对免疫禽非典型H5N1禽流感的进一步认识

只要野外有H5N1亚型禽流感病毒的存在,家禽就有可能受到感染,这是传染病的基本规律和常识,也是我们必须面对的事实。     

H5N1禽流感病毒感染雏鸡免疫器官细胞因子的变化

为探讨细胞因子在禽流感免疫发病机制中的作用,应用细胞培养技术和细胞因子活性检测方法,通过对胸腺和脾脏IL-2、IFN和TNF3种细胞因子的检测,研究不同日龄(7和21日龄)SPF雏鸡感染禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)后,上述被检指标的动态变化,结果发现,无论是7日龄,还是21日龄SPF雏鸡感染AIV后,其免疫器官胸腺和脾脏的IL-2和IFN诱生活性均有不同程度的降低,而TNF活性升高;但不同日龄雏鸡之间被检细胞因子,其降低或升高程度不论持续时间还是量也不完全相同,该研究不但表明细胞因子在禽流感免疫、发病中具有十分重要的调节作用,而且也与雏鸡感染年龄存在一定相关性。     

鸭源H5N5和H5N1亚型禽流感病毒BALB/c鼠感染试验

比较鸭源H5N5亚型禽流感病毒(A/Duck/Changchun/01/2010)和鸭源H5N1亚型禽流感病毒(A/Duck/Liaoning/N/2011)对BALB/c鼠的致病性。以106EID50/50μL剂量鼻腔感染6周龄BALB/c鼠,攻毒后3,5,7,10,14 d取小鼠的肺、脑和肝脏,处理后接种10日龄SPF鸡胚做病毒回收试验,取死亡鸡胚的尿囊液进行RT-PCR检测;分别取接种病毒后5 d小鼠的脑、肝脏、肺脏、脾脏、肾脏进行病理组织学检测。结果显示,小鼠接种H5N5和H5N1亚型禽流感病毒后,均无明显的临床症状,肝脏中分别于接种后3,5 d分离到病毒,肺脏中于接种后5 d分离到病毒,脾脏、肾脏和粪便中均未分离到病毒。病理组织学检测发现,病毒对小鼠的脏器组织产生了不同程度的病理损伤,以肺脏、脑和肝脏较为明显,且H5N1亚型禽流感病毒引起小鼠脑和肝脏的病理损伤比H5N5亚型更严重。这表明2株鸭源禽流感病毒对小鼠均有一定的致病性,且H5N1亚型强于H5N5亚型。     

H5N1亚型禽流感疫苗对供港鸡免疫效果评价

针对供港活鸡饲养周期长(85日龄～105日龄),禽流感抗体滴度要求高(21/28检测样品抗体滴度需≥4 log2)的特点,在原有H5N2疫苗对供港活禽免疫效果不理想的情况下,对哈尔滨兽医研究所研制的H5N1亚型禽流感疫苗进行了免疫效果评估.结果显示,H5N1疫苗免疫效果明显高于原有的H5N2疫苗,初步推荐该禽流感灭活疫苗对供港鸡场的免疫程序为:首免7日龄～10日龄,0.3 mL/只,皮下注射;二免45日龄,0.5 mL/只,肌肉注射.     

几种野生水禽H5N1禽流感疫苗免疫效果比较

选择北京动物园饲养的4种雁行目水禽和杭州动物园小天鹅进行H5N1禽流感疫苗免疫,考察其免疫效果。结果表明,在免疫约20 d抗体滴度达到峰值,后逐渐下降,抗体水平下降速度因野生水禽的种类不同而不同。     

H5N1亚型禽流感病毒对鸭的致病性研究

为评估H5N1亚型禽流感病毒(AIV)在实验室环境下对鸭的致病力,本研究以无特殊病原(SPF)鸭为模型,对我国近年分离的7株病毒进行了致病力分析。结果发现其中4株病毒对鸭致死率为100%,2株病毒对鸭的致死率分别为60%和80%,另外1株病毒,A/goose/Hubei/51/05(GS/HB/51/05),对鸭无致病力。本研究还发现,与高致病力毒株一样,GS/HB/51/05也可在鸭体内呈全身性复制,并且可通过喉头和泻殖腔向外排泄。我们推测GS/HB/51/05可能是中国南方出现的其他对鸭呈高致病力的H5N1病毒的祖先,对这些病毒的系统研究,可揭示H5N1亚型AIV对鸭的致病力遗传机制。     

H5N1亚型禽流感病毒进化的研究进展

H5N1亚型禽流感病毒是重要的人兽共患病病原,其基因组为分节段的负股单链RNA,这种特殊的基因组结构使得流感病毒的进化机制跟其他病毒有所不同。本文对流感病毒的进化机制、H5N1亚型禽流感病毒的进化规律和生物信息学在流感病毒进化中应用等方面的研究进展予以综述。     

H5N1亚型禽流感病毒NS1基因的克隆及表达

利用RT-PCR扩增了2株H5N1亚型禽流感病毒NS1基因,并将其克隆到pMD 18-T载体上,进行序列分析.结果显示,这2株禽流感病毒NS1基因核苷酸序列的同源性为70.2%,分别属于NS等位基因群A和等位基因群B.再将克隆的NS1基因插入到pET-28a质粒中构建原核表达载体,将其转化到DH5α大肠埃希氏菌感受态细胞中,经双酶切鉴定及序列分析,表明获得了重组质粒pET-52NS1和pET-174NS1.经SDS-PAGE分析,重组质粒转化BL21（DE3）（pLysS）感受态细胞后,经IPTG诱导,获得了分子质量约为30 ku的NS1融合蛋白.用AIV多克隆血清做Western-blotting分析,发现来自2个等位基因群的NS1蛋白都具有较好的抗原活性.     

各国对H5N1高致病性禽流感所采取的对策

当一个国家决定采用疫苗免疫的方法来防控H5N1高致病性禽流感的时候，就意味着绝大多数的国家会对该国出口的家禽制品设限。因此，欧洲和亚洲的国家在决定是否使用疫苗之前．都不得不先认真考虑这一政策会对其出口贸易产生的影响。     

H5N1亚型禽流感病毒NP基因的克隆与表达

根据已知H5N1亚型禽流感病毒NP基因序列设计、合成PCR克隆引物。自H5N1阳性病料中提取总RNA,反转录后采用高可信度DNA聚合酶,经PCR扩增NP基因,采用Invitrogen定向表达系统进行克隆表达,纯化获得N末端携带多聚组氨酸标签的重组NP蛋白,分子质量约66.0ku。采用单克隆抗体和阳性血清经ELISA、免疫印迹分析重组蛋白的免疫反应性。结果表明:所获得的重组NP蛋白在ELISA分析中均能与阳性血清和单克隆抗体发生特异性结合,但在免疫印迹分析中仅与阳性血清发生特异性结合。     

高致病性禽流感H5N1疫苗的免疫效果

禽流感H5N1是由禽流感病毒引起的禽类传染病,是危害世界养鸡业的主要疫病之一。国家对禽流感H5N1实行强制免疫。对相隔10 km的两个养鸡场的鸡群使用高致病性禽流感H5N1亚型疫苗进行免疫,测定禽流感H5抗体,分析免疫后抗体的消长规律,以期有效掌握免疫效果和疫病动态。     

富集H5N1亚型禽流感病毒生物磁珠的制备

制备了一种可以从大体积、低浓度病毒液体样品中富集H5N1亚型禽流感病毒的新型生物磁珠。比较了氨基磁珠与羧基磁珠作为生物磁珠载体的效果。结果表明,以pH 4.5MES（2-（N-吗啉）乙磺酸）为活化缓冲液活化羧基磁珠每毫克可以结合9.8μg的胎球蛋白,pH 4.5PBS（磷酸盐缓冲液）为活化缓冲液每毫克可以结合9.25μg的胎球蛋白;以5%戊二醛为活化剂活化氨基磁珠1h较以2.5%、7.5%的戊二醛为活化剂每毫克结合胎球蛋白量多,为8.12μg。制备完成的羧基型生物磁珠与氨基型生物磁珠均可富集H5N1亚型禽流感病毒,而羧基型生物磁珠可以富集检测出15倍病毒稀释液,敏感性较氨基磁珠富集检测出7倍病毒稀释液高。     

H5N1禽流感疫苗研究及应用

2003年以来，H5N1亚型禽流感病毒在东南亚多个国家包括中国引起禽流感暴发，并在越南、泰国、柬埔寨、印尼和中国引起人的感染和死亡。2005年，H5N1亚型禽流感病毒引起野生鸟类的大规模死亡，并随野生鸟类的迁徙而传播到更广泛的区域。本将对1996年以来中国家禽中分离的H5N1亚型禽流感病毒进化及演变关系．以及野鸟禽流感病毒的遗传多样性进行系统阐述。     

美国华人女科学家破解H5N1禽流感病毒死穴

据香港《太阳报》报道，随着近年来禽流感在世界各地的小时出现，令世人闻其色变，找到H5N1禽流感病毒的“死穴”已成为科学家们的愿望。由华人女科学家领导的一个小组，就找到了H5N1病毒的弱点，那就是促使它长形的蛋白尾巴发生突变，来阻止病毒感染其它细胞。这个办法推而广之，或可有效遏制其它流感的传播。     

基于纳米材料的电化学免疫传感器检测H5N1亚型禽流感病毒的研究

利用氧化石墨烯(GO)负载H5N1亚型禽流感病毒多克隆抗体(PAb-H5N1)及牛血清白蛋白(BSA)作为信号放大材料,构建一种新型电化学免疫传感器用于检测H5N1亚型禽流感病毒。结果表明:以PAb-H5N1-GO-BSA纳米复合物作为信号放大材料构建的电化学免疫传感器的灵敏度比不用此纳米复合物作为信号放大的高256倍。以PAb-H5N1-GO-BSA纳米复合物作为信号放大材料构建的电化学免疫传感器对H5N1亚型禽流感病毒的检测限为2-15 HA unit·50μL-1,检测线性范围为2-15～2-8 HA unit·50μL-1。此传感器特异性好,灵敏度高,在病原微生物快速检测领域具有良好的应用前景。     

禽流感H5N1灭活疫苗免疫对肉鸡生产影响的研究

选取6个养鸡场3万余只肉鸡,随机分成3组,在10日龄注射禽流感H5N1灭活苗,连续观察21 d,记录各组情况,并抽样作抗体检测.结果表明,15日龄时免疫过疫苗的比没免疫过疫苗的并没有少增重,反而均只重还多出36.66 g.日平均注射雏鸡最高可达3 000羽以上,平均327只/h,其注射劳务成本增加非常有限.因免疫造成的现场死亡鸡只非常少,24h之内死亡率不足0.5％,鸡群精神状态正常,饮水及采食量未见下降.     

香港的H5N1禽流感问题

如果发生最坏的情况．导致了人类的流感流行,那么全世界的家禽业就将处于致命的危险之中。     

利用免疫组织化学方法检测H5N1病毒的研究

禽流感(Avian Influenza,AI)是由禽流感病毒(Avian In-fluenza Virus,AI V)引起一种严重危害禽类、人类及其他动物的人畜共患传染病,主要引起禽类的全身性或呼吸器官性传染病,广泛发生于世界各地,造成的经济损失极大。被国际兽医局(OIE)列为A类传染病,并被列入国际生物公约动物     

哈萨克斯坦确认该国境内禽流感为致命H5N1型病毒

据路透社报道,哈萨克斯坦农业部官员8月10日表示,该国境内爆发的禽流感疫情已经被证实是对人类非常危险的H5N1病毒所致.