提高摩本杂一代水牛受胎率的体会

我市从 1976年引进印度摩拉水牛 ,采用人工授精方法改良本地水牛 ,使其生产性能由役用向役乳兼用方向转变。摩本杂一代 (以下称 F1)水牛一个泌乳期的产奶量由本地水牛的 60 0 kg增加到 1639.5kg。但在人工授精时 ,大部分发育正常的 F1母牛屡配不孕 ,而本地水牛受胎率均在 4 0 %以上。笔者通过对 F1母牛发情过程的观察和分析 ,采取相应措施后 ,使 F1母牛的情期受胎率达到 4 2 % ,有的配种季节达到 58%。现把提高 F1母牛受胎率的体会归纳如下 :1　 F1母牛配种难孕的原因　本地水牛在发情前期和发情中期 ,都有明显的外观表现 ,如哞叫不安 ,…     

提高本摩杂一代水牛受胎率的体会

我市从1976年以来引进印度摩拉水牛,采用人工授精的方法,改良本地水牛,使本地水牛的生产性能由役用向役乳兼用的方向转变,本摩杂一代(以下称F1)水牛一个泌乳期的产奶量由本地水牛的600kg增加到1 639.5 kg.但是在人工授精时,大部分发育正常的F1母牛屡配不孕,而本地水牛受胎率均在40%以上.笔者通过对F1母牛发情过程的观察和分析后,采取相应措施,使F1母牛的情期受胎率达到42%,有的配种季节达到58%.现把提高F1母牛受胎率的体会归纳如下.     

摩本杂F1水牛生长性能研究

对摩本杂F₁水牛在昆明小哨的全放牧条件下3年的生长性能进行研究，结果表明：初生体重平均36.40 kg，成年牛平均体重558.90 kg。     

摩本杂F1奶水牛泌乳性能研究

在昆明小哨开展摩本杂F₁水牛的泌乳性能测定，结果表明该杂交牛的泌乳期相对较长,少数个体可长达370 d以上,一般平均为292±45.5 d；一个泌乳期的正常泌乳量平均为2015.38 kg(1761.25~2299.54 kg),平均日产乳量6.39 kg。     

摩本杂F1奶水牛繁殖性能研究

通过对昆明小哨全放牧条件下饲养的37头摩本杂F₁育成母水牛繁殖行为及性能进行研究，结果证明：初情期表现于体重在等于或大于240 kg、年龄1.5岁左右时；初配月龄24月龄，体重300 kg，第一情期受胎率平均25.3%，随月龄的增长受胎率增加。发情周期为20.9±2.7 d,发情持续时间为2.5±1.3 d；妊娠期为311.5±11.8 d。     

云南水牛同期发情技术的研究

为探讨云南水牛同期发情的效果,于2007～2009年在云南大理、德宏对摩本杂水牛和尼本杂水牛共260头采用CIDR+PG、两次PG法进行了同期发情处理,以期提高云南水牛的同期发情率和冷冻精液人工授精配种受胎率。结果表明:摩本杂和尼本杂水牛经同期发情处理后发情率分别为86.54%和86.81%,冷冻精液配种后受胎率分别为48.89%和49.37%。两者间差异不显著(P0.05)。采用CIDR+PG同期发情处理法的效果无论在同期发情率还是受胎率上都明显好于两次PG法。两者间差异显著(P0.05)。在秋季进行同期发情处理,水牛的同期发情率最高,可达88.71%,明显高于春季的73.17%。在受胎率方面,也是秋季效果要好于春季,两者间差异显著(P0.05)。同期发情和自然发情受胎率方面,同期发情处理的受胎率为45.09%,自然发情受胎率为34.5%,两者间差异极显著(P0.01)。     

奶水牛繁殖性能研究

 通过对昆明小哨全放牧条件下饲养的37头摩本杂F₁育成母水牛繁殖行为及性能进行研究，结果证明：初情期表现于体重在等于或大于240 kg、年龄1.5岁左右时；初配月龄24月龄，体重300 kg，第一情期受胎率平均25.3%，随月龄的增长受胎率增加。发情周期为20.9±2.7 d,发情持续时间为2.5±1.3 d；妊娠期为311.5±11.8 d。     

水牛生长性能研究

 对摩本杂F₁水牛在昆明小哨的全放牧条件下3年的生长性能进行研究，结果表明：初生体重平均36.40 kg，成年牛平均体重558.90 kg。     

中国水牛两种住肉孢子虫包囊超微结构的比较研究

本文对采自我国湖南水牛食道肌的大、小两种住肉孢子虫包囊的超微结构进行了研究。两种包囊的细胞(母细胞和缓殖子)未发现有明显的结构区别,而包囊壁的结构则揭示出明显的差异。大包囊的原囊壁向表面皱褶形成菜椰花样的突起,突起内含纤丝,突起表面有凹陷;而小包囊的原囊壁皱褶形成长指形的突起,突起内不含纤丝,倒伏在包囊表面,突起壁是平滑的,无凹陷。这一观察表细:我国水牛体内的大包囊属于梭形住肉孢子虫,小包囊可能是枯氏住肉孢子虫。     

不同补饲水平摩本杂F_1代奶水牛犊牛增重效果研究

[目的]本试验旨在提高犊牛早期日增重的方法,进行本次试验。[方法]采用日龄、体型、体重均相近的1月龄以内的摩本杂F1代奶水牛犊牛14头,随机分成试验A组和试验B组,分别饲喂不同日粮(试验A组完全补饲精料补充料、试验B组补饲精料补充料与苜蓿颗粒各占50%),试验期为163d,试验结束后比较两组的日增重。[结果]补饲水平不同对云南摩本杂F1代奶水牛犊牛早期增重影响很大,试验A组增重效果明显好于试验B组。[结论]试验表明在云南摩本杂F1代奶水牛犊牛早期饲养过程中适当增加精料补充料的饲喂量,可以获得更高日增重。     

德宏水牛与尼里拉菲水牛及其杂交水牛的细胞遗传学研究

为了弄清河川型水牛与沼泽型水牛杂交后代的核型,以及与其育性和亲本核型的关系,用外周血液淋巴细胞培养法对尼里拉菲水牛、德宏水牛及尼里拉菲水牛×德宏水牛F1代公牛进行淋巴细胞培养,制作染色体标本,并进行G-带染色;利用BEION染色体核型分析系统对染色体标本分别进行染色体核型分析,确定其染色体核型。根据染色体核型分析结果,并结合其育性,分析染色体核型与其育性的关系。结果显示,尼里拉菲水牛核型为2n=50,XY;德宏水牛核型为2n=48,-4,-4,-9,-9,+t(4;9),+t(4;9),XY;尼里拉菲水牛×德宏水牛F1代公牛核型为:2n=49,-4,-9,+t(4;9),XY。     

地中海水牛杂交后代生长性能测定初报

[目的]为了解地中海水牛引进我国后,在广西地区的气候适应性及其生长发育情况。[方法]本试验选取地中海杂交后代水牛32头,对其生长发育前期阶段(0～12月龄)的体重、体斜长、体高、胸围、腹围等参数进行连续跟踪测定,并对其的生理生化相关指标进行了测定。[结果]地中海水牛及其杂交后代水牛之间的体温、呼吸、脉搏等生理数值和各项血液生化指标没有差异(P>0.05),并与先前引进的摩拉、尼里及其杂交水牛数值相似;地中海水牛与摩拉、尼里和本地的杂交后代初生重是差异不显著的(P>0.05),随着月龄的增长,地中海水牛与摩拉、尼里杂交后代的各月龄体重增长速度比地中海—本地杂交水牛高,但差异不显著(P>0.05),而地×摩、地×尼杂交水牛在0～12月龄之间的生长速度基本相同;地×摩、地×尼和地×本的杂交水牛1～12月龄的体高、体斜长、胸围和腹围变化趋势大体一致。[结论]地中海水牛引进我国后,不仅能够完全适应我国南方地区尤其广西的环境气候条件,而且表现出良好的生长优势。     

DDR1基因过表达对水牛乳腺上皮细胞的影响

为揭示盘状结构域受体1（discoidin domain receptor1,DDR1）基因对水牛泌乳性能的影响,本研究构建了水牛DDR1基因真核表达载体,并对其最佳转染时间进行摸索,同时分析DDR1基因过表达对水牛乳腺上皮细胞的影响。琼脂糖凝胶电泳检测结果显示,载体片段大小与目标载体片段大小一致,均为8.8 kb,测序结果显示其与目的片段序列匹配率为100%。细胞转染试验结果显示,DDR1基因过表达最佳转染时间为48 h。细胞增殖检测结果显示,DDR1基因过表达组与对照组细胞相对荧光值差异不显著（P>0.05）。细胞凋亡检测结果显示,DDR1基因过表达对水牛乳腺上皮细胞的晚期凋亡率（19.87% VS 17.49%）无影响（P>0.05）,但极显著增加了水牛乳腺上皮细胞早期凋亡率（6.48% VS 1.35%,P<0.01）。同时,DDR1基因过表达上调了水牛乳腺上皮细胞中抑凋亡基因BCL-2和XIAP的表达,而下调了促凋亡基因P53的表达。此外,DDR1基因过表达显著提高了水牛乳腺上皮细胞的迁移率（66.26% VS 58.76%,P<0.05）。综上,试验成功构建了水牛DDR1基因真核表达载体并证明了DDR1基因过表达促进了水牛乳腺上皮细胞的早期凋亡和迁移,为今后进一步研究水牛乳腺发育和泌乳性能提供了一定理论依据。     

摩拉水牛改良滇东南水牛的效果研究

[目的]探索摩拉水牛改良滇东南水牛的杂交效果。[方法]采用直肠把握输精法,用摩拉水牛冻精冷配滇东南水牛。[结果]表明,摩本杂F1代成年公牛的各项体尺体重指标与滇东南水牛的差别不大,而摩本杂F1代成年母牛的体重、体高、体斜长、十字部高、髋宽、胸围、管围等比滇东南水牛有不同程度的提高(P0.05或P0.01),而其他体尺二者间差别不大(P0.05)。至一岁前的摩本杂F1代生长速度较快,1岁公母牛的体重分别为274.08±36.40kg和278.25±55.05kg,较国内其他地方水牛品种的杂交一代高。摩本杂F1代成年公母牛的体重分别为474.54±63.00kg和459.39±68.12kg,摩本杂F1代母牛的体格得到明显的改善,体重增大。[结论]用摩拉水牛与滇东南水牛杂交,可以提高滇东南水牛摩本杂F1代的体格、早期生长速度、生长性能及泌乳性能。     

水牛体细胞核移植方法的研究

探讨电融合参数对水牛体细胞核移植效果的影响。体外成熟培养 22~24 h的水牛卵母细胞,在含有 5μg/mL细胞松弛素的操作液中进行去核,然后将经0 .1 mg/L Aphidicolin (APD)处理1 d, 再用0. 5% FBS培养2~9 d的水牛耳皮成纤维细胞或颗粒细胞注射到去核的卵母细胞卵周隙中,再经电融合形成重构胚。重构胚经 5μmol/L离子霉素激活处理5 min并在2 mmol/L的 6 DMAP中培养 3 h后,在含有颗粒细胞单层细胞的微滴中(30μL)培养7~9 d,观察其卵裂和胚胎发育情况。当电融合的电场强度为1 500 V·μs/mm(电压100 V/mm×脉时15μs)时,电脉冲3次,颗粒细胞核移植的融合率为 74.18%,分裂率为 71.82%,囊胚发育率为 10%,融合率显著高于2次电脉冲(52.03%,P<0. 05),卵裂率显著高于4次电脉冲(53.95%,P<0. 05);当电脉冲次数为 3 次时,电场强度为2 000 V·μs/mm的分裂率(53.54%)显著低于1 500 V·μs/mm,2 500 V·μs/mm的融合率(62.0%)和分裂率(53.23%)均显著低于1 500 V·μs/mm(P<0 .05)。采用耳皮成纤维细胞作供核的融合率(59.75%)和分裂率(57.45%)均显著低于颗粒细胞。染色体组型分析显示,66.7%的核移植胚胎具有正常的供体细胞二倍体核型。将来自1头22岁的摩拉公牛耳皮成纤维细胞的2枚冻胚移植给受体母牛,妊娠到215 d时发生流     

影响Fat-1转基因水牛胚胎发育因素的研究

本试验比较了水牛卵母细胞体外受精后注射外源DNA的时间(5~6、9~10、13~14、17~18、21~22 h)和外源DNA的浓度(10、50、100 μg/mL)对Fat-1转基因水牛胚胎的发育影响。结果显示,9~10 h组的胚胎表达率和囊胚表达率最高,其中胚胎表达率极显著高于5~6 h组,囊胚表达率极显著高于21~22 h组(P<0.01);在浓度试验中,50 μg/mL浓度组的胚胎表达率和囊胚表达率最高,且极显著高于100 μg/mL(P<0.01)。     

水牛体细胞核移植的研究

系统探讨了水牛体细胞核移植的各种影响因素，并初步建立了水牛体细胞核移植的一整套程序。体外成熟培养22～24h的水牛卵母细胞去核后，将经血清饥饿(0.5％FBs)培养2～9d、0．1mg／L Aphidicolin(APD)培养 0．5％FBs培养2～9d或一般培养法(10％FBS)培养的水牛耳皮成纤维细胞或颗粒细胞，直接注射到去核的卵母细胞质中，或注射到卵周隙中再经电融合(100V／mm，15μs，电脉冲3次)构建重构胚。重构胚经化学激活后(5pmol／L离子霉素5min，2mmol／L6-DMAP3h)培养7～8d，评定其胚胎发育能力。耳皮成纤维细胞和颗粒细胞经0．1mg／L APD 0．5％FBs培养处理后的重组胚卵裂率，均极显著高于血清饥饿和一般培养处理的同种供体细胞(P＜0.01)，但囊胚发育率无显著差异(P＞0．05)。耳皮成纤维细胞和颗粒细胞经0.1mg／L APD 0.5％FBS处理后进行核移植的分裂率和发育率均无显著差异(63．06％比58．70％，P＞0．05)。以水牛颗粒细胞为核供体时，电融舍法的重构胚分裂率显著高于胞质内注入法(P＜0.05)，囊胚发育率无显著差异(P＞0.05)。培养3代和6代的水牛颗粒细胞以及培养6代和10代的耳皮成纤维细胞，其具有正常二倍染色体的细胞比例均无显著差异(P＞0.05)；以这2种细胞不同培养代数作供体进行核移植时，各代之间核移胚的体外分裂率、囊胚发育率无显著差异P＞0.05)。这些结果表明：(1)水牛耳皮成纤维细胞和颗粒细胞经培养传代所建立起来的细胞系相对比较稳定；(2)0.1mg／L APD预培养处理供体细胞能提高水牛体细胞核移植的效果，但血清饥饿培养则无作用；(3)水牛耳皮成纤维细胞和颗粒细胞均可作供核细胞，核移植后都能得到体细胞克隆的囊胚，但前者的效果略优于后者，且其核移植效果不受供核细胞培养代数的影响；(4)电融合核移植胚胎的发育率高于胞质内直接注入法，但两者的总体效率相似。