一种快速简便的植物病毒检测方法

一种快速简便的植物病毒检测方法张建军,莫晓凤（拱北动植物检疫局５１９１０２０）日本大阪大学的ＳａｔｏｓｈｉＴ。等人,１９ｇ６年报道了一种新的植物病毒血清学检测方法──免疫滤纸显色法,该法是对Ｔｓｕｄａ等人１９９２年报道的免疫滤纸显色法（Ｉｍｍｕｎｏｆ...     

加强植物病毒检测防止有害生物入侵

1　植物病毒检测重要性及迫切性植物病毒检疫是种苗检疫的重点。至今报道的 90 0多种植物病毒中 ,至少三分之一可以由 1种或多种植物繁殖材料传带而作远距离传播 ;反之 ,多数植物种苗可以传带一种或多种病毒。由于植物病毒可以随着引进植物种苗进行远距离的传播。一旦传入新的地区 ,很难根除。并且可以随植物繁殖扩大传给后代而长期存活、持续地对植物产生危害 ,其重要性已经被形容为生物的“定时炸弹”。至今对于植物病毒还没有有效的检疫处理措施。目前的植物种苗引进 90 %以上是属于商业性的。如果在口岸检疫过程中发现危险性的植物病毒 …     

一种新型病毒检测技术

一种新型病毒检测技术（河北农业技术师范学院河北昌黎０６６６００）刘品贤有关植物病毒的诊断和鉴定方法是很多的，常用的有免疫扩做法、凝聚法、酶联免疫鉴定法（ＥＬＩＳＡ）、荧光抗体法、直接荧光诊断法（ＤＦＤ）、免疫吸附电镜法等。应用上述方法对病毒进行检测，...     

植物寄生线虫体内病毒检测方法研究进展

线虫作为植物病毒重要的传播媒介之一,引起病毒病的传播和蔓延。本文综述了近年来线虫介体体内植物病毒的检测方法,有电子显微镜检测法、血清学检测法、PCR检测法等,以期为我国开展该方面工作提供参考。     

蚕豆染色病毒检测技术标准化研究初报

通过对蚕豆染色病毒生物学、血清学、形态学的研究,初步提出诊断 BBSV的标准程序为 SPA-ELISA 测定阳性反应的样品,再进行生物测定和免疫电镜观察,均为阳性者,即可定为此样品携带 BBSV。本试验筛选出蚕豆成胡10号、昆明白皮豆、豌豆A_(256)和 A_(907)为 BBSV 的鉴别寄主,其潜育期短、症状稳定,不易与其他病毒病害混淆;肯定了1990年从叙利亚进口蚕豆资源中分离到的 BBSV 提纯制剂,制备所得抗血清,经测定和国际通用的 BBSV 抗血清反应一致;提出利用 A 蛋白酶联检测 BBSV 的技术参数及其运用结果;免疫电镜诱捕法观察到病毒粒体,修饰法看到粒体外附着的外套。     

一种植物线虫的快速分离方法

目前 ,我国口岸检验检疫机关对于检疫性植物线虫的分离 ,大多数仍然采用贝尔曼漏斗法。该方法的优点是灵敏度高 ,分离物杂质少 ;缺点是分离时间较长 ,大约需要1 0～ 2 4ｈ ,分离效果才达到最佳 ,而且仅限分离活动性的蠕虫形线虫 ,对死虫、不活动的线虫 (如胞囊线虫和根结线虫的雌虫 )则是无效的。我们经过长期的研究与探索 ,找出了一种植物线虫的快速分离方法。将植物线虫的分离时间缩短至 40ｍｉｎ ,并且分离线虫的数量与贝尔曼漏斗法 1 0～ 2 4ｈ的分离数量接近。这种方法适用于目前检疫对象名单上所有的检疫性的线虫分离 ,满足了口岸植物…     

基于PCR的植物病毒检测技术研究进展

植物病毒是引起植物重大病害的病原之一.植物病毒病危害大、防治难度高,一旦感染病毒终生携带,而早期的检测成为病毒预防及治理的先决条件.基于基因扩增技术的病毒检测方法,由于检测迅速、敏感性高、成本低等优点而被广泛应用于各种病毒的检测.本文对常用的基于PCR的病毒检测方法进行了综述,并对其优缺点进行了比较,以期为选择合适的植...     

电印迹免疫分析（EBIA）及其在植物病毒检测和鉴定中的应用

对植物组织中低浓度或极不稳定或很难提取的病毒检测和鉴定,已成为植物病毒学中一个越来越重要的问题。免疫电镜(ISEM)和酶联免疫吸附测定(ELISA)等灵敏的现代血清学技术的发展和应用,虽然缓和了这个问题,但由于容易忽视较弱的交叉反应或不能从病毒一抗体之间真正的特异性反应中区分寄主蛋白和其相应抗体之间的非特异性反应,因此,上述问题总不能令人满意地解决。最近,O＇Donnell等(1982)介绍了一种简便、有效、能很好地解决上述问题的新技术——电印迹免疫分析     

热带兰组织培养及其试管苗病毒检测

为减少从国外大量引进热带兰试管苗，同时为脱毒工作作准备，我们对进口的多种热带兰进行了组织培养，摸索出能年产十几万至百万株试管苗的配方。对自行组培的试管苗和旅检截留的试管苗作了病毒检测，结果均检出建兰花叶病毒（ＣｙＭＶ），建议加强对进口试管苗的检疫和开展无毒试管苗生产。     

近期发现的果树类病毒及其检测方法

近年来,美国、日本、西班牙、澳大利亚等许多国家,对一些病原不明、曾认为是由病毒引起的果树病害重新进行了研究,先后从柑桔、椰子、梨、苹果、葡萄、李、桃等多种果树上发现了类病毒(Viroid)或类似于类病毒的病原物、(表1)。我国也已报道了2种果树类病毒,即     

检测植物病毒的三种血清学方法敏感性的比较

 以芋花叶病毒和豇豆花叶病毒为试验材料,进行了酶联免疫吸附试验,免疫吸附电子显微术和点免疫结合试验检测植物病毒的敏感性的研究。无论是检测感染组织粗汁液还是纯化的病毒,点免疫结合试验均优于酶联免疫吸附试验和免疫吸附电子显微术。在使用羟基吲(口乃木)磷酸盐和氮蓝四唑为碱性磷酸酶的底物时,点免疫结合试验检测纯化的豇豆花叶病毒的可测感度为0.35ng,芋花叶病毒为0.83ng。对三种检测植物病毒的血清学方法进行了比较,并讨论了点免疫结合试验的优点。     

高通量测序技术在植物及昆虫病毒检测中的应用

在过去的十几年中,测序技术的发展为分子生物学领域带来了革命性的变化。第二代测序(next-generation sequencing,NGS)技术以快速、高灵敏性、高通量、非序列依赖性等特点极大地促进了病毒诊断学研究领域的发展。NGS技术可以在不了解病毒的生物学特性、血清学特点及基因组信息情况下快速检测未知病毒。通过对总核酸样本进行NGS可以获得某个特定生态环境或种植系统中的所有病毒序列,即病毒组。通过大量的NGS数据可以分析寄主中某一病毒的基因组变化、构建病毒的准种以及研究病毒的进化和起源。本文介绍了高通量测序的方法在植物和昆虫病毒检测中的应用。     

离体叶片检测种传植物病原细菌技术

寄主离体叶片和子叶用于检测棉花角斑病和大豆疫病,灵敏度分别达6×10~2cfu/ml和2.12×10~1cfu/ml;用于种子直接检测,三天内可得到结果。较之传统的分离方法优势显著,且方法简便适用。     

浅谈目前植物病毒检疫中存在的问题

目前,植物病毒的检疫工作,特别是血清学检测工作已在各港口所、各省市大专院校、农科院等单位普遍开展起来。很多单位为了实验的需要,自己制备抗血清,一些生物制品研究所也相继推出适应各种检测需要的试剂。下面就十几年的工作实践谈谈自己的看法。     

进境兰花的病毒检测

采用生物测定、血清学测定及电镜观察三种方法对进境的多种兰花进行病毒检测,结果表明:这些兰花均不同程度地带有建兰花叶病毒CyMV)、齿兰环斑病毒(ORSV)和黄瓜花叶病毒(CMV)。由于进口兰花带毒的普遍性,考虑到兰花较高的观赏价值和经济价值,建议加强兰花及其试管苗的病毒检疫;针对试管苗含毒可能较低的特点,有必要应用生物测定、血清学检测、电镜观察等多种检测方法相互印证。     

一种基于RPA的番茄褪绿病毒检测方法

番茄褪绿病毒Tomato chlorosis virus(ToCV)引起番茄褪绿病毒病,给番茄生产造成严重危害。开发快速准确的检测方法对该病害的防控具有重要意义。利用番茄褪绿病毒外壳蛋白(CP)基因序列,设计特异性引物,建立了ToCV的重组酶聚合酶等温扩增(recombinase polymerase amplification, RPA)检测方法,同时分析了该方法的灵敏度和特异性。结果表明,建立的ToCV-RPA方法在38℃恒温下40 min可从ToCV阳性的番茄样品中扩增出246 bp的特异性条带。扩增时间短,对设备要求低,且与番茄其他病毒无交叉反应,特异性好,灵敏度可达到PCR方法的10倍,适用于ToCV的快速检测。     

一种植物病毒检测新方法—纳米上转换荧光技术

随着大豆进口量的日益增加,大豆携带病毒传入我国的风险在不断增大,高效、快速地进行植物病毒检测,防止外来有害生物入侵,是目前各口岸植物检疫工作的重点。本文介绍了一种植物病毒检测的新方法—纳米上转换荧光技术。该技术是一种利用磁性纳米颗粒(magnetic nanoparticles, MNP)进行病毒分离、富集和定位;同时引入上转换荧光(up converting phosphor, UCP)材料作为标记物的免疫检测方法,具有高度的抗干扰性、多元性、稳定性和安全性等特点。     

植物病毒新的分类与命名方法

植物病毒新的分类与命名方法陈建生宁玉霞（河南省许昌林科所，许昌４６１０００）国际植物病毒分类委员会（ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＣｏｍｍｉｔｅｅｏｎＶｉｒｕｓＴａｘｏｎｏｍｙ，ＩＣＴＶ）第九次大会１９９３年在英国格拉斯哥召开，综述了本次大会所承认事项...     

植物病毒检测新技术研究进展

本文主要介绍了酶联免疫吸附测定、快速免疫滤纸测定、免疫胶体金技术、毛细管区带电泳、免疫PCR等血清学方法和PCR、分子信标、实时RT-PCR、核酸杂交等分子生物学方法的原理及特点,并重点介绍了近几年发展起来的免疫胶体金技术、毛细管区带电泳、分子信标和TaqMan实时RT-PCR等植物病毒检测技术.     

病毒的种传机制,检测及对品质和检疫的含义

以下两篇文章系著名国际种传病毒学家 Dr.L.Bos 在有关会议的发言。现征得本人同意,我们请刘军军、李明福二位同志翻译成中文,其中由于资料不全,李明福同志只摘译了全文的很少一部分,现一并发表于此,以使读者了解目前世界病毒学家所关注的某些问题。