黑莓愈伤组织细胞悬浮培养条件研究

为获得黑莓细胞悬浮培养的最佳条件,以黑莓品种Kiowa无菌苗叶片、叶柄产生的质地疏松的嫩黄色颗粒状愈伤组织为初始材料,考察了培养基种类、糖种类、蔗糖浓度、激素种类、2,4-D浓度、水解酪蛋白浓度对细胞悬浮培养效果的影响。结果表明:以MS为基础液体培养基、30 g/L蔗糖为碳源、附加1.0 mg/L2,4-D和200 mg/L水解酪蛋白处理愈伤组织,悬浮培养的效果最佳,可以获得最大生物量。     

苹果叶片愈伤组织的诱导培养

为获得优质的愈伤组织,以国光和富士苹果的幼嫩叶片为外植体,研究了不同的消毒方法、植物生长调节剂种类及其浓度、光照条件、叶片放置方式等因素对叶片愈伤组织诱导的影响。结果表明:(1)直接进行光培养,愈伤诱导率只有50%～55%,先暗培养14 d再光培养与先暗培养21 d再光培养叶片的愈伤组织诱导率都达100%,但前者产生的愈伤组织结构紧密呈淡黄色,后者出现白化疏松的愈伤细胞。暗培养14d为诱导叶片愈伤组织形成的有利条件。(2)未添加激素的MS基本培养基比添加激素的MS培养基有利于降低叶片的褐变率。(3)采用叶片远轴面接触培养基比近轴面接触培养基的愈伤诱导率高约25%～30%,且诱导愈伤组织形成的时间较早。(4)国光叶片在MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA的培养基中,富士叶片在MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA的培养基中愈伤组织的诱导效果最佳。     

不同激素配比对红掌叶片愈伤组织诱导的影响

以红掌幼嫩叶片为外植体,采用MS培养基,研究了4种激素(生长素2,4-D、NAA和细胞分裂素6-BA、KT)对愈伤组织诱导的影响。结果表明:生长素2,4-D效果优于NAA,细胞分裂素6-BA优于KT,2,4-D是主要的诱导因子。在几种激素组合中,以MS+2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L的诱导效果较好。     

不同激素配比对月季叶片愈伤组织诱导的影响

以月季叶片为外植体,在添加不同浓度NAA、IBA、2,4-D的MS培养基上,对其愈伤组织进行诱导试验.结果表明:生长素对愈伤组织诱导的效应为2,4-D>NAA>IBA.在添加不同激素组合的培养基上均可诱导出愈伤组织,其中,MS+6-BA 1.0～1.5 mg/L+2,4-D 1.0～1.5 me/L、MS+6-BA 1.5～2.0 mg/L+NAA 1.0～1.5 mg/L诱导效果为较好,诱导率分别为86.5%和77.7%.     

影响油棕叶片愈伤组织诱导因素研究

研究不同取材部位、激素组合配比等因素对3个不同油棕品系叶片愈伤组织培养的影响。结果表明:不同部位的油棕叶片以及不同品系的油棕愈伤组织诱导存在极显著差异;试验以MS培养基+5 mg/L 2,4-D+10 mg/L TDZ+6 g/L琼脂+30 g/L糖配比获得较好的愈伤诱导率;添加2%活性炭可以有效抑制油棕叶片愈伤组织褐化。     

月季叶片愈伤组织的诱导

以月季叶片为外植体,研究不同激素配比对月季叶片愈伤组织诱导的影响及愈伤组织诱导的影响因素。结果表明,月季叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS 2,4-D5.0 mg/L TDZ0.5 mg/L;此外,叶片幼嫩、大小适中、暗培养条件均有利于愈伤组织的形成。     

山葵叶片愈伤组织诱导分析

MS基本培养基中加入BA与2.4-D和BA与NAA的比例均为1：3时的培养基配方叶片成愈率分别为46.8%和45.6%，在MS BA0.5 2.4-D1.5和MS BA1 NAA3的培养基中成愈率分别达87.5%和71%。     

山葵叶片愈伤组织诱导试验

以山葵叶片为外植体，在特定条件下，诱导其愈伤组织的形成。     

沙芥叶片愈伤组织诱导研究初报

以MS为基本培养基，确定5种组合对沙芥叶片进行愈伤组织诱导，结果显示：MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．1mg／L＋3．0％蔗糖＋0．5％琼脂（pH值5．8）可诱导出愈伤组织；以MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA2mg／L＋3．0％蔗糖＋0．5％琼脂（pH值5．8）作为愈伤组织增殖培养较理想。     

人参胚愈伤组织诱导和悬浮培养的研究

[目的]建立一种从人参胚诱导愈伤组织并进行悬浮培养的方法,考察这种悬浮细胞的生长和人参皂苷积累情况。[方法]以人参胚为外植体,在添加了2,4-D3mg/L、NAA2mg/L和6-BA0.5mg/L的MS培养基上诱导愈伤组织。选取经8次继代培养的松散的愈伤组织在含有同样激素的液体培养基中进行悬浮培养。继代悬浮培养5次后测定悬浮细胞生长曲线,用高效液相色谱（HPLC）技术分析细胞中所含的人参皂苷。[结果]有活性的人参胚愈伤组织的诱导率为100%。用这种愈伤组织建立的悬浮培养体系生物量在21d内可增加1.5倍,悬浮培养物至少含有6种人参皂苷,其中Rb1、Rg和Re的含量较高,分别为细胞干重的0.44%、0.35%和0.37%。[结论]由人参胚诱导的愈伤细胞进行悬浮培养比较容易,生长良好,含有较丰富的人参皂苷。     

小蓟叶片愈伤组织的诱导及增殖条件优化

[目的]建立小蓟愈伤组织的诱导及增殖培养体系。[方法]以野生小蓟无菌苗叶片为外植体,分析2,4-D、6-BA、NAA对小蓟愈伤组织的诱导及增殖的影响,确定最适宜的激素组合。[结果]单因素条件下,0.8 mg/L 2,4-D、0.9 mg/L 6-BA、2.0 mg/L NAA为小蓟叶片愈伤组织诱导的最佳浓度;MS+2,4-D 0.6 mg/L+6-BA 0.9 mg/L+NAA 2.5 mg/L培养基为小蓟叶片愈伤组织最适诱导组合。单因素条件下,2,4-D、NAA不适合小蓟愈伤组织增殖培养,MS+6-BA 0.3 mg/L为小蓟叶片愈伤最佳增殖培养基。[结论]该研究为小蓟的进一步开发利用奠定基础。     

不同外植体对红掌初代培养及愈伤组织诱导的影响

[目的]研究红掌优良品种相配套的组培快繁技术体系。[方法]以盆栽红掌新品种‘YNG5’为研究对象,采用附加6-BA 2.0mg/L和2,4-D 0.2 mg/L的1/2MS培养基,探讨了外植体的灭菌方法、材料种类、生理状态及取材部位对红掌初代培养效果的影响。[结果]在红掌叶片、叶柄、腋芽、花序及佛焰苞片5种外植体中,叶片与叶柄的培养效果较好,出愈率可达70%以上;在选取叶片与叶柄作为外植体时,用0.1%HgCl2处理5 min,可获得良好的灭菌效果;采用叶片为外植体时,以展叶5～8 d、不带主脉的幼嫩叶片为宜,采用叶柄为外植体时,以未展开叶、形态学上端的部位为宜。[结论]研究获得了红掌新品种‘YNG5’组织培养的最适外植体种类及灭菌方法,初步建立了红掌初代培养的技术体系。     

何首乌叶愈伤组织的诱导和二苯乙烯苷含量的检测

[目的]对何首乌叶进行愈伤组织诱导并检测叶愈伤组织中二苯乙烯苷的含量。[方法]在25℃暗箱培养条件下,将何首乌叶在含有浓度为1 mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）和浓度为0.4 mg/L萘乙酸（NAA）的MS诱导培养基中进行诱导,15 d后把诱导出的愈伤组织转接到相同培养基中培养15 d,共转接3次,并通过HPLC法检测叶愈伤组织中二苯乙烯苷的含量。[结果]诱导出的愈伤组织生长状况良好,并且测得叶愈伤组织中二苯乙烯苷的含量为0.37 mg/g。[结论]由叶诱导出的愈伤组织中含有二苯乙烯苷,该愈伤组织可以用于进一步的生理生化研究。     

野生型拟南芥叶片愈伤组织诱导的研究

[目的]研究野生型拟南芥叶片愈伤组织的诱导。[方法]以野生型拟南芥叶片为外植体,通过将其切段后接种在添加有不同浓度6-BA和NAA的MS培养基上,研究了拟南芥愈伤组织的诱导和再生植株。[结果]6-BA对于愈伤组织诱导不可缺少,但其浓度太高易产生玻璃化;NAA单独使用利于生根,配合6-BA使用利于分化芽;获得最适愈伤组织诱导培养基为MS＋0.50mg/L6-BA＋0.10mg/LNAA,愈伤组织诱导率可达100%。[结论]为进一步开展拟南芥的遗传转化或细胞培养奠定了基础。     

野生型拟南芥叶片愈伤组织诱导的研究

[目的]研究野生型拟南芥叶片愈伤组织的诱导。[方法]以野生型拟南芥叶片为外植体,通过将其切段后接种在添加有不同浓度6-BA和NAA的MS培养基上,研究了拟南芥愈伤组织的诱导和再生植株。[结果]6-BA对于愈伤组织诱导不可缺少,但其浓度太高易产生玻璃化;NAA单独使用利于生根,配合6-BA使用利于分化芽;获得最适愈伤组织诱导培养基为MS＋0.50 mg/L 6-BA＋0.10mg/L NAA,愈伤组织诱导率可达100%。[结论]为进一步开展拟南芥的遗传转化或细胞培养奠定了基础。     

红掌初代培养诱导愈伤组织的品种间差异分析

[目的]不断优化红掌组培高效再生体系.[方法]以4个红掌盆栽品种的叶柄、叶片为外植体,研究红掌初代培养诱导愈伤组织的品种差异性.[结果]品种SAM、SST的愈伤组织形成能力强于SDM、SHG,其中品种SAM、SDM、SHG的叶片再生能力强于叶柄,而品种SST的叶柄再生能力较强.品种SST叶柄愈伤组织诱导的适宜培养基为1/2 MS+TDZ 4.0 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L,出愈率可达87.5％;品种SAM叶片愈伤组织诱导的适宜培养基为1/2 MS+TDZ 2.0 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L,出愈率高达90％;品种SDM、SHG叶片愈伤组织诱导适宜的培养基为1/2 MS+ZT 2.0 mg/L+2,4-D 0.2mg/L,出愈率分别可达59.34％和79.63％.[结论]在构建及优化红掌组培快繁技术体系时,除了品种因素以外,还需考虑不同外植体类型的分化能力差异.     

百里香愈伤组织的诱导及细胞悬浮培养体系的建立

以普通百里香无菌苗的茎段和叶片为材料,对百里香愈伤组织诱导和继代增殖的最佳培养条件进行研究,并对悬浮细胞的生长特性进行监测,初步建立细胞悬浮培养体系.结果表明,茎段是诱导愈伤组织和进行悬浮培养的理想外植体,愈伤组织最佳诱导培养基为MS+NAA 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D0.5 mg/L,最...     

桃砧木GF677叶片愈伤组织诱导和保存

[目的]研究桃砧木GF677(Prunus amygdalus×Prunus persica)叶片愈伤组织的诱导和保存技术。[方法]以桃砧木GF677试管苗为材料,研究激素含量、基本培养基、AgNO3、暗培养时间、碳源等因素对其叶片愈伤组织诱导和保存的影响。[结果]选取继代时间为28 d左右的试管苗幼嫩叶片,暗培养21 d后转移至光培养进行愈伤组织诱导,较佳的培养基配方为LP基本培养基+TDZ 1.0 mg/L+6-BA 0.6 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L+AgNO30.5 mg/L,添加山梨醇20.0 g/L,琼脂6.0 g/L;选取继代时间为21 d左右的愈伤组织暗培养保存,保存较佳的培养基配方为LP基本培养基+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L+CH 0.2 g/L,添加蔗糖30.0 g/L,琼脂6.0 g/L。[结论]为桃砧木GF677的遗传转化和无性系变异筛选等工作奠定了基础。