Diurnal rhythm: effects on hepatic regeneration and hepatic regenerative stimulator substance

The effect of a controlled lighting schedule on the activity of a weanling rat liver extract that stimulates DNA synthesis in regenerating adult rat liver, and on the response of the test animals to the extract, has been investigated. Both activity of the extract and endogenous DNA synthesis in the weanling animals follow the same distinct diurnal rhythm. Reversal of the lighting schedule reverses the rhythm of endogenous DNA synthesis but activity of the extract no longer correlates with the peak of DNA synthesis. Diurnal rhythm also has a striking effect on DNA synthesis in the regenerating test animal, but the extract increases DNA synthesis to the same relative degree, regardless of the time of day the hepatectomy is performed.     

DNA分子标记鉴定蔬菜作物种子纯度的原理分析

对ＤＮＡ分子标记鉴定蔬菜作物种子纯度的原理进行了分析。结果认为,鉴定种子纯度以ＲＡＰＤ技术为宜。ＲＡＰＤ标记鉴定常规品种种子纯度研究中,应选择目标品种Ａ的ＲＡＰＤ图谱中出现而其它常规品种（一般５￣１０个为宜）中不出现的ＤＡＮ谱带作为鉴定纯度用的特异谱带;鉴定杂交Ｆ１品种时,应将母本有,父本无、,Ｆ１有的ＤＮＡ谱带和母本元,父本有,Ｆ１有的ＤＮＡ谱带作为特异谱带,并且在实践鉴定中二者必须联合使用。     

左旋咪唑对金黄色葡萄球菌粘附素 ClfA重组 DNA 疫苗免疫效果的影响

为了探究左旋咪唑（LMS）作为免疫增强剂对金黄色葡萄球菌粘附素 ClfA 重组 DNA 疫苗免疫效果的影响.分别用含左旋咪唑的 ClfA 重组 DNA 疫苗、ClfA 重组 DNA 疫苗及空载体免疫昆明白小鼠,通过巨噬细胞吞噬试验、MTT 实验、免疫血清对金黄色葡萄球菌识别能力、酶联免疫吸附试验和攻毒试验验证免疫效果.结果表明,含左旋咪唑 DNA 疫苗组在巨噬细胞吞噬指数、脾脏淋巴细胞增殖、免疫血清对金黄色葡萄球菌识别能力方面有增强作用,与其他两组相比差异显著（P ＜0．05）,含左旋咪唑 DNA 疫苗组小鼠抗体水平及攻毒实验保护率高于单独 ClfA 重组 DNA 组和空载对照组,LMS 能够对 ClfA 重组 DNA 疫苗免疫效果起到增强作用.     

2种玉米胚乳DNA提取方法的比较

[目的]筛选出玉米胚乳DNA提取的最佳方法。[方法]采用改进的CTAB提取液,以高温和常温2种方法提取玉米胚乳基因组DNA,用紫外分光光度计、0.8%水平的琼脂糖凝胶电泳及PCR检测法比较了2种方法的提取效果。[结果]高温法所提玉米胚乳DNA浓度和纯度均达到分子生物学要求,而常温法所提DNA的纯度未达到分子生物学的要求。电泳检测表明,高温法提取的DNA均未降解,DNA条带整齐度较好,而用常温法提取的DNA都出现了降解。PCR检测结果表明,用高温法提取的DNA作模板的PCR所得条带清晰,明亮,而用常温法提取的DNA作模板的PCR条带不清晰。最佳聚乙烯聚吡咯烷酮(PVPP)的浓度确定为玉米籽粒重的6%~10%。[结论]高温法更适宜用作玉米胚乳DNA提取。     

TUNEL法和SCGE法评价奶牛性控冻精DNA损伤

末端转移酶介导的dUTP末端标记法(TUNEL)和单细胞凝胶电泳法(SCGE)常被用于检验细胞DNA的完整性。本研究采用这两种方法分别对性控、常规冻精进行检测,比较不同方法对精子DNA损伤的检测结果。结果表明:TUNEL法检测性控冻精DNA的损伤率为63.32±0.56%,显著高于(P0.01)常规冻精的31.67±1.03%;SCGE法检测性控冻精和常规冻精的DNA损伤率分别为64.00±0.68%和32.23±0.72%,差异极显著(P0.01)。而两种方法对性控冻精和常规冻精DNA损伤的检测结果间没有显著差异(P0.05),说明该两种方法均可用于冻精DNA损伤检测。     

魔芋DNA快速提取新方法及ISSR-PCR扩增

[目的]研究魔芋DNA的提取方法。[方法]采用CTAB、SDS及新改良的方法提取魔芋总DNA,通过分光光度计检测、电泳检测及ISSR-PCR检测方法进行比较分析。[结果]采用新改良的方法得到的DNA纯度及产量均较高,适于魔芋DNA的快速提取;以其为模板进行ISSR-PCR扩增,条带清晰,可获得较好的结果。[结论]为大规模提取高质量的魔芋DNA奠定基础,也为进一步研究魔芋的遗传多样性提供了分子依据。     

一种简单快速的DNA提取方法在水稻上的应用

采用了一种简单快速的DNA提取方法来提取水稻DNA,并用提取的DNA进行了PCR扩增。结果表明,该方法提取DNA不需要碾磨、离心等步骤,通过简单的加热、稀释等操作便能制备100个PCR反应的DNA模板,1h能提取96个样品的DNA。本研究成功地将该方法用于水稻SSR分析、白叶枯抗病基因Xa21的分子标记辅助育种和不育系纯度鉴定等方面。     

Absence of polymerase protein in virions of alpha-type rous sarcoma virus

Noninfectious particles of a mutant of Rous sarcoma virus failed to exhibit DNA polymerase activity even with the use of the most sensitive synthetic template-primer complexes. A neutralization blocking test against antibody to DNA polymerase revealed that these mutants did not contain protein immunologically related to the DNA polymerase.     

魔芋DNA快速提取新方法及ISSR-PCR扩增（摘要）

[目的]研究魔芋DNA的提取方法。[方法]采用CTAB、SDS及新改良的方法提取魔芋总DNA,通过分光光度计检测、电泳检测及ISSR-PCR检测方法进行比较分析。[结果]采用新改良的方法得到的DNA纯度及产量均较高,适于魔芋DNA的快速提取;以其为模板进行ISSR-PCR扩增,条带清晰,可获得较好的结果。新改良的方法与常规的SDS及CTAB方法相比,有以下优点：①效率高。运用冷冻研磨仪进行研磨,克服了研磨困难问题,节约液氮,且研磨效率大大提高,研磨时间短,褐变较少,1个人即可同时大批量进行提取;②提取质量高。在提取液中加入高浓度的PVP、β-巯基乙醇及KAc,有效去除了多酚和多糖等次生物质,检测结果DNA条带清晰,且无拖尾,更有利于大规模样本DNA提取;③用材少。需要的魔芋组织量少,适宜对较为珍贵的材料进行DNA提取,从而进行分子标记辅助育种、群体遗传多样性分析和种芋纯度鉴定的研究。[结论]为大规模提取高质量的魔芋DNA奠定基础,也为进一步研究魔芋的遗传多样性提供了分子依据。     

Remeasuring the double helix

DNA is thought to behave as a stiff elastic rod with respect to the ubiquitous mechanical deformations inherent to its biology. To test this model at short DNA lengths, we measured the mean and variance of end-to-end length for a series of DNA double helices in solution, using small-angle x-ray scattering interference between gold nanocrystal labels. In the absence of applied tension, DNA is at least one order of magnitude softer than measured by single-molecule stretching experiments. Further, the data rule out the conventional elastic rod model. The variance in end-to-end length follows a quadratic dependence on the number of base pairs rather than the expected linear dependence, indicating that DNA stretching is cooperative over more than two turns of the DNA double helix. Our observations support the idea of long-range allosteric communication through DNA structure.     

DNA分子标记检测种子纯度法的实验设计和统计评价

对ＤＮＡ分子标记检测蔬菜作物种子纯度法的实验设计和统计评价进行了分析。结果认为,分子标记检验蔬菜作物种子纯度时,进行两次重复较为合适,每次重复检测用种子数量相同,且以５０￣６０粒为宜。确定种子纯度时,可用点估计和区间估计;判定某一种子纯度是否属实时,应选用Ｕ检验法。     

快速小量提取小麦叶片DNA的一种简易方法

[目的]寻求少量、快速提取小麦幼叶DNA的方法。[方法]以小麦幼叶为试验材料,用改良的CTAB法小量快速提取转基因小麦总DNA。所提取的DNA以0．8％琼脂糖凝胶电泳检测。[结果]改良的CTAB法提取小麦基因组DNA所提取的DNA纯度高、无降解现象,适用于进行常规PCR扩增。[结论]该研究为小麦DNA的提取提供了一种所需材料量少、简便、快速的方法。     

20株土壤粘细菌系统发育研究

对从不同采集地土壤样本中分离的20株粘细菌菌株进行了系统发育分析及G+C mol%测定,以确定其系统发育地位。结果表明:供试菌株分属粘球菌属(Myxococcus)和珊瑚球菌属(Corallococcus)2个属的6个种,其中18株属于粘球菌属(Myxococcus),2株属于珊瑚球菌属(Corallococcus)。各供试菌株与已知相关菌株16SrDNA序列相似性在98.9%~100%之间。各供试菌株G+C mol%在63.12%~73.78%之间,除菌株93357的G+C mol%为63.12%,较其最近相关菌株黄色粘球菌(Myxococcus xanthus)DSM16526低5.26%外,其余同种内菌株的DNA的G+C mol%差异未超过5%,可作为粘细菌16S rDNA序列分析结果的验证性指征。     

微卫星DNA非变性PAGE银染法的分析探讨

微卫星DNA非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),是一种常用的DNA检测手段,具有很好的分离微小差异DNA片段的能力,而银染法使该方法得到了广大科研工作者的青睐,但是,在染色过程中,常可能出现一些问题,令结果的判断难以达到满意的效果.为此,对该方法进行了一系列的分析和探讨.     

3种植物DNA提取法中多糖类物质去除效果的研究

为探明DNA提取过程中去除多糖的有效方法,以丁香属3种植物为材料,用3种DNA提取方法（普通CTAB法、氯苯法和高盐法）提取丁香属植物基因组DNA。对提取的DNA质量采用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计法进行检测,并采用蒽酮硫酸法测定DNA提取过程中多糖含量的变化。结果表明：3种方法的多糖去除率相近且都比较高。高盐法与前两种方法相比对人体和环境危害较小且操作简单,是最适合该属植物的DNA提取方法。该方法采用了专门的去除多糖的步骤,为DNA提取过程中多糖的去除提供了一定的理论依据。     

基于支持向量机的DNA序列分类系统的设计与实现

针对传统统计方法进行DNA序列分类时要求DNA序列样本的概率分布函数已知，但多数情况下概率分布函数未知这一问题，采用支持向量机这一新的机器学习方法对DNA序列进行分类；以VB和Matlab为主要工具开发了基于支持向量机的DNA序列分类系统。结果表明：该系统能够动态选择DNA训练样本、待测试样本．以及支持向量机模型中的参数，并根据用户的指定条件动态输出计算结果；对于预测一批已知正确分类答案的DNA序列，系统能够自动统计识别率，以观察参数变化对于算法执行结果的影响。支持向量机能够在概率分布函数未知的条件下对DNA序列进行分类。     

改进的DNA指纹技术在玉米杂交种纯度鉴定上的应用研究

本试验以幼苗为对照,利用CTAB法建立了一套简单、快速的玉米干种子DNA提取程序,该程序提取的DNA分子量大小与幼苗法相当,能够利用SSR引物进行扩增,可应用于玉米杂交种纯度检测。     

快速小量提取小麦叶片DNA的一种简易方法

[目的]寻求少量、快速提取小麦幼叶DNA的方法。[方法]以小麦幼叶（只要是健康的绿叶,老叶也可）为试验材料,用改良的CTAB法小量快速提取转基因小麦总DNA。具体步骤为：①直接用已灭菌的1．5ml离心管夹取小麦叶片（无需称量）,然后在液氮中快速冷冻后用玻璃棒研磨成细粉（研磨直接在离心管中进行,不必先在研钵中研磨然后再转移到离心管里,能够有效减少材料损失）,加入600山预热（65℃）的2％CTAB提取缓冲液,快速振荡摇匀。置于65℃的水浴锅中温育30min,期间温和混匀几次。②取出离心管,冷却至室温,加入600m氯仿：异戊醇（24：1）充分混匀,于4℃下12000r／min离心8min（只抽提1次）。③取上清,加入等体积预冷的异丙醇,缓慢混匀,至有絮状DNA析出,-20℃放置30min以上。④4℃下12000r／min离心8min。弃上清液,将沉淀用700μl70％乙醇清洗2次,离心,弃乙醇,室温下挥发乙醇,加入适量ddH：O或0．1×TE溶解沉淀（DNA）,-20℃保存。所提取的DNA以0．8％琼脂糖凝胶电泳检测。[结果]改良的CTAB法提取小麦基因组DNA所提取的DNA纯度高、无降解现象,适用于进行常规PCR扩增,并且需要材料量少、成本低,还可缩短操作周期、节省时间。[结论]该研究为小麦DNA的提取提供了一种所需材料量少、简便、快速的方法。     

PCR方法检测鸡减蛋综合征病毒

根据已报道的鸡减蛋综合征(Egg drop syndrome 1976 EDS-76)病毒DNA序列,设计合成了1对能扩增300 bp DNA片段的引物,建立了EDS-76病毒的聚合酶链式反应(PCR)诊断方法。该方法对EDS-76病毒标准株AV-127扩增结果为阳性;对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)、鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)和鸡新城疫病毒(NDV)的扩增结果均为阴性。结果表明该方法特异且敏感,检测的最低病毒DNA含量达到2.5×10-2pg,PCR检测表明,从试验感染鸡的心脏中不能检测出病毒,肝脏和肾脏只有在感染后7~15 d检出,在试验感染后4~21 d的子宫、血液和4~17 d的脾中均能检测到病毒。