金属硫蛋白研究进展

金属硫蛋白(MT)是一类富含巯基、具有金属结合特性的低分子量蛋白质,广泛存在于动物、植物、微生物体内,在个体生长发育及环境适应方面发挥着重要作用。就金属硫蛋白的来源、生理功能、检测方法、应用前景进行综述,为后继的开发应用提供依据。     

金属硫蛋白的研究进展

金属硫蛋白(MT)是一类富含半胱氨酸、具有金属结合特性、广泛存在于动物、植物、微生物体内一类低分子量多功能诱导性蛋白。MT具有清除自由基、调节生物体内微量元素浓度、参与重金属的解毒的作用,参与激素的调节、细胞代谢的调节,在细胞增殖分化控制中都有重要作用。就金属硫蛋白的理化性质、提取纯化技术、检测技术、生物学功能等研究进展及应用前景进行综述,以期为其开发应用提供参考依据。     

金属硫蛋白应用研究进展

金属硫蛋白是一类低分子质量、高巯基含量、能结合金属离子具有独特性能的蛋白质。金属硫蛋白具有强烈的消除自由基的作用,可作为营养添加剂单独使用,或与GSH、VC、VE等配合使用,同时具有抑制脂质过氧化损伤、保护细胞、降低血液粘度、改善血液循环和提高机体免疫等多种生物功能。文章主要阐述了MT在吸收及动力学、医学、化妆品、保健食品中的应用研究。     

植物金属硫蛋白研究进展

植物金属硫蛋白是一类可与金属子结合的、富含半胱氨酸残基的小分子蛋白,在植物界广泛存在,可以被众多非生物因素诱导产生,其所具有的强烈的清除自由基和结合重金属离子的能力使其成为植物研究的热点。对植物金属硫蛋白的分类、基因结构与调控、结构、性质与应用、分离纯化与检测等方面的近期研究进展作简单介绍,同时提出一些研究中存在的问题,并对其研究前景进行展望。     

金属硫蛋白及其生物学功能

金属硫蛋白能够清除体内自由基、缓解动物应激、调控体内微量元素代谢及重金属解毒、调控机体发育。文章介绍了金属硫蛋白的理化性质、主要功能及其应用。     

海洋生物金属硫蛋白开发利用研究进展

金属硫蛋白(Metallothionein,MT)是一类普遍存在于生物体内的富含半胱氨酸且可以结合金属的特殊蛋白质。就MT的理化性质、生理功能以及开发利用进行了总结,着重介绍了海洋生物MT的特点以及研究现状,并对其今后的研究方向提出了展望。     

猪金属硫蛋白抗体的制备

以自猪肝提取的金属硫蛋白（MT）与牛备清白蛋白（BSA）偶联物为抗原,免疫昆明小鼠以制备多克隆抗体。结果表明：加强免疫间隔时间10d，MT首次免疫量保持在16-32μg／只，加强免疫时用量依次加倍，其免疫效果最佳，可使大部分小鼠抗血清效价达到1：16以上。随后．将这部分抗血清IgG提纯并达到电泳纯，经直接ELISA鉴定其确为猪MT的特异性抗体．表明可用于酶标记方法检测猪MT。     

猪金属硫蛋白抗体的制备

以自猪肝提取的金属硫蛋白(MT)与牛备清白蛋白(BSA)偶联物为抗原,免疫昆明小鼠以制备多克隆抗体。结果表明:加强免疫间隔时间10 d,MT首次免疫量保持在16~32μg/只,加强免疫时用量依次加倍,其免疫效果最佳,可使大部分小鼠抗血清效价达到1∶16以上。随后,将这部分抗血清IgG提纯并达到电泳纯,经直接ELISA鉴定其确为猪MT的特异性抗体,表明可用于酶标记方法检测猪MT。     

植物金属硫蛋白的提取及检测

在综合动物金属硫蛋白的提取方法上,摸索了一种用于玉米金属硫蛋白的提取方法.以玉米幼苗叶片为材料,通过本研究所述方法提取了玉米金属硫蛋白(metallothionein,MT)的粗提液,该粗提液的特征吸收峰在290 nm处,且经脱金属处理后其290 nm处特征吸收峰明显降低,经SDS-PAGB检测,在分子量14 Kda附近有单一条带,表明所获粗提液中含有玉米金属硫蛋白.     

金属硫蛋白的检测方法及其应用

金属硫蛋白(MT)是一种普遍存在、富含金属和半胱氨酸的低分子量蛋白质,主要包括Ag、Au、Bi、Cd、Hg、Zn等硫蛋白,MT具有在体内可被金属和其他因素诱导合成的生物学特性。ELISA以其灵敏度高、特异性强且测定相对迅速、方便、无需特殊昂贵的仪器设备、无放射性同位素的污染等特点成为MT定量检测的理想方法。MT在与金属有关的动物机体的生理学研究、某些微量元素营养性缺乏症的诊断、治疗以及保护环境等方面起着重要作用,随着对MT研究的日益深入,不断对ELISA方法的改进,利用ELISA检测MT有着广阔的前景。     

兔肝金属硫蛋白提取液的稳定性

研究Tris-HCl浓度、pH、温度、光照和乙醇对金属硫蛋白提取液稳定性的影响,为金属硫蛋白的研究提供资料.结果表明,金属硫蛋白在低浓度Tris-HCl中较稳定,0.01和0.02 mol/L Tris-HCl对其稳定性影响最小;pH对金属硫蛋白稳定性影响较大,pH 6～7时较稳定;光照对金属硫蛋白稳定性影响比较明显,其对硫蛋白具有破坏作用;乙醇对金属硫蛋白有明显的保护作用;金属硫蛋白具有很强的耐热性.     

兔肝金属硫蛋白提取工艺研究

研究提取液Tris-HCl的浓度、pH、加热温度和时间对兔肝金属硫蛋白提取的影响,并用正交试验优选出最适提取条件,为兔肝金属硫蛋白的研究提供一种新的提取技术。结果表明,Tris-HCl的浓度对金属硫蛋白的提取效果影响最大,pH和加热时间次之,温度对其影响最小。金属硫蛋白的合适提取条件为Tris-HCl的浓度0.01mol/L,pH 8.2,热处理温度80℃,加热时间8min。     

柽柳金属硫蛋白基因的克隆及分析

应用生物信息学技术从柽柳cDNA文库中分离出了一种金属硫蛋白全长cDNA序列,去除PolyA后该基因全长517bp。其中,5′非翻译区31bp,3′非翻译区267bp,开放读码框(ORF)长219bp,编码72个氨基酸,含13个半胱氨酸Cys,分布在蛋白质的N端和C端,呈CXC形式排列,基因编码蛋白的分子量为7.1kD,等电点为4.71。疏水性分析表明,蛋白的30～50个氨基酸之间有较强的疏水性,经过Pfam15.0(St.Louis(USA))分析证明,为金属硫蛋白家族基因。金属硫蛋白基因参与了植物的发育、胚胎发生、抵抗逆境胁迫等多种生理过程,是一种重要的功能基因。此基因的Genbank登录号为AY620987(基因),AAT39518(蛋白)。     

金属硫蛋白在动物营养学上的应用

综述了金属硫蛋白(MT)在动物的健康、疾病以及生长性能等方面的重要作用。MT能参与畜禽体内微量元素Cu、Zn等的代谢,可利用MT来评价动物机体Zn的营养状态;MT具有抗应激的作用;MT有重金属解毒作用,在高铜、高锌日粮的促生长机理中发挥重要作用;MT促进动物机体生长发育;此外,MT在Se对动物机体的各种生理作用中发挥重要作用。     

水稻金属硫蛋白ricMT基因的耐性分析

铜镉胁迫下水稻幼根中金属硫蛋白基因ricMT被显著诱导,通过构建ricMT基因的原核表达载体及大肠杆菌转化,进行ricMT基因的耐性分析.结果显示,经IPTG诱导后,转入ricMT的菌株比转入空载体的对照菌在铜、镉和H2O2胁迫下生长旺盛,说明ricMT的表达有利于增加大肠杆菌对重金属胁迫的耐性.     

金属硫蛋白在动物营养学上的应用

综述了金属硫蛋白（MT）在动物的健康、疾病以及生长性能等方面的重要作用。MT能参与畜禽体内微量元素Cu、Zn等的代谢，可利用MT来评价动物机体Zn的营养状态；MT具有抗应激的作用，MT有重金属解毒作用，在高铜、高锌日粮的促生长机理中发挥重要作用；MT促进动物机体生长发育，此外．MT在Se对动物机体的各种生理作用中发挥重要作用。     

金属硫蛋白调控及重金属解毒功能研究进展

随着现代工业的迅速发展,重金属污染问题日益严重。重金属不断在生物体内富集,对生物体的生长发育与新陈代谢产生显著危害。因此寻找安全、高效的重金属解毒物质越来越受到国内外学者的重视。金属硫蛋白(Metallothioneins,MT)是一种分子量低、广泛存在于大多数生物体内的蛋白质,具有螯合重金属离子的能力,可保护机体免受重金属危害。本文综述了MT的结构和功能,从遗传分子层面进一步阐述机体对MT基因的表达调控,旨为MT在重金属解毒领域的研究与应用提供参考依据。     

灵芝金属硫蛋白基因的克隆及序列分析

采用RT-PCR和3′-RACE相结合的方法获得了灵芝(Ganoderma lucidum)金属硫蛋白的cDNA序列。该序列全长为315bp,5′-端非翻译区为47bp,3′-端非翻译区具有166bp,开放阅读框长度为102bp(包括一个终止密码子),可编码33个氨基酸。在其编码的氨基酸序列中半胱氨酸(Cys)含量最高,占21.2%,其次是丝氨基酸(Ser)和丙氨基酸(Ala),均占12.1%。对其编码的氨基酸序列进行分析发现该序列具有金属硫蛋白的保守序列模式,是金属硫蛋白家族的成员。     

铜缺乏奶牛肝脏金属硫蛋白的层析特征

为阐明金属硫蛋白在铜缺乏奶牛肝脏中的代谢特征，选择铜缺乏区有明显临床症状的奶牛6头，采集肝脏样品后用差速离心法分离肝脏金属硫蛋白，以Sephadex-G75进行层析纯化，测定洗脱液中蛋白质、巯基含量、紫外光扫描值、216nm和260nm处吸收峰值及荧光扫描值。将6头健康奶牛的肝脏样品作为对照。结果表明，发病奶牛肝细胞浆Sephadex-G75凝胶层析液第1峰值各管中蛋白含量显著高于对照组，但第2、第3峰值各管中蛋白含量显著低于对照组；巯基含量的检测也显示了类似的结果。发病奶牛紫外吸收值及荧光吸收值出现第2峰或第3峰，且其含量显著高于对照。结论：铜缺乏能够改变奶牛肝脏中金属硫蛋白的代谢。     

蜡梅金属硫蛋白基因的克隆与原核表达

金属硫蛋白(metallothionein,MT)是一类富含Cys,能够结合重金属的低分子量蛋白质,广泛分布于生物界。在构建好的蜡梅花cDNA文库并进行EST分析的基础上,通过随机克隆测序得到了1个蜡梅金属硫蛋白的cDNA,命名为CpMetallothionein(CpMT)。CpMTcDNA全长为1083bp,基因内部含有一长度为240bp的开放阅读框,可编码79个氨基酸残基。将CpMT插入原核表达载体pET-32a,并转化Origami2感受态细胞。诱导表达产物经SDS-PAGE结果显示,目的蛋白约为30kD。表达的融合蛋白以包涵体和可溶性蛋白2种形式存在,用His-Bind蛋白纯化回收试剂盒对其进行纯化回收,得到了高纯度蛋白,为今后研究奠定基础。