茅苍术组培快繁技术研究

茅苍术是重要的道地药材,但由于繁殖困难和采伐过度,导致野生资源濒危,产量大幅度下降.为解决这一问题,利用植物组织培养的方法,以茅苍术种子为外植体,对初代培养的建立及不定芽诱导、增殖和生根的适宜激素浓度进行了筛选,以期为茅苍术的组培快繁生产提供技术支持.结果表明:初代培养以种子去皮、0.1％升汞消毒10min效果最佳;不定芽诱导以MS+6-BA 3.0mg/L诱导率最高,配合NAA浓度0.4mg/L和0.8mg/L的不定芽诱导率分别为96.77％、95.78％.其次是MS+6-BA 2.0mg/L,添加NAA浓度0.2mg/L和0.4mg/L的诱导率分别为94.53％、95.22％.增殖培养以MS培养基添加6-BA 3.0mg/L的增殖系数最高,为11.88;其次是2.0mg/L,增殖系数在9.5以上;但以MS+6-BA 2.0mg/L+NAA0.4mg/L增殖系数和长势综合效果最好.生根培养以培养基配方为1/2MS+NAA0.5mg/L生根效果最佳.     

罗田苍术增殖培养基的优化

[目的]筛选罗田苍术[Atractylodes lancea (Thunb.) DC.Subsp.Luotianensis Hu et Feng in ed.]增殖培养的最佳培养基,为罗田苍术种苗工厂化生产提供技术指导。[方法]以罗田苍术的嫩枝为外植体,筛选出最适宜的基本培养基;再利用L9(34)正交试验优化6-BA、KT、NAA和IBA的配比。[结果]N68为罗田苍术最适宜的基本培养基,各植物生长调节剂的最佳浓度为1.0 mg/L6-BA+1.0 mg/LKT+0.5 mg/LNAA+0.2 mg/LIBA。[结论]该试验筛选出了罗田苍术增殖培养的最佳培养配方,为罗田苍术种苗工厂化生产提供了技术指导。     

茅苍术生长动态及解剖结构研究

为了研究茅苍术生长动态及其解剖结构,对茅苍术1年生播种苗采样分析,测定了不同时期根茎直径、地上部分和地下部分干物质质量和鲜物质质量、根冠比等指标,同时对与药材品质相关的结构进行解剖分析。结果表明:茅苍术根茎直径的生长呈持续增长趋势,5~6月和8月为快速增长阶段。茅苍术根冠比在7月16日达到最大,总干物质质量的生长动态符合S形生长曲线。茅苍术叶片中可溶性糖含量先上升后下降,在5月7日达到最大。油室密度6月初达到最多,然后迅速下降,油室直径呈现持续上升趋势。7月是茅苍术有效成分苍术素积累较快的时期。     

茅苍术规模化组培快繁体系的建立

为建立道地药材茅苍术规模化组培快繁生产技术体系,以茅苍术无菌苗为外植体,研究了茅苍术丛生芽增殖系数、生根率、平均生根数、移栽成活率等指标。结果表明:16种不同浓度激素组合(6-BA、NAA)增殖培养基最高增殖系数为15.0,并与其他组合差异显著(P<0.05,下同)。继代4⁸代的茅苍术丛芽增殖系数互相间差异不显著,但显著高于前3代。培养基单独添加活性炭或NAA和同时添加活性炭和NAA相比对照都能显著促进生根,且3个处理的平均生根数差异不显著。通过全面组合试验,筛选出适合规模化生产茅苍术种苗的增殖培养基为:MS+1.0 mg/L 6-BA+0.15mg/L NAA,生根培养基为:1/2MS+0.5%活性炭。茅苍术可连续进行多代继代扩繁,增殖系数稳定。采用泥炭土∶蛭石∶珍珠岩=2∶1∶1的基质移栽成活率达95%。     

茅苍术愈伤组织诱导及其分化培养研究

[目的]研究不同植物生长调节剂对茅苍术不同外植体愈伤组织诱导及分化的影响。[方法]采用L9(34)正交试验设计,研究茅苍术愈伤组织诱导和分化的最优培养条件。[结果]最佳诱导培养方法:以叶片为外植体,反面朝下接种于培养基,培养基配方为MS+2.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L NAA。愈伤组织分化不定芽的最优培养基配方为1/2MS+4.0 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA。[结论]为茅苍术组培快繁技术与细胞培养技术奠定基础。     

道地药材茅苍术的ISSR分析

道地中药材茅苍术具有广泛的形态多样性。为了识别其遗传多样性,应用ISSR分子标记技术对16个茅苍术基因组和4个北苍术基因组进行了多态性分析。结果发现,茅苍术ISSR多态位点百分率为87.67%,北苍术ISSR多态位点百分率为53.33%,证明茅苍术比北苍术有更高的遗传多样性。采用SPSS13.0软件的Within-group linkage法对20个样品进行聚类分析。结果表明,茅苍术具有明显的遗传分化,且与北苍术有很近的亲缘关系。     

丰花月季组培苗增殖与生根技术研究

该实验主要探讨最佳的丰花月季增殖培养、生根培养培养基配方,结果得出:瓶苗切段 转接到MS+KT 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+ GA3 1.0 mg/L 配方中,最适合丰花月季的增殖,还能 减少玻璃化现象的发生;通过3-4 次的继代后,再次切段转接到1/2MS+IBA 0.5 mg/L 配方中,生 根效果最佳,平均根数达到4.6 条。     

正交设计优化南苍术快速繁殖培养基的研究

[目的]保护野生苍术资源,并为南苍术工厂化生产提供技术指导。[方法]以南苍术[Atractylodes lancea(Thunb.)DC]种子为材料得到无菌试管苗,应用正交试验法研究6-苄基腺嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)、激动素(KT)及其配比对南苍术无菌苗增殖的影响;同时研究了NAA浓度对南苍术苗生根的影响;以泥土、河沙、棉籽壳为材料,采用正交试验法设计9种轻型基质配方,研究其对南苍术生长的影响。[结果]适合南苍术试管苗增殖的培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.4 mg/L+KT 0.4 mg/L;适合南苍术生根的培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/L;最适基质配比为泥土∶河沙∶棉籽壳=3∶3∶2(体积比)。[结论]筛选出了南苍术增殖培养和生根的最佳配方,以及基质的最佳配比,为苍术资源的实验室保存和种苗工厂化生产提供了技术依据。     

茅苍术菌核病病原菌分离鉴定

明确茅苍术的菌核病种类和系统发育学特征,为茅苍术菌核病防治提供参考。从茅苍术种植基地采集感病植株进行病原菌分离、纯化,按照柯赫氏法则进行致病性验证及再分离培养,采用形态学观察及ITS、G3PDH和HPS60三基因核酸序列分析对病原菌进行鉴定。根据形态学和多基因系统发育分析,经鉴定茅苍术菌核病病原菌为核盘菌Sclerotinia sclerotiorum。     

茅苍术晒干品、烘制品及麸制品苍术素含量比较

探讨茅苍术(Rhizoma Areactylodis Lanceae)晒干品、烘制品及麸制品苍术素含量变化情况,旨在为茅苍术炮制提供质量依据。将茅苍术生品分别进行晒干、烘制和麸制,并用HPLC法分别测定晒干品、烘制品和麸制品的苍术素含量。结果表明,苍术素含量为晒干品0.433%、烘制品0.363%、麸制品0.296%。苍术素含量晒干品﹥烘制品﹥麸制品,均超过2010版中华人民共和国药典标准。     

红掌组培苗生根培养基的优化

[目的]优化红掌组培苗的生根技术体系。[方法]以红掌愈伤组织诱导获得的无菌试管苗为外植体,采用4因素4水平L16(45)正交试验,探讨NAA、IBA、蔗糖和活性炭等因素对红掌组培苗生根效果的影响。[结果]在MS基本培养基添加IBA 0.5 mg/L、活性炭0.7 g/L和蔗糖30 g/L(即A1B4C4D4组合)条件下,诱导生根效果较好;生长素IBA诱导生根的效果优于NAA;极值分析表明影响红掌组培苗生根的因素为IBA活性炭NAA蔗糖,4因素对红掌生根均有影响,但未达到显著差异。[结论]红掌生根培养基的最优组合为A3B4C3D4,即添加NAA 0.2 mg/L、IBA 0.5 mg/L、活性炭0.5 g/L和蔗糖30 g/L的MS培养基对红掌组培苗生根最为有利。     

越橘组培苗生根培养的正交试验

利用正交试验设计研究了不同基本培养基、不同浓度的吲哚丁酸、萘乙酸、蔗糖以及活性炭等因子对越橘组培苗生根的影响。结果表明：5个因子对越橘再生苗生根的影响程度依次为活性炭、吲哚丁酸、基本培养基、萘乙酸和蔗糖。其中,活性炭的添加对越橘的生根有极显著影响,吲哚丁酸的影响较显著,基本培养基有影响但不显著。越橘纽培苗生根的适宜培养基组合为1／2WPMA＋IBA2．0mg／L＋NA．AO．5mg／L＋蔗糖20g／L＋活性炭1g／L。     

应用正交试验设计优选番木瓜组培苗生根培养基研究

【目的】研究培养基及其不同成分对番木瓜组培苗生根诱导的效果,为番木瓜组培快繁提供依据。【方法】以台农一号番木瓜侧芽组培第8代继代苗为材料,接种到含不同基本培养基配比、不同IBA、NAA、活性炭（AC）浓度的生根培养基上进行生根培养,采用L9（34）正交试验设计优选生根培养基。【结果】在MS、1/2MS和3/2MS培养基中诱导的番木瓜组培苗生根率存在显著差异,诱导效果表现为MS＞1/2MS＞3/2MS;不同IBA浓度对番木瓜生根率影响效果表现以2.0 mg/L IBA＞2.5 mg/L IBA＞IBA1.0 mg/L IBA,以2.0~2.5 mg/L为宜;不同NAA浓度对番木瓜生根的诱导作用表现为0.05 mg/L＞0.10 mg/L＞0 mg/L,以0.05 mg/L为宜;活性炭对番木瓜生根诱导作用表现为0.002% AC＞0.005% AC＞0.000% AC,浓度以0.002%为宜;MS培养基配比、IBA、NAA、AC对番木瓜生根率影响大小表现为IBA＞AC＞NAA＞MS培养基配比。【结论】最佳诱导番木瓜生根培养基配方为MS+2.0 mg/L IBA+0.05 mg/L NAA+0.002% AC。     

4种类型茅苍术生长的比较

现代研究表明,茅苍术有保肝、抗菌、抗病毒、抑制中枢及促进胃肠道蠕动等作用。笔者对江苏镇江不同叶型茅苍术的光合速率及地上部分各参数进行比较,为研究茅苍术育种问题提供依据。     

楸树优良品种‘朝霞’增殖及生根培养的研究

以‘朝霞’楸带腋芽的茎段为试验材料,通过正交试验设计,研究基本培养基、植物生长调节剂成分及含量对不定芽增殖及生根的影响。结果表明,继代培养阶段,基本培养基类型是影响增殖系数的主要因素,不定芽增殖最佳培养基为:DKW+6-BA1.6mg·L^-1+NAA0.01mg·L^-1,增殖系数高达3.1。生根培养阶段,经极差分析和方差分析得知生根率最高的培养基为WPM+NAA0.1mg·L^-1,生根率高达97%,添加物活性炭对根数的增加有抑制作用,‘朝霞’楸最适生根培养基为WPM+NAA0.1mg·L^-1+活性炭0g·L^-1。本研究旨在筛选楸树优良品种‘朝霞’楸不定芽增殖和生根培养基,为建立‘朝霞’楸再生体系提供技术支持。     

3种前体化合物对茅苍术组培苗中主要挥发油成分积累的影响(英文)

[目的]研究三种前体化合物对茅苍术组培苗中主要挥发油成分积累的影响,以期为人工栽培茅苍术的品质提高提供帮助。[方法]在茅苍术组培苗MS生根培养基中添加不同化合物,对组培苗进行一段时间培养后,超声提取植株所含的挥发油,利用气相色谱法测定挥发油中苍术酮、苍术醇、β-桉叶醇和苍术素的量。[结果]添加木糖、异戊二烯和四氢呋喃对茅苍术组培苗的生长指标、挥发油得率及四种组分相对百分含量均有影响。6g/L木糖组优化培养基中,检出挥发油中苍术酮、β-桉叶醇的相对百分含量分别达到4.23%和56.34%,分别比对照高出1.41和1.66个百分点;四氢呋喃组优化培养基中苍术酮、苍术醇和苍术素的相对百分含量均有提高,四氢呋喃浓度为0.07g/L时总挥发油含量较对照相比增加49.97%;添加异戊二烯到培养基中虽能提高苍术酮的相对百分含量,但对总挥发油含量的积累起到一定的抑制作用,较对照分别减少23.67%、31.06%和7.10%。[结论]添加木糖和四氢呋喃对茅苍术组培苗中主要挥发油的积累具有促进作用,而异戊二烯则具有抑制作用。     

酸雨胁迫下茅苍术的光合及生理响应

[目的]探讨酸雨胁迫对茅苍术光合及生理指标的影响,为茅苍术的抗酸雨栽培提供理论依据.[方法]采用盆栽法对茅苍术进行不同梯度的模拟酸雨胁迫试验,测定其在酸雨胁迫下的光合及生理指标,并对各指标在不同胁迫程度下的变化趋势进行对比分析.[结果]酸雨胁迫初期,茅苍术叶片的光合参数指标变化不一,净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)和蒸腾速率(Tr)整体呈上升趋势,而胞间二氧化碳浓度(Ci)呈下降趋势,对酸雨胁迫表现出一定的适应性;胁迫后第21 d,pH 2.0和pH 3.0处理的Pn、Gs和Tr相对较高,Ci相对降低;至胁迫后第28 d,pH 2.0和pH 3.0处理的Pn、Gs和Tr急剧下降,Ci迅速上升;pH 4.0和pH 5.0处理的光合指标变化幅度相对缓慢.随着酸雨胁迫时间的延长,茅苍术叶片的3种抗氧化酶活性及丙二醛(MDA)和游离脯氨酸(Pro)含量总体上呈先升高后降低的变化趋势,其中超氧化物歧化酶(SOD)活性在胁迫后第15 d达最大值,过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性在胁迫后第22 d达最大值,且酸雨的酸性越强,各指标变化幅度越明显.[结论]茅苍术叶片承受酸雨的阈值在pH 3.0左右,pH 3.0以下的酸雨会对茅苍术生长发育造成显著影响.     

应用正交设计优化南苍术快速繁殖培养基的研究(英文)

[目的]为保护野生苍术资源,并为南苍术工厂化生产提供技术指导。[方法]以南苍术(Atractylodes lancea(Thunb.)DC)种子为材料得到无菌试管苗,应用正交试验法L(934)研究6-苄基腺嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)、激动素(KT)及其配比对南苍术无菌苗增殖的影响;NAA浓度对南苍术苗生根的影响;以泥土、河沙、棉籽壳为材料,采用正交试验方法设计9种轻型基质配方,研究其对南苍术生长的影响。[结果]适合南苍术试管苗增殖的培养基为MS+6RR鄄BA2.0mg/L+NAA0.4mg/L+KT0.4mg/L;适合南苍术生根的培养基为1/2MS+NAA0.5mg/L;最适基质配比为泥土:河沙:棉籽壳(体积比)=3:3:2。[结论]筛选出了南苍术增殖培养,生根的最佳配方,基质的最佳配比,为苍术资源的实验室保存和种苗工厂化生产提供了技术依据。     

响应面法优化茅苍术多糖的提取工艺

[目的]利用响应面分析法优化茅苍术多糖的提取工艺。[方法]根据中心组合设计原理,以提取温度、提取时间、料液比三个因素为自变量,多糖的提取得率为响应值,设计了3因素3水平响应面分析试验,来确定茅苍术多糖提取的最佳工艺条件。[结果]茅苍术多糖提取的最佳工艺条件为：提取温度87℃,料液比1∶22,提取时间3.1 h。在此最佳条件下,茅苍术多糖的提取率为2.12%。[结论]该研究对大规模提取茅苍术多糖有一定理论指导价值。