微量乳酸脱氢酶释放法检测NK细胞活性的几个主要影响因素

对乳酸脱氢酶释放法测定小鼠脾脏 NK细胞活性中的酶促反应时间、效靶细胞比例、检测波长、细胞毒试验孵育时间、维持液中小牛血清 ( FCS)浓度等 5个重要的影响因素进行了探索。结果显示 ,酶促反应时间以 1 0 min最佳 ;效靶细胞比例以 1 5∶ 1为适宜 ;最适检测波长为 570 nm,其结果线性关系好 ;细胞毒试验孵育时间以 2 h为宜 ;维持液中小牛血清以低浓度为宜 ,其结果更接近自然杀伤百分率计算公式 ,并选用 2 %为本试验小牛血清的体积分数     

MTT法检测鸡脾脏和外周血NK细胞杀伤活性的条件优化

选取不同日龄的SPF鸡和肉鸡,用贴壁法从血液和脾脏分离出NK细胞作为效应细胞,选择瘤细胞MDCC-MSB1和MDCC-MSBCU147分别作为靶细胞,二者按比例混合,孵育,利用MTT法检测靶细胞的活力反映效应细胞对靶细胞的杀伤活性,并对效靶比、作用时间进行比较.结果显示,MSB-1和CU147均可作为NK细胞良好的靶细胞,但CU147更稳定;效靶比为20:1～50:1,作用时间8～16 h杀伤效果稳定;50%DMF-20%SDS混合物作为裂解液能够对结晶彻底溶解,优于其他溶解试剂.     

淫蜂佐剂对实验动物NK细胞活性的影响

用微量乳酸脱氢酶（LDH）释放法分别观察了淫羊藿－蜂胶佐剂（以下简称“淫蜂佐剂”）对小鼠脾脏和雏鸡外周血中自然杀伤细胞（NK细胞）活性的影响。结果：小鼠NK细胞活性在淫蜂佐剂（Ⅰ）组、生理盐水对照（Ⅳ）组、淫蜂＋环磷酰胺（Ⅱ）组和环磷酰胺（Ⅲ）组的上述各组间差异显著或极显著（P＜0．05或P＜0．01）（Ⅱ组和Ⅳ组间差异不显著，P＞0．05），这种差异在4周龄小鼠较8周龄小鼠更为明显。雏鸡NK细胞活性，35日龄时，注射淫蜂佐剂雏鸡极显著高于注射生理盐水雏鸡，0．4mL／羽组明显高于0．2mL/ 羽组。上述结果表明，淫蜂佐剂能提高实验动物NK细胞活性，并拮抗环磷酰胺对NK细胞活性的抑制作用。淫蜂佐剂的这种作用在适龄的幼年动物中表现更为显著，并存在一定的量效关系。     

仔猪外周血中NK细胞对人K562和鼠Yac—1肿瘤细胞的杀伤活性观察

仔猪外周血中ＮＫ细胞对人Ｋ_（５６２）和鼠Ｙａｃ—１肿瘤细胞的杀伤活性观察黄庆洲，胡庭俊（中国农业科学院中兽医研究所兰州７３００５０）孟宪松（中国农业科学院科研管理部）牟家琬，李明远，蒋中华（华西医科大学微生物学与免疫学教研室）梁歌（四川省畜牧兽医研?..     

低能量氦氖激光照射对荷瘤小鼠NK细胞活性的影响

研究低能量氦氖激光照射荷瘤小鼠对ＮＫ细胞活性的影响。选取ＢＡＬＢ／Ｃ雄性小鼠腹腔接种Ｓ１８０,接种后进行激光照射小鼠内眼角,监测了正确对照组,肿瘤对照组和７．３３、１１．００、１４．６７、２２．００、２９．３３Ｊ／ｃｍ＾２五个激光照射线能明显提高荷瘤小鼠ＮＫ细胞活性;７．３３、２９．３３Ｊ／ｃｍ＾２照射组则长高不明显。     

慢性氨气暴露对肉鸡NK细胞杀伤活性和血清新城疫抗体效价和溶菌酶的影响

为探讨氨气对肉鸡免疫功能的影响,选择240只1日龄AA肉公鸡,随机分成4个处理组,分别饲养在4个独立的、环境可控制的实验舱内。4个环控仓氨气浓度设计为0～3周龄分别为0、13、26mg/kg和52mg/kg;3～6周龄分别为0、20、40mg/kg和80mg/kg。结果表明:高浓度氨气暴露3周和6周,肉鸡血清溶菌酶均表现降低,其中3周龄溶菌酶降低较显著(P<0.05);肉鸡氨气暴露6周后,NK细胞杀伤活性显著下降(P<0.05),新城疫弱毒疫苗免疫效能显著降低(P<0.05)。这一结果表明肉鸡暴露在高浓度氨气环境中,其免疫功能会表现降低。     

蒙药特润舒都乐对模型小鼠脾脏NK细胞活性的影响

目的:观察和探讨蒙药特润舒都乐对小鼠脾脏NK细胞杀伤活性的影响,了解该蒙药的生物学活性.方法:采用皮下给药的体内实验及3 H-TdR掺入抑制法检测小鼠脾脏NK细胞活性.结果:蒙药特润舒都乐能显着提高小鼠脾脏NK细胞杀伤活性,且呈剂量依赖性,其高、中、低剂量(50,25,10mg/L)各组的NK活性分别为64.39±16.53、46.21±13.28、36.09±12.26,与空白对照及阴性对照均有显着性差异(P<0.05).结论:蒙药特润舒都乐能提高NK细胞活性,并有剂量依赖性.     

黄芪多糖对雏鸡外周血中NK细胞活性的影响

黄芪多糖对雏鸡外周血中ＮＫ细胞活性的影响唐雪明刘家国宋大鲁（南京农业大学动物医学院，２１００９５）黄芪是中兽医常用的扶正药物，可“补益元气而托毒”［１］，现代研究还证实了，黄芪可以调节机体免疫功能，在人医临床上常用于抗肿瘤、消除慢性炎症［２］［３］。...     

米糠多糖对人工感染传染性法氏囊病毒雏鸡的保护力及NK细胞活性的影响

为了研究米糠多糖对鸡免疫功能的影响,将250只健康京白939公雏鸡随机分为5组,每组50只。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组为米糠多糖处理组,Ⅳ组为攻毒对照组,Ⅴ组为空白对照组。10日龄时,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别灌服米糠多糖50 mg/kg.d、100 mg/kg.d、200 mg/kg.d,Ⅳ、Ⅴ组灌服生理盐水1 ml/只,连续用药5 d。15日龄时,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别肌肉注射鸡法氏囊病毒悬液0.1 ml/只,Ⅴ组肌肉注射生理盐水0.1 ml/只。后观察鸡群的发病和死亡情况,且分别于攻毒前和攻毒后7、14、21 d制取鸡脾淋巴细胞悬液,进行NK细胞活性的检测。结果表明,在攻毒后14 d,200 mg/kg.d米糠多糖剂量组的鸡只发病率和死亡率明显低于攻毒对照组,且NK细胞活性高于空白对照组(P<0.01)。     

影响高寒草甸产草量丰歉气象指标的探讨

应用相关分析,研究影响高寒草甸产草量气象因子的单相关程度,找出综合评判产草量丰产与歉收的5个指标因子,通过5个因子的综合处理,建立牧草丰歉气象指标模式。结果表明,拟合结果较好,拟合率达75%。所建立的评判模式能定性地反映青海海北高寒草甸地区牧草丰产与歉收的年景划分。     

河南大尾寒羊主要血液生化指标的测定

对41只河南大尾寒羊(母19只,公22只)血清总蛋白,血清白蛋白,血清球蛋白,血清总胆固醇,血糖,血清钾,血清钠,血清钙,血清尿素氮和肌酐共10项血液生化指标进行了测定。结果表明:除血清胆固醇指标公羊极显著高于母羊外(P<0.01),其它各项指标公母羊均无显著差异(P>0.05)     

河南大尾寒羊血液生理指标的测定

对河南大尾寒羊的血液生理指标进行了测定，结果表明：大尾寒羊公母间RBC、WBC、PCV、Hb、MCV、MCH、MCHC均无显著性差异。大尾寒羊的红细胞脆性较大，而ESR值较小。     

放牧牦牛采食量和几种消化生理指标的测定

在莎草科 +禾本科草地上对放牧条件下牦牛采食量和几种消化生理指标进行测定。结果表明 :牦牛的干物质消化率为 69 3 6%± 5 87% ,放牧牦牛日干物质采食量为 12 2 13g/kg·W0 75,大部分食糜在采食后 60小时左右排出 ,但完全排出要在 5天以后     

饲料中添加复方中药对小鼠血液生理生化指标和免疫器官指数的影响

选取120只昆明种小鼠随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ 4个组,每组30只(雌雄各半),Ⅰ组为常规饲喂对照组,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组饲料中分别添加比例为0.75%、1.00%和1.50%的复方中药进行试验。结果表明,与对照组相比,试验第3周,Ⅲ、Ⅳ组小鼠胸腺指数和脾脏用指数显著或极显著提高(P<0.05或P<0.01);在第1、3周时,Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组血液总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)升高,Ⅲ和Ⅳ组胆固醇(CHO)和甘油三酯(TG)均显著或极显著提高(P<0.05或P<0.01);同时,Ⅲ、Ⅳ组小鼠血液中间细胞(MID)和淋巴细胞(LYM)也显著增加(P<0.05)。因此,在饲料中添加复方中药饲喂小鼠能促进免疫器官发育,并在一定程度上提高其机体免疫力。     

金丝桃素对小鼠生长性能、脏器指数及盲肠微生物多样性的影响

[目的] 探讨金丝桃素对小鼠生长性能、脏器指数及盲肠微生物多样性的影响。[方法] 将100只4周龄雌性昆明小鼠随机分为5组,每组20只;金丝桃素通过饮水给予小鼠,添加量分别为0、1、2、4、8 g/L;正饲期28 d,记录小鼠体重和采食情况,计算平均日增重、平均日采食量和料重比;记录死亡小鼠数量,计算死亡率;试验结束时用颈椎脱臼法处死小鼠,采集并称量心脏、肝脏、肾脏和脾脏,称重并计算脏器指数;采集盲肠内容物,利用16S rDNA高通量测序法分析盲肠微生物多样性。[结果] 饮水中添加1、2、4 g/L的金丝桃素可提高平均日增重（P>0.05）,4 g/L组平均日增重最高,比0 g/L组增加21.21%;饮水中添加金丝桃素可提高平均日采食量（P>0.05）,2 g/L组平均日采食量最高,比0 g/L组增加18.30%;4 g/L组的料重比最低（P>0.05）,比0 g/L组降低9.24%。1 g/L组、2 g/L组、4 g/L组、8 g/L组的心脏指数显著（P<0.05）高于0 g/L组,4 g/L组的肾脏指数显著（P<0.05）低于1 g/L组。盲肠菌群在门（Phylum）水平上,以厚壁菌门（Firmicutes）相对丰度最高,其次为拟杆菌门（Bacteroidetes）、变形菌门（Proteobacteria）,3个菌门占细菌总数的97.58%。在属（Genus）水平上, 普雷沃菌属（Prevotella）、拟杆菌属（Bacteroides）、考拉杆菌属（Phascolarctobacterium）相对丰度较高;1 g/L组、2 g/L组、4 g/L组的普雷沃菌属（Prevotella）和巨单胞菌属（Megamonas）的相对丰度显著（P<0.05）低于0 g/L组,副瘤胃球菌属（[Ruminococcus]）显著（P<0.05)高于0 g/L组;4 g/L组盲肠副拟杆菌属（Parabacteroides）、瘤胃球菌属（Ruminococcus）、乳杆菌属（Lactobacillus）显著（P<0.05)高于0 g/L组。[结论] 在饮水中添加金丝桃素在一定程度上有助于提高小鼠采食量和增重,显著提高心脏指数,增加盲肠内有益菌的相对丰度,对小鼠健康表现出有益作用。     

伯氏疟原虫ANKA株感染小鼠的T细胞、NK细胞及细胞因子变化

旨在系统分析伯氏疟原虫感染引起宿主T细胞、NK细胞、Tim-3表达及细胞因子的变化。选取64只雌性C57BL/6小鼠随机分为8组,每组8只,分别于感染后0、4、7、9、11、13、16和19 d获取小鼠脾及外周血免疫细胞,利用流式细胞术检测小鼠主要免疫细胞亚群及免疫检查点分子Tim-3表达水平的变化;同时检测血清中细胞因子的变化。结果表明,感染疟原虫后,小鼠脾CD3⁺CD4⁺ T细胞、CD3⁺CD8⁺ T细胞及NK细胞的比例均逐渐降低（P<0.01）,且伴随着3种细胞Tim-3表达量的升高（P<0.01）。小鼠外周血CD3⁺CD4⁺ T细胞的比例呈先降低后升高趋势,CD3⁺CD8⁺ T细胞的比例呈先升高后降低趋势（P<0.05）;小鼠外周血CD3^-NK1.1⁺细胞的比例呈先降低后升高趋势,但感染末期,其比例仍低于未感染组（P<0.05）。Tim-3分子在外周血CD3⁺CD4⁺ T细胞、CD3⁺CD8⁺ T细胞及CD3^-NK1.1⁺细胞的表达均显著升高（P<0.05）。感染疟原虫后,小鼠血清中促炎细胞因子IL-2的分泌量均显著高于未感染组（P<0.05）;促炎细胞因子IFN-γ、TNF-α和IL-6在血清中分泌均呈先升高后降低趋势（P<0.05）;具有免疫抑制作用的细胞因子IL-10呈逐渐升高趋势,且感染后期急剧升高（P<0.001）。以上结果表明,感染疟原虫后,小鼠的特异性免疫反应发挥了一定的杀伤作用,但由于Tim-3免疫检查点分子及一些发挥免疫抑制作用的细胞因子（IL-10）的过度表达,有利于疟原虫逃避宿主的免疫捕杀作用。该研究提示了从宿主免疫抑制角度研究疟原虫感染的重要性。     

普氏原羚若干血液生理生化指标测定

对普氏原羚的 10项血液生理生化指标进行了测定。结果 :红细胞为 12 97± 2 0 3 (10 1 2 L) ;红细胞压积为0 484± 0 0 44 (L L) ;血红蛋白为 175 3± 2 5 7(g L) ;白细胞为 3 88± 0 5 6(10 9 L) ;白细胞分类计数结果 (% ) :硷性为 0 3 3± 0 5 8,杆状核为 4 5 0± 2 12 ,分叶核为 3 6 0 0± 13 11,淋巴细胞为 5 8 67± 14 60 ,单核细胞为 1 0 0± 1 0 0 ;血清总蛋白为72 0 0± 8 72 (g L) ;血清钙为 2 0 8± 0 18(mmol L) ;血清无机磷为 2 3 5± 0 46(mmol L) ;GPT为 2 0 8 0± 10 4 8(nmol·s- 1 L) ;GOT为 83 2± 0 (nmol·s- 1 L)。其红细胞、红细胞压积、血红蛋白显著高于低海拔地区的绵、山羊 ;其它大部分指标同黑羚羊、绵羊、山羊基本相近