提高鸡新城疫HI抗体测定准确性的体会

鸡新城疫是威胁养鸡业发展较为严重的一种疾病。自1926年暴发以来,迅速向亚洲、欧洲、非洲及美洲、大陆蔓延,成为一种世界性疾病。我国自30年代发现新城疫后,至今为止,该病在全国范围内普遍存在。血凝抑制（HI）试验是监测ND免疫状态的一种简便、快速的血清学方法。本人从事此项工作已十余年,为了提高鸡新城疫HI抗体测定的准确性,对其若干影响因素作了分析和试验,提出几名体会供参考。（l）仪器的选择和使用：微量板、滴头、多孔移液器、振荡器等对HI试验都有影响c使用的微量板有U和V型。U型板测得的HA效价略高于V型板,且U型…     

提高测定鸡新城疫HI抗体准确性的几点体会

鸡新城疫 (ＮＤ)是威胁养鸡业发展最严重的传染病之一 ,自在英国发现起 ,迅速传播、蔓延各地 ,成为世界性疾病。该病在国内一直存在 ,上海地区疫情亦较为严重。故大型养殖企业均建立疫病监测体系 ,定期检疫检测 ,制订免疫程序。红细胞血凝抑制试验 (ＨＩ)是监测ＮＤ免疫状态的一种简便、快速的血清学方法 ,但影响因素较多。为提高新城疫ＨＩ抗体测定的准确性 ,笔者通过在申藤动保部血清室大量监测试验 ,对影响其正确性因素作分析 ,以选择最佳试验条件。1　实验仪器的选择和使用配置微量板、多孔移液器、单孔移液器、振荡器、滴头、恒温培养…     

SPF鸡新城疫非特异性HI抗体的血涂片鉴别研究

试验以某SPF鸡场的30份HI抗体效价疑似阳性血清为研究对象,建立了快速准确的血涂片鉴别诊断法。以间接免疫荧光法进行验证,结果提示血涂片法与间接免疫荧光法的结果完全一致,证明了血涂片法可以用于新城疫非特异性HI抗体的鉴别诊断,具有简单、方便的优点。     

抗鸡新城疫卵黄抗体IgY的研制

产蛋母鸡经新城疫灭活抗原重复免疫后，所产生的高免卵黄中，特异性抗体的HI效价可达到12log2以上。从高免卵黄中分离提纯的特异性新城疫抗体，病毒中和试验结果表明，具有明显的中和病毒的作用，特异性病毒中和指数可达到630957以上。使用纯化后的高免卵黄抗体(IgY)安全、高效、无任何不良反应。     

906免疫增强剂对鸡新城疫HI抗体水平的影响

９０６免疫增强剂对鸡新城疫ＨＩ抗体水平的影响贺澄日滕文军（北京市农林科学院作物研究所，１０００８１）高瑞萍刘惠杰侯英慧张智蕾黄会岭（河北省保定市畜牧水产局）“９０６”系北京市农林科学院作物所以油菜花粉为原料用特殊破壁及萃取工艺从中直接提取含有油菜素内...     

鸡新城疫HI试验及应用中若干问题的探讨

鸡新城疫红细胞凝集抑制试验(HI)作为一项抗体监测技术．在各大中型鸡场和兽医诊断室已全面应用，在新城疫的辅助诊断、免疫和防制等方面起着重要的作用，但是也存在着因操作不规范，技术不正确造成结果不准确的问题。作者根据多年实践的经验，提出下列看法，与大家共同商讨。     

应用HI和AGP试验同步检测新城疫抗体的比较

鸡新城疫(ND)血凝抑制(HI)试验是监测鸡群免疫状态的常规血清学方法,主要用于检测鸡血清中的HI抗体。为避免捉鸡采血对产蛋鸡群的不良影响,一些研究者用卵黄代替血清来检测HT抗体。近年来,报道了ND琼扩(AGP)试验方法,並应用AGP试验检测ND沉淀抗体。从1987年以     

蛋鸡新城疫病毒的分离与初步鉴定

采用鸡胚接种法从河北一些蛋鸡场分离到3株病毒,分别标号为WJ1、WJF2和WJF3.经血凝、血凝抑制试验及血清学中和试验鉴定3株分离毒株均为新城疫病毒;鸡胚半数致死量测定,WJ1株毒价为107.3ELD50/0.1 mL,WJ2株和WJ3株毒价分别为107.9ELD50/0.1 mL.动物回归试验鸡的临床表现与自然病例基本一致.再用分离毒攻ND Ⅳ系疫苗免疫鸡,显示ND Ⅳ系疫苗可以保护WJ1和WJ3分离毒株,而不能保护WJ2分离毒株.     

新城疫病毒HI抗体效价与流行株感染排毒之间的相关性

为了分析免疫鸡群中新城疫强毒感染流行的原因,明确抗体效价与流行株感染排毒率之间的关系,本研究以LaSota为抗原制备新城疫灭活疫苗,并以0.02mL和0.4mL的量分别免疫3周龄的SPF鸡10只。免疫后7、14、21d分别测定免疫鸡血清中的抗体HI效价。免疫后21d以基因Ⅶd亚型新城疫流行株JS5/05进行攻毒,攻毒后每天观察试验鸡的临床症状,并于攻毒后3、5、7d采集试验鸡的喉气管与泄殖腔棉拭样品进行病毒分离,结果显示,免疫3周后0.02mL和0.4mL疫苗免疫组鸡的血清HI抗体平均效价分别为5.4log2和8.2log2;0.02mL免疫组在攻毒后的排毒率达到100%,且排毒时间较长,而0.4mL免疫组在攻毒后的排毒率明显降低,且排毒时间较短。上述结果表明新城疫抗体效价与流行株感染排毒率之间存在明显的负相关。     

13株新城疫病毒强毒株的分离鉴定及部分生物学特性

2004年-2005年从黑龙江省11个地区鸡场、鸽场、鹅场疑似新城疫(ND)病死鸡、鸽、鹅体内分离到24株具有血凝活性的病毒,经HA、HI试验和电镜观察证实了13株病毒为NDV。其鸡胚平均死亡时间(MDT)和1日龄雏鸡脑内接种致病指数(IC-PI)分别为36.8 h~73.6 h和1.51~2.00之间,属于NDV强毒株或中强毒株。除HLJ-12-04株外,强毒株的血凝素热稳定性较差,属快速或中速血凝解脱型;弱毒株的血凝素热稳定性好,属慢速血凝解脱型。所有毒株均可较好地凝集鸡和人(O型血)的红细胞,但对其他动物的红细胞凝集性差异较大,对马和兔的红细胞凝集无规律。     

基因Ⅶ型新城疫病毒HN蛋白单克隆抗体的制备及特性研究

为制备基因Ⅶ型新城疫病毒(NDV)血凝素-神经氨酸酶蛋白(HN)的单克隆抗体(MAb),本研究利用JS/17病毒株的HN重组蛋白和活病毒分别免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,并通过ELISA、间接免疫荧光和western blot方法筛选,制备了3株特异性识别HN蛋白的单克隆抗体(MAb)。其中,MAb1D4和4D9具有病毒中和活性(VN)及血凝抑制作用(HI),可以识别多种基因型的Ⅱ类NDV,但与Ⅰ类NDV病毒株无反应。MAb 2G8识别线性表位131DYIGGIGKE139,该表位在各病毒株中高度保守。获得的3株MAb可以用于NDV的鉴定及HN蛋白的功能研究。     

非典型鸡新城疫的病因研究初报（一）

应用血清学、生物学方法、从我省产蛋量下降、HI抗体在1：128以上的疑似非典型鸡新城疫（CND）病鸡群中分离到1株病毒，经鉴定和致病力测定，明确是1株ND强毒，毒力与F48E9相近，然后采用该株野毒感染不同抗体水平的3批蛋鸡及肉鸡，结果3批蛋鸡均是低抗体滴度组（1：10－1：40）发生了CND症状，感染后6－7天开始产蛋停止，经15－17天后才恢复产蛋，高抗体滴定组（1：80以上）无明显变化，无抗体对照组出现典型鸡新城疫变化，全部死亡；病毒感染后第6、10天监测HI抗体，结果低滴度组第6天达1：80－1：160，第10天达1：160－1：1280。试验结果表明，我们分离到的NDV，既可引起典型的ND，也可引起非典型的ND；高HI抗体蛋鸡产生非典型鸡新城疫的病因之一，是由于存在低抗体鸡群而发生了CND，其高HI抗体有竞争是由于强毒感染后产生的抗体。     

免疫蛋鸡携带新城疫病毒的调查研究

实验对江苏省某地区 2 2个免疫鸡场进行了新城疫病毒抗体随机抽样监测 ;并从所抽样的鸡只中无菌采集气管及泄殖腔棉拭子样品 ,接种非免疫鸡胚进行病毒分离与鉴定。结果表明 ,在不同新城疫病毒抗体水平的鸡群 ,均可分离到新城疫病毒 ;这提示了新城疫病毒抗体水平只能用于衡量机体的体液免疫状况 ,而不能作为评价鸡群是否带毒的指标     

Validation and standardization of virus neutralizing test using indirect immunoperoxidase technique for the quantification of antibodies to rabies virus

A virus neutralizing test using an indirect immunoperoxidase technique (VNT-IIP) for rabies has been developed for the titration of dog and cat serum samples in Japan. The VNT-IIP has the advantage that results obtained can be viewed by the naked eye. The purpose of this study was to validate the VNT-IIP and compare it with one of the international standard methods, the fluorescent antibody virus neutralization test (FAVNT). The VNT-IIP showed satisfactory repeatability, high analytical specificity and good accuracy. Regarding the comparison between the VNT-IIP and the FAVNT, the VNT-IIP showed good agreement (91.9%), high sensitivity (92.8%) as well as specificity (87.0%) and good correlation (r = 0.92). As described above, the validation of the VNT-IIP was satisfactory and the performances of the test proved to be equivalent to those of an international standard method.     

间接ELISA与HI检测鸡新城疫抗体相关性

应用间接 EL ISA和微量红细胞凝集抑制试验 ,同时对来自两个鸡场的 1 71份血样进行常规鸡新城疫抗体检测。结果表明 ,二种方法的抗体效价检测结果呈显著相关 ,其相关系数为 0 .92 49(r2= 0 .8560 ) ,设置 t检验 ,差异显著 t<0 .0 0 0 1 ,(n= 1 71 ) ,并测得总体和各鸡群的回归方程 ,其中总体的回归方程式为 EL ISA =0 .2 80 5× HI-0 .450 9。 EL ISA方法具有敏感 ,特异 ,快速 ,简便的优点 ,可以大批量样品检测及微量血样检测时采用     

鹅源新城疫病毒的分离鉴定及其致病性

从吉林省某发病鹅场分离到1株病毒,经血凝、血凝抑制试验和RT-PCR鉴定证实,该毒株为新城疫病毒,命名为MHK-1株.毒力测定结果表明,该病毒的鸡胚平均死亡时间(MDT)为43 h,1日龄雏鸡脑内接种致病指数(ICPI)为1.63,鸡胚半数致死量(ELD50)为10-8.3/0.2 mL,表明该毒株为新城疫病毒强毒株.经致病性试验表明,该病毒对鹅有很强的致病性.分子病毒学分析表明,MHK-1株F基因裂解位点的氨基酸序列为112R-R-Q-K-R-F117,符合强毒株氨基酸序列特点.