紫锥菊不定根对LPS诱导的小鼠巨噬细胞促炎介质的影响

为探明紫锥菊(Echinacea purpurea(Linn.)Moench)不定根的抗炎效果,试验研究了不定根提取物对脂多糖诱导的小鼠腹腔巨噬细胞促炎介质释放的影响。结果表明:不同浓度的不定根提取物对促炎介质的抑制程度有所不同,不定根提取物浓度为25～100μg/mL时,对白介素-6的释放无抑制效果,但对一氧化氮、肿瘤坏死因子-α、前列腺素E_2和白介素-1β等促炎介质的释放量具有显著抑制作用,同时也明显抑制了一氧化氮合酶和环氧化酶-2的表达。     

东北刺人参不定根对LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞促炎介质的影响

东北刺人参是五加科兼具观赏和药用价值的珍贵濒危植物。为了促进东北刺人参产品的开发,在抗炎相关产品生产中以不定根代替短缺的野生植株作为植物材料。该研究利用诱导子未处理和处理的生物反应器培养的东北刺人参不定根水提物处理小鼠腹腔巨噬细胞,通过检测巨噬细胞中一氧化氮(NO)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-1β(IL-1β)3种促炎介质的水平,探明不定根的抗炎活性。研究表明:2种东北刺人参不定根提取物中总酚和总黄酮含量有很大差异,诱导子处理的不定根水提物(E 2)中总酚含量是诱导子未处理不定根水提物(E 1)的3.2倍,而总黄酮含量是2.7倍。2种不定根提取物对NO和TNF-α及IL-1β的影响不同,E2对3种促炎介质均有显著的抑制作用,但E1只抑制NO的生成,对TNF-α及IL-1β没有影响,E2的抗炎效果高于E1。因此,今后在进行抗炎相关产品生产中,可利用在生物反应器培养中经诱导子处理的东北刺人参不定根作为原材料。     

白色紫锥菊不定根提取工艺对酪氨酸酶活性抑制的影响

为筛选白色紫锥菊不定根提取物抑制酪氨酸酶活性的最佳提取工艺,该试验在不同提取时间、提取温度、提取次数和料液比条件下对不定根进行了提取,并通过调查各提取物对酪氨酸酶活性抑制率,确定各因素适宜水平。根据单因素试验结果进行了正交设计试验,优化了提取条件。结果表明:在提取时间2h、提取温度70℃、提取次数1次、料液比为1∶40(g∶mL)的条件下提取的白色紫锥菊不定根提取物对酪氨酸酶活性的抑制效果最佳,抑制率为57.4%。     

几种因素对悬浮培养白色紫锥菊不定根生物量和有效物质积累的影响

为优化白色紫锥菊不定根悬浮培养体系,从而获得较多有效物质的积累,以白色紫锥菊不定根为试验材料,探究培养基中PO_4~(3-)浓度、总氮浓度、NO_3~--NH_4~+对白色紫锥菊不定根生物量及有效物质积累的影响。结果表明:当培养基中PO_4~(3-)浓度为0.94 mmol/L、总氮浓度为45 mmol/L、NO_3~--NH_4~+为37.5-7.5 mmol/L时,悬浮培养白色紫锥菊不定根生物量及有效物质均达到最大值,其中酚、黄酮生产量分别为253.78、178.08 mg/L。因此,通过调节培养基成分配比,可提供生物量及有效物质含量高的不定根为原材料,为进一步大规模培养白色紫锥菊不定根奠定了理论基础。     

紫松果菊不定根提取工艺对酪氨酸酶活性抑制的影响

为提高紫松果菊不定根提取物对酪氨酸酶活性的抑制作用,试验对不定根提取物浓度、料液比、提取次数、提取温度和提取时间等条件进行了筛选。结果表明:当提取物浓度为0.8 mg/mL时,酪氨酸酶活性的抑制率高于其他浓度处理,IC_(50)为0.74 mg/mL。筛选出的最佳提取条件为料液比1∶50(g∶mL)、提取次数2次、提取温度30℃、提取时间1.5 h,此条件下酪氨酸酶活性的抑制率达到64%。     

紫锥菊提取物对小鼠免疫功能的影响

将60只昆明系小鼠随机分为3组,每组20只,雌雄各半.分别灌喂0 g/kg(对照组)、2 g/kg(低剂量组)、4 g/kg(高剂量组)的紫锥菊提取物15 d,以研究紫锥菊提取物对小鼠免疫功能的影响.结果显示,高剂量组小鼠脾脏指数显著高于对照组(P<0.05);高剂量组小鼠血清GLO和IgG水平显著高于对照组(P<0.05);试验组小鼠血清CHOL水平显著低于对照组(P<0.05);注射大肠杆菌后,试验组小鼠的死亡时间极显著较对照组延长(P<0.01).结果表明,紫锥菊提取物能有效提高小鼠脾脏增重,提高小鼠血清免疫球蛋白水平和降低总胆固醇水平,增强对病菌的抵抗力,具有提高小鼠免疫能力和降低血脂的功能.     

紫锥菊多糖对LPS损伤后IEC-6细胞的增殖作用

[目的]为了研究紫锥菊多糖对LPS损伤后小肠上皮细胞株IEC-6细胞增殖的影响。[方法]以IEC-6细胞为研究对象,将LPS 10μg/ml分别与EPS 50、100、200、500μg/ml先后加入培养液,采用MTT方法检测细胞增殖率,观察紫锥菊多糖对该细胞增殖的影响。[结果]紫锥菊多糖100、500μg/ml对LPS损伤后的IEC-6细胞分别在48、72 h具有促增殖作用,因此紫锥菊多糖对LPS损伤后的IEC-6细胞具有保护作用。[结论]紫锥菊多糖预处理能增强LPS损伤后IEC-6细胞的增殖活性,能降低LPS对IEC-6细胞的损伤而显现出对细胞的保护作用。     

紫锥菊提取物对环磷酰胺免疫抑制小鼠免疫功能影响研究

将雄性小鼠150只随机分成正常对照组、免疫抑制对照组、紫锥菊提取物高、中、低剂量组,每组3个重复,每个重复10只。除正常对照组外,各组小鼠连续3 d腹腔注射100 mg·kg~(-1)BW环磷酰胺,建立免疫抑制模型小鼠。建模后高、中、低剂量组分别以240、120、60 mg·kg~(-1)BW水平,正常对照组和免疫抑制对照组给予等量的纯化水,连续灌胃给药30 d。结果表明,中、高剂量组小鼠碳廓清能力与免疫抑制组比较有显著性增高(P<0.05);各剂量组免疫器官指数有显著性增高(P<0.05);中、高剂量组血清溶血素值有显著性提高(P<0.05),高剂量组脾淋巴细胞增殖转化能力有显著性增强(P<0.05)。说明紫锥菊提取物具有调节免疫抑制小鼠非特异性和特异性免疫的作用,是一种效果极好的免疫调节剂。     

紫锥菊提取物对环磷酰胺免疫抑制小鼠免疫功能影响研究

将雄性小鼠150只随机分成正常对照组、免疫抑制对照组、紫锥菊提取物高、中、低剂量组,每组3个重复,每个重复10只。除正常对照组外,各组小鼠连续3 d腹腔注射100 mg·kg~(-1)BW环磷酰胺,建立免疫抑制模型小鼠。建模后高、中、低剂量组分别以240、120、60 mg·kg~(-1)BW水平,正常对照组和免疫抑制对照组给予等量的纯化水,连续灌胃给药30 d。结果表明,中、高剂量组小鼠碳廓清能力与免疫抑制组比较有显著性增高(P0.05);各剂量组免疫器官指数有显著性增高(P0.05);中、高剂量组血清溶血素值有显著性提高(P0.05),高剂量组脾淋巴细胞增殖转化能力有显著性增强(P0.05)。说明紫锥菊提取物具有调节免疫抑制小鼠非特异性和特异性免疫的作用,是一种效果极好的免疫调节剂。     

ZD制剂对小鼠巨噬细胞促炎性介质的影响

目的:研究ZD制剂在体外的抗炎机制。方法:通过脂多糖(LPS)刺激RAW264.7细胞系建立炎症细胞模型,使用5种不同浓度的ZD制剂进行试验,分别采用Griess反应测定细胞上清液中NO水平,ELISA法检测ZD制剂干预前后细胞上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6的浓度。结果:用ZD制剂干预后,上清液中NO、TNF-α、IL-1β、IL-6含量与模型组相比均有下降,并存在剂量依赖关系。结论:因此,中药复方汤剂ZD制剂的体外抗炎作用机理之一是抑制NO、TNF-α、IL-1β、IL-6等炎性介质的产生。     

紫锥菊遗传多样性的SRAP分析

采用SRAP分子标记技术,对14份引种紫锥菊材料的遗传多样性进行分析。结果显示,9对SRAP引物组合扩增出171条带,多态性比率为80.7%,说明SRAP可应用于紫锥菊种内遗传多样性分析;聚类分析表明紫锥菊样品间的亲缘关系与种质来源地存在一定的相关性。     

紫锥菊的作用及研究现状

2012年6月,紫锥菊及其制剂被农业部批准为我国目前唯一一类天然药物新兽药。该新兽药证书的获得,标志着我国新型绿色兽药研制的开始,填补了化学抗病毒药在养殖业禁用之后的空白。本文主要综述了紫锥菊生物学功能以及对动物疾病防治上的研究现状。     

紫锥菊多糖对LPS损伤后IEC-6分泌IL-6mRNA的影响

[目的]探讨紫锥菊多糖(EPS)在内毒素(LPS)损伤后IEC-6分泌IL-6mRNA的影响.[方法]采用Trizon试剂提取总RNA,经RT-PCR扩增后,进行琼脂糖凝胶电泳及图像分析.[结果]当LPS刺激IEC-6细胞时,IL-6mRNA分泌增加.而EPS可以抑制这种作用,并且具有剂量依赖性,50 μg/ml EPS可以部分抑制LPS刺激IEC-6产生的IL-6水平,而100、500μg/mlEPS随着浓度的增加,其抑制IL-6的水平逐渐增加;将IEC-6用50、100、200、500 μg/ml EPS预处理24h,然后用LPS(10 μg/ml)刺激1、4h,采用RT-PCR方法分析得,LPS诱导IL-6mRNA表达被EPS抑制且具有时间依赖性.[结论]证实了LPS作用于小肠上皮细胞后,其分泌的细胞因子IL-6mRNA产生增多,而EPS可以抑制LPS刺激细胞分泌的IL-6mRNA的产生从而起到肠道粘膜的保护作用,并且这种抑制作用具有浓度及时间依赖性.     

紫锥菊多糖对LPS损伤后IEC-6分泌TNF-αmRNA的影响

[目的]研究紫锥菊多糖(EPS)在内毒素(LPS)损伤小肠上皮细胞(IEC-6)时对肿瘤坏死因子(TNF)表达的影响,以探讨 EPS对损伤细胞的作用机制。[方法]采用 TRIzon试剂提取总RNA,RT-PCR扩增 TNF-α mRNA,琼脂糖凝胶电泳,并进行电泳及图像分析。[结果]50μg/ml EPS 可以部分抑制 LPS 刺激 IEC-6产生的TNF-α mRNA水平,而200、500μg/ml EPS随着浓度的增加,其抑制 TNF-α mRNA的水平逐渐增加;将 IEC-6分别用50、100、200及500μg/ml EPS预处理24 h,然后用10μg/ml LPS刺激达1、4 h,采用 RT-PCR方法分析得, LPS诱导 TNF-α mRNA表达被 EPS有效地抑制,4 h的抑制率高于1 h的抑制率。[结论]EPS通过抑制 LPS刺激细胞分泌 TNF-α mRNA的产生而起到肠道粘膜的保护作用,且 EPS对这种抑制作用具有浓度及时间依赖性。     

提高紫锥菊种子发芽率方法的研究

以紫锥菊的种子为研究对象,采用4℃冷藏处理7 d后37℃温水浸种、硼酸浸种、吲哚乙酸(IAA)浸种、不同的乙醇浓度结合37℃温水浸种以及直播等方式对紫锥菊种子的发芽率进行了分析。结果表明,4℃冷藏处理7 d后37℃温水浸种、硼酸浸种、吲哚乙酸浸种均能提高种子的发芽率。其中,IAA(40 mg·L-1)浸种的发芽率最高,达到97.5%;其次是0.1%硼酸浸种、4℃冷藏7 d后37℃温水浸泡12 h,分别达到93.3%、92.7%。在温室直播育苗中,蛭石基质高于泥炭基质的种子发芽率,分别达到89%和76%。综合以上分析可以得出,温室直播育苗宜采用蛭石基质,田间播种前宜选用IAA(40 mg·L-1)浸种24 h。     

不同表型紫锥菊的形态学标记研究

测量不同表型紫锥菊样品的形态学性状数据,并进行相关系数计算和聚类分析。结果表明,不同样品在诸多数量性状和假质量性状上存在差异;部分形态学性状之间存在一定的相关性;相同生境下生长的紫锥菊样品聚为一个大类。     

药用植物紫锥菊叶的显微鉴别研究

本试验通过对药用植物紫锥菊叶的表皮、横切面和粉末进行系统的显微观察研究,描述了其微观特征,给出了紫锥菊叶上、下表面的气孔指数。该结果不仅可用于紫锥菊与同属其余两种药用植物(狭叶紫锥菊、淡紫松果菊)的显微鉴别,也补充了紫锥菊叶研究的不足,为紫锥菊的进一步研究提供更加全面的参考资料。     

紫锥菊根乙醇提取物的抗炎作用研究

目的:观察紫锥菊根乙醇提取物的抗炎作用.方法:采用二甲苯致小白鼠耳肿胀试验、蛋清致小鼠足跖肿胀试验、小鼠腹腔毛细血管通透性试验、小鼠棉球肉芽肿试验.结果:紫锥菊根乙醇提取物10,5 g/kg可显著减轻二甲苯所致小鼠耳肿胀程度、抑制醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增加、抑制小鼠棉球肉芽肿的形成(p<0.01,p<0.05);紫锥菊根乙醇提取物10 g/kg能减轻蛋清所致小鼠足跖肿胀度(p<0.05).结论:紫锥菊根乙醇提取物具有较好的抗炎作用.

Abstract：

To examine the anti-inflammatory effect of the echinacea (Echinacea) root extract.Methods: Experiments of ear edema induced by xylene, hind paw edema induced by fresh egg white, capil-lary permeability of abdominal cavity induced by acetic acid and granuloma induced by cotton ball in mice were performed. Results: Having been treated with echinacea root extract at 10 or 5 g·kg~(-1), the mice showed that the ear edema was reduced, capillary permeability of abdominal cavity and the formation of granuloma were inhibited (p<0.01,p<0.05); and the edema of hind paw was reduced when the mice were treated with echinacea root extract at 10 g·kg~(-1)(p<0.05). Conclusion: Echinacea root extract has satisfactory anti-inflammatory effect.     

药用植物紫锥菊的组织培养与快速繁殖

以紫锥菊种子萌发的子叶为外植体，进行组织培养试验。确定了紫锥菊快繁体系的最适培养条件：（1）种子发芽培养基：MS＋IAA0．1mg／L＋6-BA 1．0mg／L；（2）愈伤诱导培养基：MS＋6-BA 1．0mg／L；（3）不定芽分化培养基：MS＋NAA 0．2mg／L＋6-BA 2．0mg／L；（4）生根培养基：1／2MS＋NAA 0．2mg／L。     

紫锥菊与黄芪多糖对环磷酰胺致免疫功能低下小鼠的影响

紫锥菊多糖与黄芪多糖均具有抗菌、抗病毒、增强细胞免疫和体液免疫的作用。为了解紫锥菊多糖(EPS)与黄芪多糖(APS)不同剂量组合对环磷酰胺(CTX)致免疫功能低下小鼠的影响,本试验将60只4~6周龄雌性清洁级ICR小鼠适应饲喂一周后,再次称重,按照S行随机分成10组,每组6只;空白对照组腹腔注射0.2ml/d PBS缓冲液,其他各组腹腔注射0.2ml 80mg/(kg·d)CTX供试液,连续给药3d。而后,空白对照组和阳性对照组连续5d灌胃等体积PBS缓冲液,其余8组小鼠连续5d分别灌胃高、中剂量的EPS、APS和EPS+APS不同剂量组合。最后一次灌喂结束24h后分别进行小鼠称重,采取每只小鼠股动脉血0.5ml于1.5mlEP管中,用于血清检测;处死小鼠,消毒后取其脾脏进行称重,用于脾细胞增殖试验。结果显示,CTX造模3d后造模小鼠均出现体重明显下降,造模成功;连续5d灌胃不同剂量组合药液后,模型组体重恢复明显比空白组和CTX阳性对照组慢;检测出模型组小鼠血清IgG、IgM抗体水平明显低于空白对照组;脾细胞增殖不显著,说明给药后免疫增强效果不显著。结果表明,紫锥菊和黄芪多糖剂量组合设计不到位时难以增强小鼠的免疫机能。试验有可能是因为不同配伍给药疗程太短及操作失误等原因没能体现出紫锥菊多糖与黄芪多糖配伍对免疫抑制小鼠的免疫调节作用。