复方酸制剂体外抗新城疫病毒试验

[目的]探讨复方酸制剂体外抗新城疫病毒（NDV）的活性,为研制新型抗NDV制剂提供理论依据。[方法]采用鸡胚成纤维细胞（CEF）培养法,观察细胞病变（CPE）,并用噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞活性,计算病毒抑制率,评价复方酸制剂的体外抗NDV作用。[结果]随着复方酸制剂浓度的增加,CPE逐渐减弱,病毒抑制率明显升高,当浓度为1.0mg/ml时,病毒抑制率可达70.04%。[结论]复方酸制剂在体外具有明显的抑制NDV增殖作用。     

复方糖苷抗新城疫病毒感染作用

采用2种方法研究了复方糖苷抗新城疫病毒(Newcastle disease Virus,NDV)感染作用。一是鸡胚成纤维细胞(Chicken embryo fibroblast,CEF)培养法,通过观察NDV CPE的形成及测定CEF OD值的变化,计算病毒抑制率等指标,综合评价复方糖苷在细胞水平上抗NDV作用,并从直接灭活病毒、阻断病毒吸附与生物合成及释放等环节,探讨了复方糖苷的抗NDV途径。二是将复方糖苷稀释成1 200,1 000,800,600,300μg/m L 5种浓度与100 EID50 NDV液混合后接种9日龄SPF鸡胚,于72 h后统计鸡胚的存活数并测定尿囊液血凝效价(HA),依此判定复方糖苷在鸡胚内抗NDV作用。结果表明:随着药物浓度的增加CPE的特征逐渐减弱,OD值明显升高,病毒抑制率增大,当复方糖苷质量浓度为600μg/m L时对NDV具有显著的直接杀灭与阻断吸附作用。HA在1 200,1 000μg/m L时均为0。表明复方糖苷具有显著的抗NDV感染作用。     

鸡新城疫病临床表现及诊治

鸡新城疫是一种传染性很强的疾病,患病鸡表现出败血症的临床特征,该病在任何鸡只中都能发生,春秋季节的发病率较高,对该病的预防需要采取加强饲养管理、免疫接种、严格执行卫生防疫制度,做好环境控制等综合性的措施。本文主要论述了鸡新城疫的流行特点,临床症状及预防措施,供参考。     

黄芪和板蓝根超微粉的粒径观察及其抗鸡新城疫病毒效果

为探讨黄芪、板蓝根超微粉的抗病毒作用,应用激光粒度分析仪和扫描电镜观察了黄芪和板蓝根超微粉的粉体粒度及其破壁情况,通过鸡胚接种试验观察2种中草药超微粉对鸡新城疫病毒的抑制作用。结果表明:黄芪和板蓝根超微粉的粒度分布中心D_(50)分别为10.10μm和8.31μm;2种中草药超微粉的破壁情况良好,电镜下只能观察到不完整的细胞壁,为组织碎片。黄芪和板蓝根超微粉对新城疫病毒最小抑制剂量分别为1 562.5、781.2μg/m L,以板蓝根抗病毒效果较好。     

复合RT-PCR快速鉴别鹅副粘病毒与鸡新城疫病毒

对新近分离的鹅副粘病毒SF02株通过自行设计的3条引物建立了复合RT-PCR方法。该方法对鹅源副粘病毒SF02株和GPV2株均可检测到215bp和401bp2条带，对12株(其中7株参考株，5株野毒)鸡源新城疫、2株鸽源新城疫、1株鸭源新城疫病毒的检测只出现1条401bp带，与预期的大小一致，对H5、H9亚型禽流感病毒、鸭病毒性肝炎病毒、传染性支气管炎病毒、SPF鸡胚尿囊液均未检测到特异性条带。     

新城疫病毒接种后气管黏膜损伤研究

为了研究新城疫弱毒疫苗的免疫机理,用rlasota(重组lasota野毒株)免疫2日龄SPF雏鸡,接种后分别在第1,3,5,7,15,18 d取气管,进行电镜、光镜观察,利用免疫组化染色方法检测病毒在气管内的分布;结果发现rlasota接种后第1 d纤毛细胞有脱纤毛现象。接种第3 d杯状细胞破碎,黏液成分增多,黏膜下层的纤维裸露到表面;接种后第7 d,可以看到纤毛细胞纤毛上有球形粒子,杯状细胞、基细胞大量增生;接种后第18 d,纤毛细胞脱纤毛区域进一步增大。光镜观察结果发现,接种后第5 d黏膜下层水肿,淋巴细胞、粒细胞、浆细胞浸润,黏膜上皮形成空泡状,表层有数层不成熟的细胞组成;接种后第7 d,腺体腔闭塞。免疫组化染色气管固有层细胞呈阳性反应,棕色颗粒出现在胞浆中。这说明气管黏膜的损伤可能是机体重要的防御机制和免疫机制的表现。     

抗新城疫病毒血凝素中和性单克隆抗体的研制和免疫生物学特性鉴定——新城疫病毒的单克隆抗独特型抗体疫苗研究之一

作者以新城疫病毒(NDV)的强毒株F_(48)E_8为免疫抗原。应用淋巴细胞杂交瘤技术。获得6株抗NDV血凝素的中和性单克隆抗体,分别命名为F_4、FE_8、F_(14)、F_(14),FD_(12)和F_(32)。这6株单抗对NDV都表现出高度的血凝抑制(HI)活性和中和能力。其中FE_8和F_4单抗的HI效价分别达1:2~(17)和1:2~(16),鸡胚内中和效价分别达10~(-5)和10~(4.8)。这些单抗的特异性强,仅与NDV发生反应,而与感染家禽的常见病毒如传染性腔上囊炎病毒(IBDV)、小鹅瘟病毒(GPV)、鸭肝炎病毒(DHV)、鸭瘟病毒(DPV)均无交叉反应。在鸡体保护试验中,1ml 1:160倍稀释的FE_8或F_4腹水单抗均能使所试小鸡抵抗NDV强毒的攻击。上述结果表明,FE_8和F_4单抗不仅能为NDV的单克隆抗独特型抗体研制提供一种理想的免疫原(单克隆独特型抗体,Ab_1)。而且可用于新城疫的紧急预防。     

10种中药成分对单层鸡胚成纤维细胞增殖的影响

将安全浓度范围内的黄芪多糖、当归多糖、蜂胶多糖、淫羊藿多糖、板蓝根多糖、黄芪黄酮、蜂胶黄酮、淫羊藿黄酮、黄芪皂苷和人参皂苷等 10种中药成分分别加入已培养 2 4h、刚形成单层的鸡胚成纤维细胞 (CEF)中 ,在加药后12 ,2 4 ,36 ,4 8和 6 0h用MTT法测定它们对CEF增殖的影响。结果表明 ,黄芪皂苷、黄芪多糖、板蓝根多糖和蜂胶黄酮主要表现为促进增殖 ;淫羊藿多糖主要具抑制效应 ;其他 5种中药成分在某些浓度和时间点能促进增殖 ,而在某些浓度和时间点则抑制增殖 ,并有一定的量效和时效关系。     

12种藏药对鸡法氏囊病毒感染鸡胚成纤维细胞能力的影响

藏医藏药有着独特的理论体系,在世界医学中独树一帜,是仅次于中医中药而有系统理论的民族医药.     

复方芩连汤对几种禽病病毒体外增殖的抑制作用

以黄连、黄芩、板蓝根、黄芪等为主要成分的复方芩连汤作为抗病毒药,利用细胞病变(CPE)抑制试验测定中药复方在长成单层的鸡胚成纤维细胞(CEFC)上对鸡新城疫病毒(NDV)、鸡传染性支气管炎病毒(IBV)、鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)等几种禽病病毒的抑制作用。结果表明:中药复方对NDV具有较好的抑制作用,其最小直接杀灭浓度为7.81μg/mL,最小阻断浓度为3.9μg/mL,最小治疗浓度为15.62μg/mL;中药复方在体外对IBV的T株和M41株也具有显著定的抑制作用,而对IBDV的抑制作用则不明显。     

中草药复方制剂对肉鸡新城疫的防治研究

将300只大小适中,健康无病的肉仔鸡,用鸡新城疫疫苗首次免疫后,随机分为6组,其中1、2、3、4、5组免疫后5周内在饮水中按0.5%剂量分别添加不同配比的中草药金银花、板蓝根、连翘、黄芪、柴胡等,空白对照组0组饮水中不添加任何药物,在免疫后14、28 d时,检测鸡新城疫HI抗体效价。结果显示,大多数试验组鸡的新城疫抗体效价都显著高于空白对照组,其中以黄芪、柴胡组方和以金银花、柴胡、连翘、黄芪四种中草药为主的组方效果最为显著。     

"病毒克"颗粒剂对新城疫病毒在鸡胚中复制的影响

将新城疫病毒和“病毒克”颗粒剂一同注入9日龄的鸡胚,结果与仅接种新城疫病毒的鸡胚比较,“病毒克”颗粒剂能延长接种过新城疫病毒的鸡胚的存活时间,说明“病毒克”颗粒剂对新城疫病毒在鸡胚中的复制有抑制作用。     

新城疫病毒毒力的演化研究进展

新城疫是由新城疫病毒引起禽的一种急性、热性、败血性和高度接触性传染病.该病主要以高热、呼吸困难、下痢、神经紊乱、黏膜和浆膜出血为特征.新城疫对我国养禽业的发展造成了巨大的威胁,其病毒是一种突变快、进化快的病原,该病毒毒力的强弱并不是一成不变的,其毒力具有本身的演化趋势.通过对新城疫病毒的生物特性、新城疫病毒毒力的演化及与其毒力演化相关的因素研究,旨在探讨新城疫病毒毒力的演化与流行趋势的关系.     

新城疫F48E9病毒体外诱导的鸡T淋巴细胞程序性死亡

 应用流式细胞仪及DNA琼脂糖凝胶电泳技术研究了我国鸡新城疫标准强毒F48E9株体外诱导鸡T淋巴细胞的程序性死亡现象。同时,对其灭活毒以及从该毒株提取的囊膜蛋白诱导鸡T淋巴细胞的程序性死亡现象进行了观察,并以健康SPF鸡胚尿囊液作为对照。结果发现,F48E9株及其灭活毒体外均可诱导鸡T淋巴细胞发生程序性死亡,而从病毒中提取的囊膜蛋白及SPF鸡胚尿囊液无此特性。新城疫F48E9株体外诱导鸡T淋巴细胞程序性死亡这一现象初步表明,新城疫强毒F48E9株感染鸡T淋巴细胞数量的减少和功能的降低以及由此所致的感染鸡免疫功能的降低可能和病毒诱导鸡T淋巴细胞发生程序性死亡有关。     

复方中草药对雏鸡感染沙门氏菌的药效学试验

对由白头翁、黄柏、秦皮、坷子等组成复方中草药制剂分别进行体外和体内抑菌试验.体外抑菌试验中复方制剂的抑菌圈直径为16 mm,说明沙门氏菌对其高度敏感;体内抑菌试验中,将复方制剂以高、中、低三个剂量进行治疗试验,结果表明中剂量组明显好于其他剂量组,增重率为25.9%,死亡率为10.0%,治愈率为90.0%,对鸡白痢表现出很好的治疗作用.     

新城疫病毒F蛋白的研究进展

对新城疫病毒F基因结构,F蛋白的存在形式、裂解位点、半胱氨酸残基、潜在糖基化位点、七肽重复序列、强疏水区域,三维结构和抗原位点的研究进展进行了综述,概括了F蛋白的作用,并对其应用前景作了展望。     

1株抗肿瘤新城疫病毒的毒力分析

[目的]分析1株抗肿瘤新城疫病毒(NDV)的毒力。[方法]通过传统毒力的测定方法,测定此株NDV的最小致死量的平均死亡时间(MDT)、脑内致病指数(ICPI)及静脉致病指数(IVPI)。通过RT-PCR扩增此株病毒基因组的多个片段,相邻扩增片段之间有部分核酸序列重叠且覆盖完整的融合蛋白(F)基因和血凝素神经氨酸酶(HN)基因的区域,并进行测序。[结果]此株NDV的MDT为105.6h,ICPI约为0.26,IVPI为0。测序结果表明,此株病毒是1株新的NDV,其F蛋白剪切位点为112RRQRRF117。[结论]此株NDV为弱毒株,其F蛋白剪切位点与强毒株一致。除F蛋白剪切位点外,NDV的毒力必然与其他因素相关。