利用正交法研究丁香幼胚离体培养的影响因素

利用正交法研究5种不同因素(糖、胚龄、Gln、BA、NAA)对丁香幼胚萌发及成苗的影响,筛选出最佳的幼胚离体培养条件为在Monnier+0.1mg·L-1BA+0.001mg·L-1NAA+400mg·L-1Gln+50g·L-1糖培养基上培养胚龄为50d的丁香幼胚,同时发现Gln的加入量对丁香幼胚离体培养的萌发率有显著影响。     

荔枝幼胚的离体培养

把３个不同胚胎发育类型荔枝，品种乌叶，兰竹，绿荷包的幼胚置于含有不同生长调节剂的ＭＳ培养基上进行培养，结果表明：授粉后１５ｄ的胚胎人工培养十分困难，而授粉后３０－４０ｄ的幼胚，在ＭＳ基本培养基附加一定浓度的ＢＡ，ＮＡＡ，ＧＡ以及ＡＢＡ等的不同组合培养基上，均可诱导形成细胞团，并能进一步形成胚状体或芽状体，部分育型品种兰竹，有胚胎败育早期但未死亡１／２ＭＳ附加低浓度的细胞人裂素及生长素等的培养基上，     

荔枝幼胚的离体培养

把3个不同胚胎发育类型荔枝(Litchi chinensis Sonn.)品种乌叶、兰竹、绿荷包的幼胚置于含有不同生长调节剂的MS培养基上进行培养。结果表明:授粉后15d的胚胎人工培养十分困难,而授粉后30-40d的幼胚,在MS基本培养基附加一定浓度的BA,NAA,GA以及ABA等的不同组合培养基上,均可诱导形成细胞团,并能进一步形成胚状体或芽状体,部分败育型品种兰竹,在胚胎败育早期但未死亡的幼胚,以及完全败育型品种绿荷包,在授粉后30d的胚珠,经培养亦能形成胚状体,胚状体在MS或1/2MS附加低浓度的细胞分裂素及生长素等的培养基上,增殖能力甚强,甚至不加任何附加物的情况下亦能增殖。高浓度的附加物则不利于胚状体的增殖。从胚状体诱导成苗有待进一步研究。     

百合幼胚的离体培养和植株再生

为了探索百合幼胚离体培养的最佳胚性生长条件及植株再生途径,以授粉后３５ｄ的百合幼胚为外植体,进行了幼胚胚性生长,愈伤组织的诱导,愈伤组织不定芽、不定根的分化和再生植的移栽试验,结果表明;在含有１ｍｇ／ＬＩＡＡ〈１ｍｇ／ＬＧＡ３,６００ｍｇ／ＬＣＨ的ＭＳ培养基上培养,蔗糖含量为６－８％时,百合幼胚胚性生长最好,１ｍｇ／ＬＩＡＡ,１ｍｇ／ＬＧＡ３,６００ｍｇ／ＬＣＨ的ＭＳ２基上培养,蔗糖含量为６－８％     

同核异质玉米幼胚的离体培养

本研究选用７对同核异质玉米，进行了幼胚离体培养。研究结果表明：Ｃ细胞质玉米的愈伤组织诱导率明显低于其正常（Ｎ）细胞质的保持系，而在同核条件下不同细胞质对愈伤组织的生长速率没有明显影响，但对愈伤组织分化频率影响较大。     

玉米幼胚离体培养幼苗分化的影响因素研究

用6个玉米基因型的幼胚进行离体培养幼苗分化试验,从培养基种类、基因型和细胞质效应、激动素、分化前最后一次继代培养基中2,4 D质量浓度、蔗糖质量浓度等6个方面分析了幼苗分化的影响因素.结果表明,N6和MS两种基本培养基之间以及激动素6 BA和KT之间对幼苗分化的影响没有明显差别,6 BA质量浓度和其余4个因素对幼苗的分化都有较大影响.87-1×郑22在幼苗分化中是较为理想的组合,分化培养基中6 BA质量浓度为1mg·L-1,蔗糖质量浓度为50g·L-1,分化前最后1次继代培养基中2,4 D质量浓度为1mg·L-1时,有利于幼苗的分化.     

卷丹百合种间杂种胚培养研究

以三倍体卷丹百合(Lilium lancifolium Thunb.)为母本与兰州百合等7种百合进行种问杂交,以所得幼胚为外植体进行离体培养,研究不同杂交组合、消毒方法、幼胚处理方法、胚龄、激素配比对杂种胚培养的影响.结果表明:卷丹×大花卷丹有胚率最高,达41.3%;未开裂蒴果用70%酒精浸泡1min消毒效果最好;剥除种皮和胚乳接种幼胚的萌发率比不剥除高60%～70%,且萌发时间提早17～22d;授粉后40～50d的杂种胚最适于胚培养;最适幼胚萌发培养基为MS+NAA0.01mg·L-1+6-BA0.1～0.5mg·L-1.     

早食李幼胚离体培养的研究

[目的]探讨早食李幼胚离体培养的影响因素。[方法]以不同发育时期的早食李胚为试材,研究了不同胚龄、不同培养基、GA3浓度对离体胚培养的影响。[结果]花后26～41d的幼胚细小、胚乳尚存,经连续3代培养仍未发生任何变化;从花后48d开始胚乳已经消失,幼胚不断发育并逐渐充满整个种腔,接种在MS基本培养基上后其成活率高达77%以上,培养初代即可启动;4.5%的花后65d幼胚已能培养成苗,此后成苗率随着胚龄增加而升高,至果实成熟时成苗率可达26.00%,并在培养初代可产生愈伤组织;花后65～83d的幼胚则需经2～3代以上才能诱导出愈伤组织。胚（花后88d）在WPM培养基的成苗率比MS培养基上高1倍左右;在同一基本培养基上,添加BA、KT或2,4-D后,成苗过程受到抑制。用1000mg/LGA3处理种子24h后能显著提高胚的成苗率。[结论]为建立早食李胚胎抢救技术及杂交育种奠定实验基础。     

毛叶海棠（Begonia cathayana Hemsl）的组织培养和体细胞胚的发生

取毛叶海棠的叶片作外植体，接种于8种IAA、2，4-D、6-BA浓度配比不同的MS培养基上，45d后，含有IAA10mg/L和6-BA1ml/L的培养基上获得了胚状体。此培养基即为毛叶海棠胚状体诱导的最佳培养基。解剖观察表明胚状体源于叶表皮单细胞的垂周分裂。毛叶海棠胚状体的诱导需要适当浓度的IAA和6-BA相互配合。相同的外植体在相同诱导条件下既可发生愈伤组织又可发生胚状体，主要是由于不同细胞的生理状态不同和位置效应所致。     

四倍体苇状羊茅和多花黑麦草F_1杂种的幼胚培养及再生植株的形态特征

研究了在直接成苗培养基上不萌动的四倍体苇状羊茅和多花黑麦草杂种幼胚通过诱导愈伤组织获得再生杂种苗的方法。结果表明，杂种愈伤组织随着继代培养时间的延长，分化成苗能力逐步下降，在不改变培养基的情况下，分化能力可保持８个月；改变脱分化培养基中ＮＨ４ＮＯ３或ＫＮＯ３的浓度可显著提高愈伤组织的分化能力。此外，还讨论了再生植株的形态变异     

早熟葡萄种子培养和胚培养

结果表明:果实成熟前一周取样的种子培养后胚长1560μm,成熟期及成熟后一周取样的仅为953μm及830μm。培养基中蔗糖浓度在2—20％范围内浓度越低,效果越好。胚培养时培养基由加入GA,IA-A及IAA+KT均能促进胚的萌发,但对幼苗的生长有不同影响,在添加GA的培养基上幼苗生长正常。种子培养过程中胚不能自然萌发,种子培养后再结合胚培养可使胚萌发率达73.2％,不经种子培养而直接进行胚培养的,胚萌发率仅为5.6％。     

两种丁香种子适宜浸种温度和时间的研究

本文主要研究了暴马丁香和红丁香种子在20℃、30℃4、0℃、50℃温水中浸种的吸水规律,以及在恒温25℃无光条件下,浸种温度对暴马丁香和红丁香种子萌发的影响,并采用发芽率、发芽指数、活力指数、始发芽天数、发芽天数等指标对种子发芽效果进行了评价。结果表明,暴马丁香和红丁香种子的吸水量在20℃～50℃浸种水温范围内,随浸种水温的升高和浸种时间的延长呈上升趋势,并分别在浸种12h和24h后吸水量基本不变;在25℃无光照条件下,20℃、30℃、40℃浸种水温处理下的两种丁香种子,随温度的升高种子发芽指数、活力指数、发芽率均呈上升趋势,始发芽天数和发芽天数缩短,出芽整齐,并以40℃浸种水温的种子萌发最好;50℃浸种水温处理下的两种丁香种子萌发质量降低。对不同浸种水温下两种丁香种子萌发情况进行综合分析,40℃浸种水温条件下,12h和24h分别为暴马丁香和红丁香种子的最适宜浸种时间。     

五针白皮松离体胚培养初步研究

对珍稀濒危植物五针白皮松进行离体胚的组织培养，可以从子叶上诱导产生大量的愈伤组织及不定芽，经初步试验，Ｍｓ为基本培养基并附加激素ＢＡ３ｍｇ／Ｌ，ＮＡＡ０．０５ｍｇ／Ｌ，对诱导子叶产生不定芽最为有效，而Ｍｓ＋ＢＡ１￣３ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．０５￣０．５ｍｇ／Ｌ可诱导培养的离体胚产生愈伤组织，胚根及胚轴的下部分在培养中逐渐死亡。     

金花茶及其远缘杂种末成熟胚离体培养的初步研究

金花茶授粉(包括杂交授粉)后4个月以上(子叶大于1mm)的未成熟胚(包括生理落果)在修改的MS(HCl—B_11mg/l、烟酸1mg/l)附加NAA0.01、ZT_1、IBA0.5、谷氨酰胺20、丝氨酸2、LH500、琼脂0.76～0.8％、蔗糖6—8％,pH=5.8的培养基上,能发育成幼株。不带子叶的未成熟胚亦能成长,但生长较慢。未成熟胚在离体培养过程中,子叶增长很慢,增大甚少。     

柑桔合子胚早期离体培养获得植株

通过柑桔胚胎发育观察表明,授粉后50天左右,胚囊内仅有一个合子胚,未见珠心胚侵入胚囊,为单独分离合子胚培养的最好时期。取这一发育期的幼果,分离合子胚(或将胚囊预培养后分离合子胚),接种于 White 基本培养基附加腺嘌呤(Ad)20毫克/升、水解乳蛋白(LH)400毫克/升、椰乳(CM)10%和蔗糖10%,在光照条件下发育成双子叶胚。转入 MT 基本培养基附加玉米素(Ze)0.25毫克/升、赤霉素(GA_3)5～10毫克/升,蔗糖浓度降至2%,便发育成苗。     

濒危植物四合木（Tetraena mongolica Maxim.）悬浮培养下体细胞胚胎发生

将四合木（Tetraena mongolica Maxim)外植体诱导产生的愈伤组织进行细胞悬浮培养。 通过实验在MS培养基附加2，4－D0．1mg/L,6-BA0.25mg/L，水解酪蛋白500mgL的液体培养基中培养，经120－150r/min摇床振荡分散建立细胞悬浮系，直到体细胞胚胎产生后转至无激素的固体培养基中产生再生植株。结果表明：四合木悬浮培养条件下可以得到胚状体，并形成试管苗。     

小麦未熟胚离体培养的研究——愈伤组织发生及器官建成

对小麦胚离体培养过程中愈伤组织发生及器官的形态建成进行了解剖学观察。结果表明,胚龄对愈伤组织发生的起始部位有明显影响。胚的各个部位对离体培养反应的敏感程度随胚龄的增长盾片形成愈伤组织的能力而减弱,3周龄至成熟胚的盾片不能产生愈伤组织,只起分泌α-淀粉酶、转化、吸收和运转养分的作用。同时还观察到输导系统分化完善之前存在传递细胞。不定根及不定芽的分化和形成,既存在器官发生途径,也存在胚状体途径。根、芽原基形成的先后顺序并不固定。     

不同培养基和激素对超级杂交稻花药培养力的影响

以超级杂交稻两优培九F1的花药为材料,探讨不同诱导培养基、分化培养基及植物激素等因素对其花药培养效果的影响。结果表明：（1）不同的培养基表现出不同的花培效果,培养基和基因型间存在着一定的互作效应,其中改良M8培养基表现出对不同基因型材料有较广的适应性和较强的绿苗诱导作用。（2）诱导培养基中添加1．5mg／L 2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）与1．5mg／L萘乙酸（NAA）配比的组合比添加2．0mg／L 2,4-D的组合绿苗分化率高1．17—2．80个百分点。（3）MS分化培养基中添加2．0mg／L 6-苄基氨基嘌呤（6-BA）配比的比添加2．0mg／L激动素（KT）配比的绿苗分化率高2．52个百分点。