一起PRRSV、PCV-2和App混合感染的诊断

宜兴某猪场仔猪出现以体温升高,两耳的耳根部和四肢末端及腹部呈紫色,剖检以肺部肉变,胸腔积液等为特征的疫病.经流行病学调查、临床症状观察、病理变化分析并结合实验室检测,诊断该病为猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型和胸膜肺炎放线杆菌混合感染.经过紧急免疫接种和综合治疗,疫情得到基本控制.     

PCR检测临床病例中PCV-2、PRRSV和CSFV的混合感染

参照GenBank中已发表的有关基因序列,分别设计合成针对PCV-2、PRRSV和CSFV的3对引物,分别建立检测临床病例中PCV-2、PRRSV和CSFV感染的PCR或RT-PCR方法。结果显示,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳,分别各呈现1条大小约1154,372,375bp的特异条带。采用建立的PCR方法对江西各地发病猪和死亡猪的133份临床病料进行PCV-2检测,结果总检出率53.38%(71/133)。在71份PCV-2阳性的病料中检测出PRRSV20份,阳性率28.17%(20/71);CSFV9份,阳性率12.68%(9/71);PRRSV和CSFV共同感染9份,阳性率12.68%(9/71)。     

仔猪繁殖与呼吸综合征和圆环病毒（PCV-2）混合感染的诊治

近几年来，随着养猪行业的扩大和新疾病的增加，多病原的多重感染或混合感染已普遍发生。猪群中发病，常常不是单一的病原体引起，而是两种或多种病原体共同作用引起的，如网环病毒常与繁殖呼吸综合征病毒、细小病毒、副猪嗜血杆菌、猪肺炎支原体、猪胸膜肺炎放线杆菌以及多杀性巴氏杆菌等混合感染，引发许多症状，临床症状趋于复杂化和多样化，使诊断和防治难度加大，造成很大的经济损失。     

SIV与PRRSV、CSFV、PCV-2和PRV交叉感染的检测

采用RT-PCR方法对37份疑似猪流感病毒(SIV)感染病料进行了病原学检测。同时,还运用PCR和RT-PCR方法对SIV阳性病料进行了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)和猪伪狂犬病毒(PRV)目的基因片段的扩增。结果,扩增出了SIV特异目的基因片段,且4份病料都为混合感染,感染状况分别为SIV/PRRSV/PRV,SIV/CSFV/PRRSV三重感染,SIV/PCV-2和SIV/PRRSV二重感染。     

PRRSV与PCV2混合感染的临床检测试验

沈阳地区某猪场出现了母猪流产、仔猪腹泻、呼吸困难等症状.根据其临床症状、剖栓变化、RT-PCR及PCR等检测,确诊该场此次发病为猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)及猪2型圆环病毒(PCV2)的混合感染.     

神木县PRRSV与PCV-2的血清学调查

为调查猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)和猪圆环病毒病(PCVD)在陕西省神木县的流行情况,用ELISA方法对从该地区规模化猪场收集的200份血清进行了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病病毒(PCV-2)抗体检测,结果显示,PRRSV抗体阳性率为26.8％;PCV-2抗体阳性率为85.5％,初步证明PCV-2感染在神木县十分普遍,部分猪场PRRSV感染比例较高,应加强对这两种疾病的防疫工作.     

PMWS患病猪群中PCV2与CSFV、PPV、PRRSV混合感染的调查

应用套式PCR方法对采自辽宁、河北、河南、湖北、湖南、山东、浙江、福建和广西9个省份的733份临床发病猪肺脏和淋巴结样品进行了PCV2的检测,然后对鉴定为PCV2阳性的283份病料再分别进行PRRSV、PPV和CSFV的检测,以确定猪群中PCV2与CSFV、PRRSV和PPV双重感染情况,结果表明:CSFV、PRRSV和PPV阳性样品分别为74份、94份和46份,阳性率分别为26.1%、33.2%和16.3%。表明这些地区发病猪群中PCV2与这三种病毒的双重感染普遍存在,其中以PCV2和PRRSV的双重感染较为突出;但在河北和湖北两省,则以PCV2与CSFV的双重感染为主。     

广西某猪场猪繁殖与呼吸综合征和猪圆环病毒2型混合感染的诊断

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是20世纪80年代后期发现的一种新的高度传染性的疾病,临床上以母猪流产、死胎、木乃伊胎、弱仔等繁殖障碍及仔猪呼吸道症状、死亡率高为主要特征.该病自1987年在美国发现以来,至今已蔓延至世界所有养猪国家,给养猪业带来巨大的经济损失.     

PRRSV和PCV-2二重PCR检测方法的建立及初步应用

参考GenBank上已发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2基因序列和猪圆环病毒2型ORF1基因序列,分别设计并合成了可用于检测猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型的2对引物,扩增目的片段大小分别为421 bp和714 bp。在建立了用于检测猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型的单项PCR检测方法并优化单项PCR条件的基础上,建立了针对两种病毒的二重PCR检测方法。通过检测143份临床病料对二重PCR方法和单项PCR/RT-PCR方法进行了对比验证。结果显示,两者的总符合率在92.6%以上,表明该二重PCR检测方法可以用于临床病料的检测。     

猪瘟合并猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV2)感染

2004年初以来，杭州地区的几个规模化猪场陆续发生仔猪腹泻、保育猪呼吸困难的疾病，剖检见肺部呈橡皮样，全身淋巴结水肿，部分猪脾脏边缘梗死等，发病率、死亡率较高。设计针对猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪圆环病毒2型（PCV2）的特异性引物，进行RT—PCR或PCR检测；运用伪狂犬病（PR）鉴别试剂盒检测PR，运用免疫荧光法检测猪瘟（HC），并进行了细菌分离培养，通过全面检查认为，这几个猪场发生了猪瘟合并猪PRRSV、PCV2感染。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型混合感染研究进展

1病原简介 猪繁殖与呼吸综合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起的，以母猪的繁殖障碍、哺乳仔猪的高死亡率及呼吸症状为特征的一种传染病。PRRSV是有囊膜的单股正链RNA病毒，属于动脉炎病毒科动脉炎病毒属。该病1987年在美国首先发生，随后在世界各主要养猪国家流行。按其遗传差异和抗原性差异，可分为欧洲型（A群）与美洲型（B群）。该病毒的基因组全长约为15kb，含有8个开放阅读框架（ORFs），其中ORF1a和ORF1b编码病毒非结构蛋白，ORF2-ORF7编码病毒的结构蛋白。我国1996年由郭宝清等首次报道该病，研究证明其为美洲型。PRRS在我国大部分地区均有流行，造成巨大的经济损失。     

猪圆环病毒2型和猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染病例的实验室诊断

为确诊贵阳市某养猪场生猪发病死亡的原因,采集3头病猪的血液、肺脏、肾脏、脾脏、淋巴结病料,采用PCR、qRT-PCR方法进行猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒核酸检测.结果:在血液及组织样品中猪圆环病毒2型核酸检测均为阳性,猪瘟病毒核酸检测均为阴性;在血液样品中猪繁殖与呼吸综合征病毒核酸检测结果为阴性,而...     

检测PRRSV—Ⅰ、PRRSV—Ⅱ和PCV-2多重PCR方法的建立及初步应用

猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virns,PRRSV）欧洲株（PRRSV-Ⅰ）、北关株（PRRSV-Ⅱ）常与猪圆环病毒2型（Porcine Circorirnstype 2,PCV-2）呈混合感染,严重影响养猪业的经济效益。本文根据GenBank上已发表的PRRSV北美型（PRRSV-Ⅰ）、PRRSV欧洲型（PRRSV-Ⅱ）、圆环病毒2型（PCV-2）的基因组全序列,分别设计了3对能特异性扩增PRRSV-Ⅰ、PRRSV-Ⅱ和PCV-2的引物,建立并优化了可同时检测PRRSV-Ⅰ、PRRSV-Ⅱ和PCV-2三种病毒的多重PCR方法,通过对临床病料的检测,证实了此方法具有高特异性、高灵敏度、高效率、低成本的特点,适合大量样本的分析与鉴定。利用该方法能在24h内对样品进行检测并获得结果,因此本方法的建立对这3种病毒的早期快速诊断有十分重要的意义。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒、圆环病毒2型与弓形虫混合感染的诊断及预防

在生猪养殖过程中,猪繁殖与呼吸综合征病毒、圆环病毒2型与弓形虫混合感染的现象较为常见,临床上主要表现为精神不振、食欲下降、皮毛粗乱、呼吸困难、皮肤淤青、体温升高、早产、流产或产死胎等。相较于单一感染,混合感染的生猪传染性更强,治愈难度更大,死亡率更高,往往会给生猪养殖场造成巨大的损失。笔者结合自身生猪养殖管理及当地生猪疫病调研,介绍了以上3种病原体及混合感染的临床症状、病理变化、实验室诊断方法及防预措施,旨在更好的预防生猪疫病的发生,以促进生猪养殖健康发展。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒、圆环病毒2型和衣原体混合感染引起母猪流产的诊断与防治

2018年10月,甘肃省某规模猪场存栏900头不同胎次母猪,在产仔高峰期内突然出现大量流产现象,临产母猪主要表现为产死胎、木乃伊胎、弱仔、畸形胎,平均产生率为26.92%(365/1 356),乳猪平均死淘率高达16.55%(164/991)。为确定病因,采集5头猪病料,包括木乃伊胎1头、死胎1头、流产胎儿2头、7日龄自然死亡弱仔1头,进行猪常见疫病病原学检测。检测结果显示:5头猪的猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型核酸检测均为阳性,4头的衣原体核酸检测为阳性,猪瘟病毒、细小病毒、乙型脑炎病毒、伪狂犬病毒核酸检测均为阴性。结果表明,猪繁殖与呼吸综合征病毒、圆环病毒2型和猪衣原体混合感染是导致该规模场母猪流产的主要原因,因此需要加强混合感染的控制。     

猪圆环病毒2型和胸膜肺炎放线杆菌的混合感染

猪圆环病毒2型（Porcine Circovirus-2，PCV-2）是引发断奶仔猪多系统消耗综合征的主要病原，发病猪表现为呼吸困难、贫血，出现明显的淋巴组织病变和渐进性消瘦。猪胸膜肺炎放线杆菌可引起猪发生以出血性纤维素性胸膜炎为病理特征的传染性胸膜肺炎。2006年4月广西北海某猪场暴发一种热性、全身消耗性疾病，同时伴发呼吸困难、寒颤、下痢等症状。从送检猪的临床症状、病理变化、病毒基因检测及细菌分离培养、鉴定等方面，诊断为PCV-2和胸膜肺炎放线杆菌混合感染，该病的正确诊断为防治该病提供有力的理论依据。     

山东省某猪场仔猪多重混合感染的诊断

2018年3月,山东省青岛市某规模化猪场暴发疫情,每天死亡100余头仔猪。70~80日龄仔猪临床表现为发热、喘气、关节肿大,30~40日龄发病仔猪主要表现为水样腹泻。为确诊引起此次疫情的病原,分析病例发病情况,结合临床症状、病理剖检和实验室诊断,最终判定为猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型及猪流行性腹泻病毒的混合感染,且疑似存在猪链球菌和支气管败血波氏杆菌的混合感染。鉴于猪群存在多种病毒和细菌的混合感染,需要采取科学有效的综合防控措施,定期监测猪群疫病的抗体水平,及时调整免疫程序,防止疫病暴发。     

PCV-2 ORF2和PRRSV GP5双基因共表达重组腺病毒的构建及小鼠免疫试验

为构建猪圆环病毒2型(PCV-2)ORF2和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) GP5双基因共表达重组腺病毒,将扩增的ORF2基因和GP5基因通过IRES元件串联,构建重组腺病毒穿梭质粒.然后用Pme Ⅰ酶切穿梭质粒,使其线性化,将线性化质粒转化pAdeasy-1的BJ5183感受态细胞,同源重组后筛选重组腺病毒质粒,经Pac Ⅰ酶切后转染293A细胞进行包装,获得重组腺病毒.PCR鉴定表明重组腺病毒含有ORF2和GP5基因,Western blot检测结果表明ORF2基因和GP5基因在293A细胞内获得表达.重组腺病毒经293A细胞连续传30代,TCID50稳定为10-9.0/mL.初步动物免疫试验结果表明,该重组腺病毒能够刺激机体分别产生PCV-2和PRRSV的特异性抗体免疫应答反应.该重组腺病毒可以作为PCV-2与PRRSV二联基因工程疫苗研究的候选毒株.