双峰驼排卵机制的研究——Ⅲ输精诱导排卵前后外周血浆促黄体素、孕酮和17β-雌二醇的变化

为了研究双峰驼精液诱导排卵的机制,本文用放射免疫测定法对双峰母驼人工输精诱导排卵前后外周血浆促黄体素(LH)孕酮(P)和17β一雌二醇(E_2)的含量进行了测定。母驼在卵泡发育周期中,LH的基础水平为2.7±1.2ng/ml。输精后4小时LH达到高峰,峰值为6.9±1.0ng/ml,约为基础水平的2.6倍。输精后30～48小时内排卵。在卵泡自然萎缩前一天也出现一个LH小峰(5.3±2.5ng/ml)。 在卵泡发育周期中,血浆孕酮处于低水平(0.36±0.28ng/ml)。诱导排卵后第3天增加到1.73±0.74ng/ml,第8天可达2.40±0.86ng/ml。血浆雌二醇在卵泡发育周期中平均为26.8±9.0Pg/ml,到卵泡成熟时可达30.8±5.1pg/ml,排卵后立即下降到19.0±4.1Pg/ml。但在排卵后3天又上升到29.8±6.5Pg/ml,在其它家畜中未见这种情况。 实验中设置7种对照组,证明双峰驼的排卵仅仅是由具有生殖能力的公驼精液诱导产生的,表明在这样的精液中可能存在着与排卵有密切关系的诱导排卵因子。     

LRH—A对母驼排卵和受胎效果的影响

为探求LRH—A诱导双峰母驼排卵、受胎效果,应用放射免疫法测定了母驼冷冻精液输精前后外周血清孕酮含量的变化。5峰(头)输精并肌注LRH—A母驼,输精前孕酮值平均为0.15±0.02ng/ml,输精后第3天增加到0.52±0.13ng/ml,第7 天可达1.62 ±0.89ng/ml。怀孕驼第12天孕酮仍维持高水平,为1.72±0.31ng/ml;而未怀孕驼孕酮水平7天开始下降,第12天降为0.32 ±0.06ng/ml(p<0.05)。5峰母驼受胎3峰,产羔3峰。3峰仅输冷冻精液的母驼,输精前后孕酮水平显著低于肌注LRH—A母驼排卵后的孕酮水平(p<0.05),均未受胎,持续发情。     

枫泾和长白青年母猪首次发情周期内血清中5种生殖激素含量变化

放射免疫法测定枫泾(FJ)和长白(L)青年母猪(各4头)首次发情周期内外周血清中促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、17β-雌二醇(E_2)、孕酮(P_4)、和睾酮(T)的含量。测定结果,初情期开始日龄FJ猪平均为104.3±11.50天,L猪为235.0±1.95天。两猪种首次发情周期内外周血清中同种生殖激素有相似的变化趋势。在首次情期内,FJ和L猪的FSH平均含量分别波动在28.6±8.6～49.4±6.0ng/ml和16.8±2.5～38.9±0ng/ml之间;FSH总平均含量FJ猪组(37.8±2.7)显著高于L猪(27.0±3.1ng/ml)P<0.05;FJ猪发情0～2小时的FSH平均含量(34.4±2.1ng/ml)极显著地高于L猪(22.2±1.7ng/ml)P<0.001。排卵前LH峰均值FJ猪组(5.31±0.75ng/ml)显著高于L猪组(1.83±0.75ng/ml)P<0.05。发情当天(0天)E_2达峰值,FJ和L猪组分别是30.5±3.9和20.4±5.3pg/ml,两者无显著差异(P>0.05)。FJ和L猪组各自的P_4(ng/ml)和T(pg/ml)分泌呈显著正相关,相关系数依次为γ_F=0.71,P<0.05,γ_L=0.95,P<0.01。LH、FSH的含量高很可能是FJ猪高排卵率的重要因素之一。     

宁夏滩羊发情周期血液中促黄体素(LH)、孕酮、雌二醇——17β含量的测定

用放射免疫测定法测定了宁夏滩羊母羊(13只)外周血清中促黄体素(LH)、孕酮及雌二醇—17β的含量及其变化。血清LH的含量,在黄体期,其值很低,为5.0±0.41ng/ml,到发情开始后约6—12小时增至75.13±17.64ng/ml。孕酮含量的变化,在周期的黄体期,其值最高为2.84±0.10ng/ml;而在发情开始到发情后第二天最低0.52±0.06ng/ml。雌二醇—17β的含量是在发情开始前6—24小时时上升的;其值的变化范围是从黄体期的14.86±1.24Pg/ml到发情开始时的38.7±5.8Pg/ml。     

屡配不孕母牛发情开始后八天内血清促黄体素（LH）含量的变化

本实验采用放射免疫测定技术(RIA)分析了9头屡配不孕母牛和6头正常母牛于发情开始后8天内的血清促黄体素(LH)的含量变化。测定结果表明:屡配不孕母牛的LH排卵峰值低于正常母牛,其峰值分别为2.71±1.00ng/ml和4.70±1.71ng/ml,差异显著(P<0.025)。为了初步验证LH峰值与屡配不孕之间的关系,对20头屡配不孕母牛在发情开始至配种前肌肉注射外源性LH180IU,其配种后60天的受胎率为70％(14/20),而未用LH处理的11头屡配不孕母牛的受胎率为18％(2/11),两者差异极显著(P<0.01)。上述实验结果提示:体内LH排卵峰值降低可能是导致乳牛屡配不孕的重要原因之一。     

用异源放射免疫分析法测定猪血清促黄体素（LH）

本实验用兔抗牛LH(bLH)血清,~(125)Ⅰ-标记牛LH(~(125)Ⅰ-bLH)建立猪LH(pLH)的异源放射免疫分析法。bLH、pLH的标准曲线及猪血清稀释曲线平行。此方法的特异性强,与猪促卵泡素(pFSH)的交叉反应小于0.5％;灵敏度为0.015～0.020ng/管;猪血清添加pLH的回收率为96.8±3.8％;测定内变异系数为3.3％(n=14),测定间变异系数为5.5％(n-5),用本方法测定,注射LRH-A_210分钟后猪血清LH的含量显著提高(P<0.01)。75、95、115、135、155日龄后备母香猪(n=7)血清中LH含量依次为1.50±0.59,1.54±0.42,1.76±0.30,1.41±0.17,1.88±0.30ng/ml;发情时母香猪(n=2)血清中LH含量为7.07±2.73ng/ml     

卵巢囊肿奶牛外周血浆中促黄体素、孕酮、睾酮、雌二醇水平的研究

本试验采用放射免疫法测定了卵巢囊肿奶牛外周血浆中促黄体素、孕酮、雌二醇和睾酮水平。测定结果,促黄体素水平卵泡囊肿为0.84±0.25ng/ml(n=12),黄体囊肿为0.83±0.23ng/ml(n=5);孕酮水平卵泡囊肿为0.56±0.30ng/ml(n=12),黄体囊肿为2.85±0.64ng/ml(n=5);雌二醇水平卵泡囊肿为28.44±22.47pg/ml(n=12),黄体囊肿为8.14±0.88pg/ml(n=5);睾酮水平卵泡囊肿为84.67±40.40pg/ml(n=12),黄体囊肿为51.98±7.77pg/ml(n=5)。认为卵巢囊肿奶牛外周血浆中促黄体素水平低于正常期奶牛的水平;卵泡囊肿奶牛血浆中孕酮水平低于1ng/ml,黄体囊肿奶牛血浆中孕酮水平高于1ng/ml;卵泡囊肿奶牛血浆中雌二醇水平较高;卵泡囊肿奶牛公牛相与体内高水平睾酮有关。     

母犬发情期生殖激素测定及其意义

本试验从15只处于发情前期母犬中随机选取6只母犬,检测其促黄体生成素(LH)、促卵泡素(FSH)和孕酮(P4)3种激素,实现对母犬发情期连续的监测过程。采用静脉采血,抗凝低温离心后分别测定促黄体生成素(LH)、促卵泡素(FSH)、孕酮(P4)的含量,促黄体生成素采用人促黄体生成激素放射免疫分析药盒的方法测定,促卵泡素采用人促滤泡激素放射免疫分析药盒的方法测定,孕酮采用孕酮放射免疫分析药盒的方法测定。测定结果显示:母犬发情期的促黄体生成素的变化范围为5.16～6.82 ng/mL(除峰值外),其峰值平均值是116.71ng/mL;母犬发情期的促卵泡素的变化范围为3.18～4.78 ng/mL(除峰值外),其峰值平均值是43.56 ng/mL;母犬发情期的孕酮的变化范围为0.199 1～8.506 3 ng/mL,其峰值平均值是8.506 3 ng/mL。母犬在发情时,可出现LH释放波,并在LH开始释放后24 h内或开始发情的1～2 d内排卵。     

湖羊、三北羊发情期外周血液中促黄体素、雌二醇和孕酮含量的变化

用放射免疫法测定了湖羊和三北羊发情周期外周血液的LH、17β-雌二醇和孕酮的含量。发情的LH峰值:湖羊为126.54±7.71ng/ml,三北羊为123.38±9.6ng/ml(1)>0.05)。发情开始时间距LH峰值在两种羊之间有显著差异(P<0.01)。整个情期湖羊雌二醇含量高于三北羊(P<0.05),湖羊为36.18±1.52pg/ml,三北羊为28.72±1.92pg/ml,两种品种羊在周期1—3天孕酮含量维持低水平,周期的5—13天有一峰值,湖羊为7.92±0.18ng/ml,三北羊为6.10±0.1ng/ml,有极显著性差异(P<0.01)。在第13天孕酮含量开始下降,第16天下降到最低值。     

关中驴产后期和发情期血浆17β-雌二醇、孕酮和睾酮浓度的变化

本研究应用放射免疫分析法,测定了关中驴产后期(n=18)和发情期(n=6)血浆17β-雌二醇(E_2)、孕酮(P)和辜酮(T)的浓度。测定结果表明,产后第一次发情前血浆E_2浓度较低(12.22±1.92pg/ml),第一次发情期逐渐上升,排卵前第一天和第二天达到较高水平(19.48±2.16pg/ml和20.41±3.27pg/ml,±SE,P<0.05),排卵后降至基础浓度。产后第一次发情前血浆P浓度较低(2.74±0.51ng/ml),排卵后逐渐上升,第四天和第五天显著和极显著高于排卵前P水平,血浆值为6.19±0.66ng/ml和8.09±1.09ng/ml(P<0.05和P<0.01)。产后第一次发情前血浆T浓度较高,发情期下降,排卵后逐渐上升,第五天和第六天显著和极显著高于发情期T水平,分别为313.11±37.57pg/ml和356.73±46.37pg/ml(P<0.05和P<0.01)。产后第一次排卵前P/E_2和P/T比值均较低,排卵后上升,第五天分别达到861和25.83。产后第一次发情前T/E_2比值较高,发情期下降,排卵后上升,第五天达到33.34。排卵前后间隔6小时采样的分析结果表明,排卵前第30～24小时,E_2浓度急剧上升达到峰值。排卵后P浓度于第78～96小时达到较高水平。血浆E_2与P、E_2与T均呈中等负相关(r=-0.42和r=-0.41)。P与T为极显著正相关(r=0.92)。周期性发情期血浆E_2、P、T浓度的分泌范型和产后第一次发情期基本相似。     

LRH—A3对全奶母牦牛的诱导发情效果和作用机理初探

本研究初步探讨了促性腺素释放激素类似物(LRH-A3)对全奶母牦牛(在当年4～6月份产犊的泌乳母牦牛)的诱导发情排卵效果及机理.1998年7月对试验组(n=20)母牦牛注射LRH-A3(300μg/头),对照组(n=42)未作任何处理.9月15日前用普通牛公牛配种,9月15日后用公牦牛补配.1999年产犊率为试验组50.0%(10/20),对照组28.6%(20/42),试验组和对照组差异极显著(P<0.01).对5头母牦牛在注射LRH-A3前30min及注射后30,45和60min血清中促黄体素(LH)浓度测定以进一步探明全奶母牦牛诱导发情第一情期受胎率低的原因.结果发现,虽然注射LRH-A3后60min全奶母牦牛血清中LH浓度显著升高(P<0.05),但该峰值(3.34±0.67ng/ml,n=5)未达到自然发情排卵的LH峰值(17.1829±2.1174ng/ml).     

双峰驼精清诱导排卵活性因子的阴离子交换柱Q Hyper D层析分离及生物活性鉴定

利用阴离子交换柱QHyperD对双峰驼精清进行分离 ,大鼠垂体组织培养及母驼肌注活性组分 ,RIA法测定垂体组织培养液和母驼血浆中LH及FSH的浓度。实验结果表明 ,驼精清经QHyperD柱层析后 ,共得到 6个组分 (F1～F6 ) ,其中F3和F5在大鼠垂体组织培养实验中具有生物活性 ,可引起LH的明显释放 (P <0 .0 5 )。在体实验时给卵巢上有成熟卵泡的母驼分别肌注F3或F5 ,肌注后 5～ 7h ,LH的释放也明显增加 (P <0 .0 5 )。F3可引起母驼发生排卵 ,F5则不能 ,说明F3可能就是驼精清中的诱导排卵活性因子或其成分之一。另外 ,无论是F3或是F5 ,在体内外实验中均未能引起FSH的分泌发生显著变化     

牛促黄体素（bLH）同源放射免疫分析法的建立

本实验用兔抗牛LH血清、~(125)I-标记的牛LH建立牛LH的放射免疫分析法。本方法灵敏度为0.12ng USDA-bLH-B-5/ml,与NIH-bTSH-S_(10),USDA-bFSH-BP_3和oPRL的交叉反应分别小于1.0％,0.1％和0。牛血浆添加USDA-bLH-B-5的回收率为100.8±4.7％,标准曲线的范围为0.019-1.25ng USDA-bLH-B-5。组内变异系数为3.4％(n=20)、组间变异系数为5.2％(n=7)。垂体兴奋试验表明本方法能灵敏、特异地测定出牛血液中LH的变化。     

枫泾公猪初情期前后外周血清中睾酮、促黄体素及皮质醇的含量变化

用放射免疫法测定并研究了在初情期间24小时内和交配过程中的3头枫泾公猪外周血清促黄体素(LH)、睾酮(T)和皮质醇(F)的含量及分泌范型。3头公猪平均于102日具有射精能力,开始进入初情期。初情期前(76～88日龄)T和LH含量较低,其平均值分别为1.28±0.44和1.57±0.09ng/ml。102日龄后,T含量迅速升高,平均为8.43±0.87ng/ml,与初情期前比较,差异极显著,(P<0.01);LH也随之升高,平均为2.04±0.15ng/ml,但前、后差异不明显(P>0.05)。初情期间24小时内,LH含量波动在1.04±0.40～2.25±0.87ng/ml之间,总平均为1.64±0.28ng/ml;T和F均呈突发性分泌方式,总平均值分别为4.32±1.49和14.79±9.61ng/ml,二者的分泌呈极显著正相关(r=0.88)。T和F的含量早上显著高于夜间(24点)。3头公猪在106日龄分别与发情母猪交配过程中,三种激素均处于较高水平,射精阶段T值显著高于爬下后5～6分钟的值,而LH和F值无显著变化。综上所述,初步揭示枫泾公猪平均于108日龄已建立睾酮、促黄体素和皮质醇性成熟的分泌范型。     

屡配不孕母牛发情开始后八天内血清雌二醇和孕酮含量的变化

本实验采用放射免疫测定技术(RIA)分析了9头屡配不孕母牛和6头正常母牛于发情开始后8天内的血清雌二酵和孕酮含量的变化。测定结果表明:屡配不孕母牛发情开始时的血清雌二醇水平低于正常母牛(7.4±3.4pg/ml VS 14.2±6.3pg/ml p<0.025)。发情开后96小时内屡配不孕母牛的血清孕酮水平的变化范围为0.90～1.76ng/ml,正常母牛的变化范围为0.68～1.00ng/ml。发情开始后192小时,正常母牛的血清孕酮水平已经达到2.47±2.02ng/ml,而屡配不孕母牛的血清孕酮水平则为1.97±0.60ng/ml。实验结果指示:体内内分泌失调可能是导致母牛屡配不孕的重要原因之一。     

东北梅花鹿发情期血浆中LH,雌二醇含量变化

本文用放射免疫测定法测定了5头发情期东北梅花鹿血浆中促黄体素(LH)和17β-雌二醇的含量。所得结果:LH在发情前(0.288～0.321ng/ml血浆)与发情后(0.364～0.841ng/ml血浆)都处于低稳水平(P>0.05),但发情时出现非常显著的高峰(2.742ng/ml)(P<0.01);雌二醇在整个发情前后没有出现显著的高峰(P>0.05),仅在发情前约24小时发现一小峰(16.4±4.4pg/ml血浆),发情后12小时发现一小峰(24.9±6.1pg/ml血浆)。结果表明,东北梅花鹿发情期血浆LH、雌二醇含量的时相变化与其他已研究过的鹿种及一些反刍家畜基本一致。     

母牛早期妊娠诊断——应用放射免疫测定乳汁孕酮在母牛性周期内变化规律的试验报告

应用放射免疫法对10头黑白花母牛性周期内乳汁孕酮含量进行了测定。结果显示母牛配种当天(0天)乳汁不含孕酮,配种后第3天含量仍是低值(范围0—4ng/ml,平均0.71±1.338)。以后逐渐上升,配种后第13天,70%个体出现峰值(范围14.8～36.5ng/ml,平均24.9±6.73);其余个体于配种后第16天出现峰值(范围15—31ng/ml,平均24.83±8.6)。此后显示分化现象,其波动曲线与同类报道相似。     

LRH-A_3对全奶母牦牛的诱导发情效果和作用机理初探

本研究初步探讨了促性腺素释放激素类似物 (LRH A3 )对全奶母牦牛 (在当年 4～ 6月份产犊的泌乳母牦牛 )的诱导发情排卵效果及机理。 1998年 7月对试验组 (n =2 0 )母牦牛注射LRH A3 (30 0 μg/头 ) ,对照组 (n =42 )未作任何处理。9月 15日前用普通牛公牛配种 ,9月 15日后用公牦牛补配。 1999年产犊率为试验组 5 0 .0 % (10 / 2 0 ) ,对照组 2 8.6 %(2 0 / 42 ) ,试验组和对照组差异极显著 (P <0 .0 1)。对 5头母牦牛在注射LRH A3 前 30min及注射后 30 ,45和 6 0min血清中促黄体素 (LH)浓度测定以进一步探明全奶母牦牛诱导发情第一情期受胎率低的原因。结果发现 ,虽然注射LRH A3后 6 0min全奶母牦牛血清中LH浓度显著升高 (P <0 .0 5 ) ,但该峰值 (3.34± 0 .6 7ng/ml,n =5 )未达到自然发情排卵的LH峰值 (17.182 9± 2 .1174ng/ml)。     

双峰驼精清诱导排卵活性成分的DEAE—纤维素柱层析分离及其生物活性

选用DEAE－纤维素离子交换柱对双峰驼精清进行分离，各层析组分用于大鼠垂体组织体外培养，并给母驼肌注有活性的组分，以RIA法测定垂体组织培养液和母驼血浆中LH及FSH的浓度。结果表明，驼精清经DEAE－纤维素柱分离后可得到5个蛋白组分（L1－L5），其中L3在大鼠垂体培养时引起LH释放明显增加（P＜0．05），FSH则无明显变化。给卵巢上无大卵泡发育的母驼肌注有活性的组分L3，可引起血浆中LH明显升高，FSH也无变化。由此表明，L3在体内外试验中均具有引起LH释放的生物活性，它可能是诱导排卵的活性因子或其成分之一。     

银狐繁殖期血浆主要激素变化及其对繁殖功能的调控

通过放射免疫测定技术测定母银狐发情前期和发情期外周血浆雌二醇-17β[E2]、孕酮(P4)浓度以及公狐睾酮(T)浓度,并分析这些技术的变化及其对繁殖功能的调控.结果表明,银狐初配前2～3d,E2浓度达峰值(240.85±39.98)pg/mL,在母狐接受跨时E2浓度降至(146.95±38.21)pg/mL,而在发情前期和发情期,其孕酮浓度范围是0.91～77.43ng/mL,峰值是(54.77±23.66)ng/mL,在雌二酮峰值时,孕酮浓度为(28.57±21.21)ng/mL,配种时,P4浓度(33.12±22.56)ng/mL,初配后4d(排卵结束),P4达(48.28±34.84)ng/mL.公狐配种期,T浓度范围(127.2±444.4)pg/mL,,峰值是(341.2±103.2)pg/mL.