猪副粘病毒感染的初步诊断和病毒分离

在临床症状复杂的不同猪群中 ,分离出 4株副粘病毒。该病毒能凝集鸡红细胞 ,其血凝性能被鸡新城疫标准血清抑制。病毒能在鸡胚中生长繁殖。电镜观察不是冠状病毒而是副粘病毒。该病毒能引起猪的腹泻、呼吸急促、繁殖障碍、神经症状和体温升高等临床症状。     

鹅副粘病毒感染的诊断

[目的]为了确定江苏省某养鹅场2007年春季发生传染病的病因。[方法]从发病鹅群采集病料进行流行病学调查、病原分离鉴定、红血球凝集试验和红血球凝集抑制试验,通过交叉HI试验测定F2代分离株和Lasota毒株的HI效价,并用稀释的F2代感染鸡胚尿囊液分别感染鹅和SPF雏鸡,观察其发病和死亡情况。[结果]通过SPF鸡胚接种与传代从病、死鹅的脑、脾、胰混合病料分离到1株病毒。经HA和HI试验证明该分离株为禽I型副粘病毒。人工感染鸡和鹅试验表明该分离株对鸡和鹅都具有高致病性,同群混饲试验表明该分离株具有很强的传染性,属强毒型NDV。这进一步证实该病毒属禽副粘病毒的新成员,即鹅副粘病毒I型。[结论]该研究为NDV出现了某些新的致病特点以及其对鹅同样具有致病性提供了佐证。     

母猪猪痘的诊断及病毒分离

为确定江西某猪场部分母猪陆续发生皮肤痘斑的病原,根据猪痘病毒(AF410153.1)基因序列设计1对引物,采用PCR方法从发病母猪皮肤痘痂中扩增到猪痘病毒P35基因,与猪痘病毒参考毒株(AF410153.1)P35基因的核苷酸同源性为98％,说明该场母猪皮肤出现的痘斑是由猪痘病毒引起.利用PK15细胞从皮肤痘痂中分离到1株猪痘病毒,该毒株能在PK15细胞中连续传代,不产生严重的细胞病变(CPE).采用间接ELISA方法对该场的10头母猪和8头肥猪血样进行猪痘病毒抗体检测,母猪和肥猪血清中猪痘病毒抗体阳性数分别为5头和4头,阳性率为50％.     

猪副粘病毒间接ELISA方法的建立

以临床分离的猪副粘病毒作为抗原,通过SPF鸡胚进行病毒培养和增殖,再经过差速离心纯化后作为ELISA包被抗原,建立了猪副粘病毒全病毒间接ELISA诊断方法。试验表明:此方法具有敏感性高、特异性好的优点,为快速诊断新型猪传染病——猪副粘病毒(PPMV)感染提供了便利的途径。     

一株猪副粘病毒的分子鉴定

以 1株从发病猪中分离到的副粘病毒( MP01株)为研究对象,用反转录-聚合酶链式反应( RT- PCR)对它的 F基因进行分段扩增、定向克隆到 pUC119质粒载体,然后测定它们的核苷酸序列,并推导出相应的氨基酸序列. MP01株的 F基因全长 1 662 bp,编码 553个氨基酸,它们的裂解位点的氨基酸序列为 112G- K- Q- G- R- L117,是 NDV弱毒株特有的序列结构.序列分析结果表明,它与国内标准毒株 F48E9的核苷酸同源率为 90%,氨基酸的同源率为 93%;它与弱毒株 La Sota的核苷酸同源率为 91%,氨基酸同源率为 94%.     

猪轮状病毒与猪传染性胃肠炎病毒混合感染的实验室诊断

[目的]对海南省某猪场腹泻病死仔猪病原进行实验室诊断。[方法]通过临床症状观察与病理剖检,结合RT-PCR方法和病毒的分离培养进行病原鉴定。[结果]经过RT-PCR扩增,获得了PRV和TGEV阳性目的片段;应用MA-104细胞与PK-15细胞分别进行PRV与TGEV的分离培养后,可见典型的细胞病变,经过RT-PCR进一步鉴定最终确诊为PRV和TEGV混合感染。[结论]通过采用紧急接种和保守治疗等综合防治措施,获得了较好的防控效果。     

猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒的RT-PCR鉴别诊断

猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus，PEDV）为套式病毒目冠状病毒科、冠状病毒属的病毒，引起猪流行性腹泻（porcine epidemic diarrhea，PED）。该病是一种猪肠道传染病，以水泻、呕吐和脱水为特征，各种年龄的猪均易感染，哺乳仔猪、架子猪或育肥猪的发病率可达100％，尤其是哺乳仔猪受害最严重，该病主要发生于冬季，夏季也可发生。猪传染性胃肠炎病毒（porcine transmissible gastroenteritis virus，TGEV）为套式病毒目冠状病毒科、冠状病毒属的病毒，是猪传染性胃肠炎（porcine transmissible gastroenteritis，TGE）的主要病原。该病是一种急性、高度接触性传染病，以呕吐、严重腹泻、脱水为特征的传染病，对新生仔猪具有高度致死率。虽然不同年龄的猪对这种病毒均易感，但5周龄以上的猪死亡率较低，多成僵猪，使养猪饲料报酬降低。     

猪流行性腹泻病毒的分离培养与鉴定

上海市农业科学院畜牧兽医研究所在上海郊区分离到一株猪流行腹泻病毒，以人工攻毒发病猪的小肠粘膜无菌处理后接种已长成单层的ＶＥＲＯ传代细胞，并在维持液中加入胰酶５０μｇ／ｍＬ和２％的小牛血清。     

高致病性猪蓝耳病毒及猪圆环病毒2型混合感染的诊断

[目的]对湖北省某猪场发生的以体温升高、部分病猪死亡等为主要特征的疾病进行诊断。[方法]采集发病猪的脾脏、淋巴结等样品,应用PCR方法进行实验室检测。[结果]经实验室检验,结合临床症状,诊断为HP．PRRSV及PCV2混合感染。高致病性猪蓝耳病毒阳性率为40％,猪圆环病毒2型阳性率为90％。[结论]通过采取综合防控措施,病情得到有效控制,减少了猪场的经济损失。     

猪圆环病毒2型与猪支原体混合感染的诊断

2015年1月,河南某地猪场60日龄仔猪出现腹泻、呼吸困难并伴有后肢端坐状咳嗽为主要特征的疾病。PCR检测PCV2和MH均为阳性,结合发病情况、临床症状和剖检变化,诊断为猪圆环病毒2型与猪支原体混合感染。     

H1亚型猪流感病毒的分离鉴定

从山东、浙江、湖南、广西等地区各猪场采集30份疑似猪流感病猪的病料,通过鸡胚培养、血凝及血凝抑制试验、电镜观察、RT-PCR和测序分析进行了分离鉴定。结果从山东和湖南两地分离到4株有血凝活性的病毒,其中山东的2株病毒与新城疫病毒阳性血清的血凝抑制试验为阳性,通过电镜观察湖南的2株病毒具有猪流感病毒的特征,且与抗H1亚型猪流感病毒阳性血清的血凝抑制试验为阳性;根据H1亚型猪流感病毒HA基因设计引物,利用RT-PCR扩增出543bp片段,经序列分析证实该病毒为H1亚型猪流感病毒。     

香菇多糖的纯化及电镜分析

从香菇中提取香菇粗多糖,经DEAE-Sepharose Fast Flow纯化,Sephadex G-200检测其为纯多糖,纯化后得到5种组分,其中LNT-Ⅰ含量最大,其次是LNT-Ⅱ-1。经扫描电镜观察,一部分LNT-Ⅰ呈纤维状,可能是由于许多分子或分子集团聚集成不同样式的束所致;另一部分LNT-Ⅰ呈不规则的几何外形,表面凸凹不平,带有孔洞的褶皱结构;LNT-Ⅱ-1呈片状,表面高低不平整,同时,晶体间有非常微小的空隙,使得多糖并未完全集合。     

昆虫材料扫描电镜观察技术

介绍了昆虫材料扫描电子显微镜观察的主要技术环节及注意事项.扫描电镜观察主要包括材料的预处理、清洗、二重固定、脱水、置换、干燥、粘台、喷金镀膜和观察等步骤.并通过与实例图片的对比,总结和讨论了获得较好观察效果的关键步骤.该技术具有推广价值和借鉴意义.     

十字花科蔬菜花粉电镜扫描分析

用扫描电子显微镜对十字花科蔬菜的花粉进行了观察分析。结果表明：（１）十字花科蔬菜花粉的基本形态特征为长椭圆形，具三沟，沟长几乎达两极；（２）花粉外壁纹饰多为典型的 网状雕纹，但花粉大小，Ｐ／Ｅ值，网眼形状、大小和密度，网眼内颗粒状物的有无和多少等在种间存在明显差异；（３）与二位体比较，四位体的花 粉显著变大，Ｐ／Ｅ值减小，网眼密度降低，网眼内颗粒状特增多，这些变异可以认为是基因剂量增加的遗传效应。     

家蚕成虫触角感受器的扫描电镜观察

为了研究家蚕(Bombyxmori)成虫触角的外部形态及其感受器的种类和分布,利用扫描电子显微镜对家蚕成虫触角感器的形态特征进行了观察.结果表明,家蚕雌、雄蛾触角上存在7种感器,即毛形感器、短毛形感器、锥形感器、刺形感器、腔锥形感器、耳形感器和鳞形感器,其中腔锥形感器只存在于雄蛾触角上,毛形感器在雌雄触角中都最发达.该结果为家蚕的形态、生理和化学生态研究奠定了基础.     

鸡双梳羽管螨扫描电镜的观察

本文报道了鸡双梳羽管螨在扫描电镜下的形态构造。发现了一些光学显微镜下无法观察到的细微结构：颚体上存在一个孔缘为三瓣的口孔；螯肢上有一对平行的宽约１μｍ的吸槽。     

金边窗萤头部特征的扫描电镜观察

利用扫描电镜观察金边窗萤(Pyrocoelia analis Fabricius)成虫和幼虫头部的形态特征。结果表明:金边窗萤成虫复眼发达,口器退化;幼虫有一对发达且左右对称的3节触角,其口器发达,具有1对锋利的、向内弯曲的镰刀状上颚,及1对下颚须、1对下唇须和1对内颚叶。     

利用电子显微镜研究植物微观结构的优化方案

根据多年从事电镜技术工作的经验，作结合在电子显微镜实验中出现较多的问题，介绍两种优化试验方案，主要使用技术和技术关键：①植物叶片的处理和观察；②植物花柄脱落部位情况的研究。这两个类型样品的观察方案，都是对植物某一个器官的整体到局部，表面到内部，微观结构到超微观结构的系统观察。它基本能够涵盖对不同植物微观形态分析的方法，在植物样品研究中可借鉴。     

瓜类植物花粉形态扫描电镜观察

通过扫描电子显微镜,研究了西瓜、甜瓜、黄瓜、西葫芦、丝瓜、冬瓜、栝楼和小葫芦等葫芦科7属9种13个类型植物的花粉,并对其大小、形状、萌发孔式样及外壁纹饰进行了分析比较,旨在为研究瓜类植物的亲缘关系,促进杂交育种提供依据。     

家蝇幼虫血细胞的透射电镜观察

[目的]观察家蝇3龄幼虫血细胞的类型和超微结构。[方法]取孵化后第3天家蝇幼虫血淋巴,采用透射电镜观察家蝇3龄幼虫血细胞的形态和超微结构。[结果]家蝇3龄幼虫血细胞分为原血胞、浆血胞、珠血胞、粒血胞和类绛血胞5种类型,细胞核均匀透亮,核膜清楚,常染色质多,粒血胞内含吞噬体。[结论]透射电镜观察可将家蝇幼虫血细胞分为5种类型。