草鱼肾脏组织细胞系CIK的建立(简报)

<正> 鱼类细胞系是研究鱼类病毒和细胞生物学的重要基础。自Wolf和Quimby(1962)报告建立RTG—2细胞系以后,国外相继报告来自冷水性和温水性鱼类组织的细胞系已有数十种。我国台湾省陈秀男和郭光雄(1981)曾报告建立了鳗鱼卵巢组织细胞系。陈秀男等(1982,1983)又先后报告建     

草鱼出血病病毒854株在CIK细胞系上的繁殖动态研究

采用微量细胞培养系统测定草鱼出血病病毒854株在草鱼肾脏组织细胞系(CIK)上的繁殖动态。病毒在感染后12小时滴度开始上升,24～72小时呈对数上升,84小时病毒滴度达到最高点,以后渐趋平稳。     

草鱼出血病细胞培养灭活疫苗的研究及其应用初报

试验证明:1.GCK—84细胞培养灭活疫苗以32—35℃灭活72小时为最佳条件,以10％福尔马林使其最终浓度为0.1％为最好,室内免疫效果达96.3％。2.GCK—84细胞疫苗以10~(-2)浓度为最好,保护率达96％以上。3.在10~(-3)浓度疫苗中加入佐剂,能使保护率由68.8％提高到84.2％—100％。     

使用廉价培养基培养草鱼CIK细胞系

使用一种廉价的培养基 CAS 替代昂贵的 Eagle′S MEM 培养草鱼 CIK 细胞系,细胞生长迅速而稳定,在1.5—2天内可长成汇合单层。CAS 的最佳培养浓度为0.1%。     

草鱼出血病病毒854株的纯化及其理化特性

离心技术纯化病毒。病毒粒子具双层衣壳,直径约为65nm。病毒对氯仿、乙醚、酸碱、胰蛋白酶的处理不敏感。冻融和56℃、1小时处理,毒力下降显著。-80℃、-30℃两种温度条件下保存,其毒力损失有差异。鱼用消毒剂鱼康有杀病毒作用。     

草鱼出血病细胞培养弱毒疫苗的制备及其免疫效果

本文报道经筛选的ＧＣＨＶ－８４１毒株在草鱼吻端成纤维细胞系中进行适应性培养，弱毒驯化，细胞培养弱毒疫苗的制备，安全性观察，不同稀释度和剂量的免疫保护率测定及保存试验，ＧＣＨＶ－８４１毒株在ＰＳＦ细胞中继代驯化至５３代达到减毒目的。筛选得５３－５９代作毒株在ＰＳＦ细胞中继代驯化至５３代达到减毒目的，筛选得５３－５９代作毒种制备的细胞制备细胞弱毒疫使用安全，用稀释１０－１０＾４倍的疫苗，０．１－０．３     

草鱼出血病病毒854株的理化_生物学特性及基因组结构

草鱼出血病是我国一种十分严重的病毒性鱼病。１９７８年,中国科学院水生生物研究所第三研究室的科研人员首先报道了草鱼出血病是一种病毒性鱼病,并初步认为其病原是一种疱疹病毒（Ｈｅｒｐｓｖｉｒｕｓ）。１９８３年,陈燕新等报道了自己分离的草鱼出血病病毒形态结构...     

青鱼鳍条组织细胞系的建立及其生物学特性

采用组织块移植培养技术,对来源于青鱼(Mylopharyngodon piceus)的鳍条组织细胞进行原代培养,建立了青鱼鳍条组织细胞系,定名为BC-Fin。青鱼鳍条组织细胞为成纤维样细胞,已稳定传代培养50多代,其最适培养温度为25℃,最佳培养基为L-15,最适血清浓度为15%,在最适培养条件下,青鱼鳍条组织细胞的群体倍增时间为60.6 h。青鱼鳍条组织细胞液氮冷冻保藏6个月后,经台盼蓝染色,约(90.09±4.65)%的细胞具有细胞活性,复苏后的细胞生长旺盛。细胞染色体分析显示,第16代青鱼鳍条组织细胞的染色体数目为正常二倍体(2n=48),第41代细胞染色体众数为46。通过对离体培养细胞的线粒体中的16S rRNA基因进行特异性扩增,获得长度为320 bp的核酸片段,核酸序列比对分析结果表明,其与青鱼16S rRNA基因序列的一致性达98%,表明该细胞来源于青鱼。病毒敏感性试验结果显示,在感染草鱼呼肠孤病毒(GCRV)后BC-Fin细胞系可产生典型细胞病变效应,病毒滴度为105.33±0.21TCID50/m L,且PCR检测可检测出细胞培养的草鱼呼肠孤病毒,表明BCFin细胞系对草鱼呼肠孤病毒较敏感。     

紫外辐射诱导草鱼肾脏细胞系（CIK）的程序性死亡

本文报道研究紫外辐射对离体培养的草鱼肾脏细胞系(CIK)的影响。实验结果显示,在距离15W紫外灯40cm下照射草鱼的CIK细胞3min后,CIK细胞核即产生固缩、碎裂现象,琼脂糖凝胶电泳可见典型的DNA梯形带,流式细胞仪检测发现有亚G1峰产生。结果表明,短时间的紫外辐射即可诱导CIK细胞发生细胞程序性死亡。     

草鱼出血病的组织病理研究

草鱼出血病是由呼肠孤病毒引起的一种急性传染病。病鱼全身出血，鱼的红细胞、白细胞及血红蛋白都明显地低于健康鱼。病毒侵袭草鱼后，小血管的内皮广泛受损，引起弥漫性血管内凝血，从而大量消耗了血液中的凝血因子，引起广泛性出血。由于循环血量减少和小血管阻塞，导致大多数组织和器官缺氧而变性和坏死；尤其是造血组织的坏死，更加速病鱼死亡。此外，还在草鱼血液中首次发现嗜碱粒细胞，查明了草鱼出血病同草鱼肠炎病的肠道组织病变之间的差异。     

饲养水温对草鱼溶菌酶活性的影响↑（*）

草鱼在水温１０℃、２０℃和２８℃条件下饲养五周后，测定其体表粘液、血清、肠粘液、肝、脾和肾脏中溶菌酶的活性。２０℃和２８℃试验组的溶菌酶活性比试验前均有不同程度地上升，而１０℃试验组的溶菌酶活性有所下降，推测这主要是由于鱼体未摄食的缘故。     

草鱼对饲料中磷需要量的研究

采用酪蛋白—明胶(7:1,W/W)为基础的精制饲料,以磷酸二氢钙作磷源,用梯度法进行草鱼对饲料中磷需要量的试验,证实草鱼的生长受饲料中磷含量的影响较大。饲料中磷不足,草鱼生长缓慢,饲料系数高,整条鱼体水分、灰分、钙、磷和钙磷比低下,脂肪积累,脊椎骨磷含量低下。饲料中磷含量过高引起草鱼生长缓慢,甚至死亡。根据鱼的增重率、饲料系数等分析判断:草鱼饲料中磷的适宜范围为0.95—1.10％,草鱼对饲料中有效磷的需要量为0.85—1.00％。试验表明:草鱼饲料中的盐类添加应以磷为主体。     

兴国红鲤同草鱼杂交的受精细胞学研究

兴国红鲤与草鱼杂交虽属亚科间的远缘杂交,却符合鲤科鱼类一般的受精规律,精子由唯一的受精孔道进入卵内,单精入卵。受精的适当时间是在卵细胞第二次成熟分裂的中期。受精后7分钟形成精子星光。接着雄性原核、雌性原核先后形成,并逐渐靠拢;受精后40分钟两性原核结合(水温21℃);受精后45—50分钟出现新个体的第一次卵裂。说明草鱼精子对兴国红鲤成熟卵细胞不仅起激动作用,而且参与了遗传物质的组成。此系亚科间远缘杂交具有生活力的生物学基础。实验发现:在特定的条件下,同一批受精卵中,多倍体,单倍体,雌发育可能同时存在。本文还比较分析了常见的几种鲤科鱼类及其杂种受精的过程。     

鱼类特异性代谢物对草鱼、鳙和尼罗非鲫耗氧率的影响

以草鱼、鳙和尼罗非鲫互为供体和受体,研究其特异性代谢物对耗氧率的影响。结果表明：①在草鱼“代谢水”中,草鱼耗氧率显著下降（P＜0．001）,鳙和尼罗非鲫耗氧率均显著上升（P＜0．001）;②鳙“代谢水”中,鳙耗氧率显著下降（P＜0．001）,草鱼耗氧率无显著变动（P＞0．05）;③在尼罗非鲫“代谢水”中,3种鱼的耗氧率均无显著变动（P＞0.05）。实验揭示了鱼类特异性代谢物对代谢影响的存在,且这种影响因种而异。     

鲤和草鱼杂交中雄核发育子代的研究

在鱼类远缘杂交中,有可能自发产生雄核发育子代,但机率很小。stanley等(1976)对以色列镜鲤♀×草鱼♂杂交中雄核发育草鱼的研究,是至今为止通过杂交获得存活的雄核发育子代的唯一报道,国内未见同类报道,只有刘汉勤等(1987)用移核手段获得过泥鳅雄核发育纯合二倍体幼鱼。吴维新等在1978年开始进行的兴国红鲤与草鱼杂交试验中,曾发现过具有草鱼形态的“草鱼型杂种”,但都在     

三江水系草鱼种群RAPD分析↑（*）

用１２０个含１０碱基的随机引物,对长江、珠江、黑龙江三大水系的草鱼产卵场及太湖中捕获的草鱼进行覆盖性的ＲＡＰＤ分析,实验共扩增出２３４６条重复性高而清晰的ＤＮＡ带,获得多态性片段８４４条。结果表明,每一水系的草鱼种群均有其特征性基因图谱,可作为种群鉴定的依据;统计学分析后绘制的遗传距离树状图与经典的数量遗传、质量遗传分析结果相吻合。     

草鱼吻端组织细胞株ZC-7901及其亚株ZC-7901S1的建立和特性观察

以草鱼吻端组织为材料，经体外培养建立了一个上皮样细胞和梭形细胞混合的细胞株，后又从中分离出一个上皮样细胞亚株，分别定名为ZC-7901和ZC-7901S1。对两株细胞进行了基本生物学特性的测定，染色体数目和经长期传代后染色体数目稳定性的分析。实验表明，两株细胞为草鱼正常二倍体(2n=48)细胞株。