灵芝胞外多糖高产菌株筛选及其深层发酵培养基的优化

运用反馈抑制理论构建了耐灵芝胞外多糖 (EPS)反馈抑制的筛选模型。添加在筛选培养基中的其指示因子同源胞外多糖浓度为 2 .34g/L。将实验室保藏的 37株灵芝菌株输入该模型 ,即可检出耐灵芝胞外多糖反馈抑制作用最强、产胞外多糖能力最强的菌株GL0 2 9。然后在基础培养基的基础上用正交试验方法优化GL0 2 9深层发酵培养基。结果表明 ,组合碳源和组合氮源培养基最适合该菌株深层发酵生产灵芝胞外多糖。深层发酵培养基配方为 :蔗糖 10 g/L ,玉米粉15 g/L ,蛋白胨 2 g/L ,酵母膏 1g/L ,KCl 0 .5g/L ,KH2 PO4 ·7H2 O 0 .5 g/L ,pH自然。于 30℃、12 0r/min摇瓶培养 9d ,该菌株的胞外多糖产量高达 3.0 7g/L。     

茯苓胞外多糖、胞内多糖与菌核多糖的抗氧化活性比较研究

为探索不同来源茯苓多糖的抗氧化活性,采用邻二氮菲-Fe2+氧化法、DPPH自由基分析法、邻苯三酚自氧化法分别考察了茯苓胞外多糖、胞内多糖和菌核多糖对羟基自由基(·OH)、DPPH自由基(DPPH·)和超氧阴离子自由基(O·2)的清除活性,采用傅里叶变换红外光谱分析法对其结构进行了初步分析。结果表明:不同来源的茯苓多糖均表现出3种自由基的清除活性,但茯苓胞内多糖的活性最佳,其对·OH、DPPH·和O·2的最大清除率分别为32.07%、90.12%和39.74%。红外光谱分析进一步验证了3种待测样品均为多糖,但茯苓胞内多糖在823cm-1处存在特征吸收峰,推测其结构中存在独特的甘露糖苷键。这些数据证实了茯苓多糖的抗氧化活性以及茯苓胞内多糖在抗氧化保健食品和药品研发领域的应用优势,为真菌多糖的深度开发提供了必要参考。     

香菇A05产胞外多糖发酵培养基配方优化

以香菇A05为试材,采用单因素试验和正交实验,以胞外多糖(EPS)产量为测量指标,筛选出最佳碳氮源,并优化了香菇A05产胞外多糖发酵培养基配方。结果表明:最佳配方为玉米粉2%,葡萄糖2%,麸皮3%,牛肉浸膏0.3%,KH_2PO_4 0.1%,MgSO40.05%,pH自然,胞外多糖(EPS)产量为2.92g·L~(-1)。     

光照对灵芝液体发酵胞外多糖合成的影响

以灵芝为试验材料,采用干质量法测定生物量,苯酚-硫酸法测定胞外多糖产量,研究了单色LED光照处理对灵芝菌丝体液体发酵合成胞外多糖的影响。结果表明:在80μmol·m^-2·s^-1 LED光照12h条件下,不同LED光照处理均能促进细胞生长和胞外多糖合成,其中白光LED最有利于细胞生长,蓝光LED最有利于胞外多糖合成。综合考虑生物量和胞外多糖产量,以100μmol·m^-2·s^-1蓝光LED光照10h效果最佳,生物量和胞外多糖产量分别为15.16g·L^-1和3.102g·L^-1,比黑暗处理提高了45.91%和109.74%。光照对灵芝细胞生长和胞外多糖合成具有调控作用,为灵芝液体发酵合成胞外多糖的高效定向生产提供指导。     

金顶侧耳多糖体外抗肿瘤作用的研究

通过深层发酵获得金顶侧耳菌丝体。用水提法分别提取金顶侧耳菌丝体多糖、胞外(过滤液)多糖和全液(菌丝体 发酵液)多糖。用MTT比色法测定金顶侧耳多糖体外对小鼠S180癌细胞及人结肠低分化腺癌细胞的抑制率。结果表明,金顶侧耳胞外多糖对体外培养的S-180癌细胞有抑制作用,全液多糖和菌丝体多糖无抑制作用。这3种多糖体外对人结肠低分化腺癌细胞有抑制作用,其中金顶侧耳胞外多糖抑制率最高,全液多糖次之,菌丝体多糖最低。     

羊肚菌菌丝体液体培养产胞外多糖条件的研究

对羊肚菌菌丝体液体培养产胞外多糖的条件进行了研究。结果表明:羊肚菌的菌丝体深层发酵产胞外多糖的适宜培养基组成为:马铃薯汁20g/L,麸皮3g/L,K2HPO41g/L,KH2PO40.5g/L,MgSO40.50g/L;最适pH为7,温度25℃,溶氧为250mL三角瓶装液150mL,接种量为15%。当培养基中加入表面活性剂Tween80时对羊肚菌产胞外多糖有促进作用,加入量0.2%,羊肚菌的胞外多糖产量为1.677g/L,比未加时提高了33%。维生素VB6和VC对羊肚菌菌丝体生长及产胞外多糖有促进作用,当加入维生素VB6,胞外多糖产量达到最大为2.189g/L,比对照提高了40.4%。     

块菌胞外多糖合成机制和运动抗氧化作用

针对块菌胞外多糖合成机制和运动抗氧化作用进行研究,采用了超声波辅助热水浸提法来提取块菌胞外多糖,并进行了多糖的精密度和稳定性测试;给小鼠灌胃块菌胞外多糖样品溶液后进行了小鼠负重游泳试验,试验结果表明,块菌胞外多糖能够明显延长小鼠的肌肉耐力,具有显著的运动抗氧化作用。通过小鼠肝脏称重试验结果表明,块菌胞外多糖能够有效提高小鼠肝糖原的储备,具有显著的抗氧化活性。     

粗柄羊肚菌胞外多糖的体外抗氧作用研究

目的:利用粗柄羊肚菌(Morchella crassipes)菌丝体进行液体发酵培养,提取胞外多糖,并对胞外多糖体外抗氧化作用进行初步研究。方法:通过所提取的粗柄羊肚菌胞外多糖对DPPH自由基、超氧阴离子、羟自由基的清除效果,测定胞外多糖的抗氧化活性。结果:粗柄羊肚菌在1 mg/mL时对DPPH自由基和羟自由基以及超氧阴离子的清除率分别达到61.1%,32.8%和71.6%。结论:粗柄羊肚菌胞外多糖具有明显的抗氧化能力,具有开发为抗氧化类食品或药品的潜力。     

金耳子实体多糖硫酸化修饰研究

采用氯磺酸法对金耳(Tremella aurantia)子实体多糖进行硫酸化修饰,通过单因素实验考察了溶剂、氯磺酸用量、反应温度及时间对多糖硫酸化的影响并研究了不同取代度的硫酸化金耳多糖体外抗氧化活性和抑制L1210肿瘤细胞增殖的作用。以取代度为指标,金耳多糖硫酸化的最佳条件是反应溶剂为N,N-二甲基甲酰胺,多糖残基与氯磺酸的摩尔比为1∶4,反应温度为60℃,反应时间为3h,在此条件下,产物取代度为1.48。此外,随着多糖取代度的增加,硫酸化金耳多糖对过氧化氢、羟自由基的清除率显著提高,对L1210细胞的抑制率也明显升高,说明硫酸化多糖的抗氧化活性和体外抑制肿瘤细胞的活性与其硫酸化的取代度相关。     

金耳多糖含量测定方法

以苯酚-硫酸法测定多糖含量,比较分析金耳(Tremella aurantia)子实体样品的预处理效果和多糖提取方法。确定样品经预处理即85%乙醇中超声(室温,30 min)洗涤2次,在料液比1∶500(g/mL),提取温度100℃,提取时间2 h的优化提取条件下,测定多糖含量准确性高、重现性好、结果可靠,适用于金耳多糖含量的测定。