黄曲霉毒素解毒酶在小鼠肠道中的特异性表达

通过筛选出黄曲霉素解毒酶(ADTZ)基因片段,采用鼠的黏蛋白启动子(MUC)成功构建了ADTZ基因肠道特异性表达载体(MUC-ADTZ-LV),并利用原核注射法制备了肠道特异性表达ADTZ转基因小鼠。PCR和Southern blot鉴定结果显示,成功制备了6只携带肠道特异性表达ADTZ基因转基因小鼠。RT-PCR结果显示,ADTZ基因仅在小鼠肠道中进行了特异性表达。肠液中ADTZ的活性为(4.62±1.54)U/mL。在饲料中添加黄曲霉毒素并对小鼠进行14d的喂养试验,之后对血清生化指标及小鼠血清和肝脏中黄曲霉毒素的残留进行了测定。结果表明,转基因组血清中总蛋白(TP)和球蛋白(GLP)的含量显著高于阳性对照组,而转基因组血清中的丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)的含量显著低于阳性对照组(P0.05)。转基因组小鼠血清和肝脏中黄曲霉毒素的残留量显著低于阳性对照组小鼠血清和肝脏中黄曲霉毒素的残留量。本试验在转基因小鼠的肠道中成功生产了ADTZ,并降低了饲料中黄曲霉毒素对小鼠毒性的影响。     

饮水型复合微生态制剂对肉仔鸡生产性能、血清生化指标及肠道菌群的影响

文章旨在探讨饮水中添加粪链球菌、屎肠球菌复合微生态制剂对AV500肉仔鸡生产性能、血清生化指标及肠道菌群的影响。试验组饮水中加入35 mg/kg肠球菌复合微生态制剂;对照组饮用普通饮水。试验结果表明:1~21日龄、22~42日龄试验组肉仔鸡死淘率比对照组降低53.33%和61.49%(P0.05);21日龄肉仔鸡试验组脾脏指数、胸腺指数、法氏囊指数均显著高于对照组(P0.05),分别提高16.7%、44.4%、28.6%(P0.05);42日龄肉仔鸡试验组脾脏指数高于对照组33.3%(P0.05),胸腺指数、法氏囊指数与对照组差异不显著(P0.05)。试验组肉仔鸡盲肠、回肠肠道内肠球菌的数量均显著高于对照组(P0.05),21日龄和42日龄试验组和对照组肉仔鸡盲肠内大肠杆菌数量差异不显著(P0.05),试验组肉仔鸡回肠内大肠杆菌数量均低于对照组(P0.05);综上所述,饮水中添加肠球菌复合微生态制剂可以促进肉仔鸡的生长发育,改善肠道菌群结构,提高机体免疫力,降低死淘率。     

芪苓散粗多糖对四氯化碳引起急性肝损伤雏鸡血清中ALT和AST的影响

应用血清酶学技术,研究观察芪苓散粗多糖对四氯化碳(CCl_4)引起急性肝损伤后雏鸡血清的酶指标变化。试验分空白对照组、四氯化碳对照组、芪苓散粗多糖低剂量组及高剂量组。在灌服肝毒四氯化碳的各试验组,观察芪苓散粗多糖对试验雏鸡肝损伤后血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的影响。结果表明:芪苓散粗多糖在一定程度上可降低化学性物质致肝脏损伤ALT、AST指标,对保护肝脏有一定的作用。     

四氯化碳诱导慢性肝损伤模型小鼠的转录组学分析

为了研究小鼠慢性肝损伤发病过程中肝脏组织转录组学变化规律，试验将40只ICR小鼠随机均分为肝纤维化正常对照组(A-C组)、肝纤维化模型组(A-M组)、肝硬化正常对照组(B-C组)和肝硬化模型组(B-M组),其中A-M组和B-M组分别用四氯化碳(CCl₄)+橄榄油溶液连续灌胃7周和11周，A-C组和B-C组分别连续灌胃等量的橄榄油7周和11周，试验结束后采集小鼠血液，测定天冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性，并取肝脏组织进行转录组测序，对转录组学分析存在显著差异的基因通过实时荧光定量PCR方法进行验证。结果表明：与A-C组小鼠相比，A-M组AST与ALT活性显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),从肝脏组织中共检测到了1 109个差异基因，其中有956个上调基因，153个下调基因；与B-C组小鼠相比，B-M组AST与ALT活性均极显著升高(P<0.01),从肝脏组织中检测到509个差异基因，其中397个上调基因，112个下调基因；与B-M组相比，A-M组肝脏组织中检测到70个差异基因，其中有41个基因上调和29个基因...     

雏鸭感染坦布苏病毒后对其生长性能和血液生化指标的影响

将200只1d龄雏鸭随机分为2组,攻毒试验组150只,对照组50只,自由采食,预饲7d。8d龄时按100ELD50感染剂量进行雏鸭攻毒,攻毒7d内每日称取体质量并采血分离血清进行生化指标检测。攻毒3d后攻毒组体质量与对照组存在显著差异(P<0.01),攻毒组谷丙转氨酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、谷氨酰胺转移酶(GGT)、胆碱酯酶(CHE)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酐(Cre)、尿酸(UA))等指标各自在不同时间阶段与对照组存在显著差异(P<0.01)。所以雏鸭感染坦布苏病毒后不仅对其生长产生抑制,而且对机体器官尤其是肝脏和肾脏的性能造成影响。以上研究雏鸭感染坦布苏病毒后对其生长性能和血液生化指标的影响,为鸭感染坦布苏病毒的致病机理提供了理论依据。     

番鸭感染“白点病”病毒后血浆总胆红素和某些酶的动态变化

以番鸭“白点病”病毒株人工感染雏番鸭 ,于感染后 1 2 ,2 4 ,48,1 2 0 ,1 68,2 4 0和 360h分别检测对照组和感染组番鸭的血浆总胆红素(TBil)含量和碱性磷酸酶 (AKP) ,丙氨酸氨基转移酶 (ALT)和天冬氨酸氨基转移酶 (AST)的活性 ,同时观察番鸭的临床症状和病理变化。结果 :感染组番鸭的Tbil含量在感染后 1 2和 2 4 0h显著低于对照组 (P<0 0 5) ;AKP活性在攻毒后 1 2h开始显著上升 ,并持续至试验结束 ;ALT活性在攻毒后 2 4 ,1 2 0和 1 68h显著上升 ;AST活性在 1 2 ,48,1 2 0和 2 4 0h显著升高。番鸭感染“白点病”后血浆中酶活性上升 ,提示肝脏、心脏等器官受损明显。感染后期血浆ALT和AST活性趋于正常 ,表明受损器官在后期逐渐恢复。这与临床症状和病理变化相对应。     

长柱金丝桃提取物对四氯化碳和酒精诱导小鼠肝损伤的保护作用研究

为了研究长柱金丝桃提取物对四氯化碳(CCl4)和酒精诱导小鼠肝损伤的保护作用,试验采用白酒灌胃的方式建立小鼠急性酒精性肝损伤模型,腹腔注射CCl4建立小鼠急性肝损伤模型,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性、肝脏指数。结果表明:长柱金丝桃乙酸乙酯部位组能极显著抑制CCl4肝损伤小鼠血清ALT、AST活性的升高(P0.01),长柱金丝桃正丁醇部位组能显著抑制CCl4肝损伤小鼠血清ALT、AST活性的升高(P0.05),且两组均能显著降低肝脏指数(P0.05);长柱金丝桃乙酸乙酯部位组能抑制酒精性肝损伤小鼠血清ALT、AST活性的升高(P0.05),且能降低肝脏指数(P0.05)。说明长柱金丝桃提取物对CCl4和酒精引起的小鼠急性肝损伤具有保护作用。     

肝螺杆菌感染促进四氯化碳导致的BALB/c小鼠肝纤维化研究

为探讨肝螺杆菌(Helicobacter hepaticus,H.h)感染对四氯化碳(CCl₄)致BALB/c小鼠肝纤维化病程的影响,选取5～6周龄雄性BALB/c小鼠40只,随机分为4组(对照组、H.h组、CCl₄组、H.h+CCl₄组)。H.h和CCl₄组分别采用灌胃法和腹腔注射法处理,分别于H.h感染后4和12周进行采样,检测各组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)含量,分别采用HE染色、天狼猩红染色、免疫组化法和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测小鼠肝脏纤维化情况。结果显示：处理4周时,CCl₄组和H.h+CCl₄组小鼠出现轻度肝纤维化,其他组未见明显病变;处理12周时,与H.h组相比,H.h+CCl₄组小鼠肝脏中H.h活菌量显著升高(P>0.01),血清中ALT和AST均显著升高(P>0.01),肝脏中大量胶原纤维沉积,炎症和纤维化相关因子转录水平显著升高(P>0.01...     

长期铝暴露对大鼠肝脏功能的影响

旨在探讨长期铝暴露对大鼠肝脏损伤及其功能的影响,为防制其对动物肝脏器官的危害提供理论依据。48只4周龄雄性Wistar大鼠随机分为4组,分别于饮水中添加0,64.18,128.36,256.72mg/kg体重AlCl3.6H2O溶液建立长期铝暴露大鼠模型,试验期120d。断头处死大鼠,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性及血清和肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。结果表明,随染铝剂量的增加,各染铝组血清ALT、AST活性及肝脏MDA含量显著高于对照组(P<0.01、P<0.05);染铝组肝脏GSH-PX活性显著低于对照组(P<0.01),SOD活性呈先升高后下降趋势,低剂量组高于对照组,高剂量组显著低于对照组(P<0.01)。说明长时间铝暴露可增强肝脏脂质过氧化反应,降低抗氧化能力,引发氧化损伤,进而影响肝脏功能。     

围产期氟摄入对子代小鼠肝功能的影响

为研究围产期氟摄入对子代小鼠肝脏功能的影响，试验将48只怀孕昆明小鼠随机分成4组饲养。饲养期间饮水如下：对照组（饮用蒸馏水），低氟组（氟化钠浓度为25 mg/L的蒸馏水），中氟组（氟化钠浓度为50 mg/L的蒸馏水），高氟组（氟化钠浓度为100 mg/L的蒸馏水）。母鼠分娩21 d后，每组选取雄性仔鼠6只，断颈处死，采血，摘取肝脏。通过HE染色观察肝组织结构，ELISA法检测血清中天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）的含量。结果表明，与对照组相比，低氟组局部区域肝细胞坏死，肝窦有充血肿胀且空腔变大，胞浆结构疏松；中氟组和高氟组肝细胞局部坏死、细胞核溶解，肝窦叶间静脉淤血，细胞排列紊乱；中氟组和高氟组血清AST、ALT极显著升高（P<0.01）。说明围产期氟摄入可造成子代小鼠肝脏功能损伤。     

乳杆菌培养物对肉鸡肠道菌群及形态的影响

将1 500只从肉仔鸡随机分成5组,每组6个重复,1个对照组和4个试验组,对照组肉仔鸡采食基础日粮.试验1组肉仔鸡采食添加0.2%的高产共轭亚油酸(CLA)乳酸菌日粮,试验2组肉仔鸡采食添加0.3%的高产CLA乳酸菌日粮,试验3组肉仔鸡采食添加含0.5%的高产CLA乳酸菌日粮,试验4组肉仔鸡采食添加0.6%的高产CLA乳酸菌日粮,试验期4周.结果表明,试验组可显著降低肠道中大肠杆菌和厌氧菌数量,增加肠道乳酸杆菌的数量;试验组鸡的小肠肠腺和绒毛长度均长于对照组(P<0.01或P<0.05).     

肠炎沙门菌感染诱导鸡肠道自噬发生的研究

试验旨在探究肠炎沙门菌感染诱导鸡肠道自噬发生及其规律。将42只SPF母雏随机分成两组,其中对照组24只,攻毒组18只。5日龄时,攻毒组嗉囊灌服肠炎沙门菌SC070分离株,对照组灌服等体积无菌PBS。于攻毒6、12和24 h(6、12、24 hpi)分别记录雏鸡体重和脾脏重,检测雏鸡肝脏、脾脏、血液、空肠和盲肠组织载菌量,利用透射电镜(TEM)观察雏鸡空肠组织中自噬结构及数量。结果显示,与对照组相比,攻毒组雏鸡在攻毒后6 h即开始检测到脏器、血液及肠道载菌;雏鸡感染肠炎沙门菌后,空肠载菌和盲肠载菌在6、12、24 hpi间均差异极显著(P0.01),其中空肠载菌在6~24 hpi呈现先减少后增加的规律,而盲肠载菌在6~24 hpi内呈持续降低趋势;攻毒组空肠组织中自噬泡数量明显高于对照组,且在6~24 hpi间呈现先增加后减少的趋势。由此可见,肠炎沙门菌感染能够诱导鸡肠道自噬增加,且在感染后6~24 h内呈先增加后减少的规律。     

实验性雏鸭黄曲霉毒素中毒肝损伤的动态变化

将120羽2日龄健康雏鸭随机分成2组,试验组用含黄曲霉毒素的饲料饲喂,对照组用正常饲料饲喂,在饲喂后1、5、7、9 d检测血清转氨酶水平;同时进行肝组织病理学检查。结果：试验组饲喂后2 d雏鸭出现黄曲霉毒素中毒典型临床症状,7 d开始出现死亡。剖检可见肝脏肿大,被膜下大量网格状灰白色物质增生。试验组处理后5 d雏鸭肝细胞肿胀、变性,汇管区少量胆管上皮细胞增生;7 d汇管区小胆管增生较明显,局部连接成片;9 d汇管区增生的小胆管已经占据了肝脏的近1/2。试验组雏鸭血清天门冬氨酸氨基转移酶（AST）和丙氨酸氨基转移酶（ALT）活性随黄曲霉毒素饲喂时间延长而升高。饲喂后1 d试验组雏鸭血清中AST和ALT活性与对照组差异不明显（P〉0.05）;5、79、d试验组雏鸭血清AST和ALT活性与对照组的活性相比差异显著（P〈0.05）。对照组未见异常的临床症状及病理变化。     

鸭源呼肠孤病毒对雏鸭致病性研究

30只10日龄樱桃谷肉鸭随机平均分为试验组和对照组,试验组静脉接种分离的鸭源呼肠孤病毒(DRV)SDWF株,每只0.2mL(ELD50=10-2.36/0.2mL),对照组每只静脉接种0.2mL生理盐水。于感染后3、6、9、12、15d每组随机抽取3只采血,利用流式细胞术分析外周血CD4+/CD8+比值变化,并测定血清中IL-6及INF-γ含量以及免疫器官指数,同时观察试验组鸭临床症状、剖检变化及病理组织学变化。结果显示,攻毒后3d,试验组雏鸭表现精神沉郁,食欲不振,生长发育缓慢,体质量下降。剖检变化表现为脾脏出血、肿大、坏死,肝脏坏死。病理组织学变化表现为脾脏、法氏囊淋巴细胞流失严重,网状纤维显现;脾脏坏死,形成肉芽肿,血管动脉管壁疏松、增厚。攻毒后3d,外周血CD4+/CD8+比值升高,随后于攻毒后6、9d开始迅速下降,显著低于对照组(P0.05),后期虽有所回升,但是CD4+/CD8+比值仍然低于对照组;血清中IL-6及IFN-γ含量变化规律与外周血CD4+/CD8+比值变化规律相似,在攻毒后9d均显著低于对照组(P0.05);胸腺、法氏囊指数均在攻毒后6d显著低于对照组(P0.05),脾脏指数在整个试验观察期间高于对照组。结果表明,脾脏、法氏囊是雏鸭感染DRV的主要靶器官,免疫器官淋巴细胞流失严重,T细胞数量减少,IL-6、IFN-γ分泌量降低,从而导致机体免疫抑制。     

不同剂量的蛋氨酸铜对肉鸡肝脏病理组织结构和粪便铜含量的影响

选择1日龄健康AA肉仔鸡120只,随机分成4组。使用蛋氨酸铜作为铜源,饲喂玉米-豆粕型基础日粮,对照组饲料铜含量为11mg/kg,3个高铜试验组分别为:110mg/kg、220mg/kg和330mg/kg,试验至60日龄结束。于第12,36,60日龄在各组内随机采血,测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性;测量60日龄各组肝脏和粪便的铜含量并观察肝脏组织病理变化。结果显示:①血清ALT和AST活性均在正常范围内,没有异常升高;②110mg/kg和220mg/kg组的肝脏组织中铜含量比对照组有所升高,但是差异不显著(P>0.05),而330mg/kg组则极显著高于其他3个试验组(P<0.01);110mg/kg,220mg/kg和330mg/kg组的粪便中铜含量均极显著高于对照组(P<0.01);③330mg/kg组的肝脏组织大部分细胞中度变性,其他各组病理变化不明显。试验结果表明,日粮中蛋氨酸铜浓度达到330mg/kg时,肝脏内的铜蓄积量会迅速增多且对肝脏造成较大的损伤,粪便中的铜含量随着日粮中铜含量的增加而迅速增多,可能对环境造成不利影响。     

大片吸虫分泌排泄抗原对小鼠肝损伤的研究

为探究大片形吸虫分泌排泄物对小鼠肝脏的影响,将60只雌性昆明小鼠随机分为试验组和对照组各30只。每隔2天注射0.4mg FgESP 200μL,对照组注射PBS 200μL。于首次注射后第10天、4周、7周、14周、18周处死6只小鼠,观察肝脏表观病理变化,制做肝脏HE染色病理切片并测定血清中与肝功能密切相关的ALT、AST、ALP、ALB、GLB等生化指标的变化。肝脏眼观病理变化结果显示,试验组从第4周可见白色点状结节,症状随着时间的延长而加重;肝脏组织病理结果显示,从第2周开始小鼠肝脏出现空泡变性,至第18周出现大量炎性细胞浸润,并伴随轻度肝纤维化;生化指标动态变化结果显示,ALT、AST活性在整个试验进程中出现显著上升(P0.05),ALP活性在第4周~7周明显升高,之后降低(P0.05),ALB和GLB水平在整个试验进程中分别表现为显著下降和显著上升(P0.05),提示肝细胞可能发生变性、坏死导致血清中转氨酶活性升高,蛋白合成能力下降。本研究结果表明大片吸虫分泌排泄抗原(FgESP)可导致小鼠肝损伤,损伤程度随着FgESP的持续注射而加重。     

嗜酸乳杆菌发酵的复方中药对腹泻小鼠肠道菌群和结构的影响

目的:研究嗜酸乳杆菌发酵的复方中药对产肠毒素大肠杆菌K88所致腹泻小鼠肠道的保护作用。方法:将小鼠分为空白对照组、腹泻模型对照组、水提复方中药组和发酵复方中药组,以大肠杆菌K88所致腹泻小鼠为动物模型,研究发酵复方中药对小鼠腹泻的影响,扫描电镜及透射电镜观察对小鼠肠道结构的影响。结果:感染大肠杆菌K88 36 h后,发酵复方中药组、水提复方中药组与腹泻模型对照组相比,小鼠腹泻指数与腹泻率显著降低(P0.05),且发酵复方中药组显著低于水提复方中药组(P0.05)。发酵复方中药组在降低盲肠内大肠杆菌数量,提高双歧杆菌及乳酸菌数量方面优于水提复方中药组。扫描电镜及透射电镜观察小鼠肠道结果显示,攻毒大肠杆菌K88后会损伤小鼠十二指肠微绒毛、杯状细胞及细胞连接等结构,复方中药水提液可以一定程度保护微绒毛及杯状细胞,对细胞连接的保护效果较弱。复方中药发酵液虽未能完全避免损伤,但对大肠杆菌K88攻毒所致小鼠十二指肠微绒毛、细胞连接及杯状细胞损伤的保护效果最好。结论:嗜酸乳杆菌发酵复方中药能够降低由产毒素大肠杆菌K88引起的小鼠腹泻率和腹泻指数,保护小鼠十二指肠,为开发产肠毒素大肠杆菌所致的仔猪腹泻产品提供参考。     

姬松茸水溶性粗多糖对镉中毒小鼠肝脏保护作用及其机理的研究

探讨姬松茸水溶性粗多糖对镉中毒小鼠肝脏的保护作用。150只SPF级雄性健康小白鼠随机分为对照组、模型组、试验组1、试验组2、试验组3共5组,模型组与3个试验组采用同一水平镉染毒,但同时对3个试验组给予不同剂量的姬松茸水溶性粗多糖溶液进行保护,试验日程为5周。从第2周开始每周每组取7只小鼠采血,分离血浆,测定并统计ALT、AST、TP生化指标的动态变化。结果表明,与对照组比较,模型组小鼠ALT、AST显著升高(P0.05),TP含量显著降低(P0.05);与模型组比较,试验组2、试验组3小鼠的ALT、AST显著降低(P0.05),TP含量显著升高(P0.05)。这表明镉染毒同时灌胃姬松茸水溶性粗多糖溶液对镉中毒小鼠肝损伤具有保护作用。     

迷迭香酸对堆型艾美耳球虫攻毒肉鸡生长性能、免疫机能及炎症反应的影响

本试验旨在探究饲粮添加迷迭香酸对堆型艾美耳球虫攻毒肉鸡生长性能、免疫机能和炎症反应的影响。选用1日龄雄性黄羽肉鸡360羽，随机分为6组，每组6个重复，每个重复10羽。对照组、攻毒对照组饲喂基础饲粮，阳性对照组在基础饲粮中添加20 mg/kg地克珠利，试验组在基础饲粮中分别添加40、80和160 mg/kg迷迭香酸，在14日龄对攻毒对照组、阳性对照组和试验组进行堆型艾美耳球虫攻毒，试验期为56 d。结果表明：1）与对照组相比，堆型艾美耳球虫攻毒后肉鸡第4、7、10天每克粪便中卵囊数量（OPG）,21日龄肝脏指数、脾脏指数、血清谷丙转氨酶（ALT）活性以及血清与肝脏补体3(C3)、补体4(C4)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量均显著上升（P<0.05）,15～21日龄平均日增重、21日龄血清免疫球蛋白M(IgM)与肝脏免疫球蛋白A(IgA)含量显著下降（P<0.05）。2）与攻毒对照组相比，饲粮添加160 mg/kg迷迭香酸显著降低了堆型艾美耳球虫攻毒肉鸡OPG（攻毒后第4、7、10天），21日龄肝脏指数、血清谷丙...     

口服猪A组轮状病毒Vp4基因工程乳酸菌对BALB/c小鼠的免疫保护作用

将轮状病毒pW425et-Vp4乳酸菌重组质粒口服免疫BALB/c小鼠,免疫后不同时间眼球采血脱臼处死,收集小鼠血清、脾细胞及肠道内容物,用ELISA方法检测血清IgG水平,用试剂盒检测肠黏膜SIgA水平,以流式细胞仪检测CD3+、CD4+、CD8+T细胞亚群和CD19+B细胞亚群的变化情况,最后进行攻毒试验。结果显示,pW425et-Vp4基因工程乳酸菌口服免疫小鼠血清IgG及肠黏膜SIgA水平较对照组有明显差异,且S/N2.0,CD4+/CD8+比值显著高于对照组,且比值大于2:1;表明猪A组轮状病毒Vp4基因工程乳酸菌重组表达质粒可以增强小鼠机体免疫保护能力。