赖氨酸对绵羊肝脏和背最长肌中GHR和IGF-Ⅰ基因表达调控的影响

为了研究赖氨酸对绵羊组织生长的影响,试验选用15只年龄、体重相近的杂交母羊(陶塞特♂×蒙古羊♀)随机分为3组,于基础日粮中分别添加不同水平的赖氨酸(0,4,10 g),采用Real-time PCR方法检测日粮不同赖氨酸水平对绵羊肝脏和背最长肌中GHR和IGF-ⅠmRNA表达的影响。结果表明:日粮赖氨酸水平影响绵羊肝脏和背最长肌中GHR和IGF-Ⅰ基因的表达,随日粮赖氨酸水平的提高肝脏GHR和IGF-ⅠmRNA及背最长肌IGF-ⅠmRNA表达量相应增加;背最长肌中4 g和10 g赖氨酸组GHR基因相对表达量均极显著高于对照组(P<0.01),10 g赖氨酸组的GHR基因相对表达量与4 g赖氨酸组间差异不显著(P>0.05)。说明添加一定量的赖氨酸可以调节绵羊组织的生长发育。     

鹅多个组织GHR和IGF-Ⅰ基因表达的发育性变化

为研究鹅不同组织生长激素受体(GHR)和胰岛素样生长因子-I(IGF-I)基因发育性变化,本试验选择0日龄杂交鹅(吉林白鹅×农安籽鹅)78只作为试验动物,应用荧光定量技术分别对0、14、28、42、56日龄鹅心脏、肝脏、腺胃、腿肌GHR以及IGF-I mRNA进行测定。结果显示,0~56日龄期间杂交鹅GHR以及IGF-I mRNA在肝脏中表达量最高,其次为腿肌和腺胃,心脏GHR以及IGF-I mRNA表达量最低。鹅心脏、肝脏、腺胃和腿肌GHR mRNA表达量随日龄增加有极显著的发育性变化(P0.01)。鹅心脏、肝脏、腿肌GHR mRNA表达量均于14日龄达到峰值,鹅腺胃GHR mRNA表达量于28日龄达到峰值。鹅肝脏、腺胃和腿肌IGF-I mRNA表达随日龄增加有极显著的发育性变化(P0.01)。鹅心脏、腿肌IGF-I mRNA表达量于28日龄出现峰值,但肝脏、腺胃IGF-I mRNA表达量在0~56日龄不断升高。总体上看,公鹅与母鹅各组织GHR以及IGF-I mRNA表达量无显著差异(P0.05)。结果表明,日龄对于GHR和IGF-I基因在鹅各组织表达具有重要影响;性别对鹅组织GHR和IGF-I基因表达影响较小;鹅各组织GHR和IGF-I基因发育性变化具有组织特异性,各基因表达量在鹅不同组织出现峰值的时间并不一致。     

日粮不同蛋白水平对绵羊脂肪和肌肉中IGF-Ⅰ基因表达的影响

选择年龄、体质量相近的杂交母羊(萨福克♂×小尾寒羊♀)24只,随机分为3组,分别饲喂不同蛋白水平的日粮(中蛋白日粮,低蛋白日粮和高蛋白日粮).采用半定量RT-PCR方法,检测日粮不同蛋白水平对绵羊脂肪和肌肉中IGF-Ⅰ基因表达的影响.结果表明:日粮的蛋白质水平影响绵羊腹部皮下脂肪、肠系膜脂肪和半腱肌组织IGF-Ⅰ基因的表达,随着口粮蛋白质水平的升高IGF-Ⅰ表达量增加.但表达具有组织特异性,在腹部皮下脂肪、肠系膜脂肪中,中蛋白组和高蛋白组均显著高于低蛋白组(P<0.05),在半腱肌组织中,高蛋白组极显著高于低蛋白组(P<0.01),而中蛋白组与高蛋白组和低蛋白组间均无显著差异(P>0.05).     

庄河大骨鸡GHR、IGF-Ⅰ基因的多态性及基因聚合对产肉性能的影响

本文旨在探究庄河大骨鸡GHR和IGF-Ⅰ基因产肉性能的遗传标记及聚合基因型的效应,为庄河大骨鸡的选育奠定理论基础。利用PCR-RFLP标记技术和最小二乘法分析了GHR、IGF-Ⅰ单基因型和聚合基因型与17周龄产肉性能的关联。结果发现:GHR基因和IGF-Ⅰ基因都存在3种基因型且处在哈代温伯格平衡状态;GHR基因AA型的活体重、屠体重、半净膛重、全净膛重、胸肌重和平均日增重分别显著高于AB型和BB型(P<0.05);IGF-Ⅰ基因DD型的活体重、屠体重、半净膛重、全净膛重、腿肌重和平均日增重分别显著高于CC型和CD型(P<0.05);聚合基因型AADD、AACD和ABDD的活重、屠体重、半净膛重、全净膛重、胸肌重、平均日增重显著高于其他各基因型(P<0.05)。GHR基因的AA型,IGF-Ⅰ基因的DD型和聚合基因型AADD、AACD、ABDD对鸡的产肉性能有显著影响,但是能否作为庄河大骨鸡选育的理论依据还需进一步研究。     

蓝塘猪和长白猪肝脏和肌肉中IGF-Ⅰ、IGF-Ⅰ R和IGFBP3基因表达的发育性变化

试验用实时定量PCR方法研究了蓝塘猪和长白猪1、27、90、150和180日龄肝脏和肌肉组织中IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR和IGFBP3基因表达的发育性变化。结果显示：（1）肝脏中IGF-Ⅰ基因表达量高于肌肉组织。两个品种肌肉中表达量均是90日龄时最高;肝脏中则出现品种差异,长白猪180日龄时最高,而蓝塘猪90日龄时最高。（2）肝脏中IGFBP3基因表达量高于肌肉组织。两个品种肌肉中IGFBP3基因表达量均是1日龄最高,蓝塘猪1日龄与其它各阶段差异显著（P＜0.05）,长白猪1日龄与90、150和180日龄差异显著（P＜0.05）;肝脏中表达规律出现品种差异,蓝塘猪90日龄时肝脏中表达量最高,且与1、27和150日龄差异显著（P＜0.05）;长白猪150日龄最高,各阶段差异不显著。（3）各阶段肝脏中IGF-ⅠR基因表达量变化较大,蓝塘猪90日龄时最高,长白猪27日龄时最高。肌肉中表达规律基本一致,均是出生时最高,随年龄增加有下降趋势。（4）3个基因比较,蓝塘猪肝脏中IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR和IGFBP3基因和肌肉中IGF-Ⅰ基因均是90日龄时表达量最高,肌肉中IGF-ⅠR和IGFBP3基因1日龄时表达量最高;长白猪肌肉中3个基因表达规律相似,表现出生长前期表达量较高,后期下降的趋势,而肝脏中变化规律不明显。     

日粮赖氨酸对70~90日龄肉兔生长性能、血清IGF-Ⅰ浓度及其基因表达的影响

为研究玉米-豆粕型日粮中赖氨酸水平对70~90日龄生长肉兔生产性能、血清类胰岛素生长激素浓度及其基因表达的影响。选择100只体重接近、前期饲养相同的70日龄新西兰肉兔为试验动物,随机分成5组,以赖氨酸含量分别为0.55%、0.65%、0.75%、0.85%和0.95%的5种日粮为试验处理,进行为期20 d的饲养试验。结果表明,随日粮赖氨酸水平的增加,90日龄生长肉兔生长性能组间差异不显著(P>0.05);血清胰岛素、生长激素、类胰岛素生长激素浓度显著提高(P＜0.05),分别在0.85%,0.75%和0.95%达到最大值;肝脏和肌肉IGF-Ⅰ相对表达量也明显增加(P＜0.05)。综上所述,70~90日龄生长肉兔血清IGF-Ⅰ浓度和基因表达受日粮赖氨酸水平的影响。     

Texel和乌珠穆沁绵羊妊娠中后期胎儿背最长肌中 AKT基因的发育表达模式

选择绵羊胎儿期骨骼肌中表达稳定性高的内参基因,探讨AKT基因在绵羊妊娠中后期背最长肌中的发育性表达模式。以Texel和乌珠穆沁绵羊为研究对象,采用荧光定量PCR技术检测SDHC、YWHAB、RPLPO、RPS18、B2M 5个内参基因的mRNA表达水平,同时检测AKT基因mRNA丰度在其胎儿期70、85、100、120和135 d间的表达变化,并分析其在品种间和不同生长阶段间的表达差异及其对肌肉生长发育的影响。5个内参基因的定量结果经GeNorm程序统计学分析处理,表达稳定性由高到低排序为RPS18＞RPLPO＞SDHC＞B2M＞YWHAB,确定用RPLPO、RPS18和SDHC 3个基因校正绵羊胎儿期不同生长阶段的目的基因表达量。在5个发育阶段中,两个品种绵羊胎儿AKT基因表达模式有一定差异,AKT表达量在Texel绵羊85和120 d时均有明显的增加,而在乌珠穆沁绵羊的100 d时出现1个表达峰,这与试验对两品种绵羊组织学分析的结果是一致的,进一步印证了Texel绵羊在85和120 d以及乌珠穆沁绵羊在100 d时存在肌发生波的推测。以上结果初步揭示绵羊妊娠中后期生长发育过程中AKT基因表达的发育性变化模式和品种差异,为深入研究AKT基因的作用机制提供了理论基础。     

IGF-Ⅰ在奶牛乳腺的表达及其对乳腺上皮细胞泌乳功能的影响

为研究IGF-Ⅰ表达和奶牛乳腺发育与泌乳之间的关系,采用qRT-PCR检测奶牛乳腺组织中IGF-Ⅰ的表达情况,应用细胞培养、qRT-PCR、MTT法检测IGF-Ⅰ对奶牛乳腺上皮细胞的影响。结果显示,在青春期奶牛乳腺组织中IGF-Ⅰ的表达量最高;添加IGF-Ⅰ后,乳腺上皮细胞IGF-ⅠR表达增加,细胞增殖能力提高,β-酪蛋白表达增加。研究结果表明,IGF-Ⅰ可通过促进IGF-ⅠR的表达,从而促进乳腺上皮细胞增殖和提高乳中β-酪蛋白含量。     

GHR和IGF-1基因多态性对文昌鸡蛋品质性状遗传效应的研究

试验采用PCR-RFLP技术检测了文昌鸡GHR基因内含子5I、GF-1基因的多态性,分析了GHR基因内含子5和IGF-1基因多态性与文昌鸡蛋品质性状的关系。结果表明:内含子5等位基因C和D基因频率分别为0.19和0.81,IGF-1等位基因A和B基因频率分别为0.53和0.47。GHR基因多态与蛋壳厚度相关显著(P<0.05),并且以加性方式作用。IGF-1基因多态与蛋壳重相关极显著(P<0.01);与蛋壳强度相关显著(P<0.05),并以显性方式作用。     

添喂赖氨酸及赖氨酸席夫碱对绵羊瘤胃发酵的影响

选取4只安装永久性瘤胃瘘管的中国美利奴(新疆型)细毛羊,采用4×4拉丁方设计,分别添喂2、4 g/d赖氨酸席夫碱和24、g/d赖氨酸对照(以赖氨酸含量计),以研究其对瘤胃发酵的影响。结果表明:添喂赖氨酸席夫碱4 g/d组瘤胃乙酸和总挥发性脂肪酸浓度分别低于赖氨酸4 g/d组9.44%和7.24%(P<0.05)。赖氨酸席夫碱添喂量从2 g/d增加到4g/d时,丙酸和丁酸平均含量分别增加了8.20%和10.64%(P<0.05)。添喂赖氨酸席夫碱,绵羊干物质采食量、瘤胃pH值和NH3-N浓度分别在1 374.21~1 419.01 g、6.14~6.54和11.31~28.21 mg/100 mL范围之间,各组无显著差异。以上结果说明:添喂赖氨酸席夫碱比添喂赖氨酸降低了瘤胃乙酸和总挥发性脂肪酸浓度,改变了瘤胃发酵类型。     

不同水平赖氨酸对绵羊胰岛素样生长因子-I基因表达的影响

为研究赖氨酸对绵羊生长的影响及其机理,选用1岁左右的绵羊15只,平均分为A、B和C组.3组分别在基础日粮中添加0、4和10g赖氨酸盐酸盐.饲喂28 d后全部屠宰,取肝脏和背最长肌样,提取组织总RNA,反转录后扩增胰岛索样生长因子-I(IGF-I)和GAPDH基因,用荧光定量PCR法分析不同处理肝脏和背最长肌IGF-I基因的表达量.结果表明:C组IGF-I基因的相对表达量极显著高于B组(P<0.01),B组IGF-I基因的相对表达量极显著高于A组(P<0.01),说明添加一定量的赖氨酸呵以调节绵羊组织的生长发育.     

IGF-Ⅰ、GLP-Ⅰ对体外培养脂肪细胞HSL酶活性的影响

取体外培养单层生长良好脂肪细胞,培养介质中分别添加0、10、20、30、40、50μg/L的胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ),0、100、250、500、750、1 000 nmol/L的胰高血糖素样肽Ⅰ(GLP-Ⅰ),培养24 h后提取总蛋白,每个处理3个重复,分别采用脂肪酶测定试剂盒检测HSL酶活性的影响.结果表明,IGF-Ⅰ、GLP-Ⅰ抑制脂肪细胞内HSL酶活性,存在剂量依赖性.     

IGF-Ⅰ调控区微卫星座位遗传多态性对松辽黑猪肉质性状的影响

在克隆5′上游微卫星序列的基础上,以40头松辽黑猪为研究材料,分析了该微卫星序列的多态性,同时进行了各基因型与肌内脂肪含量等肉质和胴体性状的关联性分析。结果表明:在5′端侧翼微卫星位点上多态性丰富,共检测到4个等位基因(A、B、C、D)共6种基因型,等位基因A、B、C、D的频率分别为0.112 50、.087 50、.425 0和0.375 0;杂合度0.658 0、多态信息含量0.594 4、有效等位基因数2.924 0;遗传效应分析发现AA基因型个体具有较高的肌内脂肪含量。     

日粮不同蛋白质水平对绵羊IGF-1和GH分泌及基因表达的影响

本研究旨在探讨不同蛋白质水平日粮对绵羊胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和生长激素(GH)分泌及基因mRNA表达量的影响,为科学配置肉羊饲料及研究肉羊生长发育提供基础。选择6月龄体重相近的多胎萨福克公羔18只,随机分为3组,分别饲喂不同蛋白质水平的日粮(低蛋白日粮、中蛋白日粮和高蛋白日粮)。采用ELISA方法和SYBR Green Real-time PCR方法检测日粮不同蛋白质水平对不同生长发育阶段(30、60、90和120d)羔羊外周血中IGF-1、GH浓度和皮肤组织中基因表达的影响。结果显示,日粮蛋白质水平显著影响绵羊平均日增重、外周血中IGF-1和GH的浓度以及皮肤组织IGF-1基因的表达丰度,而未显著影响GH基因的表达丰度。结果提示,随着日粮蛋白质水平的升高,绵羊生长发育快,外周血中IGF-1浓度增加,GH浓度降低,IGF-1基因表达量增加。     

Myf5基因在不同时期绵羊胎儿半腱肌和背最长肌中的表达及生物信息学分析

为了研究MRFs家族中Myf5基因在不同发育时期绵羊胎儿骨骼肌中的表达规律及分子特性,实验采取妊娠30 d(E30)、50 d(E50)和70 d(E70)3个时期绵羊胎儿的半腱肌和背最长肌,用HE染色法观察了其显微结构,通过实时荧光定量PCR技术检测了Myf5基因的表达变化,同时运用生物信息学软件对绵羊Myf5蛋白的...     

鹅IGF-Ⅰ基因5'调控区单核苷酸多态性分析

以皖西白鹅和朗德鹅为素材,设计引物对鹅的IGF-Ⅰ基因5'端非编码区序列克隆测序,运用PCR-SSCP方法检测IGF-Ⅰ基因5'调控区的单核苷酸多态性.检测发现该区域存在4个SNP位点,分别是:A-26T、A-215G、A-314G、A-325T.     

酵母铬对热应激绵羊肝脏组织基因表达的影响北大核心

试验探讨日粮中添加酵母铬对绵羊肝脏转录组的影响。选择5~6月龄、体重相近、健康状况良好的杜湖杂交绵羊14只,随机分为对照组与酵母铬组,每组7只。对2个组得到的147 348 445和148 419 153个数据进行筛选,将筛选出的821个差异基因进行GO功能注释和KEGG富集分析,选择差异表达基因进行实时荧光定量PCR验证。结果显示:日粮中添加酵母铬可改善绵羊的屠宰性能。酵母铬可上调CD80,并显著抑制CD86,进而对T细胞产生免疫调节作用,提高机体对热应激的适应能力。研究表明,日粮中添加酵母铬可对绵羊机体起到一定的保护作用,保护肝脏免受损伤。     

凉山半细毛羊IGF-Ⅰ基因的表达规律研究

试验采用Real time PCR技术研究了IGF-Ⅰ在绵羊不同组织的各个时间点的表达.结果表明:5个组织在105 d时出现第一个表达拐点,15 d→105 d时肌肉、大脑和肝脏组织的表达降低后再升高,而皮肤和心脏组织在15 d和60 d时的表达无显著差异,105 d时才显著或极显著升高;105 d后,肝脏组织的表达逐渐降低,肌肉、心脏、大脑和皮肤组织在195 d时出现第2拐点,但肌肉和心脏组织并未引起表达的显著差异,而大脑和皮肤组织在195 d时的表达显著高于150 d和240 d,揭示IGF-Ⅰ基因在5个组织的表达具有一定的同步性.为凉山半细毛羊的生长调控机理提供了理论依据.     

鹅IGF-Ⅰ基因5′调控区单核苷酸多态性分析

以皖西白鹅和朗德鹅为素材,设计引物对鹅的IGF-Ⅰ基因5′端非编码区序列克隆测序,运用PCR-SSCP方法检测IGF-Ⅰ基因5′调控区的单核苷酸多态性。检测发现该区域存在4个SNP位点,分别是：A-26T、A-215G、A-314G、A-325T。     

藏系绵羊IGF-1基因表达水平的实时荧光定量PCR检测

采用实时荧光定量PCR SYBR GreenI荧光染料法,对藏系绵羊皮肤细胞中IGF-1基因的表达水平进行了相对定量分析,建立了快速检测IGF-1基因表达量的方法。通过该方法检测出了IGF基因在藏系绵羊皮肤细胞中的相对表达量,且表达量有差异。该方法具有灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快等优点。