猪的犁鼻器

应用解剖学和组织学方法(包括光镜、电镜和组织化学技术)研究了猪的犁鼻器。成年猪的犁鼻器呈梭形,长约3.5cm,中段直径约0.6cm,后端达犬齿的横切面。犁鼻管的外侧壁衬有非感觉上皮,内侧壁衬有感觉上皮。感受细胞的远侧突含有丰富的细胞器,游离面覆盖着许多长短不等的微绒毛。固有层除了大量的血管、神经和腺体外,常见到孤立淋巴小结。感觉上皮的浅带显示ACP、SDH和NSE活性,但ALP活性仅见于感觉上皮的最表层。     

广西本地水牛垂体的形态学与组织学观察

本研究采用HE染色和Masson特殊染色方法对广西本地水牛垂体的形态学和组织学结构特征进行了观察分析,结果表明:广西本地水牛垂体呈卵圆形,重约1.19g,大小约为1.43cm×1.07cm×0.74cm。广西本地水牛的神经部在正中矢状面所占比例约为10%～15%。嗜酸性细胞、嗜碱性细胞的比例分别为42%和9.3%;母牛的嗜酸性细胞比例比公牛的高。观察结果揭示广西本地水牛垂体的结构与形态特征与其长期繁衍进化所处生态环境变化相适应,并与其生长、生产规律相一致。这些结果将为改良广西本地水牛提供形态学和组织学的理论依据。     

家兔犁鼻器的形态特征及组织化学的观察

本文用解剖学和组织学技术对免的犁鼻器进行了研究。成年兔的犁鼻器长约2.5—3.0cm,前端距鼻前孔约1cm,经小孔与鼻腔直接相通。后端达鼻后孔的前缘。犁鼻软骨的横切面呈“J”形。内侧上皮此外侧上皮厚得多。感受细胞的胞核圆而清亮,排列成7～8层。犁鼻腺仅分布在管腔的背侧,腺导管开口于内、外侧壁的交界处。犁鼻内侧上皮的 ACP,ALP,NSE 和 SDH 的活性随年龄增长而增加。在交配期间和注射了 LH 的公兔,各酶的活性更为强烈。本文的结果表明,家兔的犁鼻器比其它家畜的犁鼻器发达,犁鼻器的功能与性行为有关。     

水牛免疫奶的研究

以人用的疫苗强化免疫奶水牛和奶牛之后，分泌的免疫乳中，甲肝抗体的相对活性效价峰值维持了1周。峰值期的最大相对活性效价值在1．7左右，甲抗的相对活性效价在完成全程免疫之后。除峰值期外，维持在一个较低的水平。相对活性效价在1．2～1．5之问变动。霍乱孤菌抗体、伤寒杆菌抗体、痢疾杆菌抗体在乳汁中出现的时间要比甲抗出现的时间迟，且维持的时间很短。霍乱孤菌抗体和伤寒杆菌抗体在乳汁中能维持5周左右，痢疾杆菌抗体在乳汁中维持的时间为l周。以奶水牛免疫乳的抗体提取物进行抑菌试验，免疫乳中的抗体表现出较强的抑菌效果。当提取物中的免疫球蛋白(Ig)以终浓度为1．0mg／mL加入到霍乱孤菌和伤寒杆菌的培养液中时，能有效地抑制霍乱孤菌和伤寒杆菌的生长。     

土壤有机矿质复合体研究──X.有机矿质复合体转化的初步研究

本文研究铁键、铝键、钙键复合体与溶液中Ｃａ＾２＋、Ｆｅ＾３＋、Ａｌ＾３＋金属离子的相互作用,结果显示,复合体上键合的Ｆｅ＾３＋,不能被溶液中的Ｃａ＾２＋、Ａｌ＾３＋置换,复合体上键合的Ａｌ＾３＋仅少量被Ｆｅ＾３＋、Ｃａ＾２＋置换进入溶液,复合体上键合的Ｃａ＾２＋则可较多地被Ａｌ＾３＋、Ｆｅ＾３＋置换进入溶液,置换的量与ＰＨ及粘土矿物类型有一定关系,尽管复合体上键合的Ｆｅ＾３＋、Ａｌ＾３＋、Ｃａ＾３     

水牛和黄牛种间体外受精的研究

将从屠宰母牛卵巢上采集的水牛和黄牛的卵母细胞经 2 0～ 2 4 h体外成熟培养后 ,分别用么拉水牛或奶牛精液进行种间和种内体外受精。受精卵在体外条件下继续培养到囊胚和孵化囊胚阶段。结果表明 ,用黄牛精子受精水牛卵母细胞 (黄×水 )或用水牛精子受精黄牛卵母细胞 (水×黄 )的种间体外受精均有较高的卵裂率 (分别为 4 6.5%和 68.4 % )。但其体外囊胚发育率分别只有 3.5%和 8.7% ,显著低于种内受精组(水×水组为 1 9.9% ,黄×黄组为 2 8.0 % ,P<0 .0 5)。在受精后 2 0 h对受精卵进行固定、染色 ,发现种间受精的黄×水和水×黄组 ,分别有 36.8%和 75.0 %的受精卵形成有 1个以上原核 ,且这些受精激活卵中大部分含 2个原核以上 (分别为 80 .9%和 80 .0 % ) ,说明种间受精的精子已进入到卵母细胞内受精并形成了雄性原核。     

土壤有机矿质复合体研究Ⅳ.有机矿质复合体中有机磷的分布

本文研究湖沼母质发育的青紫泥水稻土和第四纪红土母质上发育的黄筋泥水稻土的有机矿质复合体中有机磷的分布。结果表明:各组复合体中有机磷的含量(μg/g)是G₂>G₁>G₀C/P₀和N/P₀比例是G₂高于G₀和G₁,说明有机磷在复合体G₂中的富集低于有机碳和氮。复合体中可溶性有机磷化合物总量较全土高。可溶性有机磷化合物中,肌醇磷占有机磷12.1-32.3%,核酸磷占1.9-5.8%,磷酸磷占0.7-3.1%。复合体中肌醇磷、核酸磷和磷脂磷的含量(μg/g)G₂明显高于G₀和G₁。复合体中有机磷的活性分级为:活性磷占10%左右,中等活性磷占50%左右,中等稳定性磷和高度稳定性磷各占20%左右。G₀组的活性磷比例较全土高,但G₁和G₂组中则明显降低。不同土壤有机矿质复合体中活性磷和中等活性磷的分布,与有机磷化合物中的核酸磷和肌醇磷的含量有关。     

土壤有机矿质复合体研究Ⅸ.钙键复合体和铁铝键复合体中腐殖质的性状特征

本文通过化学和仪器分析,研究了土壤中钙键复合体和铁铝键复合体中腐殖质的化学组成、分子结构和理化性状。结果表明,铁铝键复合体中腐殖质（包括故敏酸和富啡酸）的Ｃ、Ｈ、Ｎ一高于钙键复合体中腐殖质,Ｃ／Ｈ、Ｃ／Ｎ比则低于后者,铁铝键复合体腐殖质的分子结构中故敏酸的芳化度高于后者,而富啡酸的芳化度则低于钙键复合体。并且,铁铝键复合体中腐殖质的热稳定性和对金属离子的螯合亲和力皆高于钙键复合体。     

西林水牛血液蛋白多态性研究

本研究利用９５头西林水牛血样，采用淀粉凝胶电泳法，醋酸纤维薄膜电泳法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法分别测定血清白蛋白、血红蛋白和血清运铁蛋白三个位点的基因和基因型及其频率。结果表明，西林水牛血清白蛋白受ＡｌｂＡ和ＡｌｂＸ两个等位基因控制，其频率分别为０．２２３和０．７７７；血红蛋白受ＨｂＡ和ＨｂＢ两个等位基因控制，其频率分别为０．０６３和０．９３７；运铁蛋白受ＴｆＡ和ＴＰＤ两个等位基因控制，其频率分别为０．２５８和０．７４２。     

土壤有机矿质复合体研究Ⅰ.土壤有机矿质复合体中腐殖质氧化稳定性的初步研究

土壤中有机矿质复合体的种类很多,广义地说,应当包括腐殖酸和各种金属离子所构成的盐类,腐殖质与含水铁绍氧化物的复合凝胶,腐殖质与粘土矿物直接结合或通过其他媒介结合的各种复合体等。很多工作者研究了各种有机矿质复合体的組成和特性^[1,6,7,8]。     

水牛的血结

对水牛的血结（ｈｅｍａｌｎｏｄｅ）进行了解剖学和组织学（包括光镜、扫描电镜、透射电镜及组织化学）研究。血结为暗红色小体，圆形或椭圆形，公母及大小水牛均有，直径约５～１２ｍｍ，分散存在，有小血管与之相连。主要分布于胸、腹腔大动脉附近，纵隔及肠系膜根部，数目不等，多者可达百余个。血结的组织结构与淋巴结相似，由被膜、血窦和淋巴组织构成，其特点是窦腔及淋巴组织内有大量血细胞，未见到输入淋巴管。说明血结是位于血液循环通路上正常的淋巴器官。作者通过观察，认为血结至少有滤血、吞噬红细胞以及参与免疫反应等功能，尤其对血结的免疫功能进行了讨论，提供了有用的免疫形态学依据。血结的功能类似脾脏，其在免疫学的地位应引起人们充分的注意。     

摩杂一代水牛与广西沼泽型水牛垂体组织结构的比较研究

对广西摩杂一代水牛的脑垂体进行组织学研究,并和广西沼泽型水牛(Bubalus bubalis)的脑垂体进行比较。将两种水牛的脑垂体做成切片,采用HE染色并通过图像分析仪进行分析。结果显示摩杂一代水牛脑垂体呈长卵圆形,其神经部细胞大小和细胞密度和广西沼泽型水牛差异不显著,中间部的嫌色细胞较广西沼泽型水牛的多,而远侧部的各种细胞出现率表现出差异显著,其中嗜酸性细胞与广西沼泽型水牛差异极显著。这些结果为培育广西奶水牛提供形态学依据。     

水牛输卵管上皮细胞无血清培养的研究

以广西沼泽型水牛（Bubalus bubalis）输卵管为材料，比较研究不同取材方法、有无血清及生长因子对水牛输卵管上皮细胞培养的影响。试验采用了三种不同的取材方法。原代用含血清的培养液来培养，传代用添加生长因子的无血清复杂培养液和不添加生长因子的无血清基础培养液结合梯度减量无血清培养法和直接无血清培养法来培养并进行观察。结果表明，水牛输卵管上皮细胞可以在添加生长因子的无血清复杂培养液中生长、并且最长可维持56d优于基础无血清培养的15d；刮取法获得的细胞活率为95％优于消化法的70％和剪碎法的83％；细胞冷冻复苏率为83．6％；第5代的染色体数目为48条，这说明细胞依然保持正常的生物学特性和二倍体核型。     

土壤有机矿质复合体研究Ⅵ.胶散复合体的化学组成及其结合特征

本文研究水热条件渐变的地带性土壤中Ｇ１、Ｇ２组胶散复合体有机、无机物的化学组成及其结合特点。结果表明：Ｇ２组中铁有积累现象，游离态铁、铝氧化物含量为Ｇ２＞Ｇ１，但均随土壤类型变化。松结态腐殖质（Ｈ１）为Ｇ１＞Ｇ２，紧结态腐殖质（Ｈ３）则为Ｇ１＜Ｇ２。可提取腐殖质中，松、稳结态腐殖质之比值Ｈ１／Ｈ２和胡敏酸、富里酸之比值ＨＡ／ＦＡ，除个别土壤之外，都相关不大。Ｇ１、Ｇ２两组复合体中都含有一定数量的络     

黄牛和水牛种间核移植研究初报

本实验探讨了将体外培养成熟的水牛卵母细胞去核后 ,作为体外受精生产的黄牛胚胎细胞核移植的受体进行种间核移植的可能性。结果表明 ,黄牛与水牛进行种间核移植的重组卵有 54.2 %的融合率 ,显著地低于黄牛种内核移植的结果 ( 75.0 % ,P<0 .0 5) ;而卵裂率两者之间差别不大 (分别为 65.4 %和 71 .2 % ,P>0 .0 5)。但来自种间核移植的早期胚胎体外发育潜能很低 ,体外囊胚发育率只有 5.9% ,很显著地低于种内核移植的结果 ( 50 .0 % ,P<0 .0 1 )。用作种间核移植受体的体外成熟水牛卵母细胞质量较差可能是造成重组胚体外发育能力低的主要因素之一。     

土壤有机矿质复合体研究——Ⅲ.有机矿质复合体中氨基酸组成和氮的分布

本文研究湖沼母质发育的青紫泥水稻土和第四纪红土母质上发育的黄筋泥水稻土的有机矿质复合体中氨基酸的组成和氮的分布.结果表明:各组复合体中氮的含量(%)是G₂>G₁>G₀;C/N比值是G₂>G₀>G₁;水解氮的比例青紫泥为G₀>G₂≥G₁,而黄筋泥则为G₂>G₀>G₁.水解液中氨基酸的总含量(克/100克腐殖酸)是G₀>G₂≥G₁,各组复合体胡敏酸中氨基酸的总含量大于富里酸,但氨基酸的种类和组成基本相同.青紫泥水稻土各组有机矿质复合体中含氮量高于黄筋泥水稻土,但水解氮的比例、活性腐殖质中氮的比例,以及以氨基酸形态存在的氮的比例均为黄筋泥高于青紫泥.淹水培养结果黄筋泥的氮矿化率高于青紫泥近三倍.     

水牛及小鼠腔前卵泡分离的研究

对水牛和小鼠腔前卵泡的分离方法进行了系统探索,旨在找出一种水牛和小鼠腔前卵泡的有效分离方法。实验一分别用梳刮法、剪碎法和显微分离法分离回收水牛卵巢腔前卵泡;实验二采用梳刮法分离水牛胎牛、青年牛和成年牛腔前卵泡;实验三分别用浓度为0(CK)、0.02%、0.04%、0.08%的胶原酶消化水牛卵巢20 m in,然后采集腔前卵泡;实验四采用梳刮法、剪碎法和显微分离法分离小鼠卵巢的腔前卵泡。结果表明,梳刮法能有效地分离回收水牛和小鼠卵巢的腔前卵泡。该法分离水牛卵巢所得腔前卵泡的原始卵泡最多,次级卵泡最少,而分离小鼠卵巢所得腔前卵泡的次级卵泡最多,原始卵泡最少;水牛胎牛卵巢可分离得到较多的腔前卵泡;酶消化有助于提高剪碎法的腔前卵泡分离效率。     

核转染技术转染水牛细胞的初步研究

本研究旨在获得一种高效转染水牛细胞的方法。本研究首先以水牛胎儿成纤维细胞（BFF）为研究对象,建立、优化核转染法;随后,比较核转染法、脂质体法、电穿孔法转染BFF的效率;最后选用较优的方法,探讨转染水牛原代骨髓间充质干细胞和类胚胎干细胞的可行性。结果发现随电压的增加,核转染BFF的效率升高;核转染电压为225V,脉冲时间为10ms时,细胞EGFP阳性率为（83.1±1.4）%,转染效率显著高于脂质体法（（11.7±1.2）%）和电穿孔法（（35.5±2.0）%）。运用优化的核转染条件可以成功将外源基因导入水牛原代骨髓间充质干细胞和类胚胎干细胞,且不影响其细胞生物学特性。本研究为以多能干细胞介导的水牛转基因克隆胚胎的生产奠定了基础。     

水牛体细胞核移植相关影响因素的研究

主要是探讨水牛卵母细胞的体外成熟与供体的年龄和性别对其核移植效果的影响。体外成熟培养22～24h的水牛卵母细胞,在含有5μg／mL细胞松弛素的操作液中进行去核,然后将经0．1μg／mL蚜栖菌素（Aphidicolin,APD）培养处理24h,再用0．5％胎牛血清（FBS）培养2d的水牛耳皮成纤维细胞注射到去核的卵母细胞卵周隙中,再经电融合形成重构胚。重构胚经5μmol／L离子霉素激活处理5min并在2mmol／L的二甲氨基嘌呤（6-DMAP）中培养3h后,在含有颗粒细胞单层细胞的微滴中（30μL）培养7d,观察其卵裂和胚胎发育情况。结果显示：在添加有10ng／mL上皮生长因子（EGF）成熟液中培养的受体水牛卵母细胞的融合率和重组胚卵裂率与对照组无显著差异（P〉0．05）,但其囊胚发育率明显高于对照组（18．53％vs．7．56％,P〈0．05）。来自胎儿（3个月）或成年（一头5～6岁,另一头22岁）水牛的耳皮成纤维细胞核移植后重组胚的卵裂率差异不显著（P〉0．05）,但水牛胎儿体细胞构建的重组胚囊胚率显著高于成年体细胞（22．55％vs．10．77％和8．09％,P〈0．05）。雌性水牛成纤维细胞构建的重组胚的囊胚发育率（20．23％）显著高于雄性水牛体细胞的囊胚率（10．16％,P〈0．05）。以上结果表明：（1）成熟液中添加EGF能提高受体卵母细胞核移植后的胚胎发育率;（2）水牛体细胞核移植效果受供体的个体年龄和性别的影响：胎儿成纤维细胞的核移植效果优于成年的成纤维细胞,而且以雌性的效果较好。