浸种及接种内生真菌对茅苍术种子发芽与幼苗生长的影响

探讨了不同浸种时间和温度以及接种内生真菌对茅苍术种子发芽率、幼苗生长的影响,测定了接种内生真菌后茅苍术的有关生理指标,分析了其挥发油含量.结果表明,最佳浸种温度为20℃,最佳浸种时间为48 h;接种的小菌核菌(AL3)、小克银汉霉(AL4)、AL11(未鉴定菌株)、孔球孢霉(AL12)均提高了茅苍术种子发芽率和发芽势,其中以AL11处理的效果最好;AL3、AL11、AL12处理的茅苍术幼苗生物量分别比对照提高了46.92％、24.23％、34.23％;AL3、AL12处理的茅苍术根数分别比对照提高了75.91％、65.79％,AL4、AL11处理对茅苍术生长的影响不显著;AL11、AL12处理的茅苍术SOD和POD含量均显著高于对照;接种内生真菌后茅苍术挥发油4种主要活性成分总含量均提高,4种组分的相对百分含量有所改变.     

营养条件对茅苍术生长与挥发油含量的影响

为了解营养条件对茅苍术生长及挥发油含量的影响,本试验采用不同梯度浓度营养液和单种营养元素全部或部分亏缺营养液分别浇灌沙培茅苍术,测试相应处理的苍术生长情况和挥发油含量.试验结果表明:40%浓度的营养液最有利于茅苍术生长;茅苍术在肥料匮乏的条件下会大量生根,以寻找养分;氮、磷、钾、镁、硫比例为1 : 1 : 1 : 2 : 2的营养液配比更有利于茅苍术根茎生长;部分元素的单个缺失会导致茅苍术根茎生长量及挥发油含量的变化.     

内生真菌AL12对茅苍术代谢产物器官分配的影响(英文)

[目的]研究内生真菌孔球孢霉AL12号菌株对茅苍术组培苗生长及其代谢产物器官分配的影响。[方法]将内生真菌AL12与茅苍术组培苗进行共培养,比较感染前后茅苍术叶、根重量差异,检测接种AL12的组培苗中纤维素、半纤维素、木质素以及可溶性糖在叶片和根中的分布,并利用气相色谱分析挥发油组分。[结果]茅苍术与AL12共生后,与对照组相比,其组培苗叶片和根的鲜重和干重均有明显增加,且叶片木质素和可溶性糖含量增加,根部纤维素、半纤维素、木质素、可溶性糖及挥发油含量均有提高。[结论]该研究结果表明与AL12共生有利于茅苍术根部发育且能促使药用成分向根中转移、积累。     

丛枝菌根真菌对茅苍术实生苗生长及根腐病发生的影响

根腐病是目前茅苍术栽培中危害最严重的病害之一。丛枝菌根真菌（arbuscular mycorrhizal fungi, AMF）能与90%以上的维管植物互惠共生,对植物土传病害有一定的抑制作用。为明确AMF对茅苍术根腐病的防治效果,试验采用盆栽法研究了Glomus mosseae（Gm）、Glomus intraradices（Gi）和Glomus etunicatum（Ge）3种AMF对1年生茅苍术苗生长及根腐病发生的影响。结果表明：3个AMF接种组的茅苍术苗菌根侵染率由高到低依次为Gm（60.44%）、Ge（55.89%）和Gi（52.33%）;3种AMF均能显著促进茅苍术苗的营养生长,以Ge促生长效果最为显著,但Gm对茅苍术苗地下部分物质积累的促进作用更大,Gm组茅苍术苗地下部分鲜重和干重的菌根依赖性分别达260.34%和285.45%;另外,3种AMF均能降低茅苍术苗根腐病的发生,减轻病情指数,提高其根系抗病相关酶苯丙氨酸解氨酶（PAL）、β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶的活性,其中G. mosseae和G. etunicatum防治效果较好,防效分别为53.15%和62.94%。AMF能促进茅苍术苗的营养生长,减轻其根腐病害的发生,G. mosseae和G. etunicatum可作为茅苍术根腐病防治的备选生物菌剂进行深入的研究与应用。     

3种前体化合物对茅苍术组培苗中主要挥发油成分积累的影响(英文)

[目的]研究三种前体化合物对茅苍术组培苗中主要挥发油成分积累的影响,以期为人工栽培茅苍术的品质提高提供帮助。[方法]在茅苍术组培苗MS生根培养基中添加不同化合物,对组培苗进行一段时间培养后,超声提取植株所含的挥发油,利用气相色谱法测定挥发油中苍术酮、苍术醇、β-桉叶醇和苍术素的量。[结果]添加木糖、异戊二烯和四氢呋喃对茅苍术组培苗的生长指标、挥发油得率及四种组分相对百分含量均有影响。6g/L木糖组优化培养基中,检出挥发油中苍术酮、β-桉叶醇的相对百分含量分别达到4.23%和56.34%,分别比对照高出1.41和1.66个百分点;四氢呋喃组优化培养基中苍术酮、苍术醇和苍术素的相对百分含量均有提高,四氢呋喃浓度为0.07g/L时总挥发油含量较对照相比增加49.97%;添加异戊二烯到培养基中虽能提高苍术酮的相对百分含量,但对总挥发油含量的积累起到一定的抑制作用,较对照分别减少23.67%、31.06%和7.10%。[结论]添加木糖和四氢呋喃对茅苍术组培苗中主要挥发油的积累具有促进作用,而异戊二烯则具有抑制作用。     

茅苍术与内生菌互作信号对其活性成分的影响

为了了解内生菌对茅苍术道地性的影响,本文综述了各种内生菌引发的植物信号变化的异同,以及茅苍术内生菌在促进茅苍术生长以及多萜合成中的作用。内生菌可能被植物细胞表面受体所识别,通过活性氧、钙离子、一氧化氮3种第二信使以及多种植物激素信号引发植物代谢变化,进而累积次生代谢产物。受到影响的植物信号包括水杨酸、茉莉酸、脱落酸和乙烯。研究发现,内生菌的接种可能引起多种植物信号传递的变化,并且产生挥发油含量差异。     

茅苍术生长动态及解剖结构研究

为了研究茅苍术生长动态及其解剖结构,对茅苍术1年生播种苗采样分析,测定了不同时期根茎直径、地上部分和地下部分干物质质量和鲜物质质量、根冠比等指标,同时对与药材品质相关的结构进行解剖分析。结果表明:茅苍术根茎直径的生长呈持续增长趋势,5~6月和8月为快速增长阶段。茅苍术根冠比在7月16日达到最大,总干物质质量的生长动态符合S形生长曲线。茅苍术叶片中可溶性糖含量先上升后下降,在5月7日达到最大。油室密度6月初达到最多,然后迅速下降,油室直径呈现持续上升趋势。7月是茅苍术有效成分苍术素积累较快的时期。     

4种类型茅苍术生长的比较

现代研究表明,茅苍术有保肝、抗菌、抗病毒、抑制中枢及促进胃肠道蠕动等作用。笔者对江苏镇江不同叶型茅苍术的光合速率及地上部分各参数进行比较,为研究茅苍术育种问题提供依据。     

不同光周期对茅苍术营养生长期生长及生理生化指标的影响

[目的]探讨不同光周期对营养生长期茅苍术生长的影响,为人工规范化栽培茅苍术确定适宜的光周期提供参考依据.[方法]以一年生茅苍术种苗为试验材料,在人工气候室内进行试验,按照光照时间由短到长设4个光周期处理,分别为光照10h、光照12 h(CK)、光照14h和光照16h.每隔7d测定茅苍术的株高、茎粗和叶片数等生长指标及叶绿素含量、可溶性蛋白含量和过氧化物酶(POD)活性等生理生化指标;试验第30 d,以水蒸气蒸馏法提取茅苍术根茎中的挥发油,并计算不同处理挥发油的提取率.[结果]随着处理时间的延长,各处理组茅苍术的株高整体呈上升趋势,处理后期(第21~28 d)株高随光周期的延长呈不断增加趋势,光照16h处理出现最高值(38.40 cm).各处理茅苍术幼苗的生理指标在处理初期均无显著差异(P>0.05),随着处理时间的延长,不同处理间差异增大,至第28 d时,茎粗、叶片数、可溶性蛋白含量、叶绿素含量及POD活性均随光周期的延长呈先增后减的变化趋势,在光照14h时达最高值,分别为2.37 mm、25.17片、182.67 mg/g、5.90 mg/g和4898.96 U/gFW;茅苍术根茎中的挥发油提取率同样随光周期的延长呈先升后降的变化趋势,光照14h处理的挥发油提取率最高,为11.06 mL/g.[结论]在光照14 h处理下,一年生茅苍术种苗的株高相对较高,茎粗最粗,叶片数最多,且叶绿素和可溶性蛋白含量及挥发油提取率最高,是茅苍术营养生长期较适宜的光周期.     

茅苍术叶片可培养内生细菌多样性及其促生潜力

对江苏省道地药材茅苍术叶片可培养内生细菌的多样性及其固氮、解磷、解钾、产生长素的能力进行研究.依据菌落形态的不同,共分离得到52株内生细菌.能正常传代培养的45株内生细菌经ARDRA分析后归入14个聚类簇,簇内菌株的BOX-PCR指纹图谱相似度不高,在属水平上显示出茅苍术内生细菌丰富的多样性.各聚类簇代表菌株16S rDNA的序列分析表明分离得到的内生细菌与泛菌属、微杆菌属、短杆菌属、农杆菌属、假单胞菌属、芽孢杆菌属细菌亲缘关系相近,优势内生细菌与假单胞菌属细菌亲缘关系相近.45株能正常传代培养的内生细菌中,有10株能够在无氮培养基上正常生长,具固氮潜力.使用nifH基因通用引物对其基因组进行扩增后,除ALEB 33外,其它9株内生细菌均可获得与nifH基因片段大小相近的条带.分别使用NBRIP培养基和蒙金娜有机磷培养基筛选后获得19株和15株能够溶解磷酸钙和卵磷脂的内生细菌,其中ALEB 43溶解无机磷的能力最强,达(251.43±6.55) mg/L;ALEB 4A溶解有机磷的能力最强,达(23.63±1.46) mg/L.部分内生细菌溶解无机磷的能力与其产酸能力呈正相关,而菌株溶解有机磷的能力却无此相关性.通过硅酸盐培养基的筛选,获得具有解钾潜力的菌株24株.43株内生细菌能够将色氨酸转化为生长素,其中ALEB 44产生长素的能力最强,达(268.44±10.12) μg/mL.本研究首次揭示了江苏省道地药材茅苍术体内丰富的内生细菌资源及其促生长潜力,对进一步阐述茅苍术与内生菌之间的相互关系具有重要意义.     

光照强度对茅苍术根茎生物量及挥发油含量的影响

以来自湖北英山的2年生茅苍术为材料,研究了光照强度对茅苍术根茎生长量及挥发油含量的影响.研究结果表明:光照强度的变化导致了茅苍术根茎生物量及挥发油含量的变化.在本试验条件下,轻度遮阴(光照强度72.9%)最有利于茅苍术根茎生物量的增长及根茎中挥发油含量的提高.     

合欢内生真菌诱导产孢研究

[目的]寻找促使植物内生真菌无性菌丝产生孢子的方法,为其鉴定提供依据。[方法]从采集到的合欢组织中分离、纯化得到5株形态稳定的内生真菌,对它们进行诱导产孢试验,并对所产生的孢子进行鉴定。[结果]5株内生真菌在常规培养条件下均不产生分生孢子。通过不同类型培养基及不同pH值条件诱导真菌产孢方法,使其中3株真菌（1、3、5号菌）不同程度产生了分生孢子,通过分生孢子的形态鉴定了合欢内生真菌1、3、5号菌分别属于头孢霉属（Cephalosporium）、镰孢属（Fusarium）和头孢霉属（Cephalosporium）。[结论]试验证明通过诱导内生真菌产孢的方法并借助形态学依据来鉴定无性的内生真菌是可行的。     

禾本科植物内生真菌研究16:内生真菌Neotyphodium sinicum对宿主鹅观草生长的影响

选择含有内生真菌的鹅观草,采集其成熟种子,经过南京的6—9月室温处理后冷藏。经过发芽、育苗以及田间栽培试验,调查并分析这些植物的长势、分蘖数、株高、茎宽、叶宽的变化,最后检测这些鹅观草植株中内生真菌的有无。结果表明:含内生真菌(EI)的鹅观草植株群苗期生长比较旺盛、分蘖比较多,但在成熟期株高、茎秆直径及叶宽与不含菌植株无显著差异。从EI鹅观草植株中随机分离获得4个内生真菌菌株,其形态学特征和系统发育学特征显示,分离菌株均为Neotyphodium sinicum Wang,Ji et Kang。本研究首次证明了在田间条件下内生真菌N.sinicum能促进其宿主鹅观草的苗期生长和分蘖,揭示了禾本科植物/内生真菌共生体可作为麦类作物育种利用的可能性。     

不同覆盖物对茅苍术出苗率及幼苗生长状况的影响

[目的]研究覆盖物对茅苍术出苗率及幼苗生长状况的影响。[方法]将茅苍术播种后采用稻草和枯落松针覆盖苗床(对照组裸露),培养一段时间后,测定土壤含水量、温度、pH和茅苍术出苗率,并观察茅苍术幼苗的生长状况。[结果]稻草和枯落松针覆盖处理的茅苍术出苗率极显著高于对照(P0.01);其中,松针处理效果最好,出苗率高达79.03%,土壤日平均温度变化范围在14.7~20.9℃,且随着覆盖天数的增加土壤酸碱度逐渐降低,接近茅苍术的野生土壤环境的酸碱度;枯落松针覆盖处理和稻草处理的茅苍术幼苗株高、叶长、叶宽、单株重和叶绿素含量等各种生物学性状指标均高于对照,其中枯落松针处理的幼苗各项指标均高于稻草处理。[结论]培育茅苍术幼苗时,以枯落松针覆盖既能提高出苗率,又能达到壮苗的标准。     

内生真菌印度梨形孢对乙草胺残留动态的影响

前期研究发现,印度梨形孢(Piriformospora indica)与油菜拌种可以有效缓解乙草胺药害。为进一步研究其作用机制,采用菌丝生长速率法、菌丝悬浮培养法测定乙草胺对印度梨形孢生长的影响,并用气相色谱质谱联用法(GC-MS)检测印度梨形孢菌液、施用印度梨形孢的土壤以及使用印度梨形孢拌种的油菜植株中乙草胺的残留动态。结果表明,当培养基中乙草胺质量浓度为200 mg/L时,其对固体培养基中印度梨形孢生长速率的相对抑制率为98.12%,对悬浮培养液中印度梨形孢鲜质量和干质量的相对抑制率分别为95.11%和96.40%。当乙草胺质量浓度分别为20、50、100 mg/L时,在不添加印度梨形孢的悬浮培养液中,乙草胺的半衰期均为115.52 d,添加印度梨形孢菌饼后,乙草胺的半衰期缩短至9 d以下;每千克土壤添加2 g印度梨形孢菌丝后,土壤中50、100、200 mg/kg乙草胺的半衰期分别为10.35、11.18、11.55 d,均低于未添加印度梨形孢处理的半衰期(11.18、11.95、12.38 d);同样,采用印度梨形孢拌种的油菜植株中乙草胺的半衰期均短于未进行拌种的处理。综上,内生真菌印度梨形孢的生长受乙草胺影响而减缓,但其自身也可降解培养基中的乙草胺,并能加速土壤及油菜植株中乙草胺的代谢。     

外源氯化钙对高温胁迫下茅苍术生长生理指标及叶片关键酶基因表达的影响

[目的]探讨外源氯化钙对高温下茅苍术生长生理指标及叶片关键酶基因表达的影响,以期为缓解茅苍术高温伤害及其耐热生长提供参考依据.[方法]以二年生茅苍术种苗为试验材料,采用盆栽方式,以不添加氯化钙的超纯水(0 mmol/L)为对照,采用无水氯化钙配制4个不同浓度的氯化钙溶液(5、10、15和20 mmol/L)对茅苍术进行高温前喷施处理,高温胁迫5d后分别统计各处理叶片的黄叶数量,取样进行生理指标和叶绿素荧光参数测定,并测定各处理叶片的关键酶基因表达量.[结果]经5 d高温胁迫后,与对照相比,5~10 mmol/L氯化钙溶液处理能有效减少茅苍术叶片黄化现象,抑制叶绿素分解,叶片超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性及叶绿素含量显著增加(P<0.05,下同),丙二醛(MDA)含量和相对电导率显著降低,叶绿素荧光参数整体呈上升趋势,同时还能正向调节法呢基焦磷酸合成酶(FPPS)和3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGR)基因表达量,综合作用效果尤以10 mmol/L氯化钙溶液处理最佳,其POD活性(2070.526 U/g)、叶绿素含量(1.906 mg/g)、PSII最大量子效率(0.144)、非光化学猝灭系数(1.946)、表观电子传递速率(31.509)及FPPS基因表达量(1.809)均为最高.当氯化钙溶液浓度增大至15~20 mmol/L时,茅苍术外观、生理指标及关键酶基因表达等均受到抑制,缓解高温胁迫效果不佳.[结论]低浓度(5~10 mmol/L)的外源氯化钙可增强茅苍术的耐热性,有效缓解高温胁迫对其生长造成的伤害,有助于其生长.     

铁皮石斛内生真菌的分离鉴定及其促宿主生长作用

利用微生物学传统分离培养方法从野生铁皮石斛根部分离内生真菌,依据形态学和真菌18SrDNA ITS序列分析对菌株进行分类,并采用正交设计法优化菌丝体液体培养基,考察发酵液对铁皮石斛组培苗生长的影响,以期为人工种植铁皮石斛提供优良菌肥。结果显示,共分离到4株内生真菌,其中TPSH1、TPSH2、TPSH3为镰刀菌属(Fusarium),TPSH4为柱霉属(Scytalidi-um)。优化后确定培养液的组分为:麦麸25g/L,土豆20g/L,蔗糖10g/L,1/2MS。菌株发酵液分别喷施铁皮石斛组培苗8周后,与对照(1/2MS)相比,以TPSH4菌株液体发酵8d,对铁皮石斛生长促进作用明显,成活率提高30.43%,植株高度增加了31.21%,鲜质量增加40.61%。TPSH4为具有促宿主生长作用的新菌株,其发酵液可作为菌肥,用以促进人工栽培铁皮石斛的生长。     

中国油菜内生真菌一新记录种—垣孢埃里砖隔孢

报道了一个中国新记录种—垣孢埃里砖隔孢(EmbellisiachlamydosporaSimmons),该种为从油菜(BrassicanapusL.)中分离到的一种内生真菌。文中对垣孢埃里砖隔孢的形态特征作了描述,并附有形态图。     

内生真菌Y118对促进两面针生长和品质提升的效应

【目的】分析内生真菌Y118对促进两面针生长和品质提升的影响,为提高两面针药材的综合效益提供参考依据。【方法】施加内生真菌Y118固体发酵培养基进行两面针植株盆栽试验,分别于两面针不同生长阶段测定其植株的生长指标(鲜重、株高、茎基宽、茎中宽及根、茎、叶的鲜重和干重),以色谱法测定两面针根部的氯化两面针碱和白屈菜红碱含量。【结果】真菌Y118处理组培养3个月时,两面针植株的鲜重、株高、茎基宽和茎中宽分别为34.76 g、34.47 cm、6.54 mm和4.25 mm,均极显著高于对照组(P<0.01,下同),根、茎、叶的鲜重和干重均显著(P<0.05,下同)或极显著增加;培养6个月时,两面针植株的鲜重和株高分别为68.33 g和47.85 cm,均极显著高于对照组,根、茎、叶的鲜重和干重均极显著增加;培养9个月时,两面针植株的鲜重、株高和茎基宽分别为73.80 g、49.22 cm和9.79 mm,均极显著高于对照组,根、茎、叶的鲜重和干重均极显著增加;培养12个月时,两面针植株的鲜重为78.71 g,极显著高于对照组,根、茎、叶的鲜重和干重也显著或极显著增加。共培养9和1...     

内生真菌DC-11的分离筛选及对致病疫霉的抑制作用

为了获得对致病疫霉有拮抗作用的植物内生真菌,采用常规的分离方法从健康的芹菜及大葱植株中分离内生真菌,并以对峙培养法筛选对致病疫霉有较强抑制作用的菌株。结果显示:分离获得的41株内生真菌与致病疫霉对峙培养后,有11个菌株的抑制率达到50%以上,以QC-18的抑菌率最高(84.21%),其次是QC-13(79.90%);无菌体发酵液活性表明DC-11菌株的抑菌作用最强(84.6%),其次是DC-1(62%);进一步试验发现,经较高浓度(1.91mg/mL)DC-11菌株的发酵液处理后的致病疫霉菌不能恢复生长,在马铃薯块茎切片上也失去了致病能力;镜检发现在0.51mg/mL浓度处理下菌丝体形态明显发生畸变。这些结果表明DC-11菌株在未来防治马铃薯晚疫病方面有一定的应用潜力。