共查询到20条相似文献,搜索用时 0 毫秒
1.
2.
本试验用犊牛睾丸细胞制备猪瘟细胞活疫苗,结果表明,EDTA胰酶加0.4%粉红消化细胞的病毒收获液检测兔子体温效果最好。 相似文献
3.
4.
为生产检验需要,将生长好的BT细胞分别放在37℃、25℃、15℃的温箱中,发现在25℃下,细胞维持到需传传代的最长天数为50-60d,传代前将BT细胞在37℃预热16-24h菌传代,即可获得生长良好的传代细胞。 相似文献
5.
6.
7.
犬肾传代细胞HGPRT缺失株的诱变 总被引:2,自引:1,他引:2
应用8-氮鸟嘌呤(8-Azaguizine),通过大剂量追加细胞法、剂量递增法和紫外线预先照射交替培养法,区获得9株犬肾传代细胞系(MDCK)抗药细胞(剂量分别为20μg/mL和50μg/mL),经HAT系统敏感性试验和6-巯鸟嘌呤抗性鉴定,其中有8株为犬肾传代细胞HG-PRT缺失突变株(MDCK/HGPRT^-)。该突变株细胞Giemsa染色后呈卵圆形,核呈圆形,83世代细胞(MDCK83/HG 相似文献
8.
9.
将猪链球菌2型制苗候选菌株SS2-1和SS2-H在血平板上连续传代至第41代,并分别检测第1代,第11代,第21代,第31代和第41代菌株的菌落及细菌形态,生化特性,溶菌酶释放蛋白(MRP)几胞外因子(EF0等指标。结果,从第1代至第41代,2株细菌的菌落及细菌形态,生化特性,MRP和EF均没有发生变异,这表明SS2-1和SS2-H菌株培养稳定性较好,使用限定代次至少可达41代,可作为理想的疫苗生产菌株。 相似文献
10.
本试验通过建立过氧化氢(H_2O_2)诱导山羊瘤胃上皮传代细胞凋亡模型,研究L-茶氨酸对H_2O_2诱导山羊瘤胃上皮传代细胞凋亡比率及其凋亡通路关键基因表达量的影响。选取42日龄湘东黑山羊的瘤胃上皮传代细胞,培养于含5%胎牛血清(FBS)的DMEM/F12培养基中,待细胞密度达到60%~70%时,随机分为5组,分别为培养基中无额外添加物的对照组、添加800μmol/L H_2O_2的Ⅰ组、添加800μmol/L H_2O_2+4 mmol/L L-茶氨酸的Ⅱ组、添加800μmol/L H_2O_2+8 mmol/L L-茶氨酸的Ⅲ组和添加800μmol/L H_2O_2+16 mmol/L L-茶氨酸的Ⅳ组,每组3个重复。作用12 h后,应用流式细胞术(FCM)检测山羊瘤胃上皮传代细胞凋亡比率,并采用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)对山羊瘤胃上皮传代细胞凋亡通路关键基因半胱氨酸天冬氨酸-3(Caspase-3)、半胱氨酸天冬氨酸-8(Caspase-8)、半胱氨酸天冬氨酸-9(Caspase-9)、Fas相关死亡域蛋白(FADD)和凋亡酶激活因子(Apaf-1)的表达量进行检测。结果显示:1)通过膜联蛋白-V(annexin V)/碘化丙啶(PI)联合染色结果可知,与Ⅰ组相比,各L-茶氨酸添加组(Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组)细胞晚期凋亡比率显著降低(P0.05),且细胞晚期凋亡比率随L-茶氨酸添加浓度的增加逐渐降低。2)通过RT-q PCR检测结果可知,与Ⅰ组相比,各L-茶氨酸添加组Caspase-3、Caspase-9、Apaf-1基因的表达量皆显著降低(P0.05)。由此得出,L-茶氨酸对H_2O_2引起的山羊瘤胃上皮传代细胞凋亡具有一定的保护作用,该结果可为今后研究反刍家畜瘤胃氧化应激损伤机制提供技术支持和理论参考。 相似文献
11.
犬肾(DK)传代细胞中霉形体的分离与鉴定 总被引:1,自引:1,他引:0
取经电镜观察证实有霉形体污染的DK传代细胞,分别接种于霉形体检验用液体、半流体和固体培养基,证明为霉形体混合感染,即该培养物在液体培养基和半流体培养基上,同时显示出水解精氨酸和发酵葡萄糖2种特性,前者使培养基pH上升,后者使pH下降。通过反复挑选单个菌落进行克隆传代和有目的地加入单一种属的霉形体抗血清的方法,将混合的2株霉形体纯化分开。经鉴定,一株为精氨酸霉形体,一株为莱氏无(需)胆甾醇霉形体。 相似文献
12.
13.
14.
15.
为了研究Sf9细胞PHB2蛋白(Sf-PHB2)的功能及其对虾白斑综合症病毒(WSSV)极早期基因ie1的转录调控作用,本研究从昆虫细胞Sf9中扩增sf-phb2基因编码区,克隆至表达载体pET30a中,转化到大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达6His-Sf-PHB2重组蛋白.SDS-PAGE分析表明,表达的重组蛋白以... 相似文献
16.
为进一步证明猪瘟活疫苗(传代细胞源)在猪场实际使用的免疫效力,本试验将中试生产的5批疫苗在广东的广州、韶关地区各选一个猪场进行临床应用试验。按照20日龄首免,60日龄二免的免疫程序,并分别于二免后第28天和第90天从5批疫苗免疫猪中各抽取5头,连同条件相同的对照猪各5头,在广东永顺生物制药股份有限公司负压动物舍进行猪瘟强毒攻击,观察发病死亡情况,评估猪瘟活疫苗(传代细胞源)在猪场实际应用的免疫保护效果。试验结果显示,5批疫苗免疫猪均能有效抵抗猪瘟强毒的攻击,既无死亡,也无猪瘟临床症状。表明在临床条件下应用猪瘟活疫苗(传代细胞源)免疫猪能产生很好的免疫保护力。 相似文献
17.
18.
鸡Bcl—2基因的克隆及其对卵泡闰细胞凋亡的影响 总被引:5,自引:1,他引:4
将鸡的Bcl-2基因克隆到真核表达载体JLV,构建了重组质粒JLVB。0.2μg/孔JLVB重组质粒经脂质体介导转染卵泡颗粒细胞,应用流式细胞术等方法分析了转染Bcl-2基因后原代细胞和传代细胞的生长与凋亡情况。与对照组相比,转染后的传代细胞分裂速度较快(P<0.01),凋亡比率较低,G2/M+S期细胞比例极显著高于对照组(P<0.01)。这些结果表明,Bcl-2基因具有促进细胞分裂、抑制细胞凋亡、延长细胞寿命的作用,这种作用是直接的。在转染时间为12h、DNA量为0.3μg/孔的条件下,较好的脂质体介导用量的1.2μL/孔。 相似文献
19.
IBDV超强毒GX8/99株的细胞适应毒和鸡体传代毒的致病性和VP5基因的比较 总被引:1,自引:0,他引:1
传染性法氏囊病病毒(Infectious Bursal Diseas Virus,IBDV)的超强毒株GX8/99经在鸡胚成纤维细胞(CEF)上连续盲传23代后,细胞适应毒株GXC23时鸡的致病性显著减弱,对4~6周龄SPF鸡的致死率从85%~90%减为0~5%.GXC23在96孔细胞培养板上经2次无限稀释法后得到3个克隆病毒.经SPF鸡回传20代后,相应的毒株GX-2820、GX-4820、GX-5820对SPF鸡的致死率仍维持在0~5%.序列比较表明,GX8/99在传代过程中,其细胞适应毒GXC23有8个碱基突变,其中5个碱基突变导致了氨基酸改变.bp#2 T→C突变,导致传代毒ORF中的起始编码子后移了4个氨基酸.而3个克隆化病毒回鸡20代后致病性不变,这几个位点也保持不变,且与3个疫苗株完全一致.进一步分析表明,有4个超强毒株和4个强毒株的VP5基因的5个位点与GX8/99原始毒相同,而另3个超强毒及6个强毒株与细胞适应毒GXC23一致.这些结果表明,超强毒GX8/99在细胞传代过程中VP5基因上5个氨基酸的变异主要与适应细胞培养相关而与致病性无关. 相似文献
20.