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早孕因子(EPF)是一种免疫抑制性的调节因子,目前普遍认为它是热激蛋白家族成员伴侣蛋白10 的同系物,是最早确认妊娠的生化标志之一,可用花环抑制试验做生物学鉴定。EPF的可用于预测早期胚胎发育情况,帮助了解妊娠母体对胚胎的识别,免疫耐受等机制。早孕因子的发现及研究在生殖生物学领域中具有非常重要的意义。 相似文献
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采用硫酸铵分级盐析、DEAE-52纤维素离子交换层析、G-100葡聚糖凝胶层析、ConA-Sepharose 6B LL亲和层析的方法分离纯化健康怀孕奶牛(妊娠4个月)乳中的早孕因子,以SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其肽图。结果表明:从孕牛乳中分离出EPF活性样物质,其蛋白含量为0.290 mg/mL,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳见2条蛋白带,其相对分子质量为21.0 ku、67.0 ku。说明这条分离纯化早孕因子的技术路线是可行的。 相似文献
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为了获取大量具有免疫原性的早孕因子(EPF)重组蛋白,通过PCR技术扩增得到Hela细胞EPF基因片段,与pREST-A连接。将质粒pREST-A-EPF转化大肠埃希菌BL21后IPTG进行诱导表达,采用His标签蛋白纯化试剂盒纯化重组蛋白后,再用SDS-PAGE和Western blot分别鉴定其纯度和特异性。结果表明,EPF cDNA以正确的阅读框架插入表达载体pREST-A,经IPTG诱导后高效表达EPF重组蛋白,Western blot表明其与抗EPF抗体特异性结合。论文构建了EPF的原核表达载体,纯化获得了重组蛋白,为进一步开展EPF蛋白的相关研究和猪早孕诊断试剂盒的开发奠定了基础。 相似文献
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孕牛血清中早孕因子的分离纯化 总被引:2,自引:0,他引:2
采用DEAE-Sepharose(DEAE-琼脂糖凝胶)、CM-Sepharose(CM-琼脂糖凝胶)等离子交换层析、抗孕牛全血清IgG-Sepharose 4B亲和层析等技术,分离纯化妊娠4-5个月健康孕牛全血清中的早孕因子(EPF),用玫瑰花环抑制实验对各阶段产物EPF活性进行检测。结果表明,经层析过柱后的CM-ⅡA提取物有EPF活性。经SDS-PAGE银染显色证实它含有分子量为21、67、80KD的蛋白,实验结果支持21KD的多肽为主要EPF活性物成分。同时实验表明了亲和层析对进一步纯化EPF是可行的。 相似文献
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牛早孕因子的分离纯化及其活性和含量测定向际尧,李鹏程,孙文东,努尔波拉提(中国科学院新疆化学研究所生化研究室,乌鲁木齐830011)早期妊娠因子(EarlyPregnancyFactor,EPF),由澳大利亚学者H。Morton等人在1974年应用玫... 相似文献
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早孕因子的生物学特性及其在动物繁殖领域中的应用 总被引:1,自引:1,他引:1
早孕因子(early pregnancy factor,EPF)最初发现于孕鼠血清,是妊娠哺乳动物血清中存在的一种具有免疫抑制和生长调节作用的妊娠相关蛋白。EPF的氨基酸序列包括102个氨基酸残基,与伴侣蛋白10(chaperonin 10,Cpn10)高度同源,是Cpn10在细胞外发挥的效应,对温度、酸碱度的耐受性较强,无动物及品种特异性。其生物学特性主要体现在抑制免疫和生长调节两方面:①EPF具有抑制母体的免疫反应而使精子、胚胎免受免疫排斥的作用,也是目前最早确认妊娠的生化标志之一;②EPF能促进肿瘤细胞的生长,也能促进烧伤、溃疡等伤口的愈合。由于EPF能增强抗淋巴细胞血清抑制T细胞花环的形成,因此,玫瑰花环抑制试验是检测EPF活性的经典方法。EPF在动物繁殖领域可用于动物的早期、超早期妊娠诊断,妊娠中断的检测,胚胎移植后的成活情况检测,在评价雄性繁殖力和繁殖免疫疾病的治疗等方面有着重要价值。 相似文献
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畜禽生长激素释放因子(GRF)的研究进展 总被引:4,自引:0,他引:4
生长激素释放因子(growth hormone- releasing factor,GRF)又称生长激素释放激素(growth hormone- releasinghorm one,GHRH) ,是存在于脊椎动物体内的一种生物活性多肽,由下丘脑合成并分泌,对脊椎动物的生长、发育及代谢调控起着极其重要的作用。其主要功能是,作为脑垂体生长激素(growth hormone,GH)的正性调控因子,能特异地诱导生长激素的合成与分泌,增高动物机体内的GH水平。而生长激素释放抑制因子(som atostain,SS)则抑制GH的合成与释放。GRF与其伴随的SS低谷诱发形成GH的分泌峰,峰的高度取决于GRF的强度及垂体对GRF的敏感… 相似文献
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本研究旨在表达、纯化奶牛早孕因子重组蛋白及制备多克隆抗体.本试验构建奶牛早孕因子重组蛋白原核表达载体pET32a-EPF,转化至大肠杆菌BL21(DE3)内进行诱导表达,SDS-PAGE切胶纯化的早孕因子重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,并用Western blotting和ELISA对重组蛋白及抗体进行检测.结果显示,成功表达并纯化了奶牛早孕因子重组蛋白,重组蛋白分子质量约37 ku,表达量约占菌体总蛋白的48.6%,纯化后目的蛋白纯度可达93%,重组蛋白可与所制备的多克隆抗体结合,ELISA测定的抗体效价为1:12 800.结果表明,本研究成功表达并纯化了奶牛早孕因子重组蛋白,为研究奶牛早孕诊断奠定基础. 相似文献
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杨在清 《国外兽医学(畜禽疾病)》1995,16(2):5-9
本文介绍了近年来血小板活化因子、早孕因子胚胎干扰素,胰岛素样生长因子、转化生长因子及其它细胞因子的分子特征、分泌特性以及在早孕期的生物学功能的研究进展。 相似文献
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假孕是母犬的一个重要的生殖缺陷,因为假孕不仅是造成经济损失,更重要的是母犬假孕引起的后果相当严重,易造成母犬子宫疾患等。妊娠诊断是人类在认识动物生殖规律的基础上建立的繁殖技术之一,是提高动物繁殖力的重要技术手段。在动物配种以后,尽早地判定其妊娠与否或及时监测胚胎发育的状况,以便对已妊娠者加强饲养管理,对未妊娠者找出原因,及时补配或进行必要的处理。这对于缩短动物的产仔间隔期,提高其繁殖力具有重要的意义 相似文献