真菌几丁质酶及其在植物真菌病害防治中的作用

真菌几丁质酶在几丁质资源利用和植物真菌病害防治中有广阔的应用前景。文中概述了真菌几丁质酶的特性、作用机制及其在植物真菌病害防治中的作用,并对真菌几丁质酶利用存在的问题进行了探讨。     

几丁质酶对果蔬采后病害生物防治的研究进展

几丁质酶作为一种用于生物防治的天然溶菌酶类,具有抑真菌效果好、无毒副作用等特点。对几丁质酶概况、防治果蔬采后病害效果、作用机理及应用途径进行综述,分析讨论了目前几丁质酶在果蔬采后病害防治应用中存在的问题及今后的发展应用。     

几丁质酶在植物病害生物防治中的应用

主要对几丁质酶的特性、功能及其在植物真菌病害防治中的应用进行了综合论述。在此基础上,对几丁质酶在植物病害生物防治中的应用前景进行了展望。     

抗源蛋白质在植物基因工程中的应用

近十年来,随着植物分子生物学技术的快速发展,植物抗病基因工程已成为热门课题,例如抗真菌病害基因工程、抗细菌病害基因工程和抗病毒病害基因工程等。在抗真菌病害基因工程中,研究最多的是两种抗真菌病原蛋白质———几丁质酶和β-１,３-葡聚糖酶以及将两种蛋白基因导入作物,通过基因表达产生几丁质酶或葡聚糖酶,达到防治真菌病害的目的。一、几丁质酶和β-１,３-葡聚糖酶的生化特性几丁质酶和β-１,３-葡聚糖酶通常都是纯蛋白,几丁质酶的分子量在２５～４０ＫＤａ之间,β-１,３-葡聚糖酶的分子量为３２～３７ＫＤａ。它们和其他蛋白质一样…     

枯草杆菌B18菌株酶类抑菌物质分析研究初报

报道了枯草杆菌B18菌株在人工培养条件下可分泌产生几丁质酶和β—1，3葡聚糖酶。植物真菌病害防治研究中，几丁质酶、β—1，3葡聚糖酶已被证明为具有抗病能力的防御酶，可以分解病原真菌细胞壁，杀死病原菌从而达到防病目的。通过对枯草杆菌B18菌株代谢产物中儿丁质酶β—1，3葡聚糖两生化测定，证实了该菌株在人工培养条件下能够产生具有活性的几丁质酶和β—1，3葡聚糖酶这两种两类，为该菌株抗菌机理提供了理论依据。     

植物几丁质酶及其基因工程研究进展

几丁质酶是广泛存在于微生物和植物体内的一类蛋白质,它能催化真菌细胞壁的重要成分———几丁质的水解,从而抑制真菌的生长增殖,提高植物的抗真菌能力。近年来,随着对其作用机理、生化性质、表达调控的深入研究,用几丁质酶基因转化植株正日益成为植物防御真菌病害的...     

西洋参和人参病原真菌菌体对放线菌2种水解酶的诱导

【目的】研究特定拮抗放线菌对西洋参人参土传病害病原真菌的接触抗菌机理。【方法】以5株西洋参、人参土传病害病原真菌菌体为惟一碳源,用液体培养及3,5二硝基水杨酸（DNS）法研究5株供试病原真菌对9株拮抗放线菌几丁质酶和纤维素酶合成的诱导作用;采用搭片法,观察9株拮抗放线菌与5株供试病原真菌菌丝间的相互作用。【结果】①以5株病原真菌菌体为惟一碳源时,可诱导9株拮抗放线菌合成几丁质酶和纤维素酶;9株放线菌的几丁质酶和纤维素酶活性分别为7.17～11.58和6.14～21.20 U,其中西洋参恶疫霉菌体对9株放线菌几丁质酶、纤维素酶合成的诱导作用强于其他病原真菌;②拮抗放线菌Act11、Act13、Act24及D141的菌丝与供试病原真菌菌丝接触时,对西洋参锈腐病菌、人参锈腐病菌菌丝有明显的溶解作用。【结论】以5株供试病原真菌菌体为惟一碳源时,可诱导9株拮抗放线菌合成几丁质酶和纤维素酶;供试拮抗放线菌与西洋参病原菌接触时的抗菌作用,是通过放线菌产生几丁质酶和纤维素酶,破坏细胞壁,使病原真菌菌丝溶解的方式完成的。     

西洋参和人参病原真菌菌体对放线菌2种水解酶的诱导

【目的】研究特定拮抗放线菌对西洋参人参土传病害病原真菌的接触抗菌机理。【方法】以5株西洋参、人参土传病害病原真菌菌体为惟一碳源,用液体培养及3,5二硝基水杨酸(DNS)法研究5株供试病原真菌对9株拮抗放线菌几丁质酶和纤维素酶合成的诱导作用;采用搭片法,观察9株拮抗放线菌与5株供试病原真菌菌丝间的相互作用。【结果】①以5株病原真菌菌体为惟一碳源时,可诱导9株拮抗放线菌合成几丁质酶和纤维素酶;9株放线菌的几丁质酶和纤维素酶活性分别为7.17~11.58和6.14~21.20 U,其中西洋参恶疫霉菌体对9株放线菌几丁质酶、纤维素酶合成的诱导作用强于其他病原真菌;②拮抗放线菌Act11、Act13、Act24及D141的菌丝与供试病原真菌菌丝接触时,对西洋参锈腐病菌、人参锈腐病菌菌丝有明显的溶解作用。【结论】以5株供试病原真菌菌体为惟一碳源时,可诱导9株拮抗放线菌合成几丁质酶和纤维素酶;供试拮抗放线菌与西洋参病原菌接触时的抗菌作用,是通过放线菌产生几丁质酶和纤维素酶,破坏细胞壁,使病原真菌菌丝溶解的方式完成的。     

微生物几丁质酶及其在植物病害防治中的作用

几丁质酶广泛存在于植物、动物及微生物细胞和组织中,参与多种生理过程。研究发现许多动物、植物、微生物都可以产生几丁质酶。笔者主要对微生物几丁质酶的特性、功能及几丁质酶在植物真茵病害防治中的应用方面进行了综合论述,并对几丁质酶在植物病害生物防治和抗病基因工程中的应用前景进行了展望。     

微生物几丁质酶在植物线虫病害防治等领域的应用

几丁质酶在防治由真菌、昆虫及线虫等低等生物引起的植物病虫害中发挥着重要的作用。对微生物几丁质酶在植物寄生线虫病害和其它领域中的应用等方面的现状及今后的发展方向进行了综述,以期微生物几丁质酶能够得到更加广泛地研究和利用,并将其应用于植物寄生线虫等病虫害的生物防治。     

植物几丁质酶及应用研究进展

几丁质酶作为一种重要的病程相关蛋白,一直是植物抗菌基因工程的研究热点之一。本文综述了植物几丁质酶的特性、分类、生物学作用以及基因的表达调控,重点介绍了植物几丁质酶的研究应用进展。随着研究的深入,植物几丁质酶在多个领域的应用研究也越来越受到关注,有着广阔的发展前景。     

植物几丁质酶及其应用研究进展

几丁质酶是高等植物普遍存在的一种重要的病程相关蛋白,近年来被广泛应用于植物抗病基因工程的研究.本文概述了国内外有关植物几丁质酶的研究情况,介绍了几丁质酶的特性、结构、分类、细胞学定位和功能及几丁质酶基因的克隆与其在植物基因工程中的应用.     

Transgenic Plants with Enhanced Resistance to the Fungal Pathogen Rhizoctonia solani

The production of enzymes capable of degrading the cell walls of invading phytopathogenic fungi is an important component of the defense response of plants. The timing of this natural host defense mechanism was modified to produce fungal-resistant plants. Transgenic tobacco seedlings constitutively expressing a bean chitinase gene under control of the cauliflower mosaic virus 35S promoter showed an increased ability to survive in soil infested with the fungal pathogen Rhizoctonia solani and delayed development of disease symptoms.     

朱砂叶螨几丁质酶TecCht2基因的克隆及特征分析

【目的】拟克隆朱砂叶螨几丁质代谢中的关键基因几丁质酶基因,并对其进行特征分析。【方法】利用转录组拼接技术对朱砂叶螨转录组进行拼接,根据叶螨几丁质酶序列通过BLAST找到朱砂叶螨几丁质酶相似序列,设计PCR引物,进行朱砂叶螨几丁质酶基因克隆,分析其详细特征。利用SWISS MODEL预测其蛋白结构,特别是催化功能区的结构。【结果】测序分析确认为朱砂叶螨几丁质酶基因序列,并提交到GeneBank(KY705296),其开放阅读框为1 875bp,编码624个氨基酸,C端有几丁质结合区。根据新的几丁质酶分类,判定TecCht2为Ⅵ型几丁质酶,其结构具有典型的几丁质酶结构特征。【结论】本研究克隆得到的朱砂叶螨几丁质酶基因,为今后几丁质酶功能和用于害螨防治研究奠定基础。     

Resistance identification of bivalent fungi-resistant genes transformed soybean to Phytophthora sojae

Soybean is one of the most important sources of edible oil and proteins in the world.However,it suffers from many kinds of fungal diseases which is a major limiting factor in soybean production.The fungal disease can be effectively controlled by breeding plant cultivars with genetic transformation.In this study,the resistance to Phytophthora sojae of five bivalent transgenic soybean lines was identified using the hypocotyls inoculation technique.The lines were the T,of the transgenic soybean which were transformed with kidney bean chitinase gene and barley ribosome inactivating protein gene,and were positive by Southern Blot analysis.The resistance difference was studied through comparing the death percentage of transgenic soybean with the control.The results showed that four lines were more resistant to P.sojae,whereas other one had no significant difference in comparison with the control.These transgenic soybean lines with enhanced resistance to P.sojae will be useful in soybean resistance breeding.     

华山松疱锈病的重寄生真菌(深绿木霉)中几丁质酶基因cDNA片段的克隆(英文)

[Objective] The aim of this study was to isolate chitinase gene from Trichoderma atroviride strain SS003. [Method] With the aeciospore wall of armandii pine blister rust as inducer, chitinase gene was induced to express in Trichoderma atroviride cells. The cDNA fragment of chitinase gene was cloned by RT-PCR approach. [Result] The activity of chitinase induced reached 40.17 μg/10 min; and the specific fragment amplified was 834 bp in length and proved to be the fragment of chitinase gene by sequencing and sequence analysis. [Conclusion] The result showed the feasibility of isolating the full length of chitinase gene and its transformation, and further producing chitinase.     

华山松疱锈病的重寄生真菌(深绿木霉)中几丁质酶基因cDNA片段的克隆

[目的]分离深绿木霉S5003中的几丁质酶基因,为获得高抗病的转基因植株奠定基础。[方法]采用华山松疱锈病的锈孢子壁作为诱导物,诱导深绿木霉SS003中几丁质酶基因的表达,并通过lit—PER方法扩增得到几丁质酶基因片段。[结果]锈孢子壁可诱导出高活性（40．17μg／10min）的几丁质酶,PCR扩增得到了长度为834bp的特异片段,经序列测定及分析显示该片段为几丁质酶基因片段。[结论]深绿木霉SS003的几丁质酶基因片段的获得,为分离全长基因以及进一步利用该基因生产几丁质酶以及进行基因转化提供了可能。     

苏云金芽孢杆菌几丁质酶基因chiA在枯草芽孢杆菌中的分泌表达

[目的]研究来源于苏云金芽孢杆菌的几丁质酶基因chiA在枯草芽孢杆菌中的表达情况。[方法]以苏云金芽孢杆菌染色体DNA为模板,PCR扩增获取几丁质酶基因chiA,将其与枯草芽孢杆菌表达载体pHSG连接,构建重组菌,经IPTG诱导后,检测培养液中的几丁质酶活性。[结果]扩增得到几丁质酶基因chiA大小为2.5 kb。构建的重组菌对底物[4-MU-(GlcNAc)3]显示出一定的水解活性,培养液酶活约为2.8 U/ml,而pHSG空质粒转化子在同样条件下其培养液没有明显酶活。该重组酶的最适pH值为6.5,最适反应温度为50℃,与苏云金芽孢杆菌自身产生的几丁质酶性质一致。[结论]几丁质酶基因chiA能在枯草芽孢杆菌中成功表达,表达产物可成功分泌到细胞外。     

来源于Chaetomium cupreum的几丁质酶chi58基因克隆及特性分析

以角毛壳菌cDNA文库中获得的几丁质酶基因片段(GenBank Accn:DV546055)为基础,用反向PCR技术克隆出该基因的全长cDNA序列,命名为chi58。其开放阅读框(ORF)1602bp,编码533个氨基酸组成的多肽,蛋白分子量为58kD,理论等电点为4.47。序列分析表明,该基因由2个内含子和3个外显子组成。经BlastP分析,chi58基因的氨基酸序列的保守性不高,与其相似性最高的是球毛壳菌(Chaetomium globosum XM001230073),相似性为75%。表明该基因是一条新发现的几丁质酶家族基因。该序列已收录于GenBank,登录号为EF026977,DQ886936。     

抗真菌转基因水稻对稻田靶标病害和非靶标病虫害的影响

【目的】评价抗真菌转基因水稻对靶标真菌病害的抗性和稻田非靶标病虫害发生的影响。【方法】以过表达水稻酸性几丁质酶基因（RAC22）和水稻碱性几丁质酶基因（RCH10）及转化苜蓿β-1,3-葡聚糖酶基因（β-Glu）和大麦核糖体失活蛋白基因（B-RIP）的四价抗真菌转基因水稻品系E122-1和E127-1以及对照非转基因亲本E32为材料,通过温室接种和田间调查开展E122-1和E127-1对稻瘟病、稻曲病和胡麻叶斑病等靶标真菌病害的抗性和对白叶枯病、细菌性条斑病、三化螟和稻纵卷叶螟等非靶标病虫害的影响。【结果】E122-1和E127-1对稻瘟病菌株的抗性比对照明显提高,同时,E122-1和E127-1田间发生稻曲病和胡麻叶斑病的带病株率和病情指数比对照显著降低,而两者田间发生白叶枯病和细菌性条斑病的感病株率和病情指数,发生三化螟的枯心株率和发生稻纵卷叶螟的卷叶株率与对照相比无显著差异。在抗白叶枯病的抗性植株中,E122-1和E127-1的0级植株数量显著高于对照,3级植株数量显著低于对照。【结论】E122-1和E127-1对稻瘟病、稻曲病和胡麻叶斑病具有较好的抗性水平,田间种植,相比对照,不会显著引发白叶枯病、细菌性条斑病、三化螟和稻纵卷叶螟等非靶标病虫害的上升。