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为评价布鲁氏菌病补体结合酶联免疫吸附试验抗体检测试剂盒( CF-ELISA试剂盒)的敏感性、特异性及与其他试剂盒的符合率,用CF-ELISA试剂盒对布病感染地区牛、羊血清各200份,布病净化地区牛、羊群血清各100份进行抗体检测,同时与其他商品化检测试剂进行了比较。结果表明,感染地区牛、羊血清抗体的McNemar检验结果表明CF-ELISA试剂盒与间接酶联免疫吸附试验( iELISA)试剂盒和CGS的敏感性和特异性差异均不显著( P>0.05),Kappa一致性检验分析结果表明,CF-ELISA试剂盒与iELISA试剂盒检测结果有高度的符合性。检测净化地区牛、羊群血清抗体产品间的特异性和符合率均为100%。 相似文献
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1样品的基本知识主要介绍样品采集、处理以及保存的知识,ELISA测定样品很多,如血清、尿液、唾液、排泄物等。部分样品可直接开展ELISA检测,比如血清;而部分样品则需要经过预处理,比如粪便。兽医实验室一般根据常规方式采集样品,禽类采心脏、翅静脉血的方式;猪采前腔静脉等处血;羊采颈静脉血;牛采颈静脉、尾静脉血。将血清分离时,避免出现溶血°现阶段,ELISA试剂盒多数使用的辣根过氧化物酶作为标记,红细胞溶解就会释放出较多的过氧化酶活性物质,在ELISA检测中,溶血会造成非特异性显色,导致假阳性,最后很难得到精确的检测结果。 相似文献
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诊断猪囊尾蚴病的酶联免疫吸附试验 总被引:4,自引:0,他引:4
猪囊尾蚴病又称为猪囊虫病 ,对病猪生前诊断的方法虽然很多 ,但是检出率高、特异性强、稳定性好的方法当推酶联免疫吸附试验 ,简称 ELISA。该法由我校于 80年代建立 ,后来在推广应用中又不断改进 ,形成了现在的操作方法 ,曾获农业部科技进步奖 ,农业部动物检疫规程委员会也通过 相似文献
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酶联免疫吸附试验(ELISA)是兽医实验室常用检测方法,具有灵敏度高、特异性强以及操作简便等特点。为了刚好地使用ELISA方法进行疫情检测以及疫病诊断,本文总结了常见ELISA试验各个操作步骤的注意事项,为广大实验员提供获得更准确有效的实验结果提供参考。 相似文献
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由贝诺孢子虫病牛皮肤组织包囊内分离滋养体制备抗原。然后,通过正交试验筛选影响ELISA敏感性的几种主要因素,建立了诊断牛贝诺孢子虫病的问接酶联免疫吸附试验方法。对已知阳性和阴性血清各30头份进行检测,其符合率均为100%;对疫区244头份血清进行检测,其阳性检出率为34.8%,面临床通过巩膜险查的阳性检出率仅为4.5%;对巴贝贝西虫、双芽巴西虫、瑟氏泰勒虫、环形泰勒虫、伊氏锥虫、肉孢子虫等感染牛血清68头份进行检测,除22头份肉孢子虫惑染牛血清中有5头份判为阳性外,其余均为阴性。初步尝试可以全血于纸片代替血清进行检测,其检测结果与血清一致。对ELISA检测结果以肉眼判定,与OD值测定结果间的误差不超过3.?%。 相似文献
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将斑点酶联免疫吸附试验(Dot—ELISA)用于检测猪弓形虫抗体,并与常规ELISA和IHA法进行了比较。结果,对102份滴度下降的猪阳性血清检测,弓形虫抗体阳性检出率,Dot—ELISA为66.67%(68/102),常规ELISA为48.04%(49/102),IHA为27.45%(28/102);对675头商品猪血清检测,弓形虫抗体阳性检出率,Dot—ELISA为48.15%(325/675),常规ELISA为41.93%(283/675),IHA为33.80%(228/675);与3种寄生虫(猪囊虫、猪旋毛虫、住肉孢子虫)阳性血清无交叉反应;对123份弓形虫抗体阳性和158份阴性猪血清进行3次重复性试验,结果完全一致。结果证明,该法敏感性高,特异性强,操作简便快速(于接到病料后2h报告结果),便于在基层推广使用。 相似文献
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为比较两种商品化赤羽病抗体ELISA试剂盒的敏感性和特异性,以及ELISA和微量血清中和试验(SNT)的符合率,采用两种ELISA试剂盒和血清中和试验,对690份澳大利亚纯种荷斯坦奶牛血清进行牛赤羽病检测。试验结果显示:法国某公司生产的赤羽病ELISA试剂盒敏感性为93.42%,特异性为81.23%,与SNT间的Kappa值为0.615,为高度符合;日本某公司生产的赤羽病ELISA试剂盒敏感性为39.47%,特异性为96.1%,与SNT间的Kappa值为0.427,为中度符合。比较结果表明:日本某公司生产的试剂盒敏感性较低,容易漏检,不适合用于牛赤羽病初筛;在出入境检疫中,可以采用高通量、半自动化、敏感性高的ELISA方法,对血清样本进行筛选,再采用特异性强的SNT试验进行辅助验证。 相似文献
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鸡传染性鼻炎单抗阻断ELISA诊断试剂盒的研究 总被引:12,自引:0,他引:12
本研究在单抗阻断ELISA方法的基础上成功地建立了鸡传染性鼻炎阻断ELISA诊断试剂盒,结果证明,本盒具有较子的敏感性、特异性和重复性,在对临床病鸡、人工感染鸡和免疫鸡的检测中,A型检出率可高达75%-90%,C型的检出率也可达到60%。试剂盒在37℃可保存7天以上,4℃可保存10个月,-20℃可保存1年以上。是一种适合推广应用的良好的鸡传染生鼻炎诊断产品。 相似文献
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赤羽病间接ELISA检测方法的建立和标化 总被引:6,自引:0,他引:6
应用赤羽病病毒(AKV)OBE-1株和牛标准阴阳性血清,以蔗糖密度梯度离心纯化细胞毒为包被抗原,在国内首次建立了检测AKV抗体的间接ELISA方法。该方法与中和试验相关系数0.7614,特异性和重复性良好。应用此方法对南京、上海附近奶牛抽样检测,阳性率分别为26.7%和32.7%。对澳大利亚、加拿大、美国进口牛13600头份进行检测,全部阴性。 相似文献
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酶标单抗阻断ELISA检测鸡白痢和鸡伤寒抗体 总被引:3,自引:0,他引:3
以辣根过氧化物酶标记的沙门氏菌O9单抗3-47-0与包被的鸡白痢沙门氏菌脂多糖抗原建立了一种抗体阻断EL ISA以检测鸡白痢和鸡伤寒沙门氏菌感染。该方法基于待检血清样品抑制酶标单抗与脂多糖的结合,以检测鸡白痢和鸡伤寒特异性抗体。对72份已知鸡白痢阳性血清(抑制率为(98.5±4.0)%)、54份已知鸡白痢阴性血清(抑制率为(15.3±8.0)%)、42份SPF鸡血清(抑制率为(0.8±7.2)%)检测的结果表明,该方法具有很强的区分能力。在人工感染试验中,从第2周开始,该方法能从全部鸡只中检测到特异性抗体,比全血玻板凝集试验(PAT)早1周时间。对344份种鸡血清的检测结果表明,单抗阻断EL ISA比PAT特异性好、敏感性高。另外,该方法也能检测出与鸡白痢和鸡伤寒沙门氏菌有共同抗原的沙门氏菌感染产生的抗体。 相似文献
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赤羽病琼脂免疫扩散试验诊断方法的研究 总被引:13,自引:2,他引:11
应用引自美国和日本的羽病毒和标准阳性血甭,制备了琼脂免疫扩散试验(AGID)抗原和高免阳性血清,建立了赤羽病AGID诊断方法。应用此方法对上海、杭州、广州等地的1383头牛进行了检疫,AGID抗体阳性牛746头,阳笥率54.0%,与流行情况相符。同时对从澳大利亚、美国、新西兰和加拿大等国进口的牛、羊、猪血清162头份进行了检疫,全部为AGID抗体阴性。 相似文献
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本研究建立的检测狂犬病抗体的夹心阻断ELISA,直接利用未经提纯的病毒悬液代替提纯的抗原,并仅用一种酶标抗体,测定了9种动物的血清.本方法敏感度的95%可信限为0.0013~0.0071IU/mL,比小鼠中和试验和微量免疫酶试验均敏感.按阻断50%判定血清ELISA的阴阳性,9种动物的1134份血清中有91份阳性,其中发病点的牛、猪、犬、家鼠血清的阳性率均在10%以上.根据对一定量的抗原阻断率相同时,抗体浓度一致的原理,测定了7种动物的185份血清效价,结果狂犬病抗体浓度在0.01IU/mL以上的为63份.利用夹心阻断ELISA和小鼠中和试验测定了7种动物的23份血清,阳性份数分别为12和11.两种方法均证明家鼠血清中有狂犬病抗体.本研究表明,测定狂犬病抗体的夹心阻断ELISA,简便、敏感、快速,可用于流行病学调查. 相似文献