各旋毛虫隔离种某些生物学特性研究

通过对猪、犬旋毛虫和国际标准隔离种：旋毛形线虫（Trichinella spiralis)和本地毛形线虫（Trichinella nativa)的研究发现，猪旋毛虫和旋毛形线虫在小鼠隔肌中出现保姆细胞的时间比较早，分别于感染第16天和18天出现，第38天和36天所有幼虫都已形成保姆细胞，而犬旋毛虫和本地毛形线虫出现保姆细胞的时间较晚，于感染第20天和22天出现，第32天完全形成。猪旋毛虫和旋毛形线虫雌虫体外培养24小时平均产新生幼虫数分别为66．0和76．2，而犬旋毛虫和本地毛形线虫分别是28．8和22．0，前二者在雌虫体外产新生幼虫能力上明显高于后二者。研究结果表明，黑龙江猪旋毛虫为旋毛形线虫，犬旋毛虫为本地毛形线虫。     

旋毛虫各隔离株某些生物学特性的研究

通过对猪、犬旋毛虫和国际标准隔离：旋毛形线虫（Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌｌａ ｓｐｉｒａｌｉｓ）和本地毛形线虫（Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌｌａ ｎａｔｉｖａ）的研究发现，猪旋志虫和旋毛形线虫在小鼠膈肌中出现保姆细胞的时间比较早，分别于感染第１６ｄ和１８ｄ出现，第３８ｄ和３６ｄ所有幼虫都已形成保姆细胞，而 虫和本地毛形线虫出现保姆细胞的时间较晚，于感染第２０ｄ和２２ｄ出现，第３２ｄ完成形成。猪旋毛虫和旋毛形线虫雌虫     

用DNA限制性片段长度多态性鉴定旋毛虫各隔离种

以旋毛虫国际标准虫种：旋毛形线虫（Trichinella spirlais）和本地长形线虫(Trichinella nativa）作对照,应用DNA限制性片段长度多态性（PELP）技术对黑龙江省猪、犬旋毛虫进行虫种鉴定。结果显示：猪旋毛虫和旋毛形线虫酶切图谱相同;犬旋毛虫和本地毛形线虫酶谱一致。结果提示,黑龙江猪旋毛虫为旋毛形线虫,犬旋毛虫为本地毛形线虫。     

旋毛虫各隔离株某些生物学特性的研究

以旋毛虫国际标准种:旋毛形线虫(Trichinellaspiralis)和本地毛形线虫(Trichinellanativa)为对照,从生物学方面对黑龙江省猪、犬旋毛虫进行了比较研究,结果表明:猪旋毛虫和T.spiralis在小鼠膈肌中出现保姆细胞(Nursecell,NC)的时间为感染后第16和18天,第38和36天所有肌型幼虫都形成了NC,而犬旋毛虫和T.nativa为感染后20和22天,第32天完全形成;猪旋毛虫、T.spiralis、犬旋毛虫、T.nativa成虫肠期持续时间分别为22,20,16,14天;4个旋毛虫隔离株成虫均主要位于小肠的前、中段,但犬旋毛虫、T.nativa所占比例明显高于猪旋毛虫、T.spiralis,差异极显著(P<0.01)。研究结果揭示,黑龙江省猪旋毛虫相当于旋毛形线虫(Trichinellaspiralis),犬旋毛虫相当于本地毛形线虫(Trichinellanativa)。     

旋毛虫各隔离种成虫肠期持续时间的研究

以旋毛虫国际标准种：旋毛形线虫（Trichinella spiralis）和本地毛形线虫（Trichiella nativa）为对照，对黑龙江省猪、犬旋毛虫成虫肠期持续时间了比较研究，研究结果表明：4个旋毛虫隔离种均在感染后的6－8d成虫回收率最高；猪旋毛虫和Txspiralis成虫肠期持续时间分别为22d和20d，犬旋毛虫和T.nativa分别为16d和14d。研究结果揭示，黑龙江省猪旋毛虫相当于旋毛形线虫（Trichinella spiralis），犬旋毛虫相当于本地毛形线虫（Trichinella nativa）。     

旋毛虫各隔离种对小鼠的感染性研究

比较研究了黑龙江省猪、犬旋毛虫及国际标准虫种旋毛形线虫(Trichinella spiralis)和本地毛形线虫(Trichinella nativa)对小鼠的感染性异同。结果表明，四者对小鼠的感染力存在着显著差异，猪旋毛虫和旋毛形线虫在小鼠体内的繁殖力指数(RCI)分别为121.01±7.80和149.86±7.47；而犬旋毛虫和本地毛形线虫的RCI分别为60.98±5.05和55.15±4.69。由实验结果可认为黑龙江省的猪旋毛虫相当于旋毛形线虫，而犬旋毛虫相当于本地毛形线虫。     

旋毛虫各隔离种对猪的感染性和低温耐受性的研究

用消化法所得的猪旋毛虫、犬旋毛虫、旋毛形线虫（Trichinella spiralis）和本地毛形线虫（Trichinella nati-va）分别感染猪和小鼠,以观察其感染性,同时在-22℃和-32℃条件下对其进行冷冻试验。结果表明:4个旋毛虫隔离种对猪的感染性存在着明显差异,猪旋毛虫和T.spiralis对猪易感,其繁殖力指数（RCI）分别为385.68±41.51和300.55±12.45;而犬旋毛虫和T.nativa对猪不易感,RCI分别是0.064±0.031和0.033±0.033。猪旋毛虫和旋毛形线虫不耐低温,在猪体内-32℃、24 h,-22℃、72 h;在小鼠体内-32℃、12 h即全部死亡。而犬旋毛虫和本地毛形线虫对低温抵抗力较强,在猪体内-32℃、72h,-22℃、192 h;在小鼠体内-32℃、48 h才失去感染性。结果揭示:黑龙江省猪旋毛虫相当于旋毛形线虫,犬旋毛虫相当于本地毛形线虫;犬旋毛虫和T.nativa很难通过猪的感染而对人体健康构成威胁。     

旋毛虫各隔离种雌虫生殖能力的实验研究

本试验对旋毛虫各隔离种雌虫体外产新生幼虫能力进行了研究。结果显示，猪旋毛虫和旋毛形线虫(Trichinella spiralis)雌虫体外培养24h平均产新生幼虫数分别为66.00±7.34和76.20±7.57，而犬旋毛虫和本地毛形线虫(Trichinella nativa)分别是28.80±4.30和22.00±3.22，前者在雌虫体外产幼虫能力上明显高于后者。研究结果表明，黑龙江猪旋毛虫相当于旋毛虫形线虫，犬旋毛虫相当于本地毛形线虫。     

旋毛虫各隔离种成虫在小鼠肠道中的分布

以旋毛虫国际标准种旋毛形线虫（Trichinella spiralis）和本地毛形线虫（Trichinella nativa）为对照，对黑龙江省猪、旋毛虫成虫在小鼠肠道中的分布进行了比较研究，研究结果表明：分别有76.3%，80.67%和86.18%，88.30%的猪旋毛虫、T.spiralis和旋毛虫、T.nativa分布于小肠的前、中段。说明猪旋毛虫、T.spiralis、犬旋毛虫、T.nativa的成虫均主要分布于小肠的前、中段，但犬旋毛虫、T.nativa、所占比例明显高于猪旋毛虫、T.spiralis，差异极显著（P＜0.01）。研究结果揭示，黑龙江省猪旋毛虫相当于旋毛形线虫（Trichinella spiralis），犬旋毛虫相当于本地毛形线虫（Trichinella.native）。     

旋毛虫各隔离种ITSⅡ区基因克隆和序列分析

克隆了6个不同旋毛虫隔离种的核糖体RNAITSⅡ区的基因片段，序列分析结果表明，黑龙江省猪旋毛虫和猫旋毛虫为旋毛形线虫（Trichinella spiralis）；犬旋毛虫为本地毛形线虫（Trichinella nativa）。结果与传统的分类结果基本一致，为传统的分类学方法提供了基础依据。     

猪、犬旋毛虫DNA限制性片段长度多态性分析

以旋毛虫国际标准虫种Ｔ．ｓｐｉｄａｉｓ和Ｔ．ｎａｔｉｖａ作对照,应用ＤＮＡ限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）技术对黑龙江省猪、大旋毛虫进行虫种鉴定。结果显示：猪旋虫和Ｔ．ｓｐｉｒｌａｉｓ酶切图谱相同;犬旋毛虫和Ｔ．ｎａｔｉｖａ酶谱一致,结果提示,黑龙江猪旋毛虫为Ｔｓｐｉｒａｌｉｓ,犬旋毛虫为Ｔ．ｎａｔｉｖａ。     

旋毛虫病McAb快速ELISA诊断盒的应用研究

应用ＭｃＡｂ 快速ＥＬＩＳＡ 诊断盒,对感染了４ 个旋毛虫隔离种的猪定期检测其血清中抗体出现情况。结果,猪旋毛虫和旋毛形线虫（Ｔ．ｓｐｉｒａｌｉｓ）在感染２４ ｄ 后、犬旋毛虫和本地毛形线虫（ Ｔ．ｎａｔｉｖａ）３１ ｄ 后,可在猪血清中检出抗体;在抗体出现时间上前二者较后二者早７ ｄ 左右。     

Immunity in swine inoculated with larvae or extracts of a pig isolate and a sylvatic isolate of Trichinella spiralis

Inoculation of swine with a sylvatic isolate of Trichinella spiralis, designated T s nativa, resulted in low numbers of muscle larvae, compared with muscle larvae accumulation in swine inoculated with a pig type of T s spiralis. Despite low infectivity of T s nativa for swine, primary inoculation resulted in high levels of immunity against challenge infection with T s spiralis. This immunity was expressed in accelerated expulsion of challenge adults from the intestine and reduced numbers of muscle larvae. Pigs inoculated with T s nativa developed cellular and humoral responses similar to those in pigs inoculated with T s spiralis. However, in immunoblots, sera from pigs inoculated with T s nativa recognized additional proteins in muscle larvae excretory-secretory (ES) products, compared with sera from pigs inoculated with T s spiralis. Active immunization of pigs with ES products from T s nativa resulted in numerically higher, but not significantly different levels of immunity, compared with pigs immunized with ES from T s spiralis. The highest levels of immunity were obtained in pigs immunized with a T s spiralis newborn larval extract. The combination of ES products and newborn larval extract did not result in additive levels of immunity. These results indicate that the major immune effector response to Trichinella sp in pigs is against the newborn larvae, regardless of the genetic type of Trichinella sp.     

各旋毛虫隔种对猪的感染性试验

用消化法所得的猪旋毛虫、犬旋毛虫、旋毛形线虫 (Trichinellaspiralis)和本地毛形线虫 (Trichinellanativa)分别感染健康猪。结果表明 :4个旋毛虫隔离种对猪的感染性存在着明显差异 ,猪旋毛虫和T .spiralis对猪易感 ,其繁殖力指数 (RCI)分别为 385 .6 8± 41.5 1和 30 0 .5 5± 12 .45 ;而犬旋毛虫和T .nativa对猪不易感 ,RCI分别是 0 .0 6 4± 0 .0 31和 0 .0 33± 0 .0 33。结果揭示黑龙江省猪旋毛虫相当于T .spiralis,犬旋毛虫相当于T .nativa ;犬旋毛虫和T .nativa很难通过猪的感染而对人体健康构成威胁。     

PCR检测感染早期小鼠血液中旋毛虫幼虫的研究

为了研究PCR检测感染小鼠血液中旋毛虫DNA的敏感性,应用旋毛虫1.6 kb重复序列为扩增靶序列对旋毛虫(T1)、乡土旋毛虫(T2)、布氏旋毛虫(T3)、伪旋毛虫(T4)和南方旋毛虫(T7)肌幼虫DNA进行PCR扩增,并检测小鼠感染20、100、300条T1肌幼虫后不同时间的外周血.结果表明,T1、T4和T7肌幼虫可扩增出特异性目的条带(510 bp),而T2和T3无扩增产物;1、0.04和0.02条T1、T4和T7肌幼虫均能扩增到清晰的目的条带(510 bp).20条幼虫感染小鼠后5 d～6 d,PCR阳性率均为7.69%;100条幼虫感染小鼠后5 d～12 d可检出旋毛虫DNA,其中感染后5 d～7 d的阳性率分别为30.77%、38.46%及30.77%;300条幼虫感染小鼠后5 d～15 d可检出旋毛虫DNA,感染后7 d的阳性率为61.54%,感染后6 d与8 d～10 d的阳性率均为53.85%. 3组旋毛虫感染小鼠PCR阳性率间的差异有统计学意义(p<0.01),PCR阳性率随感染剂量的增加而升高(p<0.01),100条与300条感染小鼠感染后不同时间的PCR阳性率与检测时间有相关性(p<0.01).以上实验结果表明PCR检测感染小鼠血液中旋毛虫DNA的敏感性与感染程度和检测时间有关,对感染早期旋毛虫抗体阴性宿主有一定诊断价值.     

旋毛虫各隔离种嗜酸性粒细胞变化的研究

旋毛虫各隔离种感染猪后,其血液中嗜酸性粒细胞显著增多,而其它各类细胞无明显变化,嗜酸性粒细胞于感染后７ｄ开始升高,１６ｄ左右达最高峰,以后逐渐下降趋势;猪旋毛虫和旋毛形线虫的嗜酸性粒细胞数量始终高于犬旋毛虫和本地毛形线虫,嗜酸性粒细胞增多可作为早期诊断旋毛虫病的重要临床指标之一。     

Comparative assessment of a double antibody enzyme immunoassay test kit and a triple antibody enzyme immunoassay for the diagnosis of Trichinella spiralis spiralis and Trichinella spiralis nativa infections in swine.

Enzyme immunoassays using the triple antibody enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) with both Trichinella spiralis spiralis and T. spiralis nativa excretory-secretory (ES) antigens and a commercial Trichinella spiralis enzyme immunoassay test kit were carried out on sera from pigs that were infected with light, moderate and high doses of infective T. spiralis spiralis and T. spiralis nativa respectively. Seroconversion occurred in all pigs given infective Trichinella larvae although no trichinae were recovered from pigs given T. spiralis nativa larvae and examined between days 92 and 99 postinfection by pepsin digestion. Anti-Trichinella antibodies were detected in pigs infected with T. spiralis spiralis and T. spiralis nativa by ELISA using either the homologous or heterologous ES antigen. The commercial Trichinella spiralis enzyme immunoassay test kit also detected anti-Trichinella antibodies in both the T. spiralis spiralis and T. spiralis nativa infected pigs. The commercial test kit did not appear to be as sensitive as the triple antibody ELISA since it usually took two to three days longer for seroconversion to be detected by the former procedure. Finally seroconversion occurred more rapidly in swine infected with T. spiralis spiralis than with pigs receiving comparable doses of T. spiralis nativa.