鸡马立克火鸡疱疹病毒（Fc—126株）的标准化研究：Ⅵ.HVT克隆株的稳定？…

对ＨＶＴ克隆株进行了稳定性测定,结果表明克隆株稀释后室温存放１小时,病毒滴度损失不超过３０％,符合有关规定。在－７０℃和－２０℃下保存,克隆株保存期分别至少可达３年和２．５年。用克隆株试制的３批产品在野外使用效果良好,无任何不良反应。     

鸡马立克火鸡疱疹病毒（Fc—126株）的标准化研究：Ⅳ.HVT克隆株（330801…

ＨＶＴ克隆株（大斑３３０８０１）大剂量（１０头剂）免疫１日龄有母源抗体的雏鸡，在１０周的观察期内未见任何不良反应和肉眼可见病变，半数保护量（ＰＤ５０）为６０ＰＦＵ。病毒的免疫剂量（ＰＦＵ数）与抗攻毒保护力及与雏鸡的增重呈正相关。     

鸡马立克火鸡疱疹病毒（FC—126株）的标准化研究：I.Fc—126株的纯化…

用于预防鸡马立克氏病（ＭＤ）的火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ）Ｆｃ－１２６株细胞培养低代毒经过一日龄ＳＰ雏鸡体连续回传五代，于最后一代回收病毒后，超声波裂解释病毒，接种在鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）上，挑选蚀斑纯化的克隆株。经过三代克隆纯化后，最后挑选出２３个蚀斑克隆株，３个中蚀斑克隆株和５个小蚀斑克隆株。对部分克隆株和其原始ＨＶＴＦｃ－１２６株在细胞中增殖速度和免疫原性进行了比较，初步筛选出大斑克隆株（３３０     

火鸡疱疹病毒（HVT）抗血清的制备及检测

制备２批抗火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ）血清，无菌检验合格，与鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）、鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）、鸡传染性法氏囊炎病毒（ＩＢＤＶ）和Ｒｅｏ无交叉中和反应。蚀斑减少试验结果表明当病毒含量为１０个、５个羽份／０．１ｍｌ时，中和后尚有一些蚀斑存在。病毒含量为３．３羽份／０．１ｍｌ或更低时，中和后未见典型蚀斑存在     

鸡马立克火鸡疱疹病毒（FC—126株）的标准化研究：Ⅱ.不同克隆 在雏鸡…

在火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ ＦＣ－１２６株）克隆纯化及初步筛选的基础上，又将所得到的克隆株及原始毒种接种一日龄雏鸡（ＳＰＦ雏鸡及普通雏鸡），分别测定其接种后不同时间毒血症及中和抗体产生水平。结果表明，不同克隆株接种一日龄雏鸡均可产生毒血症及中和抗体。总体来看，大斑３３０８０１克隆株产生的毒血症水平高于其它毒株。     

鸡马立克火鸡疱疹病毒（Fc—126株）的标准化—Ⅲ,HVT克隆株在机体内产…

ＨＶＴ Ｆｃ－１２６株及其克隆株免疫一日龄有母源抗体的雏鸡后，结果三个大斑克隆株产生的毒血症水平高于ＨＶＴＦｃ－１２６株和小斑克隆株。所有同群未免疫对照鸡均无毒血症产生。母源抗体在２１天时仍可测到，且明显影响毒血症的产生，并使毒血症的高峰期推迟。各克隆株接种后具有中和母源抗体的能力。用ＭＤ京－１株强毒攻击结果表明：抗攻毒保护力与鸡体内毒血症水平呈正相关，而与中和抗体水平似乎无关，母源抗体不能保护雏     

鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒(HVT)活疫苗蚀斑计数的影响因素

目前我国生产的鸡马立克氏病疫苗的效力检验是通过测定产品的病毒含量（蚀斑形成单位）来确定的。然而在测定疫苗病毒含量的过程中，有诸多因素影响测定结果。本文仅就影响疫苗蚀斑计数的因素，通过对不同培养时间的细胞、细胞密度、溶液的pH值、不同时间配置的营养液、培养温度、覆盖琼脂量、     

鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒(耐热保护剂)活疫苗的研究

通过对不同保护剂基质与鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒(HVT)相溶性的研究及冻干曲线的优化,成功研制出一种适宜HVT的耐热冻干保护剂。用其与相匹配的48h自然回温冻干曲线冻干的HVT耐热活疫苗,其病毒冻干损失比SPGA常规疫苗减少约50%,在2~8℃条件下可保存24个月,37℃保存10d病毒存活率达50.5%,而SPGA规程苗仅为31.6%。经约50万羽份的田间试验,证明安全有效并显示出良好的耐热性能,达到国外同类产品水平。     

重组动物疱疹病毒活载体疫苗的构建与应用研究进展

重组病毒活载体疫苗是通过基因工程方法构建的活载体疫苗,规避了传统疫苗的一些缺点,具有极大的优势和应用前景。目前被广泛用作重组病毒载体的动物疱疹病毒有火鸡疱疹病毒(Herpesvirus of turkey, HVT)、伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus, PRV)、鸭瘟病毒(Duck enteritis virus, DEV)、鸡传染性喉气管炎病毒(Infectious laryngotracheitis virus, ILTV)等。对疱疹病毒基因组序列进行分析显示,其基因组大,复制非必需区域多,容纳外源基因的能力强。同时疱疹病毒具有宿主范围广泛、免疫持续期长、安全性较好及相关基因操作技术成熟等优点。笔者总结了当前构建重组动物疱疹病毒的主要方法,包括传统同源重组技术、细菌人工染色体(BAC)技术、Fosmid文库及CRISPR/Cas9基因编辑技术,简述了各个方法的基本原理及技术特点,比较了各个方法的优缺点,并分析了各个方法的最适运用条件,从而更准确地为研究工作提供理论及技术参考;对外源基因的表达方式进行分析,论证了不同启动子对外源基因表达的调控作用不同,同时对不同疱疹...     

鸡新城疫耐热保护剂活疫苗中试生产及区域试验

在鸡新鸡城疫耐热保护剂活疫苗的中试生产试验中 ,共生产疫苗 6批 ,计 775 0万羽 ,检验全部合格 ,在 2～ 8℃保存期达 2 4个月 ;在北京、河北、辽宁、天津选择了 5个鸡场进行区域试验 ,共免疫鸡 8 7万羽 ,免疫后 10～ 15d的HI抗体效价几何平均滴度 (GMT)达 1∶12 8～ 1∶2 5 6 ,对免疫鸡群进行追踪观察 ,未发生鸡新城疫疾病 ,证明此疫苗安全有效。     

Genomic and Pathogenic Studies on a Glycoprotein E Variant Field Isolate of Bovine Herpesvirus 1

Glycoprotein E-negative (gE–) laboratory strains of bovine herpesvirus 1 (BHV-1) were recently introduced as novel marker vaccines, allowing serological discrimination between vaccinated and naturally infected animals on the basis of lack or presence of antibodies against gE epitopes. The applicability of this approach is based on the genetic stability of the gE. However, mutant field variants of BHV-1 with a variable response in anti-gE ELISA have been isolated. The molecular characterization of a gE variant field isolate (Salwa strain) is presented here. By comparing the gE nucleotide and amino acid sequences of the Salwa strain with those of the wild strain Jura, ten mutated bases were found in the gE strain of Salwa, six of which alter the amino acid sequence, leading to changes in five amino acids. Both strains caused respiratory disease in experimentally infected calves, but Salwa generated slightly milder signs. Both viruses were excreted in nasal and ocular discharges, and were reactivated by dexamethasone treatment. In conclusion, the rather close similarities observed in the gE gene structure and pathogenicity features of the gE mutant and of the wild strain of BHV-1 confirm the genetic stability of gE. The findings indicate that the Salwa isolate is virulent, but less virulent than wild strains. Our data support the use of gE-negative marker vaccines in eradication programmes.     

猪瘟病毒流行株与疫苗株主要抗原编码基因差异研究

从全国7个省市1200多份可疑猪瘟病料中分离出9个猪瘟病毒（HCV）野毒株，编号分别为HCV－01－09。将9株野毒分别通过PK15细胞分别通过PK15细胞传6代，测其毒价，并提纯做电镜观察，结果表明：毒价范围在10^2-10^7TCID50，电镜观察均可清晰地见到直径为25－70nm，略呈圆形的病毒颗粒，具有较完整的囊膜和纤突结构。从9株野毒中选取5株经猪瘟阴性猪各传3－4代，测其毒力、病原性、致死性，结果表明：各毒株在传代中其上述生物学特性上有变化和差别。用猪瘟兔化弱毒疫苗分别对这5株野毒做免疫保护相关性试验，结果证明：攻毒后的疫苗接种猪100％保护，而攻毒对照猪100％死亡，且对照猪在攻毒1周后便出现猪瘟野毒感染，而免疫猪在整个观察期均未见到野毒感染。用不同剂量的猪瘟兔化弱毒，表明猪瘟兔化弱毒不通过胎盘垂直感染仔猪。将猪瘟野毒株、石门系强毒株、兔化弱毒株及1982年分离的郑州野毒等毒株进行主要抗原编码基因差异研究，结果表明：猪瘟病毒可分2个基因组6个基因亚组，HCV－02、03、06、07等4个野毒株与国内的C株、石门强毒株、国外的C株、日本GPE株、ALD株、意大利Brescia株均属同一基困组，而HCV－08株及郑州株等2个野毒与法国的Alfor株同属另一个基因组。     

氧氟沙星缓释注射液的研制及稳定性试验

氧氟沙星(ofloxacin,OFL)属于氟喹诺酮类药物,本研究以OFL为原料,加入适量的缓释剂筛选配方后成功研制出OFL缓释注射液。采用6个月温湿联合加速试验、光加试验和长期稳定性试验对OFL缓释注射液进行了稳定性研究。样品中OFL含量采用反相高效液相色谱法检测(HPLC-UV)。试验结果表明试验期间所有试验样品的外观色泽、澄明度、pH值等指标均未见明显变化,表明该制剂稳定性良好,有效期可暂定2年。