重瓣东方百合Double surprise离体快繁技术体系的建立

为探讨东方百合新品种Double surprise的组培快繁技术,以其花瓣为初级外植体,以初级外植体诱导形成的无菌苗鳞片和叶片作为次级外植体,分别探讨了外植体诱导、不定芽增殖、组培苗生根以及炼苗移栽的较优条件。结果表明:花瓣诱导不定芽的较优培养基为MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.3mg·L-1,诱导率可达86.67%,诱导系数为2.73;MS+TDZ2.0mg·L-1+NAA0.5mg·L-1为诱导无菌苗鳞片和叶片直接产生不定芽的较优培养基,不定芽诱导率分别为88.89%和91.11%,诱导系数分别为6.67和5.67;MS+PIC1.0mg·L-1+TDZ0.5mg·L-1为无菌苗鳞片间接诱导愈伤组织的较优培养基,愈伤组织诱导率和分化系数分别为90.00%和3.27;MS+PIC 1.0 mg·L-1+TDZ 0.1 mg·L-1为无菌苗叶片间接诱导愈伤组织的较优培养基,愈伤组织诱导率和分化系数分别为93.33%和3.70;较优的不定芽增殖培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.3 mg·L-1;不定芽生根的较优培养基为1/2MS+IBA 1.0 mg·L-1;草炭∶蛭石∶珍珠岩(体积比)=1∶1∶1的混合基质为Double surprise较优移栽基质,成活率可达88%。     

应用TDZ优化生菜再生体系的建立

以生菜(Lactuca sativa L.)栽培品种香港玻璃生菜为试验材料建立了高频再生快繁体系,研究了不同消毒方式对种子消毒效果及无菌苗生长的影响,探讨了不同激素水平和培养基对子叶愈伤组织诱导、再分化及诱导生根的关系。结果如下:种子在70%酒精处理60 s,2%Na Cl O消毒10 min后,播种到MS培养基上种子发芽率最高,达98%,且无菌苗生长好;外植体宜选生长3~5 d的生菜无菌苗子叶,适宜不定芽分化的最优条件组合为MS+0.1 mg·L-1TDZ+0.1 mg·L-1NAA,不定芽分化率高达83.3%,分化指数为7.7,MS+0.3 mg·L-16-BA+0.1 mg·L-1NAA适宜其继代扩繁培养;NAA和IAA复合使用有利于生根,最适生根培养基为1/2MS+0.05 mg·L-1NAA+0.5 mg·L-1IAA。     

白皮松成熟胚不定芽诱导分化技术的优化

以白皮松成熟胚为外植体进行不定芽诱导分化技术的优化,以此建立白皮松的再生体系.探讨了基本培养基、激素配比、糖浓度和不同摆放方式及不定芽继代增殖等问题.结果表明:成熟胚不定芽诱导以MS培养基最好,不定芽的平均增值系数超过4;MS中加入6-BA3～4 mg·L-1+NAA0.1～0.5 mg·L-1时不定芽的诱导率接近60%,平均分化系数可达6.0以上; 35 g·L-1的蔗糖浓度能有效的防止不定芽的玻璃化;垂直摆放有利于不定芽的分化;不定芽继代增值的最佳培养基为:MS+6-BA 0.3 mg·L-1 + NAA 0.05 mg·L-1.     

灵宝大枣无菌外植体的建立及茎段不定芽的诱导

为建立灵宝大枣的快速繁殖体系,以灵宝大枣枣头一次枝上萌发的嫩枝为外植体,对外植体的消毒、茎尖的生长和茎段不定芽的诱导进行了研究。结果表明:灵宝大枣外植体采用乙醇和升汞结合的常规消毒方法较好,污染率较低;适宜茎尖生长的培养基为MS+6-BA0.5mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+AC0.3%+蔗糖3%+琼脂粉7.0g·L-1,培养基MS+TDZ0.5 mg·L-1+NAA0.2 mg·L-1和MS+6-BA0.5 mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+AC0.3%适宜枣茎段不定芽诱导,活性炭可以明显减轻褐变,TDZ诱导茎段不定芽的能力明显高于6-BA。     

黑莓叶片组织培养及植株再生的初步研究

以美国黑树莓叶片作为外植体,以MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA或IAA进行愈伤组织诱导及植株再生试验.结果表明:树莓叶片外植体在培养基MS+6-BA 2.0～ 4.0 mg/L+NAA(IAA)0.01～0.5 mg/L都能不同程度地形成愈伤组织 ,但以MS+6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L和MS+6-BA 4.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L愈伤组织的诱导率最高,诱导率可达100%;所试验的各种不定芽分化培养基,都能不同程度地诱导愈伤组织分化出不定芽,在添加6-BA 2.0 mg/L和NAA 0.01 mg/L的MS培养基上,愈伤组织分化不定芽的比例最高,达49.7%的;所产生的不定芽在1/2 MS+NAA 0.1 mg/L的培养基上的生根率可达89.3%.     

光叶楮侧芽组培快速繁殖技术研究

通过对光叶楮侧芽的离体培养和快速繁殖试验,探讨了光叶楮侧芽诱导、分化、不定芽生长分化、快速繁殖及生根的最佳培养条件。同时,还对光叶楮枝条灭菌条件、培养过程中防止玻璃化等问题进行了比较试验。结果表明:适宜光叶楮侧芽诱导的培养基为MS 6-BA2.0mg·L-1 NAA0.5mg·L-1,诱导分化率为80％;适宜不定芽诱导及继代培养的培养基为MS 6-BA1.0mg·L-1 NAA0.5mg·L-1,不定芽分化率为70％,继代倍数达6-7倍;适宜壮苗的培养基为MS 6-BA0.5mg·L-1 NAA0.5mg·L-1;适宜生根的培养基为1/2 MS IBA 1.0 mg·L-1,生根率达100％;适宜壮苗生根同时进行的培养基为MS 6-BA0.05mg·L-1 NAA 0.5 mg·L-1,生根率达100％。     

文冠果成熟胚离体培养及细胞学研究

以文冠果成熟胚为外植体,进行了初代培养、继代培养和生根培养研究,结果表明:初代培养诱导文冠果成熟胚形成不定芽的适宜培养基是MS+2.0mg.L-16-BA+0.1mg.L-1NAA+30g.L-1蔗糖+6g.L-1琼脂,分化率可达94.7%;继代高生长的适宜培养基是MS+0.5mg.L-16-BA+0.5mg.L-1NAA+30g.L-1蔗糖+6g.L-1琼脂,培养50d后,苗高大于0.5cm芽数量平均达11.67株;生根培养的适宜培养基是WPM+1.0mg.L-1IBA+30g.L-1蔗糖+6g.L-1琼脂,生根率为70.30%,平均根数为3.57条。并通过石蜡切片技术,观察愈伤组织诱导、愈伤组织分化不定芽以及不定芽发育过程。     

五种菊花近缘植物组织培养研究

以紫花野菊变种、纪伊潮菊、龙脑菊、那贺川野菊和矶菊5个菊花近缘种属植物无菌苗为试材,进行了茎段离体快繁体系和离体叶片不定芽再生体系研究.结果表明:最佳茎段增殖培养基分别为:紫花野菊变种,MS+1.0 mg·L-1 6-BA+(0.05～0.10)mg·L-1 IBA;纪伊潮菊,MS+2.0 mg·L-1 KT+0.1 mg·L-1 NAA;龙脑菊,MS+0.5 mg·L-1 KT+0.1 mg·L-1 NAA;那贺川野菊,MS+1.0 mg·L-1 KT+0.1 mg·L-1 NAA;矶菊,MS+2.0 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 NAA.紫花野菊变种、纪伊潮菊、龙脑菊、那贺川野菊试管苗适宜生根培养基是1/2MS;矶菊试管苗适宜生根培养基为1/2MS+0.2 mg·L-1 NAA.5个材料试管苗离体叶片愈伤组织诱导率均较高,但不定芽的诱导率则因基因型而异,仅那贺川野菊和矶菊能诱导出不定芽.那贺川野菊在MS+0.5 mg·L-1 KT+0.1 mg·L-1 NAA培养基上不定芽的再生率和增殖系数均最高,分别为75.0%和3.4;而矶菊在MS+1.0 mg·L-1 6-BA+0.5 mg·L-1 NAA培养基上的不定芽再生率和增殖系数最高,分别达80.0%和5.8.     

TDZ与6-BA对魔芋不定芽诱导的效应研究

为了建立魔芋离体培养高效再生体系,研究了TDZ与6-BA对魔芋不定芽分化的效应。结果表明:(1)单独使用TDZ和6-BA或6-BA与TDZ、6-BA与NAA组合均能诱导魔芋愈伤组织分化形成不定芽,且TDZ与NAA组合有利于魔芋不定芽的分化,当培养基中激素配比为TDZ 1.0mg·L-1+NAA 0.1mg·L-1时,不定芽分化率可高达96.15%;(2)TDZ或TDZ与NAA组合对魔芋不定芽数量的增加非常有效,增殖系数显著高于单独使用6-BA或6-BA与NAA组合,培养基中TDZ为1.0mg·L-1时增殖系数最高,可达15.78。(3)相比于激素6-BA,TDZ更易于导致不定芽的白化现象,最高白化率可达28.37%,而培养基中NAA的适当添加,可在很大程度上降低魔芋不定芽的白化。TDZ 1.0mg·L-1与NAA 0.1mg·L-1配比,不定芽白化率降至7.56%,6-BA 2.0mg·L-1与NAA 0.1mg·L-1配比不定芽白化率为0。(4)TDZ对魔芋不定芽的伸长生长表现出较强的抑制作用,而6-BA对不定芽的伸长生长则表现出较好的促进作用,可见在继代培养中使用6-BA更有利于魔芋不定芽的伸长生长。     

欧美杨POR组培再生系统研究

以欧美杨POR(Populus×euramericana)幼嫩茎段、叶片2种外植体为材料,研究诱导不定芽、茎伸长和生根的合适培养条件。结果表明,TDZ在芽诱导过程中有显著的促进作用,不定芽诱导最适培养基为MS+TDZ 0.05mg·L-1+6-BA 0.05 mg·L-1+NAA 0.05 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1,茎段和叶片分化率分别为97.3%和88.6%;丛生芽的茎伸长诱导最适培养基为MS+KT 0.5 mg·L-1+GA31 mg·L-1+果糖30 g·L-1,茎段和叶片来源的丛生芽的茎伸长率分别为95.5%和90%,茎伸长培养20 d,每个外植体超过3 cm的芽有3个以上。抽茎芽可直接转入生根培养基,在培养基1/2 MS+IBA 0.05 mg·L-1+NAA 0.05 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1中生根率可达92.2%,生根数量多,苗体健康。     

半蒴苣苔的叶片组织培养及植株再生

为了建立半蒴苣苔Hemiboea subcapitata的组培快繁技术体系,保护和开发利用半蒴苣苔这一民间植物药资源,以MS(Murashige and Skoog)为基本培养基,研究植物生长调节物质6-苄基腺嘌呤(6-BA)和萘乙酸(NAA)组合对叶片愈合组织诱导、不定芽分化,增殖和壮苗生根的影响,筛选出适合半蒴苣苔快繁的最适培养基。结果表明:叶片诱导愈合组织困难,但在叶片基部或切口处可直接诱导分化出不定芽,且随着6-BA 和NAA质量浓度的升高,芽的分化率先上升后降低,以MS+0.5 mg·L-1 6-BA+1.0 mg·L-1 NAA+1.5 g·L-1活性炭(AC)分化率最高,达到67.8%;但平均每外植体诱导芽数以MS+1.0 mg·L-1 6-BA +0.5 mg·L-1 NAA +1.5 g·L-1 AC最多,达到6.69个;不定芽增殖以MS+0.5 mg·L-1 6-BA+0.5 mg·L-1 NAA处理增殖倍数最高,达到23.43;在添加不同质量浓度吲哚丁酸(IBA)的培养基中生根率均超过90%。     

风信子离体快繁体系的建立

研究以风信子Gipsy queen的鳞片及幼叶为外植体育接诱导不定芽生成,结果表明:Gipsy queen单鳞片、双鳞片的初代最佳诱导培养基为:MS+6-BA5.0mg.L-1+NAA0.1mg·L-1,且双鳞片诱导效果好于单鳞片.诱导率达100%,增殖系数达10;幼叶外植体初代最佳诱导培养基为:MS+6-BA3.0mg·L-1+NAA0.2mg·L-1,幼叶作为外植体比鳞片诱导效果好,诱导率达100%,增殖系数达26.27:最佳继代培养基为:MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.5mg·L-1+KT0.2mg·L-1,增殖系数达2.91;生根诱导最佳培养基为:1/2MS+NAA0.2mg·L-1,生根率可达93.33%.     

采用均匀设计法优化西选二号培养基配比

以西选二号为试材,运用均匀试验设计方法调整植物生长调节剂的浓度和种类,通过建立回归模型筛选出适宜于西选二号植株愈伤组织形成、不定芽诱导和植株生根的最佳配方.结果表明:以MS+0.5 mg·L-16-BA+0.1 mg·L-1NAA作为愈伤组织的诱导培养基,可以获得92%的愈伤组织诱导率.MS+3.0 mg·L-16-BA +0.1 mg·L-1NAA可作为芽诱导培养基,其芽分化率为90%.使用芽诱导培养基,附加0.6 mg·L-1GA3作为增殖继代培养基为宜.在1/2MS+1.0 mg·L-1 IBA+0.2 mg·L-1NAA培养基中,芽苗诱导生根效果较佳.小植株炼苗移栽成活率达85%.     

黄精的组织培养与植株再生

研究离体条件下黄精不同外植体的愈伤组织诱导及其植株再生。结果表明,黄精的根茎、嫩茎及幼嫩的组培叶片在MS+6-BA 2.0 mg.L-1+2,4-D 1.0 mg.L-1和MS+6-BA 2.0 mg.L-1+NAA 1.0mg.L-1的培养基中均诱导产生愈伤组织,并在MS+6-BA2.0 mg.L-1+2,4-D2.0 mg.L-1和MS+6-BA2.0 mg.L-1+NAA2.0 mg.L-1的培养基上继代增殖良好。黄精愈伤组织在MS+6-BA3.0 mg.L-1+IAA1.0 mg.L-1的培养基上可诱导出不定芽,出芽率达66.33%,平均每块愈伤组织可分化出5.2个芽。试管苗在MS附加IAA0.5 mg.L-1培养基上诱导生根,生根率达86.67%。     

突脉秋海棠组织培养及快速繁殖研究

通过对突脉秋海棠(Begonia retinervia)叶片的离体培养和快速繁殖实验,探讨突脉秋海棠愈伤组织诱导,及不定芽的分化、增殖和生根的最佳培养条件.结果表明:以突脉秋海棠叶片为外植体,愈伤诱导率最高可达87.92％;适于突脉秋海棠叶片愈伤组织诱导的培养基为MS+ 6-BA 2.0 mg·L-1+ NAA 0.2 mg·L-1;适于愈伤组织分化成不定芽及不定芽继代的培养基为MS +6-BA 1.0 mg·L-1 +NAA 0.2 mg·L-1,诱导分化率为89.32％,20 d继代倍数达6倍以上;适于生根的培养基为1/2MS+ NAA 0.8mg·L-1 +AC0.1％,生根率达95.00％.研究确定了突脉秋海棠的组织培养配方并初步建立起一套较为完善的快速繁殖技术体系.     

翠菊品种库蕾娜叶片和叶柄及茎段的再生研究

为加速翠菊新品种的培育和扩繁,研究利用种子消毒接种获得的无菌苗作为外植体,以MS、1/2MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA依次进行愈伤组织诱导、愈伤组织分化、不定芽生根。结果表明:茎段为再生体系的最佳外植体,愈伤诱导培养基为MS+2.0mg·L-1 6-BA+0.2mg·L-1 NAA,诱导愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+1.0mg·L-1 6-BA+0.1mg·L-1 NAA,不定芽最佳生根培养基为1/2MS。叶片、叶柄最佳愈伤诱导培养基MS+4.0mg·L-1 6-BA+0.2mg·L-1 NAA,愈伤分化培养基只分化不定根。     

文冠果不定芽再生与快速繁殖

以成熟文冠果叶片作为外植体,通过器官直接发生途径,对其进行不定芽诱导、不定芽增殖及生根培养,建立了一种简单易行的、可再生的文冠果快速繁殖方法。结果表明,在不定芽诱导阶段,当MS培养基添加2.0mg.L-1BA和0.2mg.L-1 NAA时,不定芽诱导率最高;高浓度的BA显著降低不定芽诱导率;当MS培养基添加2.0mg.L-1 BA和0.1mg.L-1 NAA,每个外植体获得的不定芽数达到最大;当叶片远轴面接触培养基时,不定芽诱导率高于近轴面接触培养基。在增殖培养阶段,当MS培养基添加0.5mg.L-1 BA时,不定芽增殖率、增殖个数及增殖芽长均达到最大;在不同浓度的BA培养基中添加NAA降低了不定芽的增殖效果。在生根培养阶段,1/2MS培养基添加0.5mg.L-1 IBA的生根率最高;IBA的生根效果显著优于NAA或IAA。生根苗在含有土壤、沙子和泥炭的混合基质(1∶1∶1)中移栽成活。     

微毛樱离体快繁初步研究

以微毛樱茎段为外植体,探讨了不同生长调节物质对其不定芽诱导、增殖和生根的影响.结果表明,MS+1.0 mg·L-1 6-BA +0.05 mg·L-1 NAA为不定芽诱导的最适培养基,诱导率达87.5％;单芽在MS+ 0.5 mg·L -1 6-BA+0.05mg·L-1 NAA培养基中增殖系数为2.5,丛芽在MS +...     

宿根婆婆纳‘达尔文之蓝’的组培脱毒和快繁技术

将供试品种的带茎尖和腋芽的茎段,用70%酒精浸泡30 s,然后用20%的次氯酸钠溶液浸泡30 min,无菌水冲洗4次,消毒处理后剥取0.1~0.3 mm的茎尖,接种于以MS为基本培养基添加6-BA、IAA、NAA等外源激素的培养基中,研究了不同条件对愈伤组织诱导芽形成和芽继代增殖、生根和移栽效果的影响。结果表明,以MS为基本培养基,添加6-BA 1.0 mg·L-1和IAA0.5 mg·L-1为较适宜的外植体诱导愈伤组织和愈伤组织诱导芽的培养基。最佳继代增殖培养基为6-BA2.0 mg·L-1和NAA0.1 mg·L-1。最佳生根培养基为1/2MS添加NAA0.2 mg·L-1和IAA1.0 mg·L-1。25 d后,组培苗移栽成活率达到98%以上。     

黄樟高频愈伤组织诱导及植株再生

以黄樟嫩茎腋芽萌发的新枝为外植体，以MS培养基为基本培养基，研究不同植物生长调节物质对诱导愈伤组织、分化不定芽、壮苗培养和生根培养的影响。结果表明：诱导产生愈伤组织的最适培养基为“MS培养基1 L+6-苄氨基嘌呤(6-BA)1.0 mg+2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)0.2 mg”,诱导率可达90.00%;6-BA和噻苯隆(TDZ)在黄樟不定芽诱导中起着关键作用，诱导产生不定芽的最佳培养基为“MS培养基1 L+6-BA1.0 mg+TDZ0.8 mg+萘乙酸(NAA)0.05 mg”,分化率可达89.17%,不定芽数量达49.27个；不定芽继代培养基中添加维生素C(V_C)和维生素B₂(V_B2)可有效抑制褐化，最适培养基为“MS培养基1 L+6-BA0.5 mg+NAA0.05 mg+V_C15 mg+V_B220 mg”;“MS培养基1 L+6-BA0.2 mg+NAA0.05 mg+V_C15 mg+V_B220 mg+香蕉泥(BH)1...