不同温度及培养液对鲤斜管虫种群密度的影响

对鲤斜管虫在不同培养液及培养温度下种群密度的增长进行了探讨。结果表明18℃及22℃下鲤斜管虫生长繁殖良好,而4℃下繁殖速度变慢。牛肉膏、蛋白胨及酵母浸膏培养液中种群密度增长快但衰退也快,而在米粒浸出液中种群密度指数增长期及稳定期均长于其它3种培养液。     

硝酸钠和氯化铵对蠕形康纤虫的毒性影响

为探究氨氮胁迫下纤毛虫的毒性效应，试验采用静水生物急性毒性试验法，以养殖水体中常见的病害原生动物盾纤类纤毛虫——蠕形康纤虫(CohnilembusVerminus)为试验材料，测定了其在硝酸钠和氯化铵两种氮源药物胁迫下的LC₅₀值，并以此为基准开展亚急性毒性试验，测定蠕形康纤虫种群密度、种群生长率和世代时间。结果显示，硝酸钠和氯化铵对蠕形康纤虫的24h的半致死浓度分别是27.980和3 225.970 mg/L;48 h的半致死浓度分别是27.320和901.600 mg/L。在硝酸钠和氯化铵作用下，随着药物浓度升高，蠕形康纤虫最大种群密度和种群生长率均呈现先升高后降低的趋势，世代时间呈现先降低后升高的趋势。研究表明，低浓度氨氮胁迫对蠕形康纤虫生长有促进作用，相对于其他的水生生物，蠕形康纤虫对氨氮耐受性较高。在实际高密度水产养殖中，应关注盾纤类纤毛虫的病害。     

水滴伪康纤虫全长cDNA文库的构建及EST分析

水滴伪康纤虫为海水养殖鱼类的重要危害性寄生虫。采用SMART技术构建营养期水滴伪康纤虫全长cDNA文库,初始文库滴度3.3×106pfu·mL~(-1),文库容量约为1.5×107 pfu,重组率97%。随机挑取24个克隆,经PCR检测插入的片段长度在0.3~2.0kb,平均长度500bp。挑选文库中的1 200个克隆进行表达序列标签测序,得到1 032条高质量的EST,与NCBI数据库进行比对后,获得292个同源基因,其中包含190条单拷贝EST和102个重叠群,冗余度为71.7%。有215条EST在Tetrahymena thermophila,Paramecium tetraurelia,Ichthyophthirius multifiliis,Cryptocaryon irritans,Oxytricha trifallax等自由生活及寄生种类的纤毛虫的基因组中比对到同源基因,其中有134条EST具有功能注释,其余为未知功能的假定蛋白基因。水滴伪康纤虫cDNA文库的构建及EST测序的完成,为进一步发现和研究水滴伪康纤虫的功能基因奠定了基础。     

食物密度波动对蒙古裸腹溞种群密度和雄体比率的影响

在相对恒定的盐度（22）、温度（24～28℃）和自然光照下,培养液为密度（3～4）×106 cells/mL小球藻藻液,培养液更换方式1次/12 h、1次/6h和机动更换3种方式,初始种群密度为0.02 ind/mL,研究不同食物密度波动,对蒙古裸腹溞的种群密度变化规律和雄体比率的影响.结果表明,在29 d的培养期限内,种群密度呈现出典型的“S”型曲线,明显分为4个阶段：缓慢增长期、快速增长期、稳定期、下降期,固定组1次/12 h的种群密度明显低于固定组1次/6h和机动组,种群密度最大时可达到47 000 ind/L;雄体百分率表现为固定组1次/12 h＞固定组1次/6 h＞机动组,且3个组别均出现了2次雄体产出高峰期,最大雄体百分率可达到21.3％,分析得出蒙古裸腹溞雄体的产出与食物密度波动和种群密度有密切的关系,但是在较高的种群密度下并不能诱导出非常高的雄体百分率.     

响应曲面法在枯草芽孢杆菌优化培养中的应用

基于Plackett-Burman设计及结果,采用响应曲面法研究了影响枯草芽孢杆菌生长的关键因素和最佳水平.结果表明,当牛肉膏为7.3 g/L,蛋白胨为7.1 g/L,温度33.5 ℃,pH值6.1时,菌体生长量最大.进而分析2因素间交互作用的等高线图表明:牛肉膏5.7～8.0g/L,蛋白胨5.2～8.0 g/L,温度33～34 ℃,pH值5.4～6.8时,可得到较高的菌体量.     

乳酸链球菌最适抑菌培养条件的研究

为降低天然防腐剂乳酸链球菌素（Nisin）的生产成本,以金黄色葡萄球菌为试验菌,探讨了直接利用乳酸链球菌（Lactococcus lactis）培养液进行抑菌的最适培养条件。首先通过单因素试验,初步确定了最适碳源、氮源、金属离子及其浓度或配比的范围,然后采用正交试验L9（3^3）优化后得到的乳酸链球菌抑茵的最佳发酵条件为：3.0g／100g葡萄糖,4g／100g蛋白胨,2g／100g酵母膏,1g／100g牛肉膏,0.005mol／L MgSO4。优化后的培养基抑菌能力明显提高,此结果可为乳酸链球菌素的生产提供参考。     

枯草芽孢杆菌H4培养条件的优化

以枯草芽孢杆菌H4为试验材料,利用Plackett-Burman设计法,对影响菌体生长的7个因素进行了筛选,确定影响该菌生长的主要因素为牛肉膏、转速、蛋白胨和NaCl;采用响应面分析法对其中3个重要因子的最佳水平进行研究。结果表明,当牛肉膏为8.635g/L,蛋白胨为13.737g/L,NaCl为5.345g/L,接种量6.25%,初始pH7,温度39℃,转速150r/min培养时,菌体密度显著提高,菌株H4的OD460值由0.899提高到了1.129。     

乳酸菌复合系SFC-2增菌培养基的优化

通过对乳酸菌复合系SFC-2培养基的组分进行响应面优化,从而得出SFC-2优化培养基配方为白砂糖10g／L、蛋白胨31．36g／L、牛肉膏15．57g／L、酵母膏10g／L、乙酸钠7．3g／L、柠檬酸三铵4g／L、KzHP044g／L、MgS04·7H200．58g／L、MnSO4·H200．25g／L。SFC-2在此培养基中经30℃,16h培养,其活菌数可达到4．0×10^8cfu／mL,较MRS-S中（8．2×10^7cfu／mL）提高近5倍。     

植物氮源对透明质酸发酵的影响

以七种植物蛋白代替牛肉膏和蛋白胨作为氮源进行透明质酸发酵,研究了直接添加、酸解、碱解以及酶解这几种植物氮源的不同处理方式对透明质酸发酵的影响,结果表明:使用碱性蛋白酶水解的棉籽蛋白作为氮源时的效果最好,在摇瓶和30 L发酵罐中的透明质酸发酵产量分别达到了1.47 g·L~(-1)和5.94 g·L~(-1)。     

1株耐盐枯草芽孢杆菌TGBio-1433发酵工艺优化

对1株耐盐枯草芽孢杆菌TGBio-1433培养基、培养条件进行了优化;为了获得更高的菌体浓度,还探索了枯草芽孢杆菌TGBio-1433补料分批发酵工艺。试验结果表明,最优培养基为:玉米粉10 g/L、豆粕粉20 g/L、葡萄糖15g/L、蛋白胨15 g/L、牛肉膏5 g/L、MgSO_41 g/L、CaCO_37 g/L。最优培养条件为:起始pH 7.0~7.5,发酵温度35℃,培养时间18~20 h,接种量5%补料分批发酵工艺为:发酵16 h后,一次性补加碳、氮源(葡萄糖∶蛋白胨∶牛肉膏=3∶3∶1)总量的15%。枯草芽孢杆菌TGBio-1433发酵液活菌数由最初的24.2×10~8cfu/m L提高到136.1×10~8cfu/m L。     

肠膜明串珠菌6055合成低聚糖发酵培养基的优化

以MRS为基础培养基,单因素试验分析了碳源、氮源及微量元素对肠膜明串珠菌6055合成低聚糖的影响.并通过正交实验确定了肠膜明串珠菌6055合成低聚糖的适宜发酵培养基配方为：蔗糖100 g/L,麦芽糖50 g/L,酵母浸出物5g/L,大豆蛋白胨5 g/L,FeSO4·7H2O 0.01 g/L,MgSO4·7H2O 0.2 g/L,MnSO4·H2O 0.01 g/L,K2HPO4 3 g/L,CaCl2 0.05 g/L,NaCl 0.01 g/L,Tween-80 2 mL.低聚糖产量达到3.82 g/L,较优化前提高了1.42倍.     

蛹虫草菌丝液体培养基中适宜碳源和氮源的研究

以蛹虫草斜面固体菌种为试验材料,研究了5种碳源（葡萄糖、乳糖、蔗糖、麦芽糖和可溶性淀粉）和4种氮源（蛋白胨、牛肉膏、酵母浸膏和柠檬酸氢二铵）对蛹虫草菌丝产量的影响,以确定培养基的最佳碳源和氮源种类;同时分别研究了不同浓度的最佳碳源和氮源对蛹虫草菌丝产量的影响。结果表明：最适宜碳源为可溶性淀粉,适宜浓度为20 g/L;最佳氮源为酵母膏,适宜浓度为5 g/L。     

流加培养方式对大肠杆菌XD-12发酵的影响研究

[目的]研究大肠杆菌流加培养方式,提高转氨酶供体——大肠杆菌XD-12的发酵浓度。[方法]通过研究碳源流加、氮源流加、pH控制流加对发酵的影响,获得了优化的培养条件。[结果]产转氨酶大肠杆菌的最佳培养条件为：温度37℃,搅拌转速500 r/m in,通气量1.5 L/m in,培养基初始pH为7.0,控制发酵过程pH为7.5,初始葡萄糖浓度5 g/L,初始氮源为5 g/L蛋白胨＋1.5 g/L牛肉膏,从葡萄糖浓度下降为2 g/L开始每隔2 h间歇流加120 g/L的糖,从8 h起每隔2 h间歇流加15 g/L蛋白胨＋4.5 g/L牛肉膏。在此条件下培养24 h,大肠杆菌的菌体干重浓度达9.66 g/L,较分批培养提高了104.7%。[结论]这对降低酶法制备L-苯丙氨酸的生产成本、提高生产效率、满足日益增长的市场需求具有重要的现实意义。     

诺氟沙星在淡水青虾体内药物代谢动力学研究

在（26±1）℃的水温条件下,青虾一次性肌肉注射25mg／kg诺氟沙星后,用反相高效液相色谱法测定青虾血淋巴和肌肉组织中诺氟沙星含量。青虾血淋巴药一时曲线和肌肉药一时曲线均可以用二室开放模型来描述,诺氟沙星在青虾血淋巴液中的主要药动学参数为：分布相半衰期t1/α为1．66h,消除相半衰期t1/β为1．69h,达峰时间T（Peak）为1．82h,峰浓度C（max）为6．0081μg/mL,曲下面积AUC为30．75μg·mL^-1·h^-1,吸收相半衰期t1/2ka为1．66h。肌肉中的主要药动学参数为：分布相半衰期t1/ks为0．08h,消除相半衰期t1/2β为4．42h,达峰时间狄Peak）为0．03h,峰浓度C（max）为16．72μg/mL,曲下面积AUC为12．34μg·mL^-1·h^-1,吸收相半衰期t1/2a为0．08h。结果表明青虾肌注诺氟沙星后,能比较迅速的被吸收,并且在组织中维持较高的药物浓度。     

解磷菌株黑曲霉PSFM发酵条件优化研究

【目的】利用液体培养法探究不同碳源、氮源、无机盐和微量元素浓度以及发酵时间、温度、初始pH、转速、接种量等条件对解磷菌解磷特性的影响,获得解磷菌的最佳发酵培养基和培养条件。【方法】采用单因素及正交试验法,对一株分离自土壤的解磷真菌黑曲霉（Aspergillus niger）PSFM菌株的基础发酵培养基和发酵条件（发酵时间0～10d、温度20～40℃、初始pH值3.0～11.0、接种量1%～11%、转速120～300rpm）进行优化,测定其发酵液吸光度值,以解磷量的高低作为评价发酵培养基及发酵条件优劣的指标。【结果】分别在无机磷和有机磷液体培养基、简单培养基（SP）、NBRIY、NBRIP、NBRIYP培养基中培养6d后,以无机磷液体培养基的PSFM菌株解磷能力最高,解磷量为526.42mg/L。在12种不同碳源培养基中,PSFM均能正常生长,其解磷能力由大到小依次为：木糖〉葡萄糖〉乳糖〉蔗糖〉麦芽糖〉半乳糖〉山梨糖〉甘露糖〉果糖〉可溶性淀粉〉鼠李糖〉甘油。以硝酸钠、尿素、酵母浸膏、氯化铵、硝酸镁、硝酸铵、色氨酸、乙酸铵、牛肉浸膏、胰-蛋白胨、甘氨酸、酪氨酸、丙氨酸和精氨酸为氮源时,硫酸铵为唯一氮源的解磷效果最好,菌株PSFM发酵液中有效磷含量最高（990.31mg/L）。菌株PSFM的解磷能力均随着最佳培养基中NaCl、KCl、MgSO4·7H2O、FeSO4·7H2O和MnSO4·7H2O浓度的增加呈先提高后降低趋势,当其浓度分别为0.03%、0.01%、0.03%、0.001%、0.001%时,菌株PSFM的解磷能力均最强。在不同发酵条件下,以发酵6d、温度28℃、初始pH6.0、5%接种量、转速300rpm的PSFM解磷能力最强,解磷量分别为599.24、528.23、603.69、530.57和731.48mg/L。【结论】最适合PSFM菌株的基础发酵培养基为无机磷液体培养基,碳源为1.0%木糖,氮源为0.10%硫酸铵,最佳无机盐配方为：NaCl0.10g/L、KCl0.70g/L、MgSO·47H2O 0.70g/L、FeSO4·7H2O 0.01g/L、MnSO·47H2O 0.01g/L;最佳培养条件为：温度28℃,初始pH6.0,转速180rpm,接种量5%,发酵时间为6d。     

培养密度和容积对西藏拟潘生长和生殖的影响

在温度为（174-1）℃和盐度为16±1的条件下,研究了培养密度（0．1、0．2、0．3个／mL）和容积（20、50、80、150mL）对西藏拟涵Daphniopsistibetana生长和生殖的影响。结果表明：在试验范围内,低种群密度比高种群密度更有利于西藏拟淹的生长和繁殖,当种群密度为0．1个／mL时,最有利于溢体的生长和繁殖,当种群密度达到0．3个／mL时,水体中开始出现雄体（CV3组除外）;在容积试验中,容积为20—80mL时,西藏拟潘的体长随着容积的增大而增大,容积为80mL时,最适宜潘体的生长和生殖;西藏拟涵的生殖量随着体长的增加而增加。     

响应面法优化棒状乳杆菌HS4廉价增殖培养基研究

本研究对棒状乳杆菌的廉价增殖培养基进行筛选及优化,以达到降低棒状乳杆菌菌剂的生产成本。通过比较棒状乳杆菌HS4在9种基础培养基中的生长情况,确定冬瓜基础培养基为增殖基础培养基;经单一营养因子试验和Plackett-Burman设计试验,确定影响棒状乳杆菌HS4增殖的3个重要因素分别为大豆蛋白胨、牛肉膏和酵母浸粉;经响应面分析进行回归优化,获得最佳冬瓜增殖培养基配方为:冬瓜基础培养基(1L),大豆蛋白胨(19.7g/L),酵母浸粉(19.4g/L)和牛肉膏(1.94g/L),活菌数达到39.81×108 CFU/mL。