两种杏的幼胚培养

胚挽救技术是目前克服果树杂种胚早期败育的有效途径,为了探明‘黄河’‘金太阳’两个杏品种幼胚培养成苗的基本方法,以两种杏不同发育期的幼胚为试验材料,利用组织培养的方法研究了胚龄、基本培养基、植物生长调节剂等因素对幼胚萌发、成苗的影响.结果表明:基因型、胚发育指数(PF)、培养基均显著影响幼胚萌发与成苗.不同品种均随PF值的增大幼胚萌发率上升;‘黄河’杏在PF值为0.92时,萌发率最高,达61.90%;‘金太阳’杏在PF值为0.95时,萌发率最高,达71.00%.不同品种幼胚萌发的最佳培养基不同,‘黄河’杏胚萌发的最佳培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+IAA 0.1mg/L+GA 2.0mg/L,萌发率达55.67%;‘金太阳’杏胚萌发的最佳培养基为1/2MS+6-BA 0.5mg/L+IAA 0.1mg/L,萌发率达88.67%;‘黄河’杏继代培养在MS+6-BA 0.2 mg/L+IAA 0.5mg/L培养基上长势好,成苗率达75.00%;‘金太阳’杏继代培养在MS+6-BA 0.25 mg/L+IAA 0.1mg/L培养基上长势好,成苗率达44.44%;二种杏胚继代培养形成的嫩梢在1/3MS培养基上的生根率比MS及1/2 MS培养基上的生根率高.     

青钱柳离体胚的组织培养研究

以青钱柳离体胚为材料,采用正交试验设计方案对影响其萌发和成苗的4种因素进行了研究.结果表明:低温侣(4℃)层积有利于青钱柳离体胚的萌发.基本培养基种类是影响青钱柳离体胚萌发和生长的关键因素,低温层积后的离体胚适宜培养基组合为改良MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L、萌发率达97.5%,适宜成苗的培养基组合为改良MS+NAA0.5mg/L、成苗率达93.33%,而6-BA对离体胚成苗则有抑制作用.     

早熟梨新梨7号胚培养直接成苗的影响因素探讨

以早熟梨新梨7号为试验材料,在离体条件下研究了基本培养基种类、激素配比、胚龄大小及低温预处理等因素对早熟梨幼胚离体培养的影响。结果表明:MS培养基诱导新梨7号胚萌发和子叶转绿方面与White培养基相似,而在培养后期促进生根和成苗率方面优于White培养基;适宜培养基激素浓度比例为2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;以胚龄85 d以后的幼胚培养较易成功。低温预处理对促进65 d和75 d胚龄的幼胚萌发和成苗效果优于85 d以后梨胚,且低温处理对胚萌发、子叶转绿的促进作用大于对生根率和成苗率的促进作用。     

叶片诱导大花重瓣矮牵牛植株再生的研究

研究了不同浓度的6-BA和NAA对大花重瓣矮牵牛叶片离体培养愈伤组织诱导、芽分化和生根的影响。结果表明,MS+6-BA 2.0 mg/L对愈伤组织诱导的效果最好;适宜的丛生芽分化培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.10 mg/L;适宜的生根培养基为1/2MS+NAA 0.01～0.10 mg/L。     

‘李广杏’幼胚的离体培养

以‘李广杏’幼胚(盛花后30~40d)为试验材料,MS为基本培养基,研究了激素及其不同浓度组合对幼胚萌发和胚培苗继代增殖的影响.结果表明:幼胚萌发的适宜培养基配方为MS+6-BA 0.5 mg/L+IAA0.2mg/L,在培养20d时萌发率达到100%,子叶生长健壮,叶片浓绿伸展;胚培苗继代增殖的适宜培养基配方为MS+6-BA 1.0mg/L+IAA 0.05mg/L,增殖系数达3.42.     

濒危植物珙桐的组织培养技术研究

以珙桐成熟胚为试材,研究了不同生长调节剂组合对珙桐成熟胚离体分化的影响,并获得了完整的植株。结果表明:诱导愈伤组织的最佳培养基组合为1/2MS+0.5 mg/L 6-BA+3 mg/L IBA+1 mg/L GA3+蔗糖30 g/L;诱导不定芽的最佳培养基组合为1/2MS+1.0mg/L6-BA+蔗糖20 g/L;最有利于不定芽的增殖与伸长的培养基组合为MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L GA3+蔗糖20 g/L;诱导生根的最佳培养基组合为1/2MS+0.8 mg/L IBA+0.2 mg/L NAA+蔗糖10 g/L。     

新铁炮百合品种沈香一号的幼胚培养研究

以新铁炮百合沈香一号(Lilium formolongi cv.Shenxiang No.1)的幼胚为试材,筛选适宜百合幼胚萌发的诱导培养基,结果表明,适宜的诱导培养基为1/2MS,萌发时间在接种后的22～43d之间。6-BA和NAA的浓度比与新铁炮百合幼胚的发芽率之间呈现出显著的相关性,在一定范围内,6-BA和NAA的浓度比越大,胚的萌发率越低。试验筛选出适宜新铁炮百合胚分化不定芽的诱导培养基为MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L,继代增殖培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L及MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.4mg/L。新铁炮百合试管苗易出现玻璃化现象,玻璃化程度与培养基的水势、环境湿度和外源激素的浓度有关。     

茉莉离体微繁及无糖生根技术

为解决茉莉长期无性繁殖导致的种性退化、抗逆性下降、花朵产量逐年下降等问题,进行了茉莉离体微繁及无糖生根技术的研究.结果表明:茉莉腋芽萌发的适宜培养基为MS 6-BA 2.0 mg/L NAA 0.1 mg/L;继代增殖的适宜培养基为MS 6-BA 1.5 mg/L NAA 0.3 mg/L GA3 0.5 mg/L;无糖生根的适宜培养基为1/2 MS NAA 1.2 mg/L;适宜培养条件为光强5 000～5 500 lx、CO2浓度1 500 mg/L、通气孔数为3个.无糖试管苗移栽后长势健壮,成活率可达95%.     

影响野生杜梨种胚离体培养的因素

研究了离体培养条件下不同浓度激素、活性炭、低温及其处理方式和种皮等因素对打破杜梨种胚休眠促进萌发的影响.结果表明,1/2MS培养基上附加GA3和6-BA可以有效地促进去皮杜梨种胚的萌发,以6-BA的促进萌发作用优于GA3,其中分别以7.5 mg/L 6-BA和15.0 mg/L GA3促进萌发和成苗效果较好,但根系发育以附加GA3的培养基为好,易发生侧根.低温和去种皮处理均有利于种胚的萌发,且表现接种后低温预培养方式优于低温处理后再接种培养.活性炭有利于侧根的发生,以0.1%水平促进萌发成苗作用较好;IAA具有很好的促进生根的作用,平均生根率可达89.54%,且以IAA为2 mg/L时侧根条数较多.     

西葫芦未受精子房离体培养的影响因素

【目的】探究西葫芦未受精子房离体培养的主要影响因素,以提高其胚状体诱导率和生根品质,增加再生植株数量,丰富西葫芦育种材料。【方法】以西葫芦"春玉一号"未受精子房为材料,分析MS、B5、N6和White 4种基本培养基的诱胚效果;在MS培养基中添加不同质量浓度的6-BA(0,0.5,1.0,2.0mg/L)和NAA(0,0.2,0.5,1.0mg/L),筛选2种激素的最佳组合;之后添加不同质量浓度的2,4-D(0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0mg/L),筛选2,4-D的适宜质量浓度;在MS培养基中添加不同质量浓度的NAA(0,0.05,0.1,0.2,0.5,1.0mg/L),分析其对胚状体芽生根效果的影响。【结果】西葫芦未受精子房以MS为基本培养基时胚状体诱导率最高,为16.67%;在MS培养基中添加1.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA时的诱导效果最好,诱导率为19.76%;在MS+30g/L蔗糖+8g/L琼脂+1.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA培养基中添加1.0mg/L 2,4-D可以加快胚珠膨大的速度,增加胚珠转绿的数量,但对出胚的提高效果不显著。MS+30g/L蔗糖+8g/L琼脂+0.1mg/L NAA有利于提高胚状体芽的生根品质,且根系生长健壮。【结论】MS+30g/L蔗糖+8g/L琼脂+1.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+1.0mg/L 2,4-D是西葫芦未受精子房离体培养中胚状体诱导的最佳培养基,MS+30g/L蔗糖+8g/L琼脂+0.1mg/L NAA是诱导其胚状体芽生根的较适宜培养基。     

新优彩叶植物红叶樱花外植体采集及离体培养技术研究

对红叶樱花外植体采集时期和采集部位进行研究,筛选了红叶樱花的启动、增殖和生根培养基,并研究了赤霉素和黑布遮光对株高的影响。结果表明:红叶樱花外植体的最佳采集时期在4-5月,以当年萌发的半木质化枝条中、上部芽萌发最好;启动培养基为改良MS+6-BA 1.0mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6g/L时,成芽率达到93.3%;在改良MS培养基中添加0.8mg/L的6-BA时,增殖系数达到2.21;在接种后5d进行黑布遮光处理10d,然后见光培养,可以增加株高,株高最高达2.24cm;最佳的生根培养基为1/2MS+IBA 0.05mg/L+NAA 0.05mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6g/L,生根率达100%。     

驼峰藤组织培养及快速繁殖

以驼峰藤(Merrillanthus hainanensis)带芽茎段为外植体,研究不同消毒方法及植物生长调节剂对其离体培养及植株再生的影响,建立了驼峰藤离体快繁技术体系。结果表明,带芽茎段的最佳消毒灭菌方法为75%乙醇浸泡20 s,0.1%HgCl_2浸泡10 min;腋芽诱导的最适宜培养基为MS+2.00 mg/L 6-BA+0.10mg/L NAA+0.10 mg/L GA_3,诱导率可达81.11%;适宜腋芽增殖的培养基为MS+3.50 mg/L 6-BA+0.15mg/L NAA,增殖系数可达6.24;最佳生根培养基为1/2MS+0.30 mg/L NAA,生根率为84.44%,该结果为驼峰藤的快繁提供了一条新途径。     

七叶一枝花种子萌发和组织培养研究

[目的]研究七叶一枝花种子萌发的最适赤霉素（GA3）浓度和组织培养的最适培养基。[方法]采用不同浓度GA3处理种子,研究促进种子快速萌发且萌发率高的GA3浓度,再将胚根3～4 cm长的种子播于土壤中,分别在光照培养箱和自然条件下生长并观察第一片叶的长势。采用不同浓度的6－BA诱导愈伤组织,研究愈伤组织诱导的适宜6－BA浓度。[结果]150 mg／L GA3处理种子的萌发率最高,种子外植体最合适的愈伤组织诱导培养基为添加0．1 mgL／6－BA和0．5 mg／L NAA的1／2MS基本培养基。[结论]七叶一枝花种子的快速萌发方法是可行的。     

黑树莓茎尖组织培养研究

取春季黑树莓的嫩枝条,以茎尖为外植体,MS为基本培养基,添加植物激素6-BA、NAA、GA3筛选培养基,进行茎尖组织培养研究。试验结果表明,诱导茎尖萌发的最佳培养基为MS＋0.5 mg/L 6-BA＋0.05 mg/L NAA,萌发率高达90%;继代培养最佳培养基为MS＋1.0 mg/L 6-BA＋0.02 mg/L NAA＋6.0 mg/L GA3,繁殖系数达6.0～7.0;生根最佳培养基为MS＋0.5 mg/L6-BA＋0.1 mg/L NAA,生根率为96%。     

大豆子叶节高效再生系统的研究

为建立一个大豆子叶节高效再生体系用于大豆的遗传转化,以桂春豆1号、桂早2号、桂夏1号和桂夏豆2号4个大豆品种为材料,子叶节为外植体诱导丛生芽,再生完整植株.实验研究了大豆种子的消毒方法,基因型以及培养过程中植物激素的浓度等影响大豆子叶节再生的因素.结果表明在适宜的条件下,4个大豆品种的丛生芽分化率都可达到90％,丛生芽数基本都在4～6个范围内,4个大豆品种均为子叶节器官发生途径的理想基因型.最适合的种子灭菌方法是双氧水灭菌法;桂春豆1号和桂早2号的适宜芽诱导培养基为B5+ 6-BA 1.6 mg/L+ IBA 0.2 mg/L,桂夏1号和桂夏豆2号为B5 +6-BA 1.0 mg/L +IBA 0.2 mg/L;4个大豆品种的适宜丛生芽伸长培养基为1/2 MS+B5有机+GA3 0.5 mg/L;生根培养基为B5 +NAA0.5 mg/L+ 2.0 g/L活性炭.     

不同培养基对月见草种子发芽和愈伤组织诱导的影响

[目的]研究不同浓度NAA和6-BA组合的MS培养基对月见草种子发芽和愈伤组织诱导的影响。[方法]通过组织培养,研究了NAA和6-BA16种组合的MS培养基中的月见草种子发芽率和愈伤组织诱导率。[结果]在NAA和6-BA的16种组合中,MS＋10mg/L6-BA培养基中的种子发芽率最高（90%）,其次是MS＋10mg/L6-BA＋2mg/LNAA（87%）,再次是MS＋2mg/L6-BA（83%）和MS＋10mg/L6-BA＋5mg/LNAA（83%）;MS＋2mg/L6-BA＋5mg/LNAA培养基中的愈伤组织诱导率最高（88.89%）,其次是MS＋5mg/L6-BA＋10mg/LNAA（87.50%）、MS＋2mg/L6-BA＋2mg/LNAA（85.71%）和MS＋2mg/L6-BA＋10mg/LNAA（83.33%）;MS＋10mg/LNAA和MS＋5mg/LNAA培养基中有不定芽和不定根产生。[结论]该研究为提高月见草种子发芽率和愈伤组织诱导率提供了技术指导。     

不同浓度植物激素对月见草种子发芽的影响

[目的]为提高月见草的种子发芽提供技术依据。[方法]以月见草为试材,研究了GA3、NAA、6-BA的不同浓度组合的发芽率、发芽势。[结果]不同浓度6-BA与NAA的组合月见草发芽率都很低,均低于对照的发芽率。6-BA浸泡的种子发芽率明显高于6-BA+NAA的组合,仅用NAA浸泡的种子发芽率都很低。6-BA+GA3组合比6-BA+NAA组合发芽率和发芽势普遍都高,GA35000mg/L+6-BA(0,1,10,100,5000mg/L)的组合种子发芽率和发芽势都明显高于对照。GA35000mg/L+6-BA10mg/L、GA35000mg/L、GA35000mg/L+6-BA100mg/L、GA35000mg/L+6-BA1mg/L和GA35000mg/L+6-BA5000mg/L的发芽率分别为88.00%、79.67%、79.00%、77.00%和59.00%,对照组的发芽率仅为16.67%。[结论]月见草种子发芽的最适激素浓度组合是GA35000mg/L+6-BA10mg/L。     

马铃薯新品种桂农薯1号组培快繁研究

【目的】探索马铃薯新品种桂农薯1号组培快繁技术,为实现工厂化生产脱毒种薯提供技术支撑。【方法】采用茎尖培养脱毒法,以马铃薯顶芽为外植体,按不同灭菌时间进行单因子(3%NaClO和0.1%HgCl2)和双因子(75%酒精和0.1%HgCl2)消毒处理,再剥取0.3~0.7 mm茎尖接种到分别添加了不同浓度GA3、6-BA及6-BA和NAA的诱导培养基上诱导成苗。将诱导出的苗进行单腋芽切段快繁,并接种到添加有6-BA和PP333的单因子及双因子组合MS培养基中进行无菌苗继代增殖。【结果】75%酒精+0.1%HgCl2双因子灭菌较单因子3%NaClO和0.1%HgCl2效果好,污染率降至21.67%;茎尖诱导培养中,GA3和6-BA均能诱导茎尖萌芽,诱导趋势均先增后减,而以1.5 mg/L 6-BA和0.2 mg/L NAA配合,诱导率达53.67%;增殖壮苗阶段,0.1 mg/L PP333和2.5 mg/L 6-BA配合,增殖倍数达6.59倍,且苗长势好,茎粗壮、叶色正常。【结论】桂农薯1号外植体消毒最佳灭菌处理为:75%酒精2 min+0.1%HgCl211 min;最佳茎尖诱导配方为:MS+1.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA;适合继代增殖壮苗培养基为:MS+2.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L PP333。     

马铃薯茎尖组织培养技术研究

[目的]提高离体马铃薯茎尖组织培养的成苗率和脱毒率。[方法]从马铃薯上取生长健壮的芽,经消毒后在显微镜下切取1．0到1．5min长度的茎尖,接种于诱导分化培养基上,研究了不同浓度的GA3、KT与6-BA和不同激素配比以及不同浓度的基础培养基的诱导效果,探讨了茎尖组织诱导分化的最适培养条件。[结果]低浓度的GA3可促进愈伤组织的形成,过高的GA3浓度会抑制愈伤组织的形成;KT比6BA具有更好的诱导效果;在MS＋GA30．1mg/L＋NAA0．1mg／L＋BBA0．5mg／L培养基中激素配比的诱导效果较好。[结论]MS＋0．5mg／LKT＋0．2mg／LGA3＋0．1mg／LNAA是最为适宜的茎尖组织培养基。在28℃、每天光照16h、光照强度〉2000lx的培养条件下,经7d左右即可得到形态良好愈伤组织,经15d左右即可得到分化良好的试管植株。     

观赏植物白花龙的离体快繁条件筛选

[目的]筛选白花龙(Styrax faberi Perk.)的离体快繁最佳条件,为白花龙的推广种植及生态环境修复提供参考依据.[方法]以切除或带胚乳的白花龙种子为外植体、MS为基本培养基,添加不同浓度GA3进行无菌萌发;以种子无菌萌发的茎段为外植体、MS为基本培养基,采用正交试验设计,筛选适宜白花龙丛生芽增殖培养的最佳6-BA、NAA和TDZ组合;以丛生芽增殖获得的幼苗为外植体、MS或1/2MS为基本培养基,添加不同浓度的IBA,采用直接或间接生根法,筛选白花龙组培苗生根的最佳基本培养基、IBA浓度和生根方法.[结果]带胚乳的白花龙种子在添加不同浓度GA3条件下萌发15 d后子叶开始褐化,最终全部死亡;切除胚乳的白花龙种子在无激素条件下也可萌发,但以在MS+2.0 mg/L GA3培养基中萌发率最高,达97.5%.在继代增殖阶段,白花龙丛生芽在MS+0.5 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA培养基中增殖系数最大,为5.7.在生根阶段,带两个节的白花龙茎段在200.0 mg/L IBA溶液中浸泡15 min后转接至1/2MS空白培养基的生根率最高,达93.3%,平均生根数为7.1条.[结论]切除胚乳的白花龙种子在MS+2.0 mg/L GA3培养基中萌发率最高,其萌发的茎段在MS+0.5 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA培养基中增殖系数最大;采用间接生根法,可获得生根效率较高、适应规模化生产的白花龙组培苗.