水仙离体培养及植株再生的研究进展

摘 要：水仙离体培养及其再生技术在水仙品种改良、种质资源保存与繁殖、遗传转化等方面发挥着重要作用。本文综述了20世纪70年代以来水仙离体培养及植株再生的研究进展,包括水仙营养器官培养、生殖器官培养、体细胞培养等方面的应用,对水仙离体培养过程中存在的一些问题进行了探讨并对今后的研究方向作下展望。     

贯叶连翘茎段和叶片的离体培养及植株再生研究

以贯叶连翘的叶片和茎段作为外植体,培养在含有不同种类及浓度激素的MS基本培养基上,进行愈伤组织、丛生芽、根的诱导实验,并进行试管苗的移栽。结果表明,2,4-D有利于贯叶连翘愈伤组织的形成;加有6-BA 0.5 mg/L的MS培养基最适合丛生芽的形成;诱导生根较好的培养基是MS+IBA 0.5 mg/L +NAA 0.5 mg/L和MS+IBA 1.0 mg/L。     

辣椒子叶离体培养再生植株

随着收集到的８个商品辣椒品种的子叶外植体在ＰＤ培养基上形成芽丛，转移到ＰＥ培养基上伸长为具２－３个节的茎芽，茎芽在ＰＲ培养基上生根，得到了再生植株。芽分化率达１００％，移栽成活率１００％。多植体切除芽后回到ＰＤ培养基上的反复操作可重复诱导芽的分化，提高繁殖系数。     

光叶楮离体叶片再生植株的研究

将光叶楮离体叶片为外植体．进行不定芽再生植株的研究。MS＋6-BA2．0mg／L（单位下）＋NAA0．1培养基。不定芽再生率达96％。继代繁殖培养基用MS＋6．BA1．0～1．5．配合NAA0．1～0．5效果好。生根培养基用1／2MS＋NAA0．3。生根率达70％以上。     

薄荷离体培养及植株再生的研究

以薄荷茎段为外植体,研究了不同植物激素对薄荷愈伤组织的诱导及其增殖、不定芽分化和诱导生根的影响。结果表明,愈伤诱导最适培养基为MS 6-BA1.5mg/L 2,4-D0.5mg/L NAA0.5mg/L,其愈伤组织生长良好;最佳愈伤增殖培养基为MS NAA1.0mg/L或MS IAA2.0mg/L,其褐化率均较低;最佳诱导分化培养基为MS 6-BA2.0mg/L NAA0.1mg/L,分化率达77%;生根培养基为1/2MS NAA2.0mg/L,且根较为粗壮。     

狭叶红景天再生植株的快速繁育研究

目的:以狭叶红景天的叶柄作为外植体,建立一套狭叶红景天植株的快速繁殖技术.方法:通过选取NAA、6-BA和KT组成的3种植物生长调节剂,设计了L16 (43)正交试验,研究了狭叶红景天叶柄产生不定芽的快速诱导方法,并进一步选用6-BA,NAA和IBA的3种植物生长调节剂组成的培养基进行生根培养研究,最终获得了狭叶红景天再生植株.实验结果表明,狭叶红景天不定芽诱导的最佳培养基为MS+ 6-BA 0.5mg/L+NAA 0.1 mg/L,经过45 d培养后,其不定芽的诱导率为95％;诱导生根的最佳培养基为1/2 MS+IBA 0.5 mg/L,经过50 d培养后,生根率可达87％.     

无籽西瓜子叶离体培养及植株再生研究

以无籽西瓜黑蜜5号无菌苗子叶为材料,对组织培养植株再生的条件进行了详细的研究。研究结果表明：子叶芽诱导的最佳培养基配方为MS＋6-BA3.0mg/L＋NAA0.1mg/L。芽的诱导需要先在黑暗条件下启动,生长分化则须在光下进行。适宜的生根培养基配方为1/2MS＋IAA0.4mg/L和1/2MS＋IBA0.3mg/L。试验初步建立了适用于无籽西瓜遗传转化和快速繁育的子叶再生系统。     

百蕊草离体培养和植株再生体系分析

为了筛选出适合百蕊草阶段式培养的快繁方案,建立较为完善的百蕊草植株再生体系,为后期人工栽培和工厂化育苗提供技术支持.本研究以百蕊草(Thesium chinense Turcz)的茎、叶为外植体,研究不同浓度和种类的激素配比以及外源添加物组合对百蕊草阶段式培养的影响.结果显示,百蕊草愈伤组织诱导的最佳培养基为 MS+0...     

西洋杜鹃叶片离体培养及植株再生

以西洋杜鹃的嫩叶片为外植体,研究了其离体培养和植株再生的过程。结果表明：叶片愈伤组织诱导最佳培养基为Read＋ZT5．0mg／L,可用回归模型y=19．21＋7．32x1来估测西洋杜鹃叶片愈伤组织诱导情况。叶片愈伤组织增殖培养基同初代培养基,继代30d后体积可增为原来的3倍,重量增为原来的2．5～4．5倍。愈伤组织分化的最佳培养基配方为：Read＋ZT1．0mg／L＋NAA0．01mg／L,分化率为87．5％,分化出苗数在12—18株。生根培养基以Read＋IBA1．0mg／L＋NAA2．0mg／L＋ZT 0．2mg／L为好,生根率迭90％以上。炼苗基质选腐殖土：黄沙：珍珠岩：5：1：1为宜,存活率达88．33％。     

洋葱幼蕾离体培养与植株再生的研究

通过对洋葱幼蕾的离体培养试验,探讨了影响洋葱幼营愈伤组织诱导和植株再生的影响因素,即激素浓度和配比、基因型、低温预处理,花蕾大小和移栽条件,基本掌握了影响洋葱幼蕾愈伤组织诱导和植株再生的关键技术,建立起一套高频率的再生体系,为进一步利用洋葱组织培养技术奠定了基础。     

棉花组织培养直接胚胎发生和植株再生

选用陆地棉(GossypiumhirsutumL.)品种中棉所12,首次直接诱导获得棉花体细胞胚胎发生,并获得了再生植株。结果表明,激素是影响棉花体细胞胚胎直接发生的重要因素,单独使用ZT可直接诱导获得棉花胚性愈伤组织和胚状体,2,4-D的添加虽有利于愈伤组织的形成,但却没能直接诱导获得胚性愈伤组织,IAA的添加削弱了ZT的诱导效果。下胚轴、子叶和胚根直接诱导获得胚胎发生的能力不同,其中以子叶的分化能力最强,胚根次之,下胚轴较差。实验中,棉花体细胞胚胎直接发生的最高频率为11.42%,占诱导获得总愈伤组织的44.44%。     

降香黄檀愈伤组织培养与植株再生研究

为了实现降香黄檀工厂化快速繁殖和扩大栽培,并为降香黄檀抗寒基因导入打下一定的基础,以降香黄檀无菌实生苗茎段、叶片、根尖为外植体,MS为基本培养基,对各器官愈伤组织诱导与分化的最适培养基成分进行了研究。结果表明,可从降香黄檀无菌实生苗茎段、叶片、根尖成功地进行愈伤组织培养和植株再生。茎段、叶片、根尖诱导愈伤组织的最适培养基分别为1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.10 mg/L、1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.10 mg/L和1/4MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L;茎段、叶片、根尖的愈伤组织诱导丛生芽最适培养基分别为1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 4.0 mg/L、1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 3.5 mg/L和1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 3.5 mg/L;茎段、叶片、根尖来源的单芽,其最佳生根培养基分别为MS+NAA 1.5 mg/L、MS+NAA 1.0 mg/L和MS+NAA 2.0 mg/L。比较茎段、叶片与根尖的愈伤组织诱导率、丛生芽诱导率和单芽生根率,得出以无菌实生苗根尖作为外植体是降香黄檀愈伤组织培养和植株再生的最佳选择。     

枫杨组织培养快繁技术研究

为了实现枫杨优良种源和变异个体的种质保存和快速繁殖,选用枫杨带腋芽半木质化茎段为外植体,进行组织培养技术研究。结果表明：枫杨外植体适宜消毒处理为75%酒精30 s+0.1% HgCl2 5 min,外植体接种成功率可达87.5%;枫杨愈伤增殖基本培养基以MS为宜,而试管芽苗增殖和根诱导DKW培养基明显优于MS、B5;试管芽苗增殖适宜培养基为(1.0~2.0) mg/L 6-BA+1.0 mg/L KT+(0.3~0.5) mg/L IBA,20~25天增殖4倍以上;根诱导以1/2 DKW+(0.5~0.7) mg/L NAA和1/2 DKW+0.5 mg/L NAA+0.2 mg/L IAA为宜,生根率82%以上。     

辣椒细胞质雄性不育系离体培养植株再生研究

以辣椒细胞质雄性不育系9704A和8214A为试材，取无菌苗真叶进行培养。研究了不同浓度的IAA,6-BA和GA3对不定芽的诱导和伸长作用，结果表明：MS+6-BA5.0 mg/L +IAA1.0 mg/L有利于不定芽的诱导。MB+IAA1.0 mg/ L +6-BA3.0 mg/L + GA32.0 mg/L +AgNO310.0 mg/L有利于芽的伸长。将2.0 cm以上的芽转入生根培养基诱导不定根发现：1/2Ms+IAA0.3~0.5 mg/L有利于不定根的诱导。     

膨珊瑚离体培养及形态解剖探究

本研究以膨珊瑚茎段为外植体,采用正交试验设计,进行芽诱导离体培养研究;并应用徒手切片技术观察同化枝的形态解剖结构,分析其对生境的适应性。研究表明:膨珊瑚茎段最佳灭菌处理为75%酒精30 s+0.1%升汞11 min,最佳外植体为半木质化茎段(上段)或顶端;芽诱导的最佳培养基为1/2 MS+6-BA1.2 mg/L+NAA 0.1 mg/L;芽诱导效果最佳为半木质化茎段(上段);芽继代增殖最佳培养基为3/4 MS+ZT1.0 mg/L+NAA 0.02 mg/L+GA3 0.3 mg/L;膨珊瑚叶片退化,茎枝具有同化功能,皮层及髓部发达,含有较大的薄壁细胞,供其贮藏营养物质与水份。     

油菜薹茎段髓部原生质体培养再生植株

以油菜品种“蜀杂6号”的薹茎段髓部为材料分离原生质体,产量一般在每g鲜重2×10~6个左右。在每L附加1.5mgBA、0.4mgNAA、1.5mg2,4-D、200mg水解酪蛋白、250mg木糖、0.3M蔗糖和0.1M葡萄糖的Nitsch培养基中,对原生质体进行液体浅层静置培养。2～7天内原生质体出现第一次分裂,分裂频率最高可达49.2％。培养15天后逐渐形成肉眼可见的小愈伤组织。21天时将培养基改换成每L附加2mgBA、0.2mg 2,4-D和3％蔗糖的MS扩增培养基,45天后可形成5mm左右的愈伤组织。大于2mm的愈伤组织可在每L含有1.0mgBA/3.0mgZT和0.1mgNAA的MS琼脂培养基上分化出芽,分化频率可达36.7％。在1/2MS无激素培养基中,1cm左右的分化芽有85.9％生根,形成完整的植株。     

中国白菜小孢子离体培养和双单倍体植株再生

摘 要: 采用略加修改的NLN培养基（无机大量元素1/2）和甘蓝型油菜小孢子的胚状体诱导方法,培养了5个中国菜用小白菜品种和1个中国大白菜品种的小孢子,进行了双单倍体的诱导。结果表明,不同品种的小孢子产胚量差异很大,在接种的6个基因型中,有5个诱导出胚,诱导成功率83.33％ 。其中的中萁青抗热605产胚量最高,是8.676个胚／10蕾。这些胚在添加了NAA和PP333（多效唑）的B5培养基发育成健壮的小植株。关于6个基因型的小孢子胚胎发生能力,还有待进一步研究。