同源四倍体泡桐体外植株再生系统建立

以叶片为外植体,建立了同源四倍体兰考泡桐和白花泡桐体外植株再生系统.结果表明,同源四倍体兰考泡桐和白花泡桐幼苗叶片愈伤组织诱导的最适培养基分别为MS NAA 0.3 mg.L-1 BA 8 mg.L-1和MS NAA 0.1 mg.L-1 BA 10 mg.L-1;愈伤组织芽诱导的最适培养基分别为MS NAA 0.7 mg.L-1 BA 14mg.L-1和MS NAA 0.1 mg.L-1 BA 12 mg.L-1;幼芽生根的最适培养基皆为1/2 MS.     

南方泡桐同源四倍体的诱导及其体外植株再生

【目的】用秋水仙素诱导出南方泡桐同源四倍体,建立其体外植株高效再生系统,为泡桐新品种的培育奠定基础。【方法】以二倍体南方泡桐幼苗叶片为外植体,预培养泡桐不同时间(0,8,16 d)后,置于含不同质量浓度(5,10,20 mg/L)秋水仙素的固液双层培养基上处理泡桐不同时间(24,48,72 h),以诱导其同源四倍体植株,并通过根尖细胞染色体计数和叶片单细胞DNA相对含量的测定,进行变异植株的倍性分析;同时,以其四倍体叶片、茎段和叶柄为外植体,利用不同植物激素不同质量浓度的组合培养基,筛选建立体外植株再生系统的最适培养基。【结果】秋水仙素质量浓度和处理时间对南方泡桐同源四倍体诱导率影响显著,外植体预培养时间影响不显著;在含10 mg/L秋水仙素的MS培养基上处理72 h,未经预培养叶片的四倍体诱导率高达18.8%;同源四倍体幼苗叶片较二倍体大而且厚,叶片单气孔器变大,孔密度变小,叶绿素含量和SOD活性升高,MDA含量和POD活性降低。MS+0.1mg/L NAA+8 mg/L BA、MS+0.3 mg/L NAA+12 mg/L BA和1/2 MS分别是其愈伤组织诱导、芽诱导和根诱导的适宜培养基。【结论】诱导获得了南方泡桐同源四倍体,建立了同源四倍体南方泡桐的体外植株再生系统;叶片是同源四倍体南方泡桐体外植株再生的最佳外植体。     

泡桐9501体外植株再生体系的建立及体细胞同源四倍体诱导

以泡桐9501无菌苗的叶片、叶柄为外植体,建立了其体外植株再生系统.在此基础上进行了四倍体诱导,并采用根尖染色体计数和成熟叶片单细胞的DNA含量测定进行诱变植株的倍性分析.结果表明,泡桐9501叶片为最佳外植体,其愈伤组织、芽和根诱导的最适培养分别为MS+0.7 mg·L-1NAA+6 mg·L-1 6-BA和1/2M...     

豫杂一号泡桐体细胞同源四倍体诱导及其体外植株再生

在含不同质量浓度秋水仙素固液双层培养基上,以叶片为外植体进行了豫杂一号泡桐同源四倍体的诱导,同时建立了其体外植株再生系统。结果表明,秋水仙素质量浓度和处理时间对豫杂一号泡桐同源四倍体诱导率影响显著,外植体预培养时间影响不显著。在含20 mg.L-1秋水仙素MS培养基上处理48 h,未经预培养叶片四倍体诱导率最高达21.2%。同源四倍体幼苗叶片及其单气孔器较二倍体变大,气孔密度变小,叶绿素含量和SOD活性升高,MDA含量和POD活性降低。此外,叶片是同源四倍体豫杂一号泡桐体外植株再生的最佳外植体,MS+0.5 mg.L-1NAA+16 mg.L-1BA和1/2MS+0.1 mg.L-1NAA分别是其芽诱导和根诱导的最适培养基。     

泡桐丛枝病株体外植株再生系统研究

以患丛枝病豫杂一号泡桐叶片、叶柄和茎段为外植体,建立了其体外植株再生系统.结果表明,其叶片、叶柄和幼嫩茎段在MS+NAA 0.3 mg.L-1+6-BA 12 mg.L-1,MS+NAA 0.3 mg.L-1+6-BA 8 mg.L-1和MS+NAA 0.3 mg.L-1+6-BA 12mg.L-1组合培养基上,最高芽诱导率可达47.78%,21.11%和42.22%.此外,不含NAA和IBA的1/2MS培养基可作为患病苗幼芽生根的最适培养基.研究结果可为泡桐的基因工程操作和阐明丛枝病发生机理奠定基础.     

2种泡桐的丛枝病器官体外植株再生系统的建立

以毛泡桐及白花泡桐丛枝病叶片、叶柄和茎段为外植体.建立了其体外植株再生系统.结果表明,毛泡桐丛枝病叶片、叶柄和幼嫩茎段在MS+NAA 1.1 mg·L-1+6-BA 8 mg·L-1,MS+NAA 0.1 mg·L-1+6-BA 4mg·L-1和MS+NAA 0.5 mg·L-1+6-BA 12 mg·L-1培养基上,最高芽诱导率分剐为73.88%,42.11%和25.00%;而白花泡桐的丛枝病不同器官的最适培养基分别为MS+NAA 0.3 mg·L-1+6-BA 12 mg·L-1,MS+NAA 0.9 mg·L-1+6-BA 16 mg·L-1和MS+NAA 0.7 mg·L-1+6-BA 20 mg·L-1,最高芽诱导率分别为91.11%,32.78%和13.33%.此外,1/2MS+NAA 0.5 mg·L-1和1/2MS+NAA 0.3 mg·L-1可分别作为毛泡桐和白花泡桐丛枝病幼芽根诱导的最适培养基.     

台湾泡桐体细胞同源四倍体的诱导及鉴定

将台湾泡桐叶片愈伤组织放置于含有不同质量浓度秋水仙素的液体培养基上进行四倍体植株的诱导,采用根尖细胞染色体计数和叶片单细胞DNA含量测定的方法进行倍性分析。结果表明,在27个试验组合中,用30 mg/L秋水仙素处理预培养6 d的台湾泡桐叶片48 h时,四倍体诱导率最高,为5.83%。根尖染色体压片结果也表明,台湾泡桐二倍体染色体数为2n=2x=40,四倍体为2n=4x=80。此外,与二倍体相比,诱变出的四倍体植株,具有生长慢、茎加粗、叶片增宽、单个气孔面积增大、气孔密度减少等特征。     

灰楸体外植株再生体系建立

以灰楸茎段为试验材料,进行了灰楸的植株再生研究.结果表明:灰楸茎段愈伤组织和芽诱导最适培养基为MS+0.3mg/L IBA+5 mg/L BA,丛生芽诱导最适培养基为MS+0.1 mg/L NAA+12 mg/L BA,根诱导最适培养基为1/2MS+0.5mg/L NAA.     

南方泡桐突变体构建及黄化苗体外植株再生的研究

用不同质量浓度甲基磺酸乙酯(EMS)处理南方泡桐种子构建突变体库,并用获得黄化苗建立了体外植株再生系统. 结果表明,随着EMS质量浓度的增大,南方泡桐种子出苗率总体呈下降趋势,质量浓度为120 mg·L-1 EMS浸种12 h的南方泡桐种子突变体率最高.MS+0.1 mg·L-1 NAA+15 mg·L-1 BA是南方泡桐黄化苗叶片芽诱导的最适培养基,1/2MS+0.1 mg·L-1IBA是其芽诱导根的最适培养基.     

夏蜡梅体外植株再生体系的建立

以夏蜡梅幼嫩叶片为材料进行组织培养,研究建立其体外植株再生体系。结果表明,夏蜡梅叶片愈伤组织、芽、根诱导的最适培养基分别为MS+0.9 mg/L NAA+2 mg/L 6-BA、MS+0.9 mg/L NAA+2 mg/L 6-BA、1/2MS+0.3 mg/L NAA,这为夏蜡梅的快速繁殖及工厂化生产奠定基础。     

毛泡桐体细胞胚胎发生及植株再生研究

以毛泡桐(Paulowniatomentosa)无菌苗叶片和茎段为外植体,在附加NAA0.3mg·L-1或2,4 D0.3mg·L-1与6 BA5～20mg·L-1植物生长调节物质组合的MS培养基上进行体细胞胚胎发生及植株再生的研究.结果表明,毛泡桐叶片和茎段在不同植物生长调节物质组合的12种培养基上愈伤组织诱导率可达100%,但在2,4 D与6 BA植物生长调节物质组合的MS培养基上,叶片和茎段胚性愈伤组织诱导率为0,而在MS+NAA0.3mg·L-1+6 BA17mg·L-1培养基上,叶片和茎段的胚性愈伤组织诱导率分别达到88.3%和46.7%.胚性愈伤组织在该培养基上可发育为成熟的体细胞胚胎,进而成为完整植株.     

碰碰香高效离体再生体系的建立

本文以碰碰香幼嫩茎段作为外植体,通过对灭菌时间、腋芽诱导、增殖培养及生根培养的影响因素进行试验研究,建立了一套高效、完整的碰碰香离体培养再生体系。研究结果表明:茎段外植体最佳灭菌时间为4min;腋芽诱导的最适基本培养基为MS培养基;试管苗的最佳增殖培养基是MS培养基添加1.0mg·L-1 BA和0.2mg·L-1NAA,增殖率高达96.3%,增殖系数达12.9;试管苗的最佳生根培养基为1/2MS添加1.0mg·L-1 NAA,生根率高达99.3%;生根苗在含有土壤、沙子和泥炭的混合基质(1∶1∶1)中移栽成活,成活率高达94.2%。     

甘薯根倒置离体培养再生植株

以6个甘薯品种的根为外植体,研究了平铺和倒置培养对根分化成苗的影响。结果表明,粗根较细根易分化芽;根的倒置放置比平铺培养更利于芽的诱导,最高诱芽率达100%,平均诱芽率50%以上,较平铺放置方式诱芽率高出13.9个百分点。同时,倒置放置平均成芽数7个,而平铺培养只有3个。     

辽东楤木的离体培养及植株再生研究

以MS为基本培养基,通过调节6-芐氨基嘌呤(6-BA)、3-吲哚丁酸(IBA)、1-萘乙酸(NAA)、3-吲哚乙酸(IAA)等4种生长素的配比和浓度,成功地用组织培养的方法获得辽东楤木茎尖、茎等部位诱导产生的愈伤组织和再生植株,结果表明:辽东楤木离体培养的愈伤组织诱导、分化成苗和分化生根的最佳激素配比为NAA0.01mg·L-1+6-BA0.5mg·L-1、NAA0.02mg·L-1+6-BA0.5mg·L-1和NAA0.01mg·L-1+IBA1.5mg·L-1,应用该技术体系的愈伤组织诱导率、分化率和再生植株成活率分别为94%、22.5%、98%,该技术体系为国内外同类研究的首次报道。     

山桐子离体培养植株再生

以种子和叶片为外植体,研究了离体条件下外植体类型及植物生长调节剂对山桐子器官发生和植株再生的影响。结果表明:种子为诱导愈伤组织的适宜外植体; 在MS+1.0 mg·L^-16-BA +1.0 mg·L^-1 NAA +3%蔗糖+0.6%琼脂的培养基上,愈伤诱导率达96.8%; 继代培养在MS+0.08 mg·L^-1 TDZ + 1.5 mg·L^-16-BA +0.05 mg·L^-1 NAA 培养基上能成功的诱导芽的分化,诱导率达48.3%以上; 芽增殖的适宜培养基为1/2MS +0.03 mg·L^-1 TDZ +2.0 mg·L^-16-BA +0.1 mg·L^-1 NAA +3%蔗糖+0.6%琼脂,增殖系数为4.83; 在1/2MS+ 0.5 mg·L^-1 IBA +2%蔗糖+0.6%琼脂培养基上,无根苗生根率达88%。     

百合离体培养与植株再生体系的建立

以香水百合鳞叶为外植体,探讨不同外源激素水平对其小鳞茎分化、增殖与不定根形成的影响。结果表明:以MS+6-BA 0.5~1.0mg/L+IAA 0.1~0.3mg/L培养基的不定芽分化、增殖效果好,分化率达78.5%以上,增殖系数达5.6以上;1/2MS+6-BA 0.1mg/L+IAA 0.5mg/L或1/2MS+6-BA 0.1mg/L+NAA 0.1~0.3mg/L或1/2MS+6-BA 0.1mg/L+IBA 0.8mg/L的生根效果好,生根率可达96.0%以上;在泥炭∶珍珠岩=1∶1的基质中驯苗,成活率可达96.3%。     

杨树叶片离体再生系统的构建

以杨树叶片为外植体,MS为基本培养基,使用不同激素不同浓度配比,建立了杨树叶片离体培养植株再生体系。结果表明：叶片的最佳诱导培养基为：MS＋2,4-D 1.0 mg/L＋6-BA 1.0 mg/L;不定芽培养基为：MS＋NAA1.0 mg/L＋6-BA0.5 mg/L。NAA与BA对愈伤组织诱导有调控作用,NAA/BA比值增大有利于不定芽的诱导,但不能超过4∶1;BA与2,4-D关系比较复杂,当2,4-D和6-BA的浓度均为1.0mg/L时,愈伤组织诱导效果最好。     

加拿大枫树离体再生体系的建立

为了建立加拿大枫树的高效再生体系,以加拿大枫树无菌苗为试材,通过采用不同外植体和含有不同激素的培养基配方,获得了加拿大枫树的芽再生、根系诱导的最佳配方。结果显示：培养基配方2（MS＋1．0mg／LBA＋0．2mg／LIAA）的芽再生率较高（80％）,平均每块外植体的再生芽数最高（2．7个芽/外植体块）,再生芽的质量最好;下胚轴和叶柄的芽再生率为100％,子叶最低,为77．5％。下胚轴平均每块外植体的再生芽数最高（6．5个／块）,叶柄的居中（3．6个,块）,子叶的最低（2．6个／块）;1／2MS＋0．2mg／LNAA配方的枫树生根率为100％,单株生根数最高,为5．9条,且根系生长粗壮。