猪繁殖与呼吸综合征病毒的诊断及检测技术研究进展

猪繁殖与呼吸综合征是猪群中的一种免疫抑制性传染病,是严重危害养猪业的主要疫病之一,运用各种检测技术对该病做出准确的诊断是预防和控制该病的前提。猪繁殖与呼吸综合征的检测包括检测病毒、检测血清抗体及分型诊断,涉及的技术和方法有病毒分离技术、免疫组化技术、RT-PCR技术、间接免疫荧光试验、免疫过氧化物酶单层细胞试验、酶联免疫吸附试验、基因芯片技术等。每种诊断技术都有其各自的优势和局限性,应根据研究目的及工作条件等予以选择,作者对各种诊断技术的原理、方法及特点进行了概述和比较,并对今后的应用前景和发展趋势进行了展望。     

马病毒性动脉炎诊断技术研究进展

马病毒性动脉炎(EVA)是马属动物之间通过呼吸道或生殖器官传播的传染病,是危害养马业及赛马比赛的重要疾病之一,应用各种诊断技术对该病做出准确的诊断是预防和控制该病的前提.EVA的诊断技术包括检测病毒,检测血清抗体,涉及的技术和方法包括病毒的分离及中和试验、血凝及血凝抑制试验、免疫荧光试验以及酶联免疫吸附试验等.每种诊断技术都有其各自的优势和局限性,应根据目的及工作条件等综合情况予以选择,论文就各种诊断技术的原理、方法及特点进行了概述和比较,并对今后的应用前景和发展趋势进行了展望.     

猪繁殖与呼吸综合征血清学检测技术研究进展

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)又称蓝耳病,是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的以妊娠母猪的繁殖障碍以及仔猪和成长猪的呼吸困难为主要特征的传染病。目前,血清学检测是猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测最常用的方法,文章对血清中和试验、酶联免疫吸附试验、过氧化酶单层细胞试验、间接免疫荧光试验等猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体诊断技术的原理及其应用现状作一综述,并对各种检测方法的优缺点进行了分析。     

鸭圆环病毒检测方法研究进展

鸭圆环病毒病是由鸭圆环病毒感染引起的一种免疫抑制性疾病。本文综述了鸭圆环病毒血清学和病原学检测方法的研究进展,主要包括间接免疫荧光试验、酶联免疫吸附试验、核酸探针技术、普通PCR、限制性片段长度多态性聚合酶链反应、套式PCR、多重PCR、荧光定量PCR和环介导等温扩增技术等,并对各种方法的优缺点进行了汇总分析,以期为该病的诊断与防控工作提供参考。     

鸡传染性支气管炎的实验室诊断技术

鸡传染性支气管炎是危害世界养鸡业的主要疫病之一,临床上无典型的病变特征,诊断较为困难,故对该病的实验室诊断技术进行了介绍。从病料采集和处理、病毒分离、病毒鉴定,包括传统的琼脂扩散试验、中和试验和血凝抑制试验,到目前发展很快的酶联免疫吸附试验(ELISA)和荧光抗体技术,其各具特点,互有利弊。为了更好地控制该病,有必要根据临床特点对目前各种检测鸡传染性支气管炎的方法及其优缺点进行分析,为临床寻找一种适合的快速和准确的诊断方法、制定合理的免疫程序以及发展新型的诊断方法提供参考。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒实验室检测技术研究进展

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的临床症状表现为母猪繁殖性能下降、不孕、流产等。感染猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)后病理及组织学变化往往不太典型,而且易与其它病原感染所引起的病理变化相混淆,给该病的诊断带来一定困难,因此,对于PRRSV的确诊有赖于实验室诊断,不同的诊断方法敏感性、特异性及成本方面存在差异,而现有的血清学方法无法区分疫苗抗体和野毒抗体。作者就PRRSV抗原或抗体的检测技术（如病毒分离、RT-PCR、免疫过氧化物酶技术、酶联免疫吸附试验等）的研究现状作一简单的概述。     

猪流行性腹泻的诊断技术概述

猪流行性腹泻病毒可引起感染猪严重腹泻与脱水,对仔猪有很高的致死率,给全球养猪业带来了重大经济损失,尤其对包括中国在内的亚洲国家的养猪业造成越来越严重的危害。猪流行性腹泻的诊断方法主要有临床症状与病理学诊断以及基于仪器设备的实验室诊断,如病毒分离鉴定、病毒血清中和试验、免疫电镜观察、免疫荧光检测、酶联免疫吸附试验、聚合酶链式反应以及环介导等温扩增技术等。然而要确诊该病,必须结合各种检测手段综合判定。     

鸭病毒性肝炎诊断技术的研究进展

本文综述了鸭肝炎病毒的诊断技术,包括常规的病毒分离技术、血清学诊断技术及分子生物学诊断技术,着重对目前广泛应用的血清学诊断技术如中和试验、琼脂扩散试验、凝集试验、荧光抗体技术、酶联免疫吸附试验和胶体金技术等进行了介绍,比较了各种方法的优缺点,并对鸭肝炎病毒诊断技术进行了展望。     

犬瘟热病毒快速检测技术研究进展

犬瘟热病毒感染犬、狼、貂、狐等多种动物,发病率、死亡率较高,造成严重危害.因此,快速准确检测该病并及时治疗是防控的有效措施.本文综述了几种犬瘟热病毒的快速检测技术,包括免疫荧光技术、酶联免疫吸附试验、胶体金免疫层析技术、核酸杂交技术、聚合酶链式反应和环介导等温扩增技术.并对犬瘟热病毒快速检测技术进行了评述,为犬瘟热的临床快速准确诊断提供参考,对该病的防治具有重要意义.     

牛副流感病毒3型检测方法研究进展

牛呼吸道疾病综合征是引起世界范围内饲养牛发病和死亡的主要原因,严重危害着养牛业的发展。本文介绍了牛副流感病毒3型的病原学检测方法,包括病毒分离与鉴定、分子生物学检测方法和血凝试验,以及血清学检测方法,包括血凝抑制试验、免疫荧光试验、中和试验、酶联免疫吸附实验和液相芯片技术等。通过综述近年来牛副流感病毒3型的最新实验室检测方法研究进展,为该病检测和诊断提供参考。     

非洲猪瘟诊断方法研究进展

非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起的猪的急性、热性、高度接触性传染病,急性病例的发病率和死亡率几乎达100%。世界动物卫生组织将ASF列为法定报告动物疫病,中国将其列为一类动物疫病。当前中国ASF疫情防控形势十分严峻,且尚无有效的疫苗及其他防治制剂,因此执行严格的卫生措施及监测病原和抗体,进而排查和清除带毒动物是ASF防控的重要措施。笔者就ASFV诊断标识出发,总结了近年来ASF病原检测与血清学监测技术的最新研究进展。抗原检测方面,在PCR基础上发展的多种等温扩增技术如重组酶聚合酶扩增技术、交叉引物扩增技术、环介导等温扩增技术及微滴数字PCR从不同方面克服了常规PCR的缺陷,实时荧光定量PCR检测方法具有速度快、准确、结果客观和可定量基因组含量等优点,新型CRISPR/Cas12a技术无需昂贵的仪器,可为ASFV的检测提供一种更加便携、简单、灵敏和特异性强的新型替代方法;抗体检测方面,基于酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫层析技术和间接免疫荧光试验等的检测方法灵敏度和特异性也有不同程度的提高。     

猪繁殖与呼吸综合征的实验室诊断方法

猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是当前严重危害我国养猪业的重要传染病。PRRS的确诊依赖于实验室方法,包括检测抗原的病毒分离、免疫组化、免疫荧光、RT—PCR等方法,检测抗体的ELISA、血清病毒中和试验、间接免疫荧光、免疫过氧化酶单层试验等血清学方法。每种方法在诊断的敏感性、特异性以及成本方面存在差异,现有的血清学方法无法区分疫苗抗体和野毒抗体。正确的诊断结果取决于样品的种类、采样时间以及采样的代表性。PRRS确诊和结果的解释必须综合抗原抗体检测结果、流行病学资料、猪群疫苗应用情况等。     

Evaluation of real-time RT-PCR assay for the routine intra vitam diagnosis of classical swine fever

The aim of the study was to evaluate the diagnostic quality of the real-time RT-PCR assay described by Hoffmann et al. [Hoffmann, B., Beer, M., Schelp, C., Schirrmeier, H., Depner, K., 2005. Validation of a real-time RT-PCR assay for sensitive and specific detection of classical swine fever. J. Virol. Methods 130, 36-44] for the routine intra vitam diagnosis of classical swine fever (CSF). We compared the assay with conventional diagnostic methods by using defined diagnostic material from an animal experiment with pigs showing different clinical forms of CSF. Compared to virus isolation and antigen ELISA an enhanced sensitivity of the real-time RT-PCR could be shown. We were able to detect all infected pigs regardless of the clinical course of CSF. CSF infection was detected already during the incubation period, during the entire clinical phase as well as at the beginning of convalescence when the first antibodies were detected and no virus could be isolated any more. In most cases, positive PCR results were obtained 2 days earlier than with virus isolation and 2-4 days earlier than with the antigen ELISA.     

猪流感诊断技术研究进展

猪流感是由甲型流行性感冒病毒感染引起的一种急性呼吸道传染病。除常规的临床症状及病理变化诊断外,猪流感的确诊依赖于实验室诊断方法,方法主要有电镜技术、病毒分离和鉴定、血清学试验、免疫学试验、分子生物学方法等。作者从传统的实验室诊断技术和分子生物学诊断技术两个方面综合阐述了猪流感的诊断研究进展,为SIV的临床快速诊断和深入研究提供科学依据。     

A multiplex RT-PCR assay for the rapid and differential diagnosis of classical swine fever and other pestivirus infections

Classical swine fever is a highly contagious viral disease causing severe economic losses in pig production almost worldwide. All pestivirus species can infect pigs, therefore accurate and rapid pestivirus detection and differentiation is of great importance to assure control measures in swine farming. Here we describe the development and evaluation of a novel multiplex, highly sensitive and specific RT-PCR for the simultaneous detection and rapid differentiation between CSFV and other pestivirus infections in swine. The universal and differential detection was based on primers designed to amplify a fragment of the 5′ non-coding genome region for the detection of pestiviruses and a fragment of the NS5B gene for the detection of classical swine fever virus. The assay proved to be specific when different pestivirus strains from swine and ruminants were evaluated. The analytical sensitivity was estimated to be as little as 0.89 TCID₅₀. The assay analysis of 30 tissue homogenate samples from naturally infected and non-CSF infected animals and 40 standard serum samples evaluated as part of two European Inter-laboratory Comparison Tests conducted by the European Community Reference Laboratory, Hanover, Germany proved that the multiplex RT-PCR method provides a rapid, highly sensitive, and cost-effective laboratory diagnosis for classical swine fever and other pestivirus infections in swine.     

猪支原体肺炎流行病学和诊断技术研究进展

论文概述了猪支原体肺炎的病原学特性、流行病学和诊断方法的研究进展,并对猪支原体肺炎临床检测、血清学检测、分子生物学检测等检测技术的优缺点进行比较.在猪支原体肺炎预防控制方面,对上述检测技术和诊断方法的应用进行了讨论和展望,旨在为研究该病提供理论参考.     

Microarray-based detection of viruses causing vesicular or vesicular-like lesions in livestock animals

Definitive diagnosis of vesicular or vesicular-like lesions in livestock animals presents challenges both for veterinary clinicians and diagnostic laboratories. It is often impossible to diagnose the causative disease agent on a clinical basis alone and difficult to collect ample vesicular epithelium samples. Due to restrictions of time and sample size, once laboratory tests have ruled out foot-and-mouth disease, vesicular stomatitis and swine vesicular disease a definitive diagnosis may remain elusive. With the ability to test a small quantity of sample for a large number of pathogens simultaneously, DNA microarrays represent a potential solution to this problem. This study describes the application of a long oligonucleotide microarray assay to the identification of viruses known to cause vesicular or vesicular-like lesions in livestock animals. Eighteen virus isolates from cell culture were successfully identified to genus level, including representatives of each foot-and-mouth disease virus serotype, two species of vesicular stomatitis virus (VSV), swine vesicular disease virus, vesicular exanthema of swine virus (VESV), bovine herpesvirus 1, orf virus, pseudocowpox virus, bluetongue virus serotype 1 and bovine viral diarrhoea virus 1. VSV and VESV were also identified in vesicular epithelium samples, with varying levels of sensitivity. The results indicate that with further development this microarray assay could be a valuable tool for the diagnosis of vesicular and vesicular-like diseases.     

非洲猪瘟血清学诊断靶点的研究进展

非洲猪瘟（African swine fever,ASF）是一种由非洲猪瘟病毒（African swine fever virus,ASFV）引起的猪高致死性传染病。ASFV编码蛋白p30、p54和p72等具有较高的免疫原性,且部分氨基酸序列较为保守,常被作为血清学诊断靶点,用于评价ASF不同阶段或发病程度的抗体水平变化,ASF血清学诊断靶点相关深入研究有助于其感染检测、致病机制和机体免疫系统反应等探究。本文系统阐述用于ASF血清学诊断的主要候选蛋白及其靶点的检测应用进展,并分析候选靶点的抗原表位（区域）及其抗体结合的特点,探讨其作为ASF血清学诊断新靶点的应用潜力。