中华卵索线虫核型分析

昆虫病原索科线虫的性别是由其宿主体内血淋巴营养状况决定的,本研究从细胞遗传学水平探讨了这一特殊性别决定机制.以中华卵索线虫(Ovomermis sinensis)成虫期生殖腺为试验材料,采用秋水仙素处理和Giemsa染色法,对其进行染色体核型分析.结果显示,其单倍体数目n=6,二倍体数目2n=12,核型为2n=2x=3 m+3 sm,臂比值的变化范围为1.18～2.10,雌、雄线虫染色体数目一致,均未发现异形性染色体和随体.     

中华卵索线虫对粘虫自然控制作用的研究

河南省驻马店地区属我国粘虫一代常发区。根据1975～1989年在上蔡和新蔡县的田间多点调查,证明中华卵索线虫是粘虫幼虫的重要寄生天敌。58％的点对粘虫的寄生率达40％以上,最高超过90％。被寄生的粘虫食叶量平均减少38％。在18～20和22～27℃室温下,14天和8天后死亡。1984年为粘虫大发生年,上蔡县东岸村麦田粘虫密度达30.3～119.5头/m~2,由于线虫寄生率高达35.0～45.5％,未进行化学防治,小麦被害很轻。根据1979～1985年资料初步分析,线虫对一代粘虫常发区(新蔡县)的自然寄生率与二代粘虫常发区(锦州、公主岭、哈尔滨市郊)6月份诱蛾数有较显著的负相关,说明采取措施,保护利用中华卵索线虫,对压低粘虫迁飞基数是可行的。当地4月下旬至5月中旬的雨日、降水量和相对湿度是影响线虫对粘虫寄生率变动的主要因子。     

中华卵索线虫寄生对棉铃虫保幼激素和蜕皮激素的影响

中华卵索线虫Ovomermis sinensis Chen广泛寄生于粮、棉、油等多种作物害虫体内,生防潜力极大,但其体外培养尚未获得成功[1],阻碍了该线虫生物杀虫剂的开发与应用,因此,对线虫寄生期生长机制的研究具有重要意义。目前,对中华卵索线虫寄生后宿主血淋巴的相关研究主要集中在营养成分、生化物质等方面。王茂先等[2]对该线虫感染棉铃虫     

中华卵索线虫β-actin基因的克隆与分析

利用RACE技术克隆中华卵索线虫Ovomermis sinensisβ-actin基因,RT-PCR方法检测该基因在中华卵索线虫不同发育时期的表达情况。结果首次获得了中华卵索线虫β-actin基因全长cDNA序列。该基因cDNA全长1636bp,其中ORF长1131bp,编码376个氨基酸;5′UTR长137bp;3′UTR长367bp。由该cDNA推导的蛋白质序列与秀丽隐杆线虫Caenorhabditis elegans、人类等物种的β-actin蛋白序列相似性均在95%以上。系统进化树显示其系统发育关系与传统的分类关系基本一致。β-actin基因在不同发育时期的线虫中持续恒量表达。由此推断中华卵索线虫β-actin基因具有高度保守性,可以作为生物物种进化的分子标志,且能较好反映物种间的系统发生关系,是量化实验的理想内标参照。     

中华卵索线虫人工室内培养技术

为室内大量繁殖中华卵索线虫Ovomermis sinensis,采用个体由大到小的斜纹夜蛾Spodoptera litura、棉铃虫Helicoverpa armigera和黏虫Mythimna separata作为宿主,测定被中华卵索线虫寄生后3种宿主的体长和体重,研究宿主种类对中华卵索线虫有效率、雌雄比和体长的影响以及寄生强度对线虫雌雄比的影响。结果显示,被中华卵索线虫寄生后,斜纹夜蛾、棉铃虫和黏虫生长减缓。在相同感染比例下（除宿主与线虫比为1∶15外）,3种宿主的线虫有效率之间差异不显著。当寄生强度为5时,3种宿主体内脱出的中华卵索线虫均为雌线虫;当寄生强度从10增到40时,斜纹夜蛾、棉铃虫和黏虫所脱出的雌性比分别由100.0%、90.0%、83.9%降为0;相同寄生强度下,从斜纹夜蛾体内脱出的雌性比显著高于从棉铃虫与黏虫体内脱出的雌性比。斜纹夜蛾、棉铃虫和黏虫体内脱出雌线虫和雄线虫平均体长分别为14.8、13.8、12.8 cm和8.0、7.5和7.5 cm。当中华卵索线虫与宿主按照比例20∶1～25∶1侵染斜纹夜蛾、按照15∶1侵染棉铃虫和黏虫时,能获得线虫最适雌雄比（1∶1...     

1990年人工释放中华卵索线虫防治麦田一代粘虫试验

在1988年释放试验基础上,1990年5月,在土中中华卵索线虫成虫密度为14.7条/m~3,粘虫密度为45头/m~2的情况下,按益害比100:1释放线虫感染期幼虫于144m~2麦田中,防冶一代粘虫幼虫。24小时后即获寄生率高峰76％,校正寄生率为52％。麦收后挖方调查,释放区土中寄生线虫密度比释放前增加2.7倍。试验表明在田间寄生线虫成虫基数为10～20条/m~3的地区,按益害比100:1释放线虫,释放前后浇水,保持土壤湿度,创造良好寄生条件,既可在当年有效地减轻粘虫为害,又可较快地提高土中寄生线虫密度,提高今后常年自然控制粘虫的能力。     

丽草蛉三龄幼虫对斜纹夜蛾卵及低龄幼虫的捕食作用

为探明丽草蛉对斜纹夜蛾的捕食作用,本研究在室内测定了丽草蛉3龄幼虫对斜纹夜蛾卵和低龄幼虫的捕食能力及其功能反应。结果表明,丽草蛉3龄幼虫对斜纹夜蛾的卵及1龄、2龄和3龄幼虫均表现出积极捕食行为和较强的捕食能力,其捕食功能反应符合Holling II型,模型可信度较高。猎物的龄期和密度能显著影响丽草蛉的捕食能力,随斜纹夜蛾龄期增大,丽草蛉3龄幼虫的日均最大捕食量、对猎物的攻击系数和控害效能均显著下降,但对猎物的处理时间明显延长;当斜纹夜蛾密度增加时,丽草蛉3龄幼虫的捕食效率逐渐下降。综合各项捕食作用参数,丽草蛉3龄幼虫对斜纹夜蛾卵的捕食能力最高,其理论日最大捕食量为313.7粒,控害效能为23.5;其次是对斜纹夜蛾1龄幼虫,其理论日最大捕食量为130.5头,控害效能为9.9。本研究结果证实了丽草蛉是斜纹夜蛾卵和低龄幼虫的重要天敌,且具较高的控害潜能,可用于斜纹夜蛾的生物防治。     

莱氏野村菌CQNr01对斜纹夜蛾幼虫的侵染研究

以莱氏野村菌Nomuraea riley CQNr01菌株接种斜纹夜蛾Spodoptera litura 2龄和4龄幼虫,观察感病率,并利用荧光染色观察菌株在幼虫离体表皮上的孢子萌发和附着胞产生情况。结果显示,菌株CQNr01孢子悬液浓度为1×10^8、1×10^9孢子·mL^-1时斜纹夜蛾2龄幼虫的累计死亡率分别为86.58%和89.91%,而4龄则只有13.33%和16.67%。菌株CQNr01的孢子能够成功附着在斜纹夜蛾幼虫的离体表皮上,但孢子在2龄幼虫表皮的粘附能力优于4龄幼虫;接种24 h起两个龄期的离体表皮上均开始有孢子萌发现象并有附着胞和芽管产生,并随着接种时间的增长芽管不断伸长,但相同接种时间下孢子在2龄幼虫表皮上的萌发率和附着胞产生数量明显多于4龄幼虫表皮。研究证明菌株CQNr01对斜纹夜蛾高龄和低龄幼虫的致病力差异显著,其差异主要源于斜纹夜蛾幼虫体壁的屏障作用。     

昆虫病原线虫侵染鳞翅目幼虫的血淋巴病理学

菜青虫经口感染斯氏线虫后,２０小时左右在其血淋巴中出现杆状的共生细菌,并开始大量增殖,４８小时的细菌数已达出现初期的１万倍以上。用３种不同品系线虫 结果显示：经分别感染不同线虫的大蜡螟幼虫,其血细胞数总的增减变化趋势是一致的,在感染初期血细胞数较健康虫体明显降低,４￣６小时达最低值;随后逐渐增加,１２小时后血细胞数达到高峰;随后不迅速下降。感染线虫的家蚕１２小时后其血淋巴的蛋白质含量较对照明显降低     

烟盲蝽对不同密度斜纹夜蛾初龄幼虫的捕食和搜寻行为

为评价动植食性烟盲蝽对害虫的控制作用,本文通过室内试验研究了烟盲蝽在斜纹夜蛾幼不同密度虫斑块上的捕食和搜寻行为。在盆栽烟草植株上设置不同猎物密度,每株分别接0、5、10、20和30头1龄斜纹夜蛾幼虫于同一叶片上,然后接入1头烟盲蝽雌成虫,观察记录烟盲蝽的行为及其发生时间。结果表明,烟盲蝽对猎物的捕食量随猎物密度增大而增加;对猎物被捕食的时间进行Cox比例风险模型拟合表明,低密度猎物斑块上的幼虫被烟盲蝽捕食的风险大于高密度猎物斑块。烟盲蝽在猎物斑块上的行为以搜寻和刺吸猎物、植物为主,用于梳理和休息的时间较少;在低密度猎物斑块上,搜寻和刺吸植物的时间占较大比例;而在高密度猎物斑块上,刺吸猎物的时间占较大比例。烟盲蝽在斑块上的驻留时间随猎物密度增大而延长,在高密度猎物斑块上的驻留时间显著长于在低密度斑块上。研究结果说明,烟盲蝽对斜纹夜蛾初龄幼虫的捕食强度与猎物密度有关,密度越高,捕食得越多,但花费的时间更多,从而导致对高密度猎物的捕食效率低于对低密度猎物的捕食。     

一株草地贪夜蛾囊泡病毒对甜菜夜蛾幼虫的感染特性及对其生长发育的影响

囊泡病毒是一类具有生防潜力的双链DNA病毒,本文以含草地贪夜蛾囊泡病毒84-36浓度为9.77×1012病毒基因拷贝/m L的血淋巴,分别通过口服(1~2龄:1.09×1010病毒基因拷贝/虫;3~5龄:9.77×109病毒基因拷贝/虫)与针刺(1.56×109病毒基因拷贝/虫)2种方式接种感染甜菜夜蛾Spodoptera exigua(Hübner)幼虫,观察其死亡和生长发育情况。结果表明,口服感染时,1、2、3、4和5龄幼虫的校正死亡率分别为18.89%±1.11%、4.44%±1.11%、2.22%±1.11%、0与0,1龄幼虫较2、3龄显著易被病毒感染;针刺接种感染时,3、4和5龄幼虫校正死亡率分别为100.00%、100.00%和80%,所有被病毒感染的幼虫发育历期明显延长,3、4龄幼虫感染病毒后的第2 d即表现出日取食量显著降低、第3 d开始体重基本维持不变。由此可见,草地贪夜蛾囊泡病毒84-36毒株在生物防治上具有潜在优势。     

感染Bt的铜绿丽金龟幼虫对化学杀虫剂的敏感性变化及相关酶活性测定

采用Bt预处理和Bt与化学杀虫剂混用的方法,研究了感染Bt的铜绿丽金龟幼虫对辛硫磷、毒死蜱的敏感性变化及幼虫体内相关酶活性的变化.结果表明,随着Bt预处理时间和感染剂量的增加,铜绿丽金龟幼虫对化学杀虫剂敏感性显著增强,20μg/g的Bt预处理3和5d后,对辛硫磷和毒死蜱的敏感性分别提高1.96、3.28倍和6.71、16.14倍;80μg/g预处理对辛硫磷和毒死蜱的敏感性分别提高了10.22、27.10倍和13.03、51.33倍.Bt与化学杀虫剂混用后,该幼虫对两种化学杀虫剂的敏感性也有大幅度提高,Bt分别以1：50和1：200与杀虫剂混用时,铜绿丽金龟幼虫对辛硫磷和毒死蜱敏感性分别提高6.06、4.00倍和16.05、12.78倍.经Bt预处理后,金龟子幼虫体内的乙酰胆碱酯酶的比活力与对照相比略有降低,谷胱甘肽-S-转移酶和羧酸酯酶的比活力均有不同程度的升高.     

斜纹夜蛾取食水葫芦的观察

斜纹夜蛾幼虫可大量取食水葫芦的叶与叶柄,当幼虫达到一定密度时,水葫芦的生长受到抑制,甚至造成枯萎、死亡。3只斜纹夜蛾幼虫可造成1株水葫芦死亡。斜纹夜蛾幼虫能够有效地抑制水葫芦的生长,为水葫芦的治理提供新的思路。     

光肩星天牛幼虫感染绿僵菌后血淋巴中游离氨基酸含量的变化

采用高效液相色谱法测定了感染绿僵菌Metarhizium anisopliae后光肩星天牛Anoplophora glabripennis幼虫血淋巴中游离氨基酸的含量。结果表明,光肩星天牛幼虫血淋巴中共检测出 17种游离氨基酸,感染绿僵菌后不同时段,游离氨基酸总量呈现先下降后上升的变化趋势。感染24 ~72 h时,幼虫血淋巴中游离氨基酸总量与对照组相比均呈小幅下降趋势,各时间点氨基酸总量互有高低,但相差不大;感染72 h后至120 h时,游离氨基酸总量明显下降,120 h时降到最低值1 042.33 mg/100 mL;之后急剧上升,144和168 h时分别为120 h时的1.44和1.51倍。赖氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、精氨酸、酪氨酸、苏氨酸、异亮氨酸、组氨酸、亮氨酸、丙氨酸、甘氨酸、蛋氨酸含量的变化与游离氨基酸总量的变化趋势大体一致;而脯氨酸、丝氨酸、谷氨酸、天门冬氨酸、胱氨酸的含量呈波动变化。