酸驼乳中益生乳酸菌的分离筛选

旨在评价酸驼乳中乳酸菌的益生特性。采用常规方法从内蒙古阿拉善牧区采集的酸驼乳中分离乳酸菌;利用16S r DNA PCR及序列分析法对分离到的乳酸菌进行种水平鉴定;通过体外抑菌试验和耐酸、耐胆盐试验评价乳酸菌的益生特性。结果表明,从酸驼乳中分离到的1株疑似乳酸菌被鉴定为短乳杆菌,将其命名为Lactobacillus breris LT;该菌株的代谢产物对4种常见肠道性致病菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门菌、单增李斯特菌)均表现出良好的抑菌特性,且抑菌特性不受胃蛋白酶和胰蛋白酶的影响;该菌株能够在低p H值(2.0、3.0)和高胆盐含量(0.1%~0.3%)的MRS培养基上生长。该研究结果为酸驼乳中优质乳酸菌资源的开发利用提供了科学依据。     

猪肠道感染鼠伤寒沙门氏菌免疫应答的定量分析

伤寒沙门氏菌的血清变种鼠伤寒沙门氏菌可导致肠道疾病而危害食品安全。传统使用体外模型模拟猪感染鼠伤寒沙门氏菌后的分子免疫应答机制并不能准确反映肠黏膜的实际免疫应答能力。这项研究通过口腔感染鼠伤寒沙门氏菌,以深入研究猪肠道的不同部位(回肠、空肠和结肠)对细菌感染的体外应答反应。试验动物为1月龄感染仔猪,分别在接种后1、2和6 d通过实时定量PCR技术对猪免疫系统中编码28种固有分子(包括细胞因子、趋化因子、模式识别受体、细胞内信号分子、转录因子和抗菌分子)的基因进行mRNA表达水平的定量,来确定猪肠道的免疫应答能力。同时,以未感染猪作对照来确定在稳定状态下肠道中不同部位基因表达水平的差别。在鼠伤寒沙门氏菌感染期间,肠道的3个不同部位基因表达水平发生变化。而且,编码炎症介质的基因表达变化显著,可能由肠道不同部位对炎症反应的应答能力不同导致。与在空肠和结肠不同,回肠表现为促炎症细胞因子转录本的下调和缺乏。在回肠和空肠,所有的趋化性细胞因子均表现上调,而在回肠,只有IL-8和MIP-1α的mRNA过表达。这项研究结果表明猪肠道的不同部位对鼠伤寒沙门氏菌感染的炎症应答能力导致基因表达水平的不同,为猪肠道细菌感染的全面认识...     

一株强抗逆性猪源乳酸菌的筛选及生物学特性研究

本试验从健康仔猪粪便样品中分离纯化得到5株乳酸菌,并应用16S rRNA基因进化分析对其进行种属鉴定。通过对此5株菌进行耐热、耐酸、耐胆盐、耐贮藏性能和抗生素抗性选育,与伤寒沙门氏菌、大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌进行混合培养,探究其对大肠杆菌、鸡白痢沙门等病原菌的抑菌效果,最终筛选出一株具有强抗逆性和优良益生特性的屎肠球菌,并进一步对其生长性能和生理生化特性进行了系统研究,为菌株的开发与应用提供理论参考。 [关键词] 仔猪粪便|屎肠球菌|筛选|抗逆性|益生特性     

益生凝结芽孢杆菌的筛选及生物学特性研究

本实验依据益生菌筛选的常规方法和凝结芽孢杆菌的判定标准,旨在从健康仔猪粪便中分离获得益生性能优良且安全的益生凝结芽孢杆菌,并通过体外模拟动物肠道环境,评价其益生特性和应用特点。本研究从70余株猪源芽孢杆菌中筛选鉴定出4株凝结芽孢杆菌,分别命名为BC147、BC235、BC303和BC310。结果表明:4株菌对大肠杆菌K88,鸡肠炎沙门菌,猪肠炎沙门菌,金黄色葡萄球菌,鼠伤寒沙门菌均表现出良好的抑菌作用。益生及耐受性研究发现,四株菌均具有良好黏附能力,并对胆盐和低酸环境表现出较强的耐受能力,其中BC303对仔猪肠黏液的黏附率高达41.67%,在p H 4的条件下其营养细胞存活率高达91.0%,在0.3%胆盐中暴露2 h,其存活率仍然维持在40%以上。同时,四株菌均具有一定的蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶产生能力。结果显示,从健康仔猪肠道及粪便分离筛选获得的凝结芽孢杆菌具有良好的益生性和安全性,其在畜禽养殖中具有广泛应用前景。     

一株泡菜来源副干酪乳杆菌生物学特性及抗逆性研究

研究对从泡菜中分离的一株副干酪乳杆菌进行生长曲线测定、耐酸试验、耐猪胆盐试验、人工模拟猪胃肠道环境耐受性试验和抑菌试验等抗逆性研究。结果表明:饲用微生态制剂湖南省工程实验室从泡菜中分离得到的副干酪乳杆菌耐酸性强(pH 2.0)和耐高胆盐质量分数(质量/体积0.3%),对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、副伤寒沙门菌和鸡白痢沙门菌等具有较好的抑菌效果。     

具有益生特性的小尾寒羊肠道正常菌群的分离、鉴定及筛选

为了获得适合生产的羊源益生菌株,本试验从健康成年小尾寒羊肠道内分离出5株菌落形态各异、生长良好的菌株。通过革兰染色、生理生化鉴定及16SrDNA分析,5株菌分别为M1(干酪乳杆菌)、M2(植物乳杆菌)、E1(粪肠球菌)、E2(屎肠球菌)、L1(枯草芽孢杆菌)。细菌生长曲线、耐酸、耐胆盐、抑菌试验等益生特性分析结果表明,M1、M2和L1具有生长速度快,耐酸、耐胆盐,明显抑制大肠杆菌、鸡白痢沙门菌和金黄色葡萄球菌等肠道常见致病菌的益生特性,可以作为研制羊用微生态制剂的候选菌株。     

猪源粪肠球菌的分离与鉴定

从新鲜仔猪粪便中分离益生菌,筛选出适合养猪生产的益生菌株,为进一步开发猪用微生态制剂奠定基础。采集长春市双阳地区某猪场健康仔猪新鲜粪便,分离纯化粪肠球菌,通过形态学观察、体外耐酸耐胆盐性能和抑菌能力试验,筛选出益生特性的候选菌株,16S rDNA序列分析方法鉴定其种属,并对候选菌株生长情况及其对抗菌药物敏感性进行评价。成功筛选出2株(S-50、和S-4)耐酸、耐胆盐和抑菌能力较强的粪肠球菌,且具有较好的生长性能,为研发微生态制剂提了供理论依据。     

宫内发育迟缓仔猪断奶后肠道菌群特征及其与生长的潜在联系

本试验旨在研究正常体重(NBW)仔猪和宫内发育迟缓(IUGR)仔猪肠道菌群的定植特征及其与器官生长发育的潜在联系。试验选取NBW仔猪和IUGR仔猪各12头,21日龄断奶后转至单栏饲喂,经7 d适应后,开始为期28 d的饲养试验。分别于试验的第0和28天空腹称重并记录,屠宰后分离肝脏、脾脏和胰腺称重;分离空肠、回肠和结肠称重并测量长度,采集肠内容物进行微生物组分析。结果表明,与NBW仔猪相比,IUGR仔猪的末重、肝脏重、空肠重和长度均显著降低(P<0.05),而肝脏系数,回肠重、长度和系数以及结肠重、长度与系数均显著升高(P<0.05)。NBW仔猪和IUGR仔猪空肠、回肠和结肠微生物α和β多样性均无明显改变,而IUGR仔猪空肠变形菌门(Proteobacteria)丰度呈升高趋势(P=0.08),回肠Proteobacteria和放线菌门(Actinobacteria)丰度显著升高、厚壁菌门(Firmicutes)丰度显著降低(P<0.05)。此外,Spearman分析发现肠道菌丰度与仔猪器官发育密切相关,其中呈显著负相关(P<0.05)的包括：空肠葡萄球菌属(S...     

1株具有免疫增强功能的乳酸菌筛选及其免疫效果评价

为筛选出具有较强免疫功能的益生菌用于临床研究,对分离自健康鸡粪便样品中的20株乳酸菌进行耐酸、耐胆盐、体外抑菌、黏附、胞外多糖含量测定试验以及小鼠免疫功能检测,并结合上述试验结果进行综合性评价.结果:筛选出20号菌株为目的菌株,耐酸、耐胆盐试验表明,该菌株在pH=2时的存活率为72.7％,在胆盐浓度为1.0％的环境中存...     

几株饲用乳酸菌益生性能的研究

对实验室保存的10株乳酸菌进行耐酸、耐胆盐试验,筛选出3株有效菌。采用牛津杯法研究3株乳酸菌对大肠杆菌和沙门氏菌的抑菌机理,即取乳酸菌发酵液、发酵滤液、菌体体外抑制病原菌及经碱处理、乳酸脱氢酶处理的发酵滤液体外抑制致病菌。结果表明:3株乳酸菌都有抑菌能力,菌液及发酵滤液的抑菌能力无明显区别,菌体无抑菌能力。发酵滤液经碱处理后抑菌能力下降,经乳酸脱氢酶处理后抑菌能力无明显影响。     

猪源乳酸菌对致病性大肠杆菌的体外抑制作用

对从健康仔猪肠道分离的12株乳酸菌菌株进行耐酸试验和耐胆盐试验,筛选出4株有效菌株。分别将这4株乳酸菌单独、混合与K88共培养;取4种乳酸菌单独和混合培养的菌液、发酵滤液和菌体用牛津杯做K88抑制试验;分别将培养滤液经过乳酸脱氢酶和碱处理做K88抑制试验。结果表明:4种乳酸菌皆具有抑菌功能,但相互之间有差异;用乳酸脱氢酶或碱处理后抑菌能力明显下降,说明乳酸菌是通过产生有机酸尤其是乳酸对K88进行有效抑制。4种菌混合培养的抑菌能力强于单独培养。     

猪源乳酸菌的抗逆性及益生性研究

在对猪肠道中分离到的乳酸菌的抗逆性和益生性进行研究,拟为获取可用于发酵饲料生产接种菌奠定基础。采用体外法,对筛选得到的11株乳酸菌进行耐酸、耐胆盐、抑菌、温度敏感性和耐抗生素试验检测。结果显示:11株乳酸菌中,编号为L71、L76和L104的乳酸菌株可耐受p H2.5环境,暗示其对胃酸环境有一定的耐受性;L33、L35、L37和L104菌株可耐受猪肠道的胆盐环境;L22、L24、L26、L71、L76和L96菌株发酵液上清对大肠杆菌K88、K99和鸡白痢沙门氏菌均有较好的抑制效果;L76和L96菌株对60℃温度具有一定耐受性;L71、L76和L96对抗生素最低耐受量在益生菌的测定最低限制浓度范围内。研究表明:编号为L71和L76的2株乳酸菌具有较好的抗逆性,有用作发酵饲料生产接种菌的潜力。     

仔猪益生乳酸菌的分离及其抗逆性筛选

从仔猪肠道中分离出45株乳酸菌,从中筛选出4株耐酸、耐胆盐并具有良好益生性的菌株,小鼠试验证明其具有可靠的安全性,所分离出的4株乳酸杆菌可用于仔猪生产中用。     

二甲酸钾预防沙门菌感染小鼠的效果评价及对肠道菌群的影响

二甲酸钾(potassium diformate, KDF)为酸化剂的代表之一，在2001年被欧盟批准可作为饲料添加剂使用，在2005年被我国批准作为饲料添加剂。目前已有较多的研究表明KDF可以显著提高动物的生长性能，然而关于KDF对传染病预防作用的直接证据的研究还比较少。本研究旨在通过体外抑菌试验及小鼠感染模型，在体外和体内评价KDF对致病菌的预防效果，并检测KDF对小鼠肠道菌群的影响，以探讨KDF的作用机理。在体外检测KDF对养殖场中常见病原菌的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC)后，选取3～4周龄，体重12～15 g的C57/BL6雌鼠，分组饲喂一周后感染鼠伤寒沙门菌，记录KDF饲喂组、KDF饮水组和对照组小鼠感染后的体重变化(n=6),并在感染后第6天将小鼠安乐死检测其盲肠组织载菌量(n=6)、血清炎性细胞因子水平(n=6)和盲肠病理变化(n=3)。另外选取两组3～4周龄，体重12～15 g的C57/BL6雌鼠(n=5),饲喂含有KDF的饲料两周后采集其粪便，利用16S rRNA测序技术分析饲喂KDF对小鼠盲肠菌群的影响。结...     

地顶孢霉培养物对断奶仔猪生长性能、肠道菌群及体液免疫的影响

为了在研究地顶孢霉(Acremonium terricola)培养物对断奶仔猪肠道菌群及免疫机能的影响,选取35日龄太湖黑猪×杜洛克杂交断奶仔猪30头,随机分为2组,每个组3个重复,每个重复5头猪,对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中添加0.1%ATC,试验期45 d。结果显示:试验组相比对照组腹泻率显著减少(P0.05);终末体重试验组高出对照组7.62%,试验组料重比比对照组低12.93%;对照组结肠大肠杆菌数量显著高于试验组(P0.05),试验组盲肠沙门菌数极显著低于对照组(P0.01),结肠沙门菌数显著低于对照组(P0.05),试验组盲肠与结肠乳酸杆菌数均显著低于对照组(P0.05);试验30 d,试验组猪瘟(HC)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)及猪口蹄疫(FMD)抗体高于对照组(P0.05),45 d后试验组HC抗体极显著高于对照组(P0.01),PRRS抗体显著高于对照组(P0.05),45 d后试验组FMD抗体高于对照组,差异不显著(P0.05)。因此,ATC能够改善断奶仔猪肠道健康,增强其体液免疫应答功能。     

乳酸杆菌LAP5在单胃经济动物中的应用

<正>一、起源由猪只肠道筛选出15株菌,其中一株耐酸、耐胆盐能力最佳之菌株外观呈长杆状。LA=Lactobacillus acidophilus,外观长杆状P=frompig,5=当时试验菌株编号。二、LAP5具通过、定殖消化道、排除沙门氏菌能力LAP5可耐酸耐胆盐能力佳→存活于消化道;可吸附与     

一株嗜酸乳杆菌的分离鉴定及其生物学特性研究

为丰富猪源微生态制剂菌种,研究从健康猪肠道内容物中分离获得5株疑似乳杆菌菌株,通过生理生化和分子生物学鉴定方法,综合确定其中一株菌为嗜酸乳杆菌,命名为HEW-A701;对其耐酸性能、耐胆盐性能和对致病菌颉颃性能进行研究,表明菌株HEW-A701具有较强的耐酸性、耐胆盐性及对大肠杆菌、沙门菌和金黄色葡萄球菌有较强的颉颃性。     

动物源乳酸菌的分离鉴定以及生物学特性研究

为了筛选性状良好的动物源乳酸菌为微生态制剂的制备提供候选菌株,试验对鸡、雏鸭、甲鱼和小鼠的肠道内容物进行细菌分离鉴定,并对鉴定的乳酸菌进行耐酸、耐胆盐和生长特性研究。结果表明:从鸡、雏鸭、甲鱼和小鼠肠道内容物中各分离出了一株乳酸菌;相比其他三株乳酸菌,分离自甲鱼肠道的类肠膜魏斯氏菌生长性能优良,具备较强的耐酸、耐胆盐能力,且在pH值为7和pH值为4.5的条件下均具有较快的生长速度。说明分离自甲鱼的乳酸菌能够作为微生态制剂制备的候选菌株。     

乌鸡肠道中一株乳酸菌的分离鉴定及生物学特性研究

本试验采用添加碳酸钙的MRS培养基作为筛选培养基，从乌鸡肠道中筛选乳酸菌，并对分离到的菌种进行16S rDNA基因序列鉴定以及益生性能研究，测定其生长速率、产酸能力、耐酸和耐胆盐性能、抑菌能力及抗生素敏感性。试验结果表明：分离到的溶钙圈较好的菌株N为乳酸菌，分离菌株N产酸能力强，达到对数期的时间短，在低pH、高胆盐浓度时，仍具有较好生长活性。 [关键词] 乳酸菌|乌鸡|益生性能     

复方白头翁散对鹅源鼠伤寒沙门菌分离株的体外抑制效果

为研究复方白头翁散对鹅源沙门菌优势流行株的抑制效果。2017年5月—2018年7月共收集扬州、滁州和泰州等10个地区送检的病死鹅的肝脏、胆汁和盲肠内容物等病料共计214份，随即进行沙门菌的分离鉴定。结果显示：沙门菌分离率为23.4%(50/214),其中鼠伤寒沙门菌占60%(30/50),为优势血清型；药敏试验结果显示，36株沙门菌具多重耐药性，其中鼠伤寒沙门菌占20株；结晶紫染色试验结果显示，86.7%(26/30)的鼠伤寒沙门菌能够形成生物被膜；体外试验结果显示，复方白头翁散对鼠伤寒沙门菌最小抑菌浓度(MIC)范围为23.44～375.00 mg/mL,最小杀菌浓度(MBC)范围为46.87～375.00 mg/mL;93.75 mg/mL复方白头翁散可抑制此26株细菌生物被膜的形成。结果表明鼠伤寒沙门菌是鹅源沙门菌优势血清型，也是感染鹅的一个重要的病原体，复方白头翁散能有效地抑制鼠伤寒沙门菌。