鸡十二指肠中T淋巴细胞及其亚群发育的研究

通过免疫组织化学法,应用CD3、CD4和CD8单克隆抗体研究了CD3+T淋巴细胞及CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群在鸡盲肠扁桃体中的出现、迁移、组织定位分布及数量变化规律等一系列发育过程。结果显示:CD3+、CD8+T淋巴细胞最初于11胚龄时出现,而CD4+T淋巴细胞在15胚龄时出现。在定位分布变化上,CD3+主要分布在黏膜上皮中,CD4+主要分布在黏膜固有层中,CD8+在黏膜固有层和黏膜上皮内都有大量分布。在数量变化上,1～7日龄雏鸡各种阳性细胞的数量都骤然增加;而到7日龄时,雏鸡CD3+淋巴细胞的数量明显减少,CD4+、CD8+T细胞的数量无明显变化;从21日龄开始直到35日龄,雏鸡CD3+、CD4+和CD8+T淋巴细胞的数量持续增加。试验证明,鸡在出壳后初期十二指肠的细胞免疫功能增强。     

鸡脾脏中T淋巴细胞及其亚群的发育

利用免疫组化法结合计算机图像分析技术研究鸡不同生长发育阶段T淋巴细胞及其亚群在脾脏中的发育过程。研究发现,CD3+和CD8+T淋巴细胞最早出现在18日龄鸡胚,CD4+细胞出现在20日龄鸡胚。随着日龄增长,CD3+、CD4+和CD8+T淋巴细胞的数量均呈上升趋势,在21日龄雏鸡脾脏中达到稳定。CD3+和CD8+细胞在动脉周围淋巴鞘和红髓中大量分布,而CD4+细胞主要分布在动脉周围淋巴鞘中。脾小体中也存在CD4+细胞,但不存在CD8+细胞。CD4+细胞数量始终少于CD8+细胞,两者的比值基本维持在0.3～0.5。结果表明,鸡出壳后初期,脾脏的细胞免疫功能迅速增强,并在21日龄时达到成熟水平。     

鸡直肠中T淋巴细胞的发育研究

通过免疫组织化学方法,应用CD3、CD4和CD8单克隆抗体研究了CD3＋、CD4＋和CD8＋B淋巴细胞在鸡直肠中的出现、迁移、组织定位分布以及数量变化规律等一系列发育过程。T淋巴细胞均在雏鸡出壳后7日龄时出现。在定位分布变化上,出壳后1～4日龄时,T淋巴细胞数量没有明显增加,7日龄时,CD4＋大量分布在肠绒毛皮下固有层中,少量分布在黏膜肌层和黏膜固有层中,CD3＋分散分布在黏膜肌层和黏膜固有层中,极少数的CD8＋出现在黏膜肌层中。随着日龄的增长,T淋巴细胞的数量持续增多,多数位于黏膜固有层,雏鸡生长至21日龄时,T淋巴细胞的数量维持稳定,其中数量以CD4＋细胞最多,CD3＋细胞次之,CD8＋细胞最少。鸡出壳后初期直肠的体液免疫逐渐增强,并在21日龄时达到成熟水平。     

糖萜素对固始鸡免疫器官发育及T淋巴细胞亚群的影响

应用流式细胞仪技术检测固始鸡CD3⁺、CD4⁺和CD8⁺ T淋巴细胞含量来研究添加不同剂量的糖萜素对固始鸡免疫器官及T淋巴细胞亚群的影响。结果表明,500、700 mg/kg糖萜素组的免疫器官指数及CD4⁺／CD8⁺比值显著(P<0.05)高于其余各组。因此,一定剂量的糖萜素可以促进固始鸡免疫器官发育,提高T淋巴细胞亚群的水平。     

固始鸡免疫器官内T淋巴细胞亚群动态变化

应用流式细胞仪结合免疫荧光抗体技术对固始鸡和固始鸡胚胎免疫器官内T淋巴细胞亚群的动态变化和发育分化规律进行了研究.结果发现,(1)胚胎时期,胸腺内T淋巴细胞发育分化低,表现为成熟的T淋巴细胞(CD3~+)和不成熟的胸腺细胞均较少;出壳后,固始鸡胸腺内成熟T淋巴细胞增多,占胸腺细胞的30%左右,但大部分仍是未成熟的胸腺细胞.(2)脾脏内T淋巴细胞为成熟的T淋巴细胞(CD3~+),占淋巴细胞的60%左右.胚胎时期脾脏内CD3~+水平低,出壳后2周已达脾脏内正常水平(60%左右).(3)法氏囊内有少量的成熟T淋巴细胞(10%左右).结果表明,T淋巴细胞在固始鸡胸腺内增殖分化和成熟,脾脏和法氏囊内的成熟T淋巴细胞均来源于胸腺.     

雏鸡T淋巴细胞及其亚群的变化规律

白细胞分化抗原是白细胞在分化成熟为不同谱系和分化不同阶段以及活化过程中 ,出现或消失的细胞表面标记 [1]。鸡的 T淋巴细胞表面分化抗原的研究近年来进展较快 ,证明与哺乳动物的 T淋巴细胞表面分化抗原有许多相似之处 ,尤其以 CD3,CD4,CD8为突出。 CD3分子表达于所有成熟 T细胞表面 ,可与 TCR( T细胞抗原识别受体 )分子以非共价结合形成一个 TCR- CD3复合物 ,其中 TCR是识别异种抗原和自身 MHC分子多态性决定簇的受体 ,而 CD3分子具有稳定 TCR结构和传递活化信号的作用 [2 ] ,CD3是鉴定 T细胞的重要标记。T细胞可分为辅助…     

鸡T淋巴细胞和B淋巴细胞分离纯化方法的建立

将鸡胸腺和腔上囊淋巴组织剪碎后与PBS磷酸盐缓冲液混合，通过密度梯度离心和尼龙棉柱过滤对T、B淋巴细胞进行了分离纯化。纯化的T、B淋巴细胞以FITC标记的鼠抗鸡CD4单抗，RPE标记的鼠抗鸡CD8单抗，FITC标记的鼠抗鸡Bu-1单抗染色，用流式细胞仪分类检测其纯度，用台盼蓝排斥试验检测T、B淋巴细胞的活力。结果表明，以本研究建立的方法分离到的T、B淋巴细胞纯度较高（均达90％以上），细胞活力强，与流式细胞仪分选的效果相当，且经济简便。     

蜂毒对T淋巴细胞亚群的影响

蜂毒可能是通过调节T淋巴细胞亚群来影响人体的免疫功能，作者通过A组风湿病者lO例以蜂毒治疗为主，用蜂针或蜂毒注射剂，停用其它药物；B组健康人5例不用药，C组风湿病者5例作常规治疗。三组病人均先查T淋巴细胞亚群，在治疗组完成两个月的治疗后三组同时复查T淋巴细胞亚群，结果显示蜂毒治疗组T细胞亚群治疗前后有明显变化，而健康对照组和患病对照组前后无明显差别。初步证实蜂毒能使失调的T淋巴细胞亚群恢复正常。     

中药对柔嫩艾美尔球虫感染鸡外周血T细胞亚群的影响

为研究中药对柔嫩艾美尔球虫感染鸡免疫水平的影响,本实验采用流式细胞技术检测柔嫩艾美尔球虫感染鸡外周血CD4+T细胞亚群,以及CD8+T细胞亚群数目的动态变化。结果表明,接种球虫后,感染给中药组鸡CD4+、CD8+T细胞亚群数目及百分比(CD4+T/CD8+T)均高于感染不给药组,9d时,感染给中药组最高,分别为9.77和7.53,与感染不给药组差异显著(p0.05)。感染球虫组CD4+T/CD8+T比值均低于不感染组,感染给中药组在接种后第6d和第9d均高于感染不给药组。感染给中药组、不感染给中药组和不感染不给药组CD4+T/CD8+T平均值均在2-1之间,分别为1.11、1.33和1.25,而感染不给药组仅为0.93。     

鸡脾脏中B淋巴细胞的发育及其定位分布

应用IgM、IgG和IgA单克隆抗体的免疫组织化学方法,研究IgM+、IgG+和IgA+B淋巴细胞在鸡脾脏中的出现、迁移、数量变化规律等一系列的发育过程以及组织定位分布特点。结果显示,IgM+和IgA+细胞在胚胎15日龄时开始出现,IgG+细胞在胚胎18日龄时出现,21日龄雏鸡脾脏的红髓和生发中心中出现以IgG型为主的浆细胞。各日龄IgM+、IgG+和IgA+细胞主要分布在脾脏的特征性组织结构—椭球周围淋巴鞘和生发中心中,这些结构也随着B淋巴细胞的增多而不断发育成熟。B淋巴细胞的数量随着日龄增长持续增加,直至21日龄时趋于稳定,各日龄B淋巴细胞数量始终以IgG+细胞最多,IgM+细胞次之,IgA+细胞最少。结果表明,鸡出壳初期,脾脏的体液免疫功能逐渐增强,并在21日龄时达到成熟水平。     

镉致体外培养鸡脾淋巴细胞膜蛋白损伤

为了探讨镉对体外培养鸡脾淋巴细胞膜蛋白损伤的影响。通过对体外培养的鸡脾淋巴细胞以终浓度为10μmol／LCdCIz进行染毒,培养12、24、36、48、72h后,收集细胞并提取细胞膜,聚丙烯酰胺梯度电泳分析膜蛋白组分。结果显示,试验组膜蛋白I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅸ的含量有升高趋势,蛋白区带V、Ⅵ、Ⅶ的百分含量有降低趋势,蛋白区带V、Ⅷ的含量变化不明显。说明镉能对鸡脾淋巴细胞膜蛋白造成损伤,使其膜蛋白组分含量改变,膜蛋白功能受抑制。     

紫锥菊多糖对鸡淋巴细胞体外增殖影响

为了评价紫锥菊多糖免疫增强效果,将4种浓度的紫锥菊多糖分别加入体外培养的鸡脾脏淋巴细胞中,培养44 h后,用MTT法测定淋巴细胞增殖变化。结果表明,4种浓度的紫锥菊多糖对鸡淋巴细胞均有促进增殖及协同的作用,其中在50-100μg/mL浓度范围内效果最为显著。     

镉对体外培养鸡脾淋巴细胞膜抗氧化功能的影响

以终浓度为10μmol/L CdCl2对体外培养淋巴细胞进行染毒,分别培养12、24、36、48和72h时收集细胞,提取体外培养脾淋巴细胞膜,采用试剂盒比色的方法,分别检测了细胞膜GSH-Px、SOD的活性、膜MDA和SA含量及培养液LDH的活性,来观察镉性细胞损害时细胞膜的抗氧化功能和通透性。结果显示,随着镉作用时间的延长,淋巴细胞膜GSH-Px、SOD的活性降低,MDA生成量增加,试验组与对照组差异显著（P〈0.05）或极显著（P〈0.01）;培养液中LDH活性升高,膜SA含量降低。表明镉可使淋巴细胞膜的抗氧化功能降低,膜完整性被破坏。     

刺五加多糖对雏鸡脾脏中T、B淋巴细胞定位分布的影响

为了研究雏鸡注射不同浓度刺五加多糖(ASPS)后脾脏中T、B淋巴细胞定位分布的变化情况,将60只1日龄雏鸡随机分为3组:对照组、低剂量组和高剂量组,每组20只,10日龄起对低、高剂量组雏鸡分别皮下注射免疫50和200 mg/m L的ASPS 0.2 m L,对照组雏鸡以相同方式注射等体积的生理盐水,连续注射4 d。于末次免疫后第7天和第14天,从每组中分别随机选取5只雏鸡,取其脾脏制作冰冻切片,采用免疫组织化学方法检测CD3+T淋巴细胞和Bu-1+B淋巴细胞的定位分布。结果显示,与对照组比较,低、高剂量组在注射后的7 d和14 d ASPS均能增加脾脏中CD3+T淋巴细胞和Bu-1+B淋巴细胞的数量,由CD3+T淋巴细胞构成的脾脏特征性结构-动脉周围淋巴鞘(PALS)的面积也显著增加,红髓中CD3+T淋巴细胞也明显增多,分布范围逐渐增加;同时,由Bu-1+B淋巴细胞构成的椭球周围淋巴鞘(EALS)的面积也明显增加,红髓和白髓中的浆细胞数量显著增多,并在注射后14 d时出现生发中心。与对照组比较,高剂量组和注射后14 d时上述变化趋势更为明显。结果表明,ASPS能够增加脾脏中T、B淋巴细胞的数量,并且能够影响其在PALS、EALS等脾脏特征性结构中的定位分布,从而从组织学角度进一步证明ASPS对鸡免疫功能具有显著的增强作用。     

T淋巴细胞亚类在地方流行性牛白血病牛外周血及脾脏中的分布

应用抗牛白细胞分化抗原单克隆抗体经免疫组织学方法及流体细胞计数器法对地方流行性牛白血病病牛（以下称牛白血病牛）,健康成年牛（以下称成年牛）及健康未成年牛（以下称未成年牛）的外周血和脾脏的Ｔ淋巴细胞亚类进行了分析。无论是在外周血还是脾脏,牛白血病牛和成年牛的Ｔ淋巴细胞亚类的百分率（ＣＤ３＋,ＣＤ４＋,ＣＤ８＋和ＷＣ１＋γδＴ淋巴细胞）均明显低于未成年牛。虽然牛白血病牛外周血中Ｔ淋巴细胞亚类的百分率低于成年牛,但在脾脏却高于成年牛。这提示在脾脏存在一定程度的肿瘤免疫反应。病理组织学观察证实脾脏未见有滤泡增生,增生的肿瘤细胞主要见于红髓。因此认为脾脏不是牛白血病淋巴肉瘤的原发器官,肿瘤细胞是从外周血中转移而来。