用抗原免疫构建分泌兔出血症病毒抗独特型抗体的杂交瘤细胞

用纯化的兔出血症病毒（ｒａｂｂｉｔｈａｅｍｏｒｈａｇｉｃｄｉｓｅａｓｅｖｉｒｕｓ,简称,ＲＨＤＶ）免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠。正如网络学说所指出的,从免疫鼠的杂交瘤细胞克隆中,不仅筛选出能分泌抗ＲＨＤＶ抗体（Ａｂ１）的细胞克隆,同时也筛选出能分泌抗ＲＨＤＶ独特型抗体（ａｎｔｉ－ｉｄｉｏｔｙｐｉｃａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ,Ａｂ２）的杂交瘤细胞,用抗原而不用单克隆抗体（Ａｂ１）免疫,诱导产生抗独特型抗体（Ａｂ２）是一种具有广阔的应用前景的新技术     

分泌抗兔出血症病毒单抗杂交瘤细胞株的建立

以纯化的兔出血症病毒免疫ＢＡＬＢ／Ｃ鼠，应用杂交瘤技术获得了分泌抗ＲＨＤＶ单抗杂交瘤细胞１７株，其中有３株杂交瘤细胞分泌单抗的ＥＬＩＳＡ效价为１：４０９６００，１：４０９６；５株单抗具有血凝抑制活性。兔抗ＲＨＤＶ高兔血清对１７株ＭｃＡｂ的ＥＬＩＳＡ抑株为ＩｇＧ２ｂ。各株ＭｃＡｂ与欧洲棕色兔病病毒无抗原交叉反应，也无沉淀反应特性。     

ELISA检测兔出血症病毒抗体的研究

用人“O”型红细胞吸附解脱法提纯制备的兔出血症病毒抗原,成功地建立了ELISA检测兔出血症病毒抗体的方法。实验证明,该ELISA方法敏感、特异,与HI试验结果有极好地相关性。     

用Dot—ELISA检测兔出血症病毒抗体的研究

建立了敏感、特异、稳定的检测兔出血症病毒抗体的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ，其敏感性比ＨＩ试验高１００倍以上。结果表明，当抗体效价在１：１６０时，攻毒保护率为５０％，在１：３２０以上时保护率为１００％。据母源抗体的动态检测结果，仔兔３０日龄时应进行首次免疫。     

应用单克隆抗体ELISA阻断试验快速检测兔出血症病毒抗体的研究

利用抗兔出血症病毒(RHDV)的特异性单克隆抗体(McAb)建立了ELISA阻断试验用以检测血清抗体,并与血凝抑制(HI)和琼脂扩散试验(ID)进行了比较.结果ELISA阻断试验敏感性超过HI,更远胜于ID.具有灵敏、特异、准确等优点.适于大批血清样品的快速检测.     

用醛化红细胞分离抗禽流感病毒独特型多克隆抗体

用纯化的鸡抗禽流感病毒(AIV)抗体免疫家兔，制备抗独特型多克隆抗体；用戊二醛醛化的红细胞固定非特异性鸡抗体，再吸附兔抗鸡抗体，获得了纯的抗独特型抗体。经鉴定，该抗体既有弱的血凝性又有弱的血凝抑制性，并能与原病毒竞争性地和鸡抗AIV抗体结合。     

应用间接血凝试验检测兔出血症病毒抗体的研究

应用纯化兔出血症病毒抗原,以戊二醛醛化绵羊红细胞为载体,成功地建立了间接血凝试验用以检测兔出血症病毒抗体.与血凝抑制试验和琼脂双扩散试验比较,其敏感性比血凝抑制试验高32倍,比琼脂双扩散试验高1024倍.致敏红细胞于4°C保存四个月仍有效.     

抗独特型抗体的研究进展

近年来,随着重组DNA技术及单克隆抗体的应用,开创了疫苗发展的新时代。DNA重组疫苗、人工合成多肽疫苗、亚单位疫苗等新型疫苗相继问世。但是,疫苗接种的基本原理并没有突破,仍然要使用外源性抗原物质刺激机体,使机体主动建立对该抗原的特异性免疫应答,而且,减毒的病原体有时会恢复其毒力,许多抗原,尽管可用重组DNA技术合成,但提纯上仍很困难,许多细菌和寄生虫的保护性抗原,其组成是碳水化合物或脂类,这些成分目前还不能用重组技术或多肽合成技术来制成。     

曼氏血吸虫病抗独特型抗体制备初报

用曼氏血吸虫抗原特异性的保护性单抗Ｄ６多次免疫新西兰大白兔，从１只免疫兔分离得到的免疫血清在ＥＬＩＳＡ试验中对单抗Ｄ６的反应，比对血吸虫的其它两株同亚型抗原特异性单抗Ｎ（１２２）和Ｎ（３４）的反应强，能强烈地抑制单抗Ｄ６识别曼氏血吸虫尾蚴抗原（ＣＡＰ）和虫卵抗原（ＳＥＡ），而不能抑制单抗Ｎ（１２２）和Ｎ（３４）识别ＣＡＰ和ＳＥＡ。多次实验的结果还证明，单抗Ｄ６免疫兔血清不能识别ＣＡＰ和ＳＥＡ，正常兔血清不能抑制单抗Ｄ６识别ＣＡＰ和ＳＥＡ。单抗Ｄ６免疫兔血清经饱和硫酸铵和结合有正常小鼠血清蛋白的免疫亲和层析柱纯化后，其免疫原性不变。这些结果说明，免疫兔血清中含有抗保护性单抗Ｄ６的抗独特型抗体。日后可用它免疫动物，探索抗独特型抗体疫苗在血吸虫病免疫预防上的应用价值。     

应用单克隆抗体ELISA阻断试验快速检测兔出血症病毒抗体的研究

利用抗兔出血症病毒(RHDV)的特异性单克隆抗体(McAb)建立了ELISA阻断试验用以检测血清抗体,并与血凝抑制(HI)和琼脂扩散试验(ID)进行了比较。结果ELISA阻断试验敏感性超过HI,更远胜于ID,具有灵敏、特异、准确等优点,适于大批血清样品的快速检测。