外源DNA导入烟草后D_2代植株抗病性鉴定和酶活性的测定

提取抗赤星病烤烟CV87的总DNA ,采用花粉管通道法导入感赤星病烤烟NC89。D1代筛选出的优良株收种并种植后得到D2 代 ,对其活体接种赤星病菌 ,检测其抗病性 ,并于接菌前后测定叶片过氧化物酶活性。结果表明 :接菌的 10个株系有 3个株系的抗病性与供体亲本CV87相似 ,并显著高于受体亲本NC89;抗病性强的个体接菌后其过氧化物酶活性较接菌前有明显升高 ,与CV87没有明显差异。但CV87的过氧化物酶活性在接菌前后没有明显变化 ,说明其接菌前就表现高的活性     

外源DNA导入烤烟后D_2代植株抗病性和过氧化物酶活性的测定

提取抗赤星病烤烟ＣＶ８７ 的总ＤＮＡ,采用浸种法导入感赤星病烤烟ＮＣ８９。Ｄ１ 代筛选出的优良株收种并种植后得到Ｄ２ 代,对其活体接种赤星病菌,检测其抗病性,并于接菌前后测定叶片过氧化物酶活性。结果表明,接菌的８ 个株系有３ 个株系的抗病性与供体亲本ＣＶ８７ 相似、并显著高于受体亲本ＮＣ８９;抗病性强的个体接菌后的过氧化物酶活性较接菌前有明显的升高,与ＣＶ８７ 没有明显差异。但ＣＶ８７ 的过氧化物酶活性在接菌前后没有明显变化,即接菌前就表现高的活性     

应用浸种法导入外源DNA转化烤烟遗传性状变异D_2代研究(Ⅰ)

提取抗赤星病烤烟 CV 87的总 DNA,采用浸种法导入感赤星病烤烟 NC89。 D_1 代筛选出的优良变异株收种并种植后得到 D_2代 ,对其活体接种赤星病菌 ,检测其抗病性 ,并于接菌前后测定叶片过氧化物酶活性。对其田间生长性状调查 ,对其成熟期烟叶总糖、蛋白质及烟碱分析。结果表明 ,浸种法直接导入外源 DNA ,在变异株 D_2代仍可有效转移株高、株型、叶型、叶面积及抗病性等性状 ,并获得较高的转化率 ,D_2代为 8.10 %。高抗赤星病 ,过氧化物酶活性高 ,总糖、蛋白质及烟碱含量基本保持了受体原有的优良品质 ,其变异株 D_2代有 C_10,A_9,B_6,D_3,A_13。     

应用浸种法导入CV85DNA转化烤烟遗传性状变异D2代研究

提取抗赤星病烤烟CV85的总DNA，采用浸种法导入感赤星病烤烟NC89。D1代筛选出的优良变异株收种并种植后得到D2代植株，对其活动体接种赤星病菌，检测其抗病性，并于接菌前后测定叶片过氧化物酶活性，田间生长性状调查，对其成熟烟叶总糖，蛋白质及总氮含量进行分析，并进行蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，结果表明：浸种法直接导入外源DNA，在变异株D2代仍可有效转移株高，株型，叶型，叶面积及抗病性等性状；赤星病菌人工接种检抗病性和过氧化物酶活性测定，筛选出高抗赤星病株系Jz9802；经蛋白质SDS－PAGE谱带分析表明，变异株D2代Jz9802出现了受体没有的而供体特有的4条谱带，RfA1 0.07,A2 0.015,B5 0.59,C4 0.87，变异株Jz9802的总糖，蛋白质和总氮与受体基本一致，保持了受体原的优良品质。     

应用浸种法导入外源DNA转化烤烟变异株D2代的氨基酸含量分析

本文对应用浸种法将烤烟CV87总DNA导入受体烤烟NC89产生的抗赤星病变异株D2代的水解氨基酸含量进行了分析。结果表明，变异株D2代4个抗病株系的17种氨基酸总量均比受体低。通过与受体和供体各种氨基酸成分的相对含量比较表明，这4个变异株系中的天冬氨酸、丙氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、精氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、胱氨酸含量的改变与供体烤烟CV87的DNA导入有关。     

外源DNA导入烤烟后变异株D1代茎尖染色体核型分析

以抗赤星病烤烟CV87为供体，感病烤烟NC89为受体，采用浸种法将总DNA导入受体。收获的变异株Jz96027种子发芽，得到的D1代个体，对其茎尖受体(亲本)的茎尖进染色体核型分析。结果表明：烤烟NC89(受体)和变异株JZ97027染色体体数目2n＝48，2个染色体组均为基本对称核型。其中14对染色体为M型，9对为SM型，1对为ST型。变异株D1代Jz9702与受体NC89核型相比较有第1、2、4、6、15、16、17、22共8对染色体有明显变异。变异株D1代Jz97027尚有染色体落后畸变现象发生。     

外源DNA导入烟草后过氧化物酶活性及其同工酶变化的研究初报

抗赤星病烟草CV85的总DNA用浸种法导入优质烤烟感病品种Nc89，当代筛选出具抗赤星病性质的变异植株，对其进行过氧化物酶活性和同工酶的测定分析，结果表明，该变异株较受休Nc89过氧化物酶同工酶谱带增加，原有谱带颜色加深，同时过氧化物酶活性明显增强．     

应用浸种法导入外源DNA转化烤烟D1代遗传性状变异的研究

针对严重威胁烤烟大田生产的赤星病病害，培育抗病品种，以烤烟品种NC89为受体，具有选择标记性状的CV87为供体，采用浸种法将供总DNA导入受体，获得具有目的性状的D0代变异株收种并种植后得到D1代，对其D1代进行实验检测结果表明浸种法直接导入外源DNA在D1代，仍可有效转移株高，株型，叶色，叶面积，生育期及抗病性等性状，并获得较高化率D1代为15％，导入后D1代成熟烟叶总糖与蛋白质含量变异株与对照基本一致，说明变异株基本保持了受体原有的优良品种，蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，表明导入D1代变异株出现了受体没有的耐供体所特有的两条谱带，Rf0．19和Rf0.63，具有供体特有的两条谱带的D1代变异株有A14B6．C5．C10．D3等5个优良株系。经过D1代一系列检测和筛选，选出5株早熟，优势，抗病变异株有A14．B6．C5．C10．D3。为今后进行D2代筛选，通过分子验证，为烟草育种创造新种质，开创新途径。     

外源DNA导入烤烟后D_1代植株根尖细胞有丝分裂的细胞学观察

以抗赤星病烤烟 CV87为供体、感病烤烟 NC89为受体 ,采用子房注射 ( ZZ)、柱头滴加( DZ)和切柱头后滴加 ( QD)等 3种方法 ,将供体总 DNA导入受体。收获的种子发芽 ,得到的是 D1代个体 ,对其根尖及亲本的根尖进行细胞学观察测。结果显示 ,导入外源 DNA能够提高根尖细胞有丝分裂过程中染色体畸变的发生率。 ZZ、 QD和 DZ的 D1代的染色体畸变发生率 (变异率 ) ,细胞水平上较亲本分别提高 5.50 %、18.10 %和 3.80 % ,个体水平上较亲本分别提高 4 .80 %、13.30 %和 2 .4 0 %。畸变的类型以染色体落后为最多 ,其次是染色体桥 ,染色体断片及其他畸变类型出现很少。     

不同抗赤星病烤烟品种衰老期叶片氮运转差异性研究

[目的]:明确不同抗赤星病烤烟品种衰老期叶片氮运转的差异性。[方法]:以抗赤星病的烤烟品种净叶黄(JYH)和感赤星病的NC89、长脖黄(CBH)为试验材料,采用盆栽试验对它们衰老期叶片的氮转运进行了研究。[结果]:3个烤烟品种的质外体NH4+浓度逐步增大,长脖黄、NC89的质外体NH4+浓度显著大于净叶黄;谷氨酰胺合成酶(GS)活性均急剧下降,净叶黄的GS活性极显著大于NC89和长脖黄;三者的总氮含量和叶片组织NH4+含量明显下降。[结论]:不同赤星病抗性品种衰老期叶片氮运转具有明显差异,在衰老期抗赤星病烤烟品种叶部的氮素再利用能力大于感赤星病烤烟品种;感赤星病烤烟品种以叶片质外体氨挥发形式损失的氮素多于抗赤星病烤烟品种。