猪瘟病毒E2蛋白的高效表达及纯化

<正>猪瘟(Classical swine fever,CSF)是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起的一种急性、热性、高度接触性传染病,主要特征是高热、微血管变性,进而引起全身出血、坏死。CSFV为单股正链有囊膜的RNA病毒,基因组大小为12.3 kb,编码一个独立的含3 898个氨基酸的多聚蛋白。这个独立的多聚蛋白在宿主蛋白酶的修饰下,裂解为12种成熟的病毒蛋白,包括4种结构蛋白和8种非结构蛋白。E2囊膜糖蛋白是CSFV的主要结构蛋白,位于病毒     

猪瘟病毒分子生物学研究进展

猪瘟病毒 (CSFV)是一种具有囊膜的 RNA病毒 ,在病毒分类上属于黄病毒科、瘟病毒属的成员 ,也是世界上危害最严重的猪的病原之一 ,被国际兽医局 (OIE)列为 A类动物传染病 ,因此开展猪瘟病毒分子生物学研究具有重要的经济意义。1　CSFV基因组结构和功能CSFV基因组为单股正链 RNA,长约 1 2 .3 kb,含有一个大的开放阅读框架 ,并由其编码一种约3 898个氨基酸的多聚蛋白 ,该聚蛋白在翻译的同时和翻译后经病毒和宿主细胞的蛋白酶加工成 1 2种成熟的病毒蛋白 ,其在聚蛋白上从 N端到 C端的顺序依次为 :Npro、C、Ems、E1、E2、p7、NS2、N…     

猪库布病毒与检测方法的研究进展

猪库布病毒（Kobuvirus）属于微小RNA病毒科、库布病毒属,是无囊膜的单股正链RNA病毒,病毒粒子直径为30nm。基因组大小为8．2—8．3kb,含有一个大的开放阅读框,编码一个单一的多聚蛋白。这个多聚蛋白可裂解为3种结构蛋白（VP0、VP3和VP1）和7种非结构蛋白（2A～2C和3A-3D）。     

用裁截的E2重组蛋白作为抗原建立ELISA检测猪瘟病毒抗体

猪瘟 ( CSF)是猪的一种传染性致死性疫病 ,该病在家猪群和野猪群中流行传播 ,造成地方流行性感染。猪瘟病毒 ( CSFV)是黄病毒科瘟病毒属成员之一 ,本属中还有另 2种具有经济重要性的病毒 :边界病病毒 ( BDV)和牛病毒性腹泻病毒( BVDV)。瘟病毒属成员在结构上和抗原性上密切相关。 CSFV的基因组为长约 1 2 .3kb的正极性RNA,其编码为单一多蛋白 ,形成成熟的病毒蛋白。CSFV感染后 ,在猪体内产生抗结构蛋白 E2 、Erns及非结构蛋白 NS3抗体。囊膜糖蛋白 E2 是CSFV最具免疫原性的蛋白。为在无疫区进行CSF监测 ,或开展 CSF扑灭计划…     

瘟病毒致细胞病变的遗传机制及其非结构蛋白的功能

牛病毒性腹泻—黏膜病病毒(bovine viral diarrhea—mucosal disease virus，BVDV)、边界病病毒(border disease virus，BDV)以及猪瘟病毒(classical swine fever virus，CSFV)在黄病毒家族中构成了瘟病毒属(Pestivirus)。瘟病毒是能够引起畜牧业严重损失的重要病原。这些具有囊膜的病毒粒子内包含长为9．5-12．3kb的单股正链RNA，其基因组包含有长的开放阅读框架，在病毒或细胞蛋白酶的作用下，通过共翻译或翻译后修饰途径产生成熟的病毒蛋白^[1]。从其基因组5’→3’方向依次编码N^pro、C、E^ms、E1、E2、P7(NS1)、NS2—3、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B蛋白，其中C、E^ms、E1、E2为结构蛋白，其余为非结构蛋白。     

从腹泻的马驹粪便中分离的冠状病毒的特征

冠状病毒科都是RNA病毒,感染多种禽类和哺乳动物。分为冠状病毒属和环曲病毒属,这两个属在形态学、基因组和基因表达上有相似性。冠状病毒属具有感染性单股RNA分子,长度为20～30kb。病毒有囊膜,呈多形性,直径为80～220nm,囊膜上有棒状突起,长约20nm。其已知的三种主要的结构蛋白:S糖蛋白90～180kDa,M蛋白20～35kDa,N蛋白50～60kDa,除此之外,一些冠状病毒还包括第四种主要结构蛋白,即血凝素-酯酶(HE)蛋白120～140kDa。根据冠状病毒抗原性的不同,通过血清学分析及核苷酸序列分析,冠状病毒分为三个主要的抗原组。人的冠状病毒(HCV)229E…     

猪瘟疫苗的“前世今生”

猪瘟病毒猪瘟病毒(CSFV)属于黄病毒科,是世界范围内最重要的猪病病毒。分子特性:单正股RNA,结构蛋白有衣壳蛋白(C)和3种囊膜糖蛋白(E0、E1、E2)。E0蛋白是唯一分泌到CSFV感染细胞血清中的糖蛋白,在机体内可诱导产生中和抗体;E2则是引起猪产生针对猪瘟保护性抗体的主要抗原,在猪瘟诊断和新型疫苗的研究上都起着重要的作用。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒蛋白质研究进展

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是一种折叠的正义RNA病毒,属于动脉炎病毒科(Arteriviridae),尼多病毒目(Nidovirales)。除了动脉炎病毒科,尼多病毒目还包括冠状病毒科(Coronaviruses)。15.1~15.2 kb长的PRRSV基因组通过互相重叠的开放性阅读框编码蛋白质。ORF1a翻译过程中产生pp1a多聚蛋白。ORF1b表达产生了 pp1ab多聚蛋白。pp1a和pp1ab经病毒蛋白酶处理后又生成了14个非结构蛋白。一些非结构蛋白为蛋白酶(NSP1、NSP1β、NSP2和NSP4)、RNA-依赖性RNA聚合酶(NSP9)、解旋酶(NSP10)和核酸内切酶(NSP11)。ORFs2-5编码GP2-GP5,ORF6编码M,ORF7编码N蛋白。ORF2b完全包括在ORF2内,表达小的非糖基化E或2b蛋白。相当一部分的囊膜蛋白是nidoviruses所特有的,所有的结构蛋白都是感染所必需的。     

影响猪流行性腹泻病毒分离培养的因素

<正>近些年养猪场备受仔猪腹泻的困扰,而猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)是引起腹泻的最主要病原之一。PEDV是冠状病毒科冠状病毒属成员,为有囊膜的单股正链RNA病毒,基因组全长约28 000 nt,编码4个结构蛋白(S、E、M和N)和3个非结构蛋白(ORF1a、ORF1b和ORF3)。其中S蛋白是PEDV最重要的结构蛋白,主要负责结合细胞受体,调节病毒感染,在病毒侵入宿主细胞、组织     

传染性法氏囊病病毒Rescue技术及其应用的研究进展

传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)是一种小的、无囊膜的双股RNA病毒,基因组含A、B两个片段,大片段A(3.2～3.4kb)由两端的非编码区以及两个部分重叠的开放阅读框架(ORF)组成,其中较大的ORE编码一个分子量约为110kDa的多聚蛋白,该多聚蛋白经几步裂解加工后形成VP2、VP3和VP4蛋白,较小的ORF编码一个17kDa的非结构蛋白VP5,基因组小片段B(约2.8kb)编码90kDa的具有多功能酶活性的VP1.     

鹅副黏病毒BZ02株F HN基因的克隆及分子特性分析

鹅副黏病毒(GMPV)属禽Ⅰ型副黏病毒,基因组为单股负链RNA,编码F、HN、M、NP、P、L等6种结构蛋白和2种非结构蛋白[1].其中F蛋白是介导病毒脂蛋白囊膜与宿主细胞表面包膜融合的主要因子,同时也是决定病毒毒力的主要决定因素.     

猪瘟病毒囊膜结构(糖)蛋白Erns和E2的生物学特性研究

猪瘟病毒(CSFV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、边界病病毒(BDV)和长颈鹿瘟病毒(Giraffe pestvirus)为黄病毒科瘟病毒属成员,其病毒结构、抗原性和遗传特性密切相关.CSFV囊膜结构(糖)蛋白E2(gp55)是诱导机体产生中和抗体及激发保护性免疫应答的主要抗原蛋白.囊膜结构(糖)蛋白Erns/E0(gp48)具有BNA酶活性,在病毒增殖及中和病毒感染中发挥重要作用,是诱导机体产生保护性免疫应答的第二抗原蛋白.E2和Ens与细胞表面受体的相互作用介导CSFV对细胞的感染过程.本文综述CSFV囊膜结构(糖)蛋白Erns和E2的生物学特性研究进展.     

猪瘟病毒E2基因原核表达及间接ELISA检测方法的初步建立

猪瘟(CSF)是猪的一种高度接触性的致死传染病。其病原体猪瘟病毒(CSFV)是黄病毒科(Flaviviridae)瘟病毒属(Pestivirus)中的成员,为有囊膜的单股正链RNA病毒。E2蛋白是猪瘟病毒的跨膜结构蛋白,是诱导被感染动物机体产生免疫保护     

猪瘟病毒HL-LY地方株E2基因在毕赤酵母中的高效表达

猪瘟是由猪瘟病毒（CSFV）引起的危害养猪业的主要传染病之一，CSFV是以单股正链RNA为遗传物质的黄病毒科瘟病毒属成员。是一种致死性疾病，给养猪业造成了巨大的经济损失口。其基因组大小约为12．3～12．5kb，只含有一个大的开放阅读框架（ORF），编码一个3900个氨基酸的大多聚蛋白一，此多聚蛋白经病毒和宿主细胞的蛋白酶作用，可形成4个成熟的结构蛋白，即衣壳蛋白C和糖蛋白E0、E1、E2，另外还包括7个非结构蛋白一。     

猪圆环病毒2型广谱性中和构象表位的结构解析及其抗体介导的中和作用机制

正猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)属于圆环病毒科圆环病毒属的一员,是一类非常小的无囊膜的单股环状DNA病毒。PCV2病毒直径约为17 nm,基因组含有1 766 nt～1 768 nt核苷酸,主要包含4个开放阅读框架(Open reading frame, ORF), ORF1～ORF4,其中ORF2编码病毒的唯一结构蛋白,即衣壳蛋白(Capsid protein,Cap蛋白),与病毒感染和免疫息息相关。PCV2是一种     

猪瘟病毒囊膜结构(糖)蛋白E~(rns)和E2的生物学特性研究

猪瘟病毒(CSFV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、边界病病毒(BDV)和长颈广鹿瘟病毒(Giraffe pestvirus)为黄病毒科瘟病毒属成员,其病毒结构、抗原性和遗传特性密切相关。CSFV囊膜结构(糖)蛋白E2(gp55)是诱导机体产生中和抗体及激发保护性免疫应答的主要抗原蛋白。囊膜结构(糖)蛋白Erns/E0(gp48)具有RNA酶活性,在病毒增殖及中和病毒感染中发挥重要作用,是诱导机体产生保护性免疫应答的第二抗原蛋白。E2和Ens与细胞表面受体的相互作用介导CSFV对细胞的感染过程。本文综述CSFV囊膜结构(糖)蛋白Erns和E2的生物学特性研究进展。     

犬细小病毒新型疫苗的研究进展

正犬细小病毒(CPV)属细小病毒科细小病毒属成员。CPV为无囊膜的线性单股负链DNA病毒,其基因组全长约为5 300 nt,由4个开放阅读框(ORF)组成,为编码结构蛋白的VP1和VP2,非结构蛋白NS1和NS2组成。衣壳蛋白VP1和VP2蛋白构成互相叠加,其中VP2蛋白占总衣壳的90%。VP2蛋白是构成病毒抗原决定簇的主要组成部分,该蛋白可使机体产生中和抗体[1]。将近40年的流行过程,CPV发生了多次抗原变异,出现了CPV-2a、CP     

冠状病毒与宿主细胞受体相互作用的研究进展

<正>冠状病毒(Coronavirus)是一类有囊膜的单股正链RNA病毒，具有复杂的进化历史，属于套式病毒目，冠状病毒科，冠状病毒亚科，冠状病毒属，这类病毒能广泛感染野生、家养禽类和哺乳动物^[1]。冠状病毒是目前已知的RNA病毒中基因组最大的病毒，成熟的冠状病毒直径为60～220 nm，分为4个不同的属:α、β、γ和δ冠状病毒(图1)。冠状病毒粒子多呈现球形或不规则形，其基因组大小介于26 000～32 000 bp，长度约为30 kb^[2]，包含6～11个开放阅读框(Open reading frame,ORF)，第一个ORF占整个基因组约67%，编码16种非结构蛋白(Nonstructural protein)^[3]，其余的ORF编码辅助蛋白和结构蛋白。4种主要的结构蛋白为刺突表面糖蛋白(S)、包膜蛋白(E)、基质蛋白(M)和核衣壳蛋白(N)^[4](图2A、2B)。S蛋白在结合宿主细胞上的受体中起着至关重要的作用，也决定了病毒的宿主向性^[5,6]。冠状病毒可以通...     

我国猪博卡病毒的流行现状及检测技术

<正>猪博卡病毒(PBo V)属于细小病毒科(Parvovirus)细小病毒亚科(Parvovirus)博卡病毒属(bocavirus),为无囊膜的单股DNA病毒,病毒粒子大小为25~30 nm,呈正二十面体结构。病毒基因组全长5.2 kb,编码3个主要的开放阅读框(ORF1~3),其中ORF1编码非结构蛋白NS1,ORF2编码衣壳蛋白VP1和VP2,     

PRRSV疫苗的研究进展及前景展望

正猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是单股正链RNA病毒,有囊膜,属于动脉炎病毒科动脉炎病毒属。其基因组中含有10个开放阅读框(ORFs)。ORF1a和ORF1b编码病毒复制所必需的非结构蛋白,ORFs2～7编码结构蛋白[1]。PRRSV有欧洲型和美洲型两个公认的血清型,前者又称血清1型(PRRSV-1),后者又称血清2型(PRRSV-2)。PRRSV主要感染单核巨噬细胞系统的细胞(如猪肺泡巨噬细胞)及其他来源的巨噬细胞。弱毒疫苗I