3组的卵裂率和囊胚率分别为84.47%/40.23%、78.49%/36.99%和71.55%/25.30%;来自黄牛、小鼠和猪的颗粒细胞单层在支持黄牛孤雌胚胎体外发育方面无显著差异(P>0.05);第4天更换培养单层的囊胚率最高(55.17%),与不更换单层的对照组(41.25%)有显著差异(P<0.05)。