核桃炭疽病的研究进展

核桃炭疽病是核桃(Juglans regia L.)的主要病害,严重威胁核桃产业的迅猛发展。近来年,随着核桃种植面积的进一步增加,该病害频频暴发,给核桃产业造成巨大的损失,极大地制约了该产业的发展壮大。结合国内外的相关报道综合论述该病害的研究进展,从其发病症状、发病规律、病原菌特性和防治方法等方面进行阐述。     

核桃(Juglans regia L.)维生素E代谢相关基因jrVTE3的克隆与分析

核桃(Juglans regia L.)坚果是重要的天然维生素E源.在维生素E合成代谢中,2-甲基-6-叶绿基-1,4-苯醌甲基转移酶(MPBQMTase)催化2-甲基-6-植基-1,4-苯醌(MPBQ)向2,3-二甲基-5-植基-1,4-苯醌(DMPBQ)的合成,是γ-生育酚和α-生育酚生物合成过程中的关键酶.本研究以‘香玲’核桃开花后90d的胚组织为材料,利用RACE技术克隆了核桃MPBQMT的cDNA.序列分析表明,得到的cDNA全长1280 bp,有1020 bp的开放阅读框(ORF),编码340个氨基酸,将其命名为jrVTE3.序列同源性比较显示,jrVTE3基因与毛果杨MPBQ/MSBQ甲基转移酶基因以及蓖麻、葡萄、大豆的内膜包装蛋白基因有同源性较高;其ORF编码的多肽序列与橡胶、莴苣、毛果杨的MPBQ/MSBQ转移酶及葡萄、蓖麻的内膜包装蛋白有较高的同源性.jrVTE3编码的多肽序列中,有15个氨基酸可能为蛋白激酶磷酸化位点,多肽序列二级结构中有α-螺旋、无规则卷曲.在多肽序列中,有一个低成分复杂性区域和一个跨膜区段,还有一个第一类S-腺苷甲硫氮酸甲基转移酶(AdoMet-MTases,Class Ⅰ)的保守域,这些序列结构体现了甲基转移酶结构的特点.这些结果对进一步研究核桃坚果仁中维生素E的合成的调控机制及核桃品质的遗传改良具有参考意义.     

核桃不同品种花粉生活力及其贮藏条件研究

[目的]测定核桃不同品种花粉的生活力,并研究其贮藏条件。[方法]采用固体培养基和液体培养基测定维纳、元丰、香玲、丰辉和当地核桃5个品种的花粉生活力,并对贮藏条件进行考察。[结果]固体培养基测定的花粉生活力普遍高于液体培养基0.98%~2.51%。5个品种均在2.5%蔗糖溶液中萌发率高;花粉最适宜的贮藏条件为-20℃、遮光。核桃不同品种的花粉生活力存在显著差异(P0.05);在同一培养基上,维纳花粉生活力最高为12.3%,其次是丰辉、元丰、香玲,当地核桃最低为3.9%。[结论]花粉生活力的测定以固体培养基较适合。同一培养基上,维纳花粉生活力最高。     

新疆早实核桃FLOWERING LOCUS C同源基因的克隆与序列分析

[目的]通过克隆得到新疆早实核桃FLC同源基因,对其相关生物信息学进行分析,为在分子生物学水平上揭示早实核桃成花机理奠定基础.[方法]通过RT-PCR法克隆获得早实核桃FLC的同源基因cDNA全长.采用生物信息学手段对该基因的保守结构域、疏水性和二级结构进行分析.[结果]该基因命名为Pw-FLC基因,在GenBank注册,登记号为KF729795.PwFLC基因含开放阅读框612 bp,编码203个氨基酸,具有典型的MIKC型MADS-box结构域.[结论]该片段与其他植物的FLC同源基因序列同源性达48;～ 97;.推测该蛋白分子量为23.779 kD,理论等电点为5.96.     

核桃输液滴干综合效应研究

试验对核桃(Juglans regia L.)品种辽核1号(J.regia cv.Liaohe No.1)进行输液滴干处理,比较了输液滴干、土壤施肥和常规管理3种方式对土壤含水量、核桃营养器官和果实生长发育的影响。结果表明,输液滴干处理的叶片SPAD值、叶面积、新梢长度和粗度、土壤含水量、果实品质、单果重、单株产量、抗性等指标均优于土壤施肥和常规管理,分别比土壤施肥处理和常规管理处理的单果重提高了13.93%、23.23%;单株产量分别提高了20.39%、75.27%;黑果率分别降低了88.97%、91.74%。     

基于网络药理学的核桃防治老年痴呆功能成分及其作用靶点研究

基于网络药理学方法探究核桃(Juglans regia L.)防治老年痴呆(Alzheimer’s disease,AD)的作用机制,通过TCMSP数据库和文献挖掘获得核桃的活性成分及相应潜在靶点;使用OMIM等数据库进行AD相关基因预测和筛选;采用Cytoscape 3.7.2软件构建"药物-活性成分-疾病-靶点"网络以形成核桃防治AD的成分及靶点相互作用关系,并进行GO功能和KEGG通路富集分析。结果表明,筛选获得29种核桃活性成分,其中17种成分具有AD相关靶点159个,PTGS1/2、RXRA、RELA、MAOB和NOS3可能是AD的关键靶点,主要信号通路为AGE-RAGE信号通路、动脉粥样硬化、PI3K-Akt信号通路、IL-17信号通路和HIF-1信号通路。核桃通过多成分、多靶点、多途径防治AD,其中作用靶点最多的成分为槲皮素、油酸、鞣花酸;受最多化合物作用的靶点为前列腺素过氧化物合成酶、视黄酸受体、转录因子p65、单胺氧化酶和一氧化氮合酶。     

基于主成分分析筛选核桃种子最佳浸种时间

为进一步优化核桃(Juglans regia L.)种子浸种时间,对在不同浸种时间条件下播种的核桃幼苗发芽率、树体特征(株高、干茎、主根长、须根长、叶面积、叶绿素含量)与叶片营养物质(氮、磷、钾、钙、镁等矿质元素)进行主成分分析,按照主成分贡献率计算不同浸种时间的综合得分,筛选出最适合的浸种时间。结果表明,主成分分析适用于优化核桃种子浸种时间,得到浸种时间为5 d综合得分最高,浸种1 d综合得分最低。     

新疆核桃实生后代坚果外观品质差异分析

为了探究新疆核桃(Juglans regia L.)不同品种实生后代坚果外观品质的优劣,为核桃育种提供参考依据,试验对10个新疆核桃品种的实生后代果实青果果重、皮厚、果形指数和坚果的果重、壳厚、出仁率等外观品质进行了分析,研究不同核桃品种实生后代群体间外观性状的差异。结果表明,不同核桃品种的实生后代中,扎343的平均湿果重和单果重最大,温185的仁重最重,出仁率最高,果形指数最小,缝合线高度最小,壳最薄,温417的内褶壁厚最薄,温179的含水量最高,壳硬度最小,新翠丰的缝合线紧密度最小。通过综合分析各外观指标,最终可以确定温185实生后代核桃的综合品质较好,是值得大力推广的品种。     

核桃雌雄异熟性研究进展

核桃(Juglans regia L.)为雌雄异花同株植物,其雌雄异熟性直接影响着开花、授粉等有性繁殖过程,从而影响核桃坚果的产量和品质。概述了国内外核桃雌雄异熟性的研究现状,对核桃雌雄异熟性在自然界中的表现、物候期特点、花芽分化进程、遗传特性和生产利用价值等进行了综述,以期反映核桃雌雄异熟性的规律及对高产栽培的指导意义。     

中国核桃（Juglans regial）起源考证

本文根据中国古代文献及国内外研究报道,结合化石鉴定、地质孢粉、炭化核桃和有关核桃细胞学、酶学研究,对中国核桃的栽培起源,进行了较深入的考证,提出世界核桃起源不是一地而是多地,并根据中国近年研究资料认为中国是核桃起源地之一的论点。     

新疆核桃亲缘关系的ISSR分析

[目的]采用ISSR技术从DNA水平探讨核桃材料亲缘关系,为核桃资源的保护、开发利用及新品种选育等提供理论依据.[方法]以核桃叶片为材料,利用ISSR标记技术,筛选出8条引物对24份DNA进行PCR扩增.以NTSYSpc2.1软件计算样品的遗传相似系数(GS),并进行UPGMA聚类分析.[结果]共扩增位点86个,其中多态位点60个,多态位点百分率70.00;;样品间的GS在0.29～0.93,在GS=0.37处将栽培核桃与野生核桃分成2组.[结论]供试核桃具有较高的多态性,样品间有明显的基因分化,其亲缘关系也较远,并且具有明显的地域性.     

核桃与铁核桃种间关系的RAPD鉴定

运用RAPD技术对核桃与铁核桃特征性条带进行标记。分别利用8个核桃样品和8个铁核桃样品构建2个物种的基因池,用327个随机引物,选出10个多态性引物,进一步用这10个引物进行单株确认,发现只有引物D6在核桃类群的8个样品中扩增出一条250bp的特异带,而在铁核桃类群的8个样品中无此特异带。初步分析认为,D6-250可能是核桃与铁核桃之间的特异性分子标记,该结果可为核桃和铁核桃种质鉴定提供一定的理论依据。     

菠菜性别相关的RAPD标记

菠菜为雌雄异株植物,用CTAB法提取其雌雄成株幼嫩叶片总DNA分别构建雌、雄株的DNA池,以之为模板,用已优化的RAPD体系扩增,在160条随机引物(10 bp)和40个引物对中筛选出44个扩增效果较好的单引物,再从中进行进一步筛选.研究发现,引物S1497扩增出1条雄性特异性条带,检测发现该条带只在雄株DNA池中出现.回收纯化该特异扩增片段,将其连接于pUCm-T载体,转化进大肠杆菌JM109菌株,并进行检测及测序.测序结果显示,该片段全长1 978 bp,该特异条带的获得为菠菜性别相关基因的克隆奠定了基础.     

温185核桃一年生枝条的抗寒力测定分析

[目的]通过温185早实核桃(Juglans regia L.)一年生枝条抗寒力测定分析,筛选出与抗寒相关的关键生理指标,为有效评价不同栽培管理条件下“温185”核桃越冬抗寒能力,制定合理的冬季安全越冬技术措施提供理论依据.[方法]设置了9个胁迫低温处理,测定并分析了不同胁迫处理后温185一年生枝条的半致死温( LT50)、枝条组织活力、保护酶(SOD、POD、CAT)活性、丙二醛(MDA)含量、渗透调节物质(可溶性糖和游离脯氨酸)含量等指标.[结果]温185一年生枝条的半致死温度分别为-24.71℃;不同组织抗寒能力存在强弱差异,以表皮抗寒性最强,皮层、韧皮部和木质部冻害临界温度与LT50接近;随着胁迫温度的降低,MDA含量持续增加;SOD、POD和CAT活性峰值的激发胁迫温度均接近LT50,胁迫温度低于半致死温度时,保护酶活性明显下降;游离脯氨酸含量与相对电导率之间存在极显著的正相关关系.[结论]相对电导率和游离脯氨酸含量可作为温185一年生枝条抗寒力评价的关键生理指标,皮层、韧皮部和木质部的TIC染色结果可作为组织冻害的鉴别依据.     

苹果抗斑点落叶病基因的一个RAPD标记的SCAR转换

将苹果抗斑点落叶病相关基因的一个RAPD标记成功转换为重复性和特异性更好的SCAR标记。由序列特点设计特异SCAR引物,并用所设计引物对两亲本和抗病、感病基因池及F1代单株进行PCR扩增。结果表明,秦冠×富士F1代群体在抗病后代个体中扩增出470 bp条带,而在感病后代个体中无此扩增条带,故将该标记命名为SCAR470。同时,分析分离群体的扩增,重复率为4.69%,表明该标记可以用于苹果斑点落叶病的分子鉴定。     

葡萄无核基因RAPD标记的序列分析

报道了用ＱｉａｇｅｎＫｉｔ纯化ＲＡＰＤ遗传标记，用细菌质粒Ｍ１３克隆ＲＡＰＤ标记的ＤＮＡ片段，采用自动荧光ＤＮＡ测序仪（型号３７３Ａ）测定了该ＤＮＡ片段的核苷酸组成及其排列顺序。无核白ＲＡＰＤ标记由５１９对核苷酸及其特定序列组成。因为无核白是无核基因的原始供体，作者认为所获无核白ＲＡＰＤ标记的ＤＮＡ序列，可以作为合成探针的基础，用于检测无核葡萄育种和无核品种的无核性。     

超声处理核桃仁及其提取物的抗氧化性分析

[目的]提取活性较高的核桃多酚,提高核桃的利用价值。[方法]采用添加0.05 mol/L盐酸的70%乙醇溶液超声辅助的方法处理核桃仁,Folin-Ciocalteau法测定总酚含量,并测定其清除自由基能力及铁离子还原能力表征抗氧化活性。[结果]4次超声提取(65℃,10 min)的核桃多酚提取液多酚含量为(12.03±0.16)mg/g,核桃仁中的多酚残留量为0.38 mg/g,低于碱处理后的核桃仁多酚残留量。此外,核桃多酚提取物在清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基能力及铁离子还原能力均高于叔丁基对苯二酚(TBHQ)、VC和VE。[结论]酸化乙醇超声处理核桃仁不仅可以有效去除核桃多酚,还为食品工业提供了高活性的天然抗氧化剂。     

Identification of Co-Segregating RAPD Marker Linked to Powdery Mildew Resistance Gene Pm 18 in Wheat

The Pm18 gene of wheat confers resistance to the powdery mildew which is oneof the most serious diseases in many regions of the world. In this study, bulked segregant analysis (BSA) was used to develop randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) markers linked to Pml8 gene. Three hundred and twenty decamer primers were screened and one of them was identified as RAPD marker (S411600) linked to Pml8. Using the F2 mapping population from the cross Pml8 × Chancellor, the marker S411600 was shown to co-segregate with the gene Pml8. This marker can be conveniently used for marker-assisted selection in wheat breeding programs for the identification or pyramiding of Pml8 with other resistance genes.     

Inheritance of Resistance to SMV3 and Identification of RAPD Marker Linked to the Resistant Gene in Soybean

One SMV resistant soybean line (95-5383) was crossed with four susceptible soybean varieties/line ( HB1, Tiefeng21, Amsoy, Williams) and one resistant introduced line PI486355. Their F1 and F2individuals were identified for SMV resistance by inoculation with SMV3. The results showed that in the four crosses of resistant × susceptible, F1 were susceptible and the ratio of F2 populations was 1 resistant : 3susceptible (mosaic and necrosis), indicating that 95-5383 carries one recessive gene that confer resistance to SMV3. There is segregation of susceptibility in F2 progenies from the cross of 95-5383 × PI486355, indicating that the SMV3 resistant gene in 95-5383 is located at different locus from PI486355. By bulked segregating analysis (BSA) in F2 populations of 95-5383 × HB1, one codominant RAPD marker OPN11980/1070 closely linked to SMV3 resistance gene amplified with RAPD primer OPN11 was identified. The DNA fragment OPN11980 was amplified in resistant parent 95-5383 and resistant bulk, and OPN111070 was amplified in susceptible parent HB1 and susceptible bulk. OPN11980/1070 was amplified in F1. Identification of the markers in F2 plants showed that the codominant marker OPN11980/1070 is closely linked to the SMV resistance locus in95-5383, with genetic distance of 2.1cM.