脱病毒草莓田间品种比较试验

在江苏省科委的支持下,在江苏省建立了3个脱毒草莓科技示范园,为了检验脱毒草莓在生产上的增产效果,以事实宣传和启发广大果农科学种田,靠高科技致富的积极性,使脱毒草莓这一高科技成果在生产上产生应有的经济效益。我们在草莓科技示范园内进行了草莓脱毒苗和有病毒苗的比较试验,结果如下：     

通过玻璃化超低温处理脱除草莓轻型黄边病毒(SMYEV)研究

以草莓品种明宝为材料,取茎尖做初代培养,继代扩繁5次后,取2mm左右的茎尖,利用玻璃化超低温技术对SMYEV进行脱除,并利用结合内标的多重RT-PCR技术对再生植株进行病毒检测。结果表明,在病毒脱除过程中,预培养蔗糖浓度为0.5mol/L,处理3d;装载处理为25℃,60min;玻璃化处理为0℃,120min;液氮处理60min后,进行40℃水浴2min,草莓茎尖的存活率为76%,而草莓轻型黄边病毒的脱除率为95%。只有通过液氮处理才可以脱除该病毒,液氮处理前的玻璃化处理脱毒率为0。利用超低温脱毒法可以简便有效地脱除SMYEV。     

发展高效经济作物——脱病毒草莓

在当前农村调整农业产业结构 ,大力发展经济作物的大潮中 ,摆在广大农村乡镇干部、农业科技开发集团和广大农业专业户面前的最大难题是选择什么作物作为发展高效农业的经济作物 ,哪些项目科技含量高 ,具有长远的发展潜力和较高的经济效益。根据目前各种经济作物的市场行情和经济效益 ,我们推荐大果型脱毒草霉作为发展高效农业的经济作物 ,脱毒草莓具有科技含量高 ,栽培容易 ,增产效果显著 ,周期短和经济效益高的特色。根据我们多年的调查研究和脱病毒草莓示范推广中的实际经济效益 ,一般草莓目前由于普遍严重感染病毒病 ,果实变小 ,品质下降…     

北京地区不同品种草莓种苗中草莓轻型黄边病毒的检测与分析

以产自北京地区的36个品种的草莓种苗为试材,采用田间调查和RT-PCR方法,研究草莓轻型黄边病毒(SMYEV)在不同品种草莓种苗上的影响,以期为草莓品种选育和推广工作提供参考依据。结果表明：采集的431株草莓种苗中检出SMYEV阳性样品30份,病毒检出率为6.96%。其中,8个品种的草莓种苗中检出SMYEV,检出率为6.5%～23.1%,而其他28个品种均未检出。通过基因克隆、序列测定和比对分析,获得3个北京分离物的SMYEV外壳蛋白(CP)核苷酸序列,北京分离物BJHY253与美国草莓分离物WSU1988CP基因序列的同源性为98.63%;北京分离物BJHYZ83与阿根廷草莓分离物Berra-2CP基因序列的同源性为99.04%,北京分离物BJLYN与中国福建草莓分离物FJ2 CP基因序列的同源性为98.63%。通过对不同草莓品种中的SMYEV进行检测分析和序列测定,发现SMYEV在不同品种草莓种苗中的检出率存在差异,北京地区草莓种苗中SMYEV序列具有多样性,属于不同的株系,这些结果可以为草莓的田间生产和病毒防控提供数据支持。     

山楂属植物中苹果褪绿叶斑病毒的RT-PCR检测及病毒脱除方法

【目的】建立优化的山楂属植物苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)的RT-PCR检测体系,获得以山楂组培苗为试材的高效ACLSV脱除方法。【方法】基于转录组高通量测序解析的山楂属植物ACLSV基因组序列设计病毒检测引物,比较c DNA模板浓度、Taq DNA聚合酶种类及采样部位对病毒RT-PCR检测效果的影响。通过组培苗热处理和培养基中添加三氮唑核苷来脱除山楂植株中的ACLSV。【结果】基于转录组高通量测序获得的2个ACLSV山楂分离物的全基因组序列设计并筛选出适合于山楂属植物ACLSV的RT-PCR检测引物。建立了优化的山楂属植物ACLSV的RT-PCR检测体系。对80份山楂样品进行病毒检测,其中有18个样本检测出ACLSV,带毒率为22.5%。比较了热处理(37℃、30d)、化学处理(培养基中添加20 mg·L-1的三氮唑核苷,处理40 d)、热处理与化学处理结合方法(处理30 d)3种方法对山楂组培苗中ACLSV的脱除效率,表明热处理或热处理与化学处理结合的方法能够完全脱除山楂中的ACLSV,而单独化学处理的脱毒率不能达到100%。【结论】建立了优化的山楂属植物ACLSV的RT-PCR检测体系,表明组培苗热处理是脱除山楂植株中ACLSV的有效方法。     

草莓脱毒苗与常规苗田间性状比较试验

比较了草莓章姬组培脱毒繁殖苗与常规匍匐茎繁殖苗的植物学性状和果实经济学性状,结果表明组培苗较常规苗株高、株幅有明显增大,复叶多一张功能叶;草莓品种经过组培脱毒后植株长势增强,平均单果与最大单果重较常规苗增大明显,果实可溶性固形物含量比常规苗增加了15.2%;果实品质和产量明显提高。     

草莓脱毒技术研究进展

综述了草莓主要病毒病的种类及危害,草莓病毒的脱毒机理、脱毒方法,脱毒苗的鉴定与繁殖,指出了存在问题,对今后的发展方向进行了展望。     

发展高效、绿色有机经济作物—脱病毒草莓

脱毒草莓具有科技含量高、易栽培、增产效果显著、周期短、风险小和经济效益高等特点,是我国发展高效、绿色有机农业的首选经济作物。我们根据多年的调查研究发现,     

四种主要草莓病毒研究进展

草莓在长时间的无性繁殖过程中极容易受到病毒侵染,进而导致生产中的病毒积累和传播,严重影响草莓的产量和品质。目前草莓病毒病的研究相对于其它植物病毒滞后,因此,对于草莓病毒病的防控研究迫在眉睫。综合国内外文献从生物学、进化、致病机制、检测方法、病毒防治等方面综述了4种主要草莓病毒的研究进展,对促进草莓病毒的研究与防控工作有重要意义。     

草莓白化相关病毒中国分离物全基因组分析

草莓白化相关病毒(strawberry pallidosis-associated virus,SPaV)属于长线形病毒科(Closteroviridae)毛形病毒属(Crinivirus),可引起草莓病害,2017年在中国首次报道.采用高通量测序、RACE和RT-PCR技术获得了SPaV中国分离物(FJ)的基因组全长...     

应用多重RT - PCR检测草莓斑驳病毒和草莓轻型黄边病毒

 建立了多重RT - PCR同时检测草莓斑驳病毒( SMoV) 和草莓轻型黄边病毒( SMYEV) 的技术体系, 对草莓田间植株和试管苗都可以有效进行检测。多重PCR引物根据引物之间的互补性及引物的Tm值进行筛选。适宜的PCR缓冲液的浓度为2 ×, 退火温度为57℃, 延伸温度为66℃。分别利用单一PCR和多重PCR对微茎尖培养获得的草莓品种宝交早生的11个株系进行了脱毒效果鉴定。     

草莓镶脉病毒的PCR检测及特异片段的序列分析

用CTAB法从感病的草莓叶片中提取总DNA,以其为模板经PCR扩增获得与预期片段大小一致长约600bp的扩增产物,同时优化PCR反应程序,获得单一特异条带;通过总DNA浓度梯度稀释,进行PCR扩增,结果表明能检测到2.5μg叶组织中病毒的存在。回收PCR特异扩增产物,与pMD18-T载体连接,并进行转化、重组克隆的筛选、重组质粒的酶切鉴定和序列测定。扩增片段序列与已报道SVBVCP基因序列(序列号:Nc_001725)的核苷酸同源性为89.2%,氨基酸同源性为96.3%。该特异片段序列在GenBank中的登记号为AY862389。     

草莓果实磷脂酶D活性的测定

以草莓果实为试材,建立了适合草莓果实组织磷脂酶D制备及活性测定的技术体系。以放射标记的磷脂酰胆碱为底物,在1mL反应体系中,膜蛋白的含量以5-10μg为宜;25℃反应温度下,反应时间以5-10min为宜;反应体系的适宜pH为6.5-7。对草莓果实不同组分磷脂酶D酶学特性的进一步分析认为,该技术体系的建立有助于进一步探讨磷脂酶D在草莓果实发育成熟和衰老进程中的作用。     

草莓微繁殖苗光合特性研究

以草莓品种全明星和丰香的微繁殖一代苗和二代苗为材料,在日光温室中系统地比较了草莓微繁殖苗和普通苗在光合特性和光合色素质量分数的差异。结果表明,2种性质的微繁殖苗的净光合速率和气孔导度都显著高于普通苗;微繁殖苗的光饱和点和补偿点低于普通苗,其中全明星的一代苗与普通苗差异显著,而丰香的一代苗和二代苗与普通苗差异均显著。在表观量子效率上,微繁殖苗显著高于普通苗。微繁殖苗的叶绿素b质量分数显著高于普通苗;微繁殖苗光合速率的日变化规律与普通苗相似。     

草莓微繁殖苗及其后代性状表观遗传变异研究

为揭示微繁殖导致表观遗传变异的表现特点,以草莓品种佐贺清香和全明星为试材,研究了微繁殖导致草莓表观遗传变异的生物学性状表现和生理生化变化。草莓微繁殖原种苗和一代苗繁殖匍匐茎子苗的能力明显高于普通苗,其中佐贺清香微繁殖原种苗繁苗能力比普通苗高1倍以上。微繁殖苗后代与普通苗在物候期上没有明显差异,同样在叶片形态和发育上也没有明显差异。在果实成熟期,微繁殖苗后代的生长势强旺,佐贺清香二代苗和全明星二代苗分别比普通苗增产49.8%和9.7%;微繁殖苗后代叶片中可溶性糖含量、可溶性蛋白质含量、苯丙氨酸解氨酶活性、几丁质酶活性和β-1,3-葡聚糖酶活性明显低于普通苗,这意味着微繁殖可能导致草莓的抗病性降低。     

草莓微繁殖苗移栽后开花结果的研究

以草莓品种丰香、吐德拉、全明星、北辉为试材,研究了移栽时期、生根方式对草莓微繁殖苗移栽后开花结果的影响。草莓微繁殖苗在春季移栽时期对开花结果习性具有重要影响,2月份移栽,4个品种都开花结果,成熟期比露地栽培草莓大约晚20d,全明星、吐德拉和丰香3个品种的产量与普通苗露地栽培的产量相近;3月份移栽,虽然有开花结果,但并无经济学产量;4月份移栽,4个品种均未开花。不同品种的微繁殖苗在开花株率、单株产量等指标上差异显著,其中全明星微繁殖苗的开花结果能力最强,2月份移栽的微繁殖苗的开花株率达89.3%,单株产量达98.2g。在花序数上,培养基中不含植物生长调节剂处理显著高于附加植物生长调节剂的处理。     

Effect of night humidity on the vegetative growth and the mineral composition of tomato and strawberry plants

Conditions of low night humidity (50–55%) and high night humidity (90–95%) were imposed on tomato plants (Lycopersicon esculentum Mill. cv. Young-Kwang) for 30 days, and on strawberry plants (Fragaria grandiflora Ehrh. cv. Bogyo) for 40 days. Shoot dry weight and leaf area in tomato plants increased with high night humidity whereas the strawberry plants did not show any such increases. The concentrations of five major nutrients (N, P, K, Ca and Mg) were reduced in tomato plants under high night humidity, with the calcium content in younger leaves being the most severely affected. For the strawberry plants, however, high night humidity tended to increase the concentrations of major nutrients, including calcium in the younger leaves. Possible reasons for the differences in response of these two species to night humidity are discussed.     

草莓不同器官中microRNA表达差异研究

MicroRNA(miRNA)在植物的生长发育过程中起着重要作用。以CTAB法提取的总RNA为模板,通过设计茎环反转录引物,利用实时RT-PCR技术对草莓根系、花托、茎尖和叶片4种器官中的6种miRNA进行了表达差异研究。以草莓叶片中6种miRNA的表达量为1,差异表达结果显示miR164在草莓花托中高度表达,达到6.615,明显高于根系(0.485)、茎尖(0.371)和叶片(1.000);miR172在茎尖和花托中的表达量都较低,分别为0.029和0.020,在根系中的表达量更低,只有0.0008454;miR167在根系中表达也很低,只有0.053;miR156,miR159和miR165在4种草莓器官中的表达差异不明显。这些结果为进一步验证miRNA基因在草莓植株生长发育过程中的作用奠定了基础。     

草莓轻型黄边病毒的RT-PCR检测及其3''端序列分析

利用RTPCR技术对草莓植株中草莓轻型黄边病毒(SMYEV)的外壳蛋白基因片段进行特异扩增,扩增产物经测序证明为SMYEV的特异片段。建立了稳定的SMYEV的RTPCR检测体系,并对19个草莓品种和2种野生草莓进行检测,其中12个品种和五叶草莓带有SMYEV。从SMYEV的沈阳分离物SY01上扩增出了932bp的基因组3末端区域,其核酸序列与国外分离物的序列同源性为86%～96%。系统进化树显示SMYEV分为3个组群,沈阳分离物SY01与欧美分离物位于同一组群内,但独立形成1个小的分支。RNA二级结构分析显示SMYEV基因组3末端形成3个茎环结构,不同分离物的序列变化并未引起茎环结构的明显变化。