西藏八角莲种胚愈伤诱导的初探

以西藏八角莲成熟种子为材料,研究了外植体的不同处理方法、激素浓度及光照条件对愈伤诱导的影响。结果表明,在暗培养条件下,以带种胚的种子段为外植体,在MS＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 0.2 mg/L培养基上可以获得诱导率较高的愈伤组织,诱导率为66.7%。     

外源激素对桃儿七愈伤组织诱导的影响

为了探讨外源激素对桃儿七愈伤组织诱导的影响,以桃儿七的胚及无菌苗的子叶和胚轴为材料,以MS为基本培养基,研究了3种不同激素配比对不同外植体愈伤组织诱导的影响。结果表明,以胚为外植体,在3.0 mg/L 2,4-D、0.5 mg/L KT和0.5 mg/L IAA组合处理的培养基中,诱导率达到39.5%;诱导子叶和胚轴形成愈伤组织的最佳激素配比为4.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L KT+0.2 mg/L IAA;成熟胚比子叶和胚轴更易诱导愈伤组织的形成,诱导率分别提高了43.64%和315.79%,诱导效果最显著(P0.001);在接种前,用5mg/L 2,4-D溶液浸蘸子叶和胚轴可有效提高其出愈率。     

藏药桃儿七的快繁体系及其鬼臼毒素含量分析

[目的]建立藏药桃儿七的组培-移栽体系,并比较野生桃儿七与组培桃儿七的根茎中鬼臼毒素的含量差异。[方法]以藏药桃儿七种子为外植体诱导愈伤组织,将组培苗炼苗移栽,并利用高效液相色谱技术(HPLC)测定野生品桃儿七与组培品桃儿七的根茎中鬼臼毒素的含量。[结果]桃儿七带胚种段在MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L GA3培养基上愈伤诱导率最好,达33.33%;组培苗在蛭石基质中存活较好,成活率可达80%以上;西藏野生品桃儿七根茎中鬼臼毒素含量为1.01%,组培品中含量为0.087%。[结论]通过组织培养可在不破坏野生资源的前提下生产鬼臼毒素,该研究为桃儿七引种栽培提供了试验指导。     

酸枣成熟胚离体培养研究

为了建立酸枣成熟胚离体培养再生体系,以酸枣成熟胚为试验材料,研究启动培养基和增殖培养基对不同贮藏处理酸枣成熟胚萌芽率及增殖的影响。结果表明：以常温保存1a的成熟胚萌芽率较高（57.78％）,最佳启动培养基为不添加任何植物激素的M S培养基,而最适增殖培养基为1/2MS＋1.0 mg/L 6 BA＋0.3 mg/L NAA＋1.5 g/L PVP。     

甘蔗胚性细胞团诱导影响因子研究

以不同基因型甘蔗品种新台糖22号、新台糖16号、桂糖21号及拔地拉为供试材料,以近生长点0～3 cm的嫩叶鞘组织为外植体、MS固体培养基为基本培养基,研究诱导初期不同分化刺激培养时间和不同激素组合（2,4-D 1.0～7.0 mg/L、ABA 0～2.0 mg/L）对愈伤组织胚性细胞团诱导或分化的影响。结果表明,在MS＋6-BA 1.5 mg/L＋NAA 0.5mg/L培养基中对嫩叶鞘愈伤组织进行分化刺激培养24～72 h,可显著提高胚性细胞团的诱导率,以培养48 h的诱导率最高,平均诱导率为44.4%,比对照增加15.7个百分点;在不同激素组合培养基中,以在培养基MS＋2,4-D 3.0 mg/L＋ABA0.5 mg/L中培养的不同甘蔗品种胚性细胞团诱导率较高、生长较好,其次是MS＋2,4-D 3.0 mg/L;在分化培养基MS＋6-BA 1.5 mg/L＋NAA 0.1 mg/L中对来自不同诱导培养基的胚性细胞团进行分化培养,结果发现在MS＋2,4-D 3.0 mg/L＋ABA 0.5 mg/L和MS＋2,4-D 3.0 mg/L中诱导的胚性细胞团的绿苗分化率较高,不同甘蔗品种平均绿苗分化率分别为65.0%、64.9%,但绿苗生根率较低。     

玉米自交系幼胚高效再生系统的建立

以22份玉米自交系为试验材料,以幼胚为外植体,研究基因型、诱导（分化）培养基、继代次数、Ag-NO3浓度对玉米幼胚胚性愈伤组织的诱导、保持和植株分化的影响。结果表明,玉米幼胚培养能力受基因型、培养基及二者互作效应的影响,基因型是主要的影响因子。3 mg/L的2,4-D对胚性愈伤组织诱导和保持起关键作用;0.5 mg/L 6-BA抑制胚性愈伤组织的发生;8-12 mg/L AgNO3明显改善部分基因型愈伤组织质量,提高胚性愈伤组织诱导率。分化培养基中添加1 mg/L的KT和0.5 mg/L的IBA促进绿苗的分化和根系的生长。胚性愈伤组织继代3-5次后调整到最佳状态。确定了玉米幼胚培养胚性愈伤组织诱导的最佳培养基为N6＋3 mg/L 2,4-D＋8-12 mg/L AgNO3＋0.2 mg/L IAA,最佳分化培养基为N6＋1 mg/L KT＋0.5 mg/L IBA。     

蝴蝶兰无菌播种及快繁技术研究

以蝴蝶兰无菌种子为材料,对蝴蝶兰种子消毒和萌发、原球茎诱导、增殖和分化培养、芽生根培养基、壮苗培养基配方进行研究。结果表明,种子经次氯酸钠和洗衣粉消毒,有利于促进种子萌发和原球茎的形成;最适合种子萌发的培养基为MS＋香蕉泥100g/L＋马铃薯50g/L＋NAA 0.5mg/L;原球茎的形成及增殖培养以MS＋6-BA 2.0mg/L＋NAA0.1mg/L＋香蕉泥100g/L为佳,分化培养基为MS＋6-BA 0.1mg/L＋NAA 0.1mg/L＋香蕉泥80g/L＋蔗糖20g/L＋活性炭2.0g/L＋卡拉胶7.0g/L。小苗生根培养基为MS＋NAA 0.1mg/L＋香蕉泥100g/L＋蔗糖20g/L＋卡拉胶7.0g/L＋活性炭2.0g/L,生根率达98%以上;壮苗培养基为MS＋香蕉泥80g/L＋马铃薯汁50g/L＋蔗糖20g/L＋卡拉胶7.0g/L＋活性炭2.0g/L。经过适当驯化处理,将壮苗移栽到疏松的水草或苔藓基质中,注意温度、湿度及光照管理,成活率可达90%以上。     

用于遗传转化的花生植株再生体系研究

以广西花生主栽品种桂花17和桂花22的成熟种子胚小叶为外植体,探讨外植体处理方式、不同激素组合和蔗糖浓度对外植体不定芽诱导、继代、生根培养的影响。结果表明,在MS培养基中预培养0、4d的花生种子的胚小叶利于不定芽的诱导,具有较高的分化率;近叶柄1/3处横切的小叶不定芽分化率较远离叶柄部位的高。适宜小叶不定芽分化的蔗糖浓度为40～50g/L,40、50g/L蔗糖分别利于桂花22、桂花17不定芽的分化。培养基MS＋4.0mg/L 6-BA＋1.0mg/L NAA＋2.0mg/L AgNO3对桂花17不定芽的分化效果较佳,MS＋6.0mg/L 6-BA＋1.0mg/L NAA＋2.0mg/L AgNO3利于桂花22不定芽的分化,两者的不定芽分化率均达100%;继代培养基MS＋1.5mg/L 6-BA＋0.4mg/L NAA有利于促进两个花生品种的不定芽成苗,而最佳生根培养基为1/2 MS＋0.5mg/L 6-BA＋2.0mg/L NAA。已构建的花生植株再生体系,不定芽分化率高,再生植株多,适合进行花生的遗传转化。     

蜡梅花药离体培养研究初报

本研究主要探索了蜡梅花药离体培养中灭菌方式及愈伤组织诱导影响因素。结果表明：外植体灭菌采用4%次氯酸钠直接处理花药20 mim的方式最为方便有效;非胚性愈伤组织诱导培养基为：MS＋2,4-D 2.0 mg/L＋6-BA0.5 mg/L＋蔗糖20 g/L;胚性愈伤组织诱导培养基为：MS＋2,4-D2.0 mg/L＋6-BA1.0 mg/L＋蔗糖40 g/L。     

两个牡丹杂交系种子胚培养技术研究

为保存和扩繁牡丹杂交系种质资源,提供牡丹组培苗的菌根化供试体系,本试验筛选牡丹杂交系‘Z1-10-3’和‘Z1-WM’的种子,取种胚进行胚培养,建立了牡丹胚培养无菌体系。结果表明：成熟种子经70%酒精2min与0.1%HgCl20 min表面消毒后去外种皮切开胚乳直接取胚接种,3 d时启动率达76.7%,比直接用种子和去外种皮的种子接种启动时间提前30～50 d。胚根苗直接培养的最佳培养基和培养条件为：1/2MS＋IBA1.0mg/L＋AC0.4g/L＋Sugar30g/L,在自然弱光照下培养。     

红心材马尾松胚培养研究

采用正交试验设计，研究不同基本培养基和激素配比对红心材马尾松胚培养的影响。结果表明，沙子和无菌水培养基上的种子萌发率最高，达到71.6％，苗长得最好。WPM＋6 BA 2 mg/L＋NAA 0.3 mg/L＋KT 0.2 mg/L培养基为最佳增殖培养基，增殖系数最高，达到7.3，芽高度较高、粗壮。以1/2WPM＋ABT1＃0.8 mg/L＋NAA 0.1 mg/L培养基不定芽生根率最高，达到69.7％。     

文冠果细胞悬浮培养技术研究

[目的]建立文冠果体细胞胚胎发生和快速成苗的悬浮培养体系,为文冠果的产业化和规模化发展提供参考。[方法]以文冠果新旧种子为材料,诱导体胚发生,进行文冠果细胞悬浮培养。[结果]适合胚性愈伤诱导的最佳培养基为MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．5mg／L＋2,4-D0．5mg／L＋3％蔗糖;适合胚性愈伤组织不定芽诱导培养的最佳诱导培养基为MS＋6一BA1．0mg／L．4-NAA1．0mg／L＋3％蔗糖,且萌芽率最高;适合单细胞团再生植株培养的最佳培养基为MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．2mg／L＋3％蔗糖。[结论]NAA和2,4-D混合使用有利于胚性愈伤组织的形成;一定浓度的NAA对文冠果愈伤组织萌芽培养有较大的促进作用。     

奥迪亚无核葡萄胚抢救技术研究

以奥迪亚无核葡萄为试材,对其果实发育及胚抢救技术进行了研究。结果表明：花后49 d是奥迪亚无核葡萄幼胚抢救的最佳时期;NN69＋NAA 0.2 mg/L＋GA 0.4 mg/L＋BA 0.5 mg/L是奥迪亚无核葡萄的最佳胚抢救培养基,其胚发育率达到76.67%,胚萌发率达到26.67%;低温培养可促进其幼胚的发育。     

银杏胚芽组织培养试验初报

以徽县地方银杏品种田河1号为试材,研究了银杏胚培养中适宜的培养材料处理方式、适宜的初代培养基以及激素对继代培养的影响。结果表明,将剥去外壳的银杏在2 g/kg Hg Cl2中浸泡10 s后滤干水分,然后在超净工作台上切开取出胚接入MS＋0.3 mg/L 6-BA＋2 g/L AC培养基,分化生长良好;适宜的初代培养基为MS＋0.3 mg/L 6-BA＋2 g/L AC和MS＋0.5 mg/L 6-BA＋2 g/L AC,继代培养基为MS＋1.0～2.0 mg/L 6-BA＋0.5mg/L NAA＋2 g/L AC。     

玉米自交系愈伤组织诱导及植株再生体系的建立

玉米的组织培养比较困难,其再生体系还不完善,建立骨干自交系稳定、高效的遗传转化体系是玉米转基因技术的必要前提。以玉米常用自交系齐319、478、502、黄C和7922不同大小（1.0、1.5和2.0 mm）的幼胚为外植体,探讨不同基因型、胚大小和植物生长调节剂浓度对幼胚再生的影响,从而建立玉米高频再生体系。结果表明：以1.5 mm大小的齐319幼胚为外植体,愈伤诱导率最高,达到了86.2%;1.5 mg/L的24-D有利于胚性愈伤的形成和胚性的保持;两步法分化培养可以提高愈伤组织分化、再生成苗。确定了玉米自交系齐319较适合的培养程序为：将1.5 mm大小的幼胚盾片向上接于诱导培养基（N6＋24-D 1.5 mg/L＋L-脯氨酸0.7 g/L＋蔗糖30 g/L＋琼脂粉8 g/L＋硝酸银5μmol/L）,在25℃下暗培养20 d;挑选胚性愈伤组织在温度25℃、暗培养条件下进行继代培养,继代培养基与诱导培养基相同,每14 d继代1次;将愈伤组织继代42 d后转移至分化培养基1（MS＋肌醇100 mg/L＋蔗糖60 g/L＋gelrite 3 g/L）,继续暗培养10 d左右,待愈伤组织形成象牙白色的块状物且有绿点出现时,将其转移到分化培养基2（MS＋肌醇100 mg/L＋蔗糖30 g/L＋gelrite3 g/L）进行光培养,2～3 d即可分化出苗;待幼苗长到4～5 cm高时,移至生根培养基（1/2 MS＋IBA0.8 mg/L＋蔗糖30 g/L）,14～21 d幼苗长出大量的根系,形成完整的植株。     

碧玉兰×虎头兰种间杂交胚培养技术研究

以兰科兰属碧玉兰(Cymbidium lawianum)为母本,虎头兰(C.hookerianum)为父本进行杂交,分期采收种子进行培养,研究兰属附生兰杂交胚培养技术。结果表明,杂交种子完全成熟约需1年时间,授粉90 d的幼胚即具有良好的萌发能力;添加活性炭可促进杂交胚萌发,提高成活率,早期胚培养以1/2 MS NAA 1 mg/L 6-BA 0.1 mg/L 活性炭2 g/L萌发最佳;芽、根分化培养则以1/2 MS NAA 0.5 mg/L 6-BA 2 mg/L 香蕉泥100 g/L效果最好;壮苗培养基中加入香蕉汁和2,4-D效果明显,以1/2 MS NAA 0.5 mg/L 6-BA0.5 mg/L 2,4-D 0.3 mg/L 香蕉泥100 g/L最理想;注意光、温、湿的配合,炼苗成活率达90%以上。     

地被菊直接体细胞胚发生研究

该文建立了地被菊品种‘玉人面’直接体细胞胚受体体系。试验以‘玉人面’叶片为外植体,研究了培养基、生长调节剂等因子对其直接体细胞胚诱导的影响,同时还进行了抗生素敏感性试验。结果表明:①在相同浓度下,KT诱导体胚的效果优于6-BA;②体胚诱导培养基为MS＋KT 20 mg/L＋2,4-D 2.0 mg/L＋NAA 0.5 mg/L,诱导10 d后,转入去除2,4-D的体胚发育培养基MS＋KT 2.0 mg/L＋NAA 0.5 mg/L中培养30 d,体胚发生率最高为93.0％,平均每外植体分化的体胚数为13.6个; ③MS基本培养基对‘玉人面’体胚发生的效果优于N 6、B5 培养基;④‘玉人面’直接体胚发生途径的基因转化的卡那霉素选择压为10 mg/L,头孢霉素前期（3～4周内）选择压为300 mg/L,后期（4周后）为100 mg/L。      

香樟子叶胚体胚发生诱导的研究

以香樟的子叶胚为外植体,以 MS 为基本培养基,研究不同植物生长调节剂组合对香樟子叶胚体胚发生诱导的影响。结果表明,配方 MS＋2,4 D 0·5 mg/L＋6 BA 1·0 mg/L＋水解酪蛋白（CH）1·0 g/L 对香樟子叶胚的体胚发生诱导率较高,诱导率为83·3％,平均体胚数为3·4枚,且生长状态较好;香樟体胚经萌发诱导处理后,萌发率可达48％。     

赤霉素、光照及基因型对花生体细胞胚诱导和植株再生的影响

【目的】完善花生离体再生繁殖体系,为花生的遗传转化提供技术支持。【方法】以桂花系列花生品种为材料,以胚小叶为外植体,MS＋10mg/L2,4-D为体细胞胚诱导基本培养基,MS＋3mg/L6-BA＋0.8mg/LNAA＋（0～15mg/L）GA3为苗诱导基本培养基,研究光照、赤霉素和基因型对花生体细胞胚诱导和植株再生的影响。【结果】在光暗比14∶10条件下,花生体细胞胚诱导率明显高于全黑暗培养,体细胞胚诱导率增加7.5～37.5个百分点。在不同花生品种中,桂花26体细胞胚诱导率最高,达62.8%,桂花833最低,为21.7%。在成苗培养基中添加5～15mg/LGA3利于提高体细胞胚的成苗率。桂花26和桂花771在5mg/LGA3处理下成苗率最高,分别为42.8%和35.3%;桂花836、桂花1026、桂花833在15mg/LGA3作用下成苗率最高,分别为38.7%、33.3%、26.4%。所有品种与GA3组合中,以桂花26与5mg/LGA3组合成苗率最高,其次是桂花836与15mg/LGA3组合。【结论】适宜的光照条件有利于花生体细胞胚的发生;成苗培养基中添加GA3利于促进体细胞胚诱导成苗;桂花26和桂花836是体细胞胚诱导植株再生较理想的材料。     

早熟罐藏黄桃胚培养技术研究

试验以果实发育期75d的地方黄桃品种早黄金×果实发育期75d的巴西58号的杂交种为试材,探讨了早熟黄桃胚培养和移栽技术。结果表明：以F14＋6-BA1．0mg／L＋GA1．0mg／L＋IBA0．1mg／L结合4℃低温处理60d,之后光照培养为最好,利于胚的发育,胚培苗生长健壮;试管苗移栽以园土、珍珠岩、蛭石（体积比1：1：1）混合基质为最佳,移栽后7d内要注意保湿,之后逐渐放风透气,提高移栽成活率。