宁夏滩羊体大品系、裘皮品系及其杂交后代血红蛋白多态性比较

采用醋酸纤维素膜电泳分析法,测试体大品系、裘皮品系及其杂交后代血红蛋白多态性.发现滩羊血红蛋白位点鉴别出的四种等位基因HbA、HbB、HbC和HbD控制着HbAA、HbBB、hbAB、HbCC、HbAC、hbDA和HbDB七种表现型.其中体大品系滩羊(76只)主导基因频率HbA为0.546 1,裘皮品系滩羊(34只)主导基因频率Hb为0.485 3,两者相差4个百分点.HbD基因体大品系比裘皮品系高6个百分点,而表现型HbAA和HbDA体大品系高于裘皮品系,但差异均不显著.     

宁夏滩羊体大品系遗传标记的研究

研究首先采用RAPD技术,利用混合基因池(DNA pool)法,对滩羊体大品系、普通品系进行DNA多态性分析。从100种具有10个碱基的随机引物中,筛选出84种引物在滩羊群体基因组中共扩增出358条带,其中22种引物扩增产物表现为多态(占22%),且扩增出32条有差异的条带,占总带数的8．94%(32/358);62种引物的扩增产物表现为单态(占62%)。滩羊体大品系的特异性条带5个,而普通品系的特异性条带7个。这些特异标记可以用来鉴定滩羊的2个品系。滩羊体大品系和普通品系间的遗传距离为0．136±0．087,表明2个品系之间的亲缘关系很近。     

宁夏滩羊体大类群选育及其分子遗传标记研究

1994年开展体大滩羊选育 ,1997年以“滩羊体大类群选育”列入国家科技攻关地方管理项目 ,并相继付诸实施。从 10 0种具有 10碱基的随机引物中筛选出 84种引物可在滩羊群体基因组中得到扩增 ,共扩增出 35 8条带 ,滩羊普通品系有六条 :PS - 10 7- 5 5 0 ,PS - 5 10 - 5 0 0 ,PS - 5 12 -45 0 ,PS - 10 1- 45 0 ,PS - 5 12 - 40 0 ,PS - 5 11- 40 0 ,PS - 12 - 370 ;体大品系有五条 :PS - 5 0 9- 875 ,PS - 5 15 - 875 ,PS - 10 6 - 75 0 ,PS - 10 0 8- 70 0 ,PS - 10 10 - 370 ;以上引物可作为区分两品系的标记引物 ,特征性条带可作为各自的分子标记来进行品系鉴定。肥胖基因 (ob)检测其结果 ,两个品系之间无基因型差异。体大品系公羊血清GH水平比裘皮系高 2 82ng/ml,体大群及快肥群母羊比裘皮系高 2 75和 2 6 0ng/ml;体大品系公羊血清IGF -I含量高于裘皮系 ,其中成年公羊比裘皮系高出...     

滩羊体大品系生长激素基因的RFLPs的检测

研究运用了PCR－RFLPs方法，根据羊生长激素基因序列合成的特异性引物，对滩羊两个品系的基因组进行多态性分析。结果表明，其扩增产物的PVU Ⅱ酶切结果分别出现了两种基因型。并对两个品系滩羊生长激素基因检测结果进行了基因型和基因频率的初步分析，结果显示，BB基因型频率，滩羊普通品系显著高于体大品系（P＜0．05）；AB基因型频率，体大品系极显著的高于普通品系（P＜0．01）。而基因频率，两个品系之间无差异（P＞0．05）。     

滩羊体大品系遗传标记的研究

本研究首先采用RAPD(Romdom Amplified Polymorphic DNA)技术,利用混合基因池(DNApool)法,对滩羊体大品系、普通品系进行DNA多态性分析.从100种具有10碱基的随机引物中筛选出84种引物可在滩羊群体基因组中得到扩增,共扩增出358条带,其中22种引物扩增产物表现为多态(占22%),且扩增出32条有差异的条带,占总带数的8,94%(32/358);62种引物的扩增产物表现为单态(占62%);另有16种引物扩增非常微弱,不便分析(占16%).根据Nei氏片段共享度公式计算出滩羊的体大品系和普通品系间的遗传距离为0.14±0.25,表明两品系之间的亲缘关系很近.同时在分析过程中发现滩羊体大品系,普通品系均出现了具有品系特征的特异性条带.滩羊普通品系有7条PS-107-550,PS-510-500,PS-512-450,PS-101-450,PS-512-400,PS-511-400,PS-12-370;体大品系有5条PS-509-875,PS-515-875,PS-106-750,PS-1008-700,PS-1010-370;以上引物可作为区分两品系的标记引物,特征性条带可以作为各自的分子标记来进行品系鉴定.     

甘南藏系绵羊DGAT1基因16-17外显子多态性分析

本研究旨在探讨甘南藏系绵羊(欧拉羊、甘加羊和乔科羊)及滩羊DGAT1基因16-17外显子多态性,为开展藏系绵羊遗传分化、藏系绵羊与其他绵羊的亲缘关系、藏系绵羊DGAT1基因与肉质性状关联等方面的研究提供参考.采用PCR-RFLP方法,检测501只绵羊DGAT1基因16-17外显子SNP,并对主要遗传参数进行统计学分析.结果表明:①藏系绵羊DGAT1基因16-17外显子均具有Alu Ⅰ酶切多态性,存在TT、TC、CC 3种基因型,其中CC基因型频率最高,为优势基因型;C等位基因频率高于T等位基因频率,为优势等位基因.②欧拉羊在DGAT1基因16-17外显子处于Hardy-Weinberg平衡状态(P＞0.05),而甘加羊、乔科羊在DGAT1基因16-17外显子处于Hardy-Weinberg不平衡状态(0.01＜P＜0.05).③独立性检验结果表明:各藏系绵羊间基因型分布差异不显著(P＞0.05),而滩羊与乔科羊之间差异极显著(P＜0.01),滩羊与欧拉羊、滩羊与甘加羊之间差异显著(0.01＜P＜0.05).④藏系绵羊在DGAT1基因16-17外显子Alu Ⅰ酶切位点均表现为中度多态.结果提示:在DGAT1基因16-17外显子Alu Ⅰ酶切位点上藏系绵羊之间基因型分布差异不显著(P＞0.05),而滩羊和藏系绵羊差异显著(0.01＜P＜0.05)、亲缘关系较远.     

滩羊mtDNA Cytb和COⅡ基因遗传多样性研究

为了分析滩羊线粒体DNA(mtDNA)细胞色素b(Cytb)和细胞色素C氧化酶亚基Ⅱ(COⅡ)基因的遗传多样性,试验采用PCR扩增、12%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、Sanguinetti银染法显色的方法对宁夏地区3个品种绵羊(滩羊、小尾寒羊和蒙古羊)群体遗传多样性进行检测,统计各群体的等位基因组成,利用等位基因频率计算各群体的多态信息含量(PIC)。结果表明:Cytb和COⅡ基因在3个绵羊群体中具有多态性,Cytb基因出现CC、CD、DD 3种基因型,C等位基因频率为0.34,D等位基因频率为0.66,PIC为0.348 1,达到中度多态;COⅡ基因出现EE、EF、FF、EH、FH 5种基因型,E等位基因频率为0.34,F等位基因频率为0.47,H等位基因频率为0.19,PIC为0.625 6,达到高度多态。将滩羊、小尾寒羊和蒙古羊Cytb基因与COⅡ基因序列进行分析对比,分别在202 bp、47 bp、157 bp处发现变异位点。     

绵羊PRND基因多态性及其与生长性能的关联分析

目的:研究绵羊PRND基因多态性及其对生长性能的遗传效应,旨在寻找改良绵羊生长性能的分子标记。方法:本研究采用DNA测序的方法检测了兰州大尾羊(n=120)、小尾寒羊(n=190)、滩羊(n=1 020)3个群体共1 330个个体在绵羊PRND基因中的遗传变异,并分析了绵羊PRND基因多态性与生长性能的关联性。结果:绵羊PRND基因存在多态性。其中,兰州大尾羊未检测到DD型,II基因型频率高于ID型,等位基因I频率高于等位基因D,SNP处于低度多态(PIC0.25);小尾寒羊、滩羊均检测到DD、ID、II三种基因型,II基因型频率均高于DD、 ID型,等位基因I频率高于D,SNP均处于低度多态(PIC0.25);关联分析表明,兰州大尾羊ID型个体的各种生长性能均高于II型个体。其中,兰州大尾羊ID型个体的胸围普遍高于小尾寒羊和滩羊,体斜长差异显著(P0.05)。小尾寒羊管围差异显著(P0.05)。滩羊生长性能差异均不显著(P0.05)。结论:PRND基因在兰州大尾羊、小尾寒羊、滩羊中都存在多态性,对绵羊生长性能有显著影响。     

梅山猪ob基因多态性与繁殖性状的相关性研究

本文利用Bi-PASA方法研究了梅山猪ob基因的 3714位点多态性与繁殖性能的相关。ob基因经Bi-PASA扩增以后出现 3个条带 ,表现为 3种基因型 (AA型、AB型和BB型 ) ,两个等位基因A和B。经方差分析检验 ,AA型母猪的产仔数显著低于AB型和BB型个体的产仔数 (P <0 .0 5 ,10 .4头与 11.7和 11.6头 )。而AA型仔猪生后生长速度显著高于AB型和BB型 (P <0 .0 5 ,4 .5 5 3kg与 4 .0 4 4t4 .0 4 3,2 0日龄 ;7.6 2 1kg与 6 .6 0 4和 6 .6kg ,35日龄 ) ,试验猪群ob基因处于平衡状态 ,故可能ob基因并不是各性状变异的主要原因     

滩羊多胎基因(FecB)TaqMan探针SNP分型与产羔数的关联研究

为了建立滩羊FecB基因SNP高效分型的方法,试验选用373只滩羊利用TaqMan探针FecB基因进行SNP分型研究。结果表明,FecB基因具有3种基因型,分别是XX(87%)、XY(12%)和YY(1%)。FecB基因YY基因型的平均产羔数为3.81只,XY基因型为2.44只,XX基因型为2.01只。FecB基因可以作为滩羊多胎性选育的分子遗传标记,并能有效提高滩羊个体平均产羔数;通过基因型选育,还可以加快滩羊高繁品系的建立。     

Polymorphism in 3'UTR of DLX3 Gene and Its Association with Wool Quality Traits in Chinese Merino Sheep

为探讨DLX3基因的多态性与绵羊羊毛品质及生长性状的关系,本研究以5个品系的中国美利奴羊(新疆军垦型)为试验材料,采用PCR-RFLP方法开展了DLX3基因3'UTR区4个SNPs的多态性检测.通过卡方检验分析了4个SNPs在各品系绵羊中的等位基因频率,采用连锁不平衡分析构建了这4个SNPs的单倍型,最后将单位点和单倍型分别与绵羊羊毛品质和生长性状进行关联分析.结果表明:4个SNPs在5个品系间的等位基因频率均存在极显著差异(P＜0.01)；超细毛绵羊品系与其他4个品系间的基因型分布均存在极显著差异(P＜0.01),2个多胎品系与其他3个品系间的基因型分布同样存在极显著差异(P＜0.01)；相关分析显示,这4个SNPs及其单倍型均对羊毛卷曲度有显著影响(P＜0.05),而对其他羊毛性状及生长性状无显著影响(P＞0.05).由此可见,中国美利奴羊(新疆军垦型)DLX3基因3'UTR区的多态性与绵羊毛发卷曲度性状显著相关,可以尝试使用这些SNPs开展高品质细毛羊的分子标记辅助选择.     

中国美利奴羊DLX3基因3′UTR的多态性及其与羊毛品质性状的关联分析

为探讨DLX3基因的多态性与绵羊羊毛品质及生长性状的关系,本研究以5个品系的中国美利奴羊(新疆军垦型)为试验材料,采用PCR-RFLP方法开展了DLX3基因3′UTR区4个SNPs的多态性检测。通过卡方检验分析了4个SNPs在各品系绵羊中的等位基因频率,采用连锁不平衡分析构建了这4个SNPs的单倍型,最后将单位点和单倍型分别与绵羊羊毛品质和生长性状进行关联分析。结果表明:4个SNPs在5个品系间的等位基因频率均存在极显著差异(P<0.01);超细毛绵羊品系与其他4个品系间的基因型分布均存在极显著差异(P<0.01),2个多胎品系与其他3个品系间的基因型分布同样存在极显著差异(P<0.01);相关分析显示,这4个SNPs及其单倍型均对羊毛卷曲度有显著影响(P<0.05),而对其他羊毛性状及生长性状无显著影响(P>0.05)。由此可见,中国美利奴羊(新疆军垦型)DLX3基因3′UTR区的多态性与绵羊毛发卷曲度性状显著相关,可以尝试使用这些SNPs开展高品质细毛羊的分子标记辅助选择。     

宁夏地方绵羊品种mtDNAD-loop环序列遗传多样性与起源研究

为了分析宁夏地区主要绵羊品种的遗传多样性及系统发生关系,试验采用PCR扩增,12%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、Sanguinetti银染法显色的方法,对宁夏地区3个绵羊品种(滩羊、小尾寒羊和蒙古羊)群体遗传多样性进行检测,统计各群体的等位基因组成,利用等位基因频率计算各群体的多态信息含量(PIC)和群体间的遗传距离。结果表明:D-loop环在3个绵羊群体中的PIC达到中度多态,可以作为有效的遗传标记用于各绵羊品种的遗传多样性及系统发生关系的分析。运用遗传距离(D A)将绵羊品种进行分类,滩羊与蒙古羊遗传距离最近,滩羊与小尾寒羊的遗传距离最远,聚为两类。各绵羊品种的分子系统发生关系与其来源、育成史、分化及地理分布基本一致。     

十二月龄滩羊屠宰试验及羊肉测定

滩羊是肉裘兼用型地方品种,具有良好的二毛裘皮性能,毛细度分布比较集中,细而均匀,光泽好,保持有一定弯曲、呈比较紧实的毛辫结构.十二龄期的羊羔肉用性能突出,生长发育快、肉质鲜嫩、无膳、无腥、营养丰富,是优良的营养滋补品.滩羊产区舍饲的12月龄滩羊公羊宰前活重和胴体重分别为33.77kg 和14.50kg,母羊宰前活重和胴体重分别27.67kg 和13.1kg.屠宰率公羊为45.48%母羊为49.51%.与滩羊选育改良前相比(母羊屠宰率为40%,公羊屠宰率为45%)有了提高.与滩羊行业修订标准体重相比公羊(29.12±2.13)kg和母羊(28.14±2.184)kg相近,公羊肉的蛋白和脂肪分别为(16.97±1.42)%,(25.43±7.55)%;母羊分别为(16.18±1.91)%,(28.99±5.97)%,说明胴体品质良好.本文就滩羊的品质改善进行综合分析,为进一步提高滩羊生产水平和深入研究提供依据.     

滩羊多胎品系选育中的FecB基因的检测及利用

为了达到滩羊多胎品系的辅助选育的目的,试验利用绵羊多胎主效基因Fec B的PCR-RFLP检测方法检测了宁夏灵武、盐池两地滩羊多胎品系基础群湖羊母本及其滩湖杂一代252只个体,检测结果为湖羊母羊公羊169只均为BB型,滩公羊4只均为++型,滩湖杂一代80只为B+基因型,其中BB型66.7%;B+型31.75%;++型1.98%,并确定了每个个体的基因型,通过基因型的判断在选配中选留BB基因型和B+基因型,进一步纯化基因达到滩羊多胎品系选育的目的,可加速育种项目滩羊多胎品系的选育步伐。     

滩羊肌肉抑制素(MSTN)基因的多态性研究

为了分析宁夏滩羊肌肉抑制素(MSTN)基因的遗传多样性及其与生长性状的相关性,试验对滩羊群体的98个个体的MSTN基因进行PCR-RFLP分析。结果表明:MSTN基因引物1在所选群体中处于Hardy-Weinberg平衡状态,多态信息含量为0.301 5,属于中度多态,2个等位基因分别为:A、a,3种基因型分别为:AA、Aa、aa,有效等位基因数为1.586 9,杂合度为0.369 8。MSTN基因引物2也处于Hardy-Weinberg平衡状态,多态信息含量为0.366 4,属于中度多态,2个等位基因分别为:A、B,3种基因型分别为:AA、AB、BB,有效等位基因数为1.934 7,杂合度为0.483 1。     

中国美利奴(新疆军垦型)A品系、B品系绵羊群体遗传结构研究

利用位于绵羊不同染色体的9个微卫星标记对新疆紫泥泉国家二级种羊场中国美利奴(新疆军垦型)A品系、B品系绵羊基因组DNA的遗传多样性进行了检测。统计了中国美利奴(新疆军垦型)A品系、B品系绵羊在9个位点的平均杂合度(H)、有效等位基因数(E)、9个微卫星位点的等位基因频率多态信息含量(PIC)和位点平物多态信息含量(PIC)以及中国美利奴(新疆军垦型)A品系、B品系绵羊基因座频率的抽样估计等遗传指标。研究表明:9个微卫星位点在中国美利奴(新疆军垦型)A品系、B品系中均存在遗传多态性,其中5个与产毛性状相关的位点可作为区分A、B品系的依据(5个位点为BM6438、ILSTS004、BM143、BM6516、BM1824);通过分析各品系的遗传结构和特性,如等位基因频率等,对中国美利奴绵羊的选育提高有帮助。     

酵母硒对滩羊的生物安全性评价:生长性能、血液常规参数、硒蛋白基因表达以及富集规律

本试验旨在研究饲粮酵母硒添加水平对滩羊生长性能、血液常规参数、硒蛋白基因表达以及组织器官硒含量的影响,进而评价酵母硒对滩羊的生物安全性,揭示硒在滩羊体内的生物富集规律。选取体重[(32±2) kg]相近、健康状况良好的滩羊公羔64只,随机分为4组,每组16个重复,每个重复1只羊。试验选用玉米-豆粕型基础饲粮,硒含量为0.16 mg/kg,各组分别在基础饲粮中添加28.94、105.46、258.51、564.60 mg/kg酵母硒,使饲粮硒含量分别为0.25(Ⅰ组)、0.50(Ⅱ组)、1.00(Ⅲ组)、2.00 mg/kg(Ⅳ组)。预试期10 d,正试期60 d。结果表明:1)饲粮酵母硒添加水平对滩羊生长性能无显著影响(P0.05)。2)与Ⅰ组相比,Ⅲ组滩羊血液平均红细胞体积、嗜酸性粒细胞计数显著升高(P0.05)。与Ⅱ组相比,Ⅳ组滩羊血液红细胞分布宽度标准差显著降低(P0.05)。3)与Ⅰ组相比,Ⅲ组滩羊肝脏谷胱甘肽过氧化物酶1(GPX1)、谷胱甘肽过氧化物酶3(GPX3)的mRNA相对表达量呈二次极显著升高(P0.01)。与Ⅰ组相比,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组滩羊肝脏硫氧还原白还原酶1(TXNRD1)的mRNA相对表达量呈二次极显著下降(P0.01),甲状腺激素脱碘酶1(DIO1)的mRNA相对表达量呈线性显著下降(P0.05)。各组之间滩羊肌肉硒蛋白mRNA相对表达量均无显著差异(P0.05)。4)Ⅳ组滩羊血清硒含量极显著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组(P0.01)。随着饲粮酵母硒添加水平的提高,滩羊背肌、肝脏、肾脏、肺脏、心脏、胰腺、十二指肠硒含量呈二次极显著增加(P0.01),脾脏、睾丸硒含量呈线性极显著增加(P0.01)。综上所述,以酵母硒为补充硒源,饲粮硒含量在0.25～2.00 mg/kg时对滩羊生长性能、血液常规参数、硒蛋白基因表达以及组织器官硒含量均无不良影响;饲粮硒含量达2.00 mg/kg时饲喂滩羊是安全的。滩羊血清及组织器官硒富集量随着饲粮酵母硒添加水平的提高而增加。     

鸡EX-FABP基因PCR-SSCP分析

以AA白鸡、广西鸡、E1矮小鸡品系为试验材料,采用PCR-SSCP技术对鸡细胞外脂肪酸结合蛋白基因(EX-FABP)的2个片段进行PCR扩增,分析了EX-FABP基因在3个鸡品系的多态性。结果表明:EX-FABP基因在2对引物扩增片段中均存在PCR-SSCP多态性。对于引物1扩增片段,3个鸡品系均检测到BB基因型,AA基因型只出现在AA白鸡中;而且B等位基因频率在3个鸡品系中均明显高于A等位基因频率。对于引物2扩增片段,3个鸡品系均检测到HH和Hh基因型,hh基因型只出现在E1矮小鸡中;H等位基因频率在3个品系中均明显高于h等位基因频率。引物1和引物2的多态性片段测序分析表明,EX-FABP基因第641位点和645位点分别发生了单碱基的转换(G-A和T-C),第3264位点发生了转换(T-C)。     

放牧与舍饲对滩羊生产性能的影响

对舍饲和放牧条件下,滩羊母羊和羔羊生产性能进行了研究。结果显示:舍饲条件下滩羊母羊的繁殖率和繁殖成活率比放牧条件下有一定程度提高。羔羊的初生重、二毛期体重、平均日增重及肩部毛股弯曲数则有明显地提高,经t检验舍饲与放牧之间均呈极显著差异(P<0.01)。而羔羊成活率、肩部毛股长度和花穗评分等指标二者之间无明显区别,经t检验差异均不显著(P>0.05)。说明舍饲在提高滩羊生产性能方面具有一定作用,同时对其品种特征无不良影响。