猪伪狂犬病毒Taqman-MGB荧光定量PCR检测方法的建立及应用

本研究根据猪伪狂犬病病毒gE基因序列,设计一对特异引物和探针,通过优化反应条件,建立了可区分猪伪狂犬野毒株及基因缺失疫苗株的TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法。结果表明：TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法灵敏度可达2.23×101拷贝/μL,比常规PCR检测方法高100倍;同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪细小病毒（PPV）、均为阴性,无交叉反应;对30份疑似病料的TaqMan荧光定量PCR和普通PCR检测阳性率分别为40%和33%,两者符合率90%。表明该方法灵敏度高、特异性强、重复性好,可同时检测大量样品,可适合于PRV的临床诊断和流行病学调查。     

山东某猪场繁殖障碍性疾病的诊断研究

采用ELISA、PCR、RT-PCR及细胞培养等方法对山东某猪场流产、死胎及出生后几天死亡的小猪进行猪瘟病毒(CSFV),伪狂犬病毒(PRV),圆环病毒2型(PCV-2),细小病毒(PPV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)五种繁殖障碍性疾病进行检测,并应用ELISA猪瘟抗原检测试剂盒检测猪瘟病毒.检测结果表明,猪瘟病毒与圆环病毒2型为阳性,猪繁殖与呼吸综合征病毒、细小病毒、伪狂犬病毒均为阴性.根据结果判定该猪场发生猪瘟病毒与圆环病毒2型混合感染的繁殖障碍性疾病,其中以猪瘟感染最为严重.     

规模化猪场猪繁殖障碍类疫病的血清学调查

母猪繁殖障碍性疫病是以母猪发生流产、产死胎、胎儿干尸化、产弱仔、畸型胎和不育为主要特征.随着养猪生产向集约化、工厂化方向发展,各养殖场均采用了先进的生产设备和饲养工艺,生产规模和饲养数量不断增加.在提高饲养技术水平的同时,疫病的防治难度也越来越大,尤其是繁殖障碍类疫病的发生,已成为制约规模猪场健康发展的难题之一.为此,我们对全区南北疆8个出现繁殖异常的规模化猪场进行了能引起猪繁殖障碍症状的主要疫病--猪瘟、猪伪狂犬病、细小病毒病、繁殖与呼吸障碍综合症和布鲁氏菌病的血清学调查,以便为有效防制该类疫病提供科学依据.     

生猪重大疫病“三苗两点注射”免疫方法和优点

生猪重大疫病"三苗两点注射"免疫方法,是指将国家要求强制免疫的猪瘟、高致病性猪蓝耳病两种疫苗同时用猪瘟疫苗稀释液或高致病性猪蓝耳病疫苗稀释液按1∶1∶1的比例稀释后一次性注射到猪一侧颈部肌肉内,另一侧颈部同步注射猪O型口蹄疫合成肽疫苗的免疫方法。1.操作要点一是稀释疫苗。疫苗稀释前应恢复到     

一起输入性猪蓝耳病的诊断与防制

猪的蓝耳病又称猪繁殖与呼吸综合症,是猪的一种新的病毒性传染病,以母猪繁殖障碍和不同年龄猪的呼吸困难为主要特征,由于发病时猪的耳朵会发绀变蓝,又称蓝耳病.2006年,哈密地区发生了第一起输入性的猪蓝耳病,造成猪群母猪流产、仔猪死亡,现将发病情况、诊断方法及采取的防制措施报告如下.     

北屯市部分猪场主要传染病抗体检测与分析

为了解北屯市周边地区养猪场主要疫病免疫效果。采集北屯市周边地区5个养猪场不同猪群的1 008份血清样本，应用ELISA抗体检测方法，对其进行口蹄疫（FMD）、猪瘟（CSF）与猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）抗体检测。结果表明，该地区口蹄疫病毒（FMDV）、猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRSSV）的平均血清抗体阳性率分别为84.33%(850/1 008)、86.61%(873/1 008)和87.30%(880/1 008)，且各养殖场之间差异不显著（P> 0.05），猪群整体免疫符合国家相关规定（> 70%）。说明北屯市周边地区猪场主要疫病免疫效果良好，但距离创建净化场还有差距，需要动物防疫部门和养猪场共同努力，修改完善免疫方案，切实提高猪群免疫水平，为北屯市养猪行业健康发展奠定坚实基础。     

猪繁殖与呼吸障碍综合症的诊断与防制

自2 0 0 1年8月以来,石河子垦区的一些个体养猪户和少数集约化猪场陆续发生以怀孕母猪流产、早产、死胎、木乃伊、弱仔和仔猪发生肺炎症状为特征的一种猪病,经临床和实验室诊断,确诊为猪繁殖与呼吸障碍综合症(猪蓝耳病) ,随后采取了相应的防制措施,控制了病情的发展和漫延,现报     

抗伪狂犬病毒闽A株单克隆抗体的制备及鉴定

用纯化的猪伪狂犬病病毒闽A株(PRV-FA)免疫Balb/c鼠,取脾细胞和骨髓瘤细胞进行细胞融合,经间接ELISA筛选,获得2株能稳定分泌伪狂犬病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为4G9E9和4H9C9.这2株杂交瘤细胞株细胞培养上清和小鼠腹水效价(EusA)分别为1:6 400、1:12 800及1:12 800、1:25 600.特异性鉴定结果表明,各株单抗均不与猪瘟病毒、乙脑病毒、猪呼吸繁殖障碍综合症病毒、猪细小病毒等发生交叉反应,这2株抗PRV杂交瘤细胞株的获得为进一步建立准确快速的抗原检测方法奠定了基础.     

四十五团高致病性猪蓝耳病应急防治措施

高致病猪蓝耳病是由猪繁殖与呼吸综合症(俗称蓝耳病)病毒变异株引起的一种急性高致病性传染病。仔猪发病率100%,死亡率50%以上,母猪流     

临床上怎样快速正确诊断副猪嗜血杆菌

副猪嗜血杆菌病,已经成为猪场的常见和多发病,不但可直接造成猪发病或死亡,而且常与猪繁殖与呼吸综合征、圆环病毒、流行性感冒、伪狂犬病等并发或继发,严重危害养猪业的发展。     

规模化猪场仔猪猪瘟母源抗体效价动态检测

仔猪猪瘟母源抗体的存在,可使仔猪在一定时间内被动地得到保护,但又给免疫接种带来影响。试验采用IHA法对哺乳母猪及其所产未进行猪瘟疫苗超前免疫的初生仔猪进行了猪瘟抗体检测,结果显示,26头母猪在整个哺乳期的抗体效价均达标,并且处于较高水平,被检仔猪在出生后15~20日龄时母源抗体水平达到最高值,随后保持相对稳定,20日龄后开始逐渐回落,至35日龄时母源抗体水平低于保护临界值。鉴于此,该养猪场在不进行猪瘟超前免疫的情况下,猪瘟疫苗首免日期应安排在30~35日龄之间。     

临床上怎样快速正确诊断副猪嗜血杆菌病

<正>副猪嗜血杆菌病,已经成为猪场的常见和多发病,不但可直接造成猪发病或死亡,而且常与猪繁殖与呼吸综合征、圆环病毒、流行性感冒、伪狂犬病等并发或继发,严     

荧光定量PCR技术在猪病毒病诊断上的应用

摘要：荧光定量PCR技术融汇了传统PCR技术灵敏、快速、特异的特点以及光谱技术的高敏感性和高精确定量的优点,以直接探测PCR过程中荧光信号的变化获得定量的结果。因其具有特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全封闭反应等优点,为动物疫病诊断技术提供了新的模式,成为当前动物疫病检测广泛采用的分子生物学诊断技术。论文就实时荧光定量PCR技术在猪瘟、猪繁殖与呼吸综合症、猪圆环、猪流感等猪病毒病检测上的应用作一综述,以期为猪病毒病的防控提供参考。     

辽宁省猪血凝性脑脊髓炎病毒抗体的血清学调查

摘要： 从辽宁省各地区采集猪血清样本,应用血凝和血凝抑制试验检测血凝性脑脊髓炎病毒(HEV)抗体。结果,910份样品中有451份呈现HEV抗体阳性反应,阳性率为49.6%;抽检了10个规模化养猪场共280份样品,阳性率高达70.0%;抽查了不同年龄阶段猪血清样品,种母猪阳性率最高,为73.8%,仔猪次之,为67.5%,育肥猪最低,为37.0%。调查证明辽宁省各地区普遍存在HEV感染,被采集血清的成年猪未表现临床症状,说明HEV在本地区的猪群中主要表现为隐性感染,仔猪有少数出现症状,诊断为HEV与猪瘟或猪繁殖与呼吸综合征等混合感染。关键词：血凝性脑脊髓炎病毒;血清学调查;猪;     

＂一猪三针＂免疫效果好

“一猪三针”免疫是指在接种猪瘟疫苗、猪口蹄疫疫苗、高致病性猪蓝耳病疫苗时在同一猪体上分3个部位一次性进行注射。这是昌宁县2012年春季在云南省动物疫病预防控制中心小试、保山市动物疫病预防控制中心中试基础上新推广的生猪免疫方式,与传统的免疫方式相比,该免疫方法省时省力,生猪应激次数减少,疫苗利用率得到提高,同时免疫副反应也小,生猪养殖户特别是广大农村散养户容易接受。     

猪繁殖与呼吸障碍综合征检测技术的研究进展

猪繁殖与呼吸障碍综合征(PRRS)是以母猪繁殖障碍和仔猪严重的呼吸道症状及高死亡率为特征的猪病毒性传染病。其发生与流行给养猪业造成巨大的经济损失,现已成为危害养猪业较严重的病毒性疾病之一。及时、准确地检测出该病以便采取相应的措施, 是成功防制该病的关键。本文就从血清学、病原学、分子生物学等方面阐明了猪繁殖与呼吸障碍综合征的检测技术,从而为兽医临床诊断与治疗提供参考。     

湖北省规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征血清学检测

为了解湖北省内规模化养猪场猪繁殖与呼吸综合征的感染及疫苗免疫状况,在省内17个地市的50个规模化猪场采集5160份血清样品进行了PRRSV抗体检测。结果显示:未免疫猪场PRRSV抗体平均阳性率为33.54%(21.10%~46.92%),其中公猪的阳性率为0,母猪的阳性率为7.69%,而育肥猪、保育猪及哺乳仔猪的阳性率分别为34.24%、28.18%和38.53%;免疫猪场PRRSV抗体平均阳性率为75.52%(68.46%~100%),其中公猪的阳性率为100%,母猪的阳性率为96.78%,育肥猪、保育猪及哺乳仔猪的阳性率分别为70.07%、74.28%和68.46%。说明PRRS在湖北省普遍流行,且感染程度高,流行范围广,应引起足够的重视。     

猪瘟病毒C株重组标记疫苗的构建

利用构建的猪瘟病毒C株感染性克隆作为骨架,利用猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因作为标记基因,将GP5基因引入猪瘟病毒感染性cDNA中,体外转录得到RNA,转染SK6细胞后,检测了传代细胞中重组猪瘟病毒包含GP5区段的一段重组序列。结果表明,GP5基因稳定地插入在重组病毒基因组中,改造后的重组病毒可望作为C株活病毒标记疫苗。     

高致病性猪蓝耳病和猪瘟混合感染的诊断

2008年,我县育肥猪和仔猪价格居高不下,激发了很多人养猪的热情。很多养猪户在当地买不到仔猪和外二元母猪,只好到外地去调购。由于外地购来的猪各种疫苗的注射不全面,甚至没有注射疫苗,又加上长途运输的应激反应,一些外地猪调入后不久就开始发病,给养猪户造成了严重的经济损失。现将某猪场调入猪发生高致病性猪蓝耳病和猪瘟混合感染的诊断报告如下：     

三种猪繁殖障碍疾病的流行病学调查

通过对河南省不同规模猪场问卷调查、现场问询调查和采样检测，获取有关猪瘟（CSF）、猪繁殖障碍与呼吸综合征（PRRS）、圆环病毒病（PCV-Ⅱ）等疫病流行病学的相关情况。结果表明，PRRSV阳性猪场为34.4%，CSFV阳性猪场为41.7%，PCV-Ⅱ阳性猪场为36.2%；CSFV与PRRSV、PCV-Ⅱ混合感染分别占CSFV感染的24.54%和37.79%；PRRSV与PCV-Ⅱ混合感染占PRRSV感染的36.87%。提示猪群中三种疫病感染严重，CSFV、PRRSV与PCV-Ⅱ混合感染比较普遍