绿僵菌MaZPTR 01菌株固体发酵条件筛选研究

以绿僵菌MaZPTR 01菌株为发酵菌株,进行最佳固体发酵培养基、不同加水量及加水顺序筛选,培养基不同厚度对产孢的影响,以及测定固体发酵过程中的温度变化等试验。结果表明：不同培养基组分及配比对绿僵菌的产孢量影响均极为显著,绿僵菌MaZPTR 01菌株的最佳固体发酵培养基配比为A1B3C1D3,即V （玉米粉）∶ V （麦麸）∶ V （米粉）∶ V （谷壳）=1∶3∶1∶3;固体培养基加水后灭菌的处理绿僵菌产孢量显著较先灭菌后加无菌水的处理要高;每500g固体培养基加水400mL混合后灭菌的物理状态好、产孢量最高,固体培养基厚度以5cm培养效果最好;通过测定绿僵菌固体发酵过程中的温度变化与对绿僵菌生长情况的观察,发现0~24h为生长延滞期,24~48h为对数生长期,48~96h为生长稳定期,之后为生长衰退期 （产孢阶段）。     

云南干巴菌次生代谢产物研究

为研究干巴菌的次生代谢产物,利用色谱技术从干巴菌中得到7个化合物,其结构用波谱分析方法分别鉴定为(22E, 24R)-ergosta-5, 7, 22-trien-3-o1(1), stearic acid(2), p-hydroxybenzoic acid(3), 5, 8-epidioxy-(22E, 24R)-ergosta-6, 22-dien-3-o1(4),(22E, 24R)-ergosta-4, 6, 8(14), 22-tetraen-3-one(5), -sitosterol(6), ethyl p-hydroxybenzoate(7);其中,化合物3~7为首次从该真菌中分离得到。     

金龟子绿僵菌发酵代谢产物中苦马豆素的初步研究

金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)经过发酵培养,采用气相色谱法对发酵代谢产物中的苦马豆素(Swainsonine SW)进行了定性和定量分析;同时用正丁醇萃取法对发酵液进行了初步的分离提取及薄层层析法检测。结果表明,金龟子绿僵菌发酵代谢产物中含有苦马豆素,且含量为10.2 131 mg/L;正丁醇萃取法是从发酵液中提取苦马豆素的有效方法。     

解磷菌Novosphingobium sp.WW01的解磷活性及其发酵条件研究

从烟草根际土壤中分离到1株具有解磷活性菌株,编号WW01。通过连续发酵培养,考察了WW01菌株的解磷活性,结果显示WW01菌株发酵48 h时,发酵上清液中有效磷含量达到最大值1.33 mg/L。结合形态特征、生化测定和16S r DNA分析结果,WW01菌株鉴定为鞘鞍醇杆菌属,暂命名为Novosphingobium sp.WW01。发酵条件测定表明,菌株WW01对6种碳源的同化能力由强到弱的顺序是葡萄糖>直链淀粉>蔗糖>乳酸>支链淀粉>海藻糖;对6种氮源的同化能力由强到弱的顺序是硝酸钠>尿素>酰胺>氯化铵>硝酸钾>硫酸铵;生长的适宜温度是30～40℃,适宜的pH是6～8。菌株WW01可作为烟草有机肥备用资源。     

拟诺卡氏菌次级代谢产物的研究

[目的]研究拟诺卡氏菌次级代谢产物的化学成分。[方法]应用多种色谱方法进行分离和纯化,并用NMR和MS等方法解析其结构。[结果]得到4个单体化合物,其结构分别鉴定为白鲜碱、6-羟基-4-（4-羟苯基）-7-甲氧基香豆素、4-异丙基苯甲酸、β-吲哚甲酸。[结论]所有化合物均为首次从该菌中分离得到。     

蜡蚧轮枝菌的发酵培养及其代谢产物对害虫毒杀作用的初步研究

研究表明,蜡蚧轮枝菌(Verticillium lecanii(Zimm.))在2种液体和5种固体培养基中发酵比较,以麦芽汁液体和小米粒固体培养基中的产孢量和分生孢子活力较高。液体发酵5～12 d 的代谢产物粗提物(稀释10倍)对温室白粉虱成虫的毒杀作用,以发酵7 d 的为最好,24 h 校正死亡率为50.18%,但与发酵5 d 的(34.18%)无显著差异(P<0.05)。代谢产物粗提物对棉铃虫、麦长管蚜的触杀作用较好,对瓜蚜次之,对桃蚜最差。如试验24 h,稀释5倍的代谢产物杀虫校正死亡率,麦长管蚜66.7%、棉铃虫66.7%、瓜蚜48.8%、桃蚜23.4%。稀释2倍时,24 h 瓜蚜的校正死亡率为78.8%,略高于氰戊菊酯(7768mg·L~(-1))的毒杀作用(77.2%)。说明该菌代谢产物中具有杀虫活性物质,值得进一步研究利用。     

蒿属植物内生真菌Penicillium sp.抗癌活性产物的液体发酵工艺优化

编号为GZUCCZY0012的青霉属内生真菌Penicillium sp.代谢产物中的物质A疑似为青蒿素类化合物,体外抗癌实验表明物质A对人前列腺癌细胞PC3和人非小细胞肺癌细胞A549具有中等的细胞毒活力。本实验以物质A的含量为主要指标,通过单因素实验和正交实验的考察,并结合PB和中心组合设计,优化确定了适合物质A积累的GZUCCZY0012液体发酵培养基和培养条件。研究结果表明:GZUCCZY0012发酵生产物质A的最优培养基为麦芽糖47.52 g/L、NH4Cl 14.82 g/L、K2HPO41.5 g/L、MgSO42.0 g/L、KCl 2.0 g/L、ZnSO40.5 g/L、CaCl20.5g/L、FeSO40.5 g/L,pH 6.0,接种量4%(V/V),于26℃下摇瓶发酵14 d,物质A的产量可以达到(144.61±7.56)μg/mL,比优化前的含量(32.30±2.28)μg/mL提高了3.48倍。     

镰孢菌代谢产物浓度的定量测定方法

针对大豆根腐主要病原菌之一的镰孢菌进行的其代谢产物定量研究结果表明,在一定条件下,在PSC和土壤浸提液 大豆汁培养液中随接菌量的增加,其培养滤液的电导率也随之增加,说明随代谢产物浓度的增加电导率值也随着增加,二者呈高度正相关;在其“接种”不同浓度代谢产物的盆栽试验中,随代谢产物电导率(浓度)增加,其导致的大豆根部变褐程度也呈规律性加重,表明可以用培养滤液电导率值表示培养滤液中代谢产物的相对浓度。     

多孔菌发酵代谢物的抑菌活性研究

用乙酸乙酯和正丁醇分别从多孔菌(Polyporus variusPers.:Fr.)摇瓶发酵液的上清液和菌丝体中提取生物活性物质,然后分别对不同细菌和植物病原菌进行抑菌活性的测定。试验结果表明,发酵液的乙酸乙酯提取物能显著抑制金黄色葡萄球菌、枯草杆菌和大肠杆菌;菌丝的乙酸乙酯提取物对大肠杆菌的抑制作用较强;而菌丝的正丁醇提取物对5种植物病原菌均有不同程度的抑制作用。     

白腐菌固体发酵稻草传代驯化研究

[目的]研究白腐菌固体发酵稻草的传代驯化。[方法]通过对9株白腐菌(01菌、02号菌、1号菌、3号菌、5号菌、2-5菌、柬兰、姬松茸3-L和华泰菌)稻草固体发酵进行9～10次传代驯化试验,研究其菌丝生长状况、代时及发酵后的稻草降解性能。[结果]01菌和华泰菌经多代传接,生长正常,菌丝粗壮、纯白,抗杂菌能力强;在10.5～11.3 d发酵期内,SI值分别为1.71和1.34,居国内同类试验先进水平,可开发为草浆生产的白腐菌剂。[结论]该研究为研发适应于我国草浆生产的白腐菌剂提供了参考依据。     

灰葡萄孢菌不同发酵方式次生代谢产物的生物活性

对灰葡萄孢菌固体和液体发酵后的次生代谢产物乙酸乙酯粗提物进行抑菌、杀虫活性研究,结果表明:用于测试的5种真菌病原菌中,固体发酵粗提物对烟草赤星病菌和稻瘟病菌的菌丝生长有很高的抑制活性,对番茄早疫病菌、菜豆炭疽病菌、梨黑星病菌和稻瘟病菌的孢子萌发有很高的抑制活性;液体发酵粗提物对番茄早疫病菌、梨黑星病菌的菌丝生长和菜豆炭疽病菌的孢子萌发有非常高的抑制率.对2种细菌病原菌烟草野火病菌和白菜软腐病菌,固体、液体发酵粗提物抑制生长率均高达80%以上,但固体稍高于液体发酵粗提物;在杀虫方面,固体发酵粗提物对桃蚜触杀作用明显高于液体发酵粗提物.     

间型脉孢菌固体发酵产纤维素酶研究

采用正交试验和单因子试验对间型脉孢菌固体发酵产纤维素酶条件及酶学性质进行了研究,测定了CMC酶、β-葡萄糖苷酶和滤纸酶活力,以CMC酶和β-葡萄糖苷酶为主要参考指标,结果表明:以麸皮米糠为碳源且比例为1∶1、硫酸铵的浓度为3%、料液比为1∶1.5为最佳产酶培养基,在初始pH值为7.0、温度为34℃、培养时间为108 h的条件下纤维素酶活力较高,CMC酶活、FAP酶活和β-葡萄糖苷酶活分别为668.0、162.5、939.5 U/g,酶反应最适温度为55～60℃,最适pH值为4.0～4.5。     

鲍氏层孔菌发酵产物抑菌活性的研究

 为研究鲍氏层孔菌发酵产物对植物病原菌的抑菌活性,采用菌丝生长速率法以鲍氏层 孔菌发酵产物的不同溶剂萃取物为研究对象,测定其对7种植物病原菌的抑制作用。将鲍氏层 孔菌的发酵产物进行不同的处理,分级纯化抑菌活性多糖,比较其抑菌活性。结果表明:鲍氏 层孔菌发酵产物对7种病原菌均有抑制作用;鲍氏层孔菌发酵时间为20 d时,发酵产物对杨树 烂皮病菌的抑制率最高;鲍氏层孔菌发酵产物的主要抑菌活性物质存在于发酵上清液醇提物 中;醇沉体积分数为50％醇提物中的多糖对病原菌的抑制率为供试醇沉级别中最高。鲍氏层 孔菌含有抑制病原菌的有效成分,具有成为新型生物农药的潜力。     

1株红树内生真菌Fusarium sp.代谢产物的研究

【目的】研究红树林镰刀菌属真菌Fusarium sp.R5的代谢产物。【方法】采用硅胶柱层析分离纯化代谢产物,波谱技术鉴定结构,滤纸片扩散法测试抗植物病原真菌活性。【结果】分离鉴定5-羟甲基-2-呋喃甲醛(化合物1),(3R,4R)-顺-4-羟基蜂蜜曲菌素(化合物2),(3R,4R)-顺-4,7-二羟基蜂蜜曲菌素(化合物3),Clavatol(化合物4),酒渣碱(化合物5),麦角甾-4,6,8(14),22-四烯-3酮(化合物6),β-谷甾醇(化合物7)、3β-胆甾-5-烯-3-醇(化合物8)、丁二酸和顺丁烯二酸10个化合物。在250μg·m L~(-1)时,化合物5对香蕉炭疽菌Colletotrichum musae高度抗菌,化合物5和6对番茄枯萎菌F.oxysporum、小麦赤霉菌F.graminearum中度抗菌。【结论】从Fusarium属分离得到化合物1~8,其中,化合物5、6可作为相应农药抗菌先导化合物开展深入研究。     

中药渣固体发酵亮菌产漆酶研究

[目的]研究中药渣固体发酵亮菌产漆酶及其发酵条件,以充分利用中药渣。[方法]在单因子试验基础上,用正交试验法对中药渣固体发酵亮菌的培养基和培养条件进行优化筛选。[结果]在供试的6种药渣培养基中以白芍药渣为碳源时产漆酶量最佳,其最适培养条件为葡萄糖0.6%,白芍麸皮比3∶7,温度25℃,含水量65%,接种量11%。[结论]供试6种中药渣固体发酵亮菌均可产漆酶,培养条件优化后,亮菌漆酶酶活力较初始培养基提高了19倍。     

花脸香蘑液体发酵次生代谢产物中挥发性物质的化学成分研究

采用GC-MS联用技术,结合质谱信息经计算机检索NIST147标准质谱图库与人工解析,分析了花脸香蘑Lepista sordida(Fr)Sing菌株发酵液CH2Cl2提取物的挥发性成分,发酵液中气相色谱共分离了19个峰,经解析确定了16个成分,在培养基(对照组)中CH2Cl2提取物气相色谱共分离了16个峰,经解析确定了14个成分,主要次生代谢产物为1-Decanol,1,2-Benzendicarboxylic acid,2,6-Dichlorophenylisothiocyanate,Benzenemethanol,1-H-3α,7-Methanazulen-5ol,2-Chloro-4,5-dimethoxybenzaldehyde,5-Chloro-2-methoxybenzoic acid,Geranic acid,Pyrrolo[1,2-α]pyrazine-1,4-dione,Cyclo-(1-leucyl-1-phenylalanyl)。     

哈茨木霉M-17固体发酵及发酵产物浸提液对镰刀菌的抑制作用

通过平板对峙试验测定哈茨木霉M-17对尖孢镰刀菌、接骨木镰刀菌、木贼镰刀菌、茄病镰刀菌和锐顶镰刀菌的抑制作用;通过抑菌试验测定菌株M-17在添加中药残渣固体培养基中发酵产物浸提液的抑菌作用,筛选对5种供试病原真菌具有抑菌作用的固体发酵培养基配方。结果表明：哈茨木霉M-17对尖孢镰刀菌、接骨木镰刀菌、木贼镰刀菌、茄病镰刀菌和锐顶镰刀菌的菌丝生长抑制率分别为66.39%、66.18%、  57.06%、66.38%和51.29%;在添加中药渣固体发酵培养基上,菌株M-17的发酵产物浸提液对不同病原菌的抑制作用不同,其中配方为甘草∶玉米粉∶木屑的固体培养基对多种病原真菌具有较强抑制作用,配比为5∶4∶1时,M-17发酵产物浸提液对木贼镰刀菌的抑制率最高,为76.89%;配比为3∶5∶2时,对木贼镰刀菌和尖孢镰刀菌的抑制率最高,分别为78.45%和72.20%;配比为7∶2∶1时,对木贼镰刀菌的抑制率最高,为77.19%;配方为板蓝根∶玉米粉∶木屑、配比为3∶5∶2时,M-17发酵产物浸提液对木贼镰刀菌的抑制率最高,为77.99%。不同固体发酵培养基和配方影响木霉M-17发酵产物对不同镰刀菌的抑菌作用,为木霉菌制剂开发和应用提供了基础。     

不同培养条件对乳酸菌发酵代谢产物CLA的影响

共轭亚油酸是具有多种生理功能的生物活性物质,是一种很有前途的绿色饲料添加剂。本试验以植物乳杆菌为出发菌株,探讨了温度、时间、初始pH、接种量以及油脂添加量等不同发酵条件对发酵代谢产物中共轭亚油酸产量的影响。获得了生成CLA最佳发酵工艺参数为：温度37％,发酵时间96h,pH6．5,接种量5mL／100g,葵花籽油添加量2％。     

里西裸囊菌代谢产物对植物幼苗的影响研究

[目的]对里西裸囊菌代谢产物对植物幼苗影响进行研究,使该具有潜力的生防因子得到有效应用。[方法]以对根结线虫具有很强杀虫作用的里西裸囊菌为试验材料,测定代谢产物对植物活性的影响,代谢产物活性的差异和不同浓度代谢产物对植物活性的影响。[结果]里西裸囊菌代谢产物对不同植物的影响不同;不同培养基培养和不同溶剂抽提的里西裸囊菌代谢产物对植物的幼苗影响不同;不同浓度里西裸囊菌代谢产物对不同植物幼苗生长影响不同。[结论]还需进一步深入研究该里西裸囊菌代谢物在防治根结线虫时所需的浓度和使用时期。