细菌CpG—DNA对犬免疫增强效果的研究

以犬瘟热病毒为模式病毒，将CpG-DNA与铝胶、蜂胶2种对照佐剂分别与犬瘟热病毒灭活疫苗配合，给犬接种疫苗前后用微量中和试验抽查血清中和抗体效价，根据抗体效价高低判断佐剂的免疫增强效果。结果表明，3种佐剂疫苗均能诱导产生特异性抗体，但组间抗体效价有显著差异（P＜0．01），CpG-DNA的免疫增强作用明显高于其它2种佐剂，CpG-DNA所诱导的抗体效价较蜂胶佐剂高5倍，较铝胶佐剂高7倍。     

蜂胶对猪细小病毒灭活疫苗佐剂作用的试验

68只豚鼠随机均分为4组,1³组分别免疫蜂胶、铝胶和油佐剂PPV疫苗,第4组为空白对照组,注射等量生理盐水。免疫后不同时间点采集血清分析特异性血凝抑制抗体效价评价蜂胶佐剂对免疫豚鼠体液免疫的影响,测定淋巴细胞增殖、IL-2和IL-4含量评价蜂胶佐剂对免疫豚鼠细胞免疫的影响。结果表明,蜂胶、油佐剂和铝胶3种佐剂均能提高豚鼠对PPV灭活疫苗的免疫应答能力,油佐剂提高血清HI抗体效果较好,其次为蜂胶佐剂,再次为铝胶佐剂。蜂胶佐剂促进T淋巴细胞增殖和提高IL-2、IL-4、IL-6和IFN-γ含量效果优于油佐剂和铝胶佐剂。结论:蜂胶能增强PPV灭活疫苗的免疫效果。     

不同佐剂GnRH疫苗主动免疫对公猪睾丸发育和血清睾酮的影响

为探讨铝胶佐剂与白油Span佐剂的GnRH疫苗对公猪睾丸发育和血清睾酮的影响,12头初生公猪随机分为GnRH疫苗铝胶佐剂免疫组和GnRH疫苗白油Span佐剂免疫组(下简称铝胶组和白油组).9周龄初免,17周龄加强免疫,25周龄屠宰.游标卡尺测量猪阴囊直径和睾丸大小,石蜡切片观察睾丸组织发育,ELISA法和放射免疫分析(RIA)法分别检测GnRH抗体水平和血清睾酮水平.结果表明,铝胶组与白油组GnRH抗体效价差异不显著(P0.05).铝胶组血清睾酮水平于17,21周龄(P＜0.05)和25周龄(P＜0.01)显著地低于白油组,阴囊直径,睾丸直径、横径、周长及睾丸血量均显著地低于白油组(P＜0.05).铝胶组与白油组猪睾丸曲精小管均出现不同程度的空泡化,白油组零星分布少量精子,铝胶组无精子产生.这表明在公猪免疫去势的效果上,辅以铝胶佐剂的GnRH疫苗比辅以白油Span佐剂的GnRH疫苗好.     

三种免疫增强剂对猪细小病毒抗体水平的影响

选择30日龄健康荣昌仔猪12头,每组3头分为4组。选择盐酸左旋咪唑、猪基因工程干扰素及蜂胶液作为免疫接种猪细小病毒疫苗的免疫增强剂,按相同的免疫程序免疫接种试验猪1个月,于免疫接种前采集血液后,以后每隔7d采集一次血液制备血清,检测猪细小病毒抗体效价。比较各组猪细小病毒抗体水平消长曲线情况,分析3种免疫增强剂的免疫增强效果。结果表明,蜂胶作为猪细小病毒疫苗的免疫增强剂效果最好,平均滴度达1∶256;左旋咪唑次之,平均滴度为1∶128;干扰素较差,滴度介于1∶64～1∶128。统计分析表明,试验组及单一细小病毒疫苗对照组免疫接种前后猪细小病毒抗体效价差异极显著(P<0.01),3种免疫增强剂与单一细小病毒疫苗对照组差异显著(P<0.05),其中,蜂胶与单一细小病毒疫苗对照组及与干扰素组差异极显著(P<0.01),盐酸左旋咪唑与干扰素组及与蜂胶组间的抗体效价差异均不显著(P>0.05),干扰素与蜂胶组的猪细小病毒抗体效价差异显著(P<0.05)。     

不同佐剂对鸡新城疫疫苗免疫调节作用的影响

试验以300只AA雏鸡为试验动物,将其随机分为4组,A、B、C组分别接种相同剂量的甲壳素、蜂胶、铝胶佐剂苗,D组为对照组。结果表明,三种佐剂的疫苗在对肉鸡组免疫的第3、4、5、6、7、9、11、13、15、20、25天后,甲壳素疫苗组H I抗体效价显著高于其它组,蜂胶疫苗组H I抗体效价其次,铝胶疫苗组抗体H I效价最低;用三种不同佐剂的疫苗对肉鸡免疫后第26天称其重量,甲壳素佐剂疫苗组免疫后的肉鸡增重效果最好,蜂胶疫苗组居中,铝胶疫苗组最差。     

不同佐剂对猪附红细胞体亚单位疫苗免疫效果的影响

为比较不同佐剂的猪附红细胞体亚单位疫苗的免疫效果,笔者通过试验提取猪附红细胞体抗原,并将其分别与白油佐剂、弗氏佐剂、明矾佐剂及铝胶佐剂混合,免疫小鼠。应用间接ELISA方法比较不同佐剂的猪附红细胞体亚单位疫苗的免疫效果。结果表明：白油佐剂组免疫效果最好,抗体水平在一周后有明显上升,其次为与弗氏佐剂组、铝胶佐剂组和明矾佐剂组。该试验为猪附红细胞体亚单位疫苗的研究提供了可靠的理论依据,为该病的防治奠定了一定的基础。     

不同佐剂对猪附红细胞体亚单位疫苗免疫效果的影响

为比较不同佐剂的猪附红细胞体亚单位疫苗的免疫效果,本试验提取猪附红细胞体抗原,并将其分别与白油佐剂、弗氏佐剂、明矾佐剂及铝胶佐剂混合,免疫小鼠。应用间接ELISA方法比较不同佐剂的猪附红细胞体亚单位疫苗的免疫效果。结果表明:白油佐剂组免疫效果最好,抗体水平在一周后有明显上升,其次为弗氏佐剂组、铝胶佐剂组和明矾佐剂组。该试验为猪附红细胞体亚单位疫苗的研究提供了可靠的理论依据,为该病的防治奠定了一定的基础。     

猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫佐剂的比较试验

以猪圆环病毒2型(PCV2)遗传标记毒株为毒种,经细胞培养传代,优化了病毒增殖条件,获得较高滴度的病毒培养物用于PCV2灭活疫苗的研制。为了比较不同免疫佐剂的效果,本试验对国产矿物质白油和铝胶两种佐剂以及赛比克公司提供的MONTANIDETMISA206、ISA15VG、IMS1315VG3种佐剂配制的灭活疫苗进行了猪体免疫试验。通过临床观察、血清抗体效价测定,确认ISA15VG佐剂配制的疫苗在增强免疫效果方面优于其它佐剂。按5种佐剂免疫效果排序为ISA15VG、IMS1315VG、铝胶、ISA206、国产白油。ISA15VG佐剂属于水包油剂型,可刺激接种动物产生快速免疫应答反应,抗体产生效价高、持续时间长,有可能成为新型PCV2灭活疫苗佐剂的候选。     

蜂胶对PPV灭活疫苗细胞免疫效果的影响

为了研究蜂胶作为佐剂对猪细小病毒（PPV）灭活疫苗细胞免疫效果的影响,试验将20头25-30日龄健康仔猪随机均分为4组,1-3组分别颈部肌肉注射2 m L蜂胶、铝胶和油佐剂猪细小病毒灭活疫苗,第4组为空白对照组注射2 m L生理盐水,2周后以相同剂量进行第2次免疫。分别于首免后第7,14,35天颈静脉采血5 m L,采用MTT法测定外周血淋巴细胞增殖变化,ELISA法检测淋巴细胞上清液IL-2、IFN-γ（Th1型）和IL-6（Th2型）细胞因子含量。结果表明：蜂胶佐剂可以促进淋巴细胞增殖和提高各细胞因子含量,效果优于油佐剂和铝胶佐剂。说明蜂胶提高细胞免疫的效果较好,可以作为猪细小病毒灭活疫苗佐剂使用。     

三种佐剂对奶山羊乳房炎灭活疫苗免疫效果的影响

为筛选奶山羊乳房炎灭活疫苗的有效佐剂,以大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性表皮葡萄球菌及产色葡萄球菌为材料,经甲醛37℃灭活,分别与铝胶盐、蜂胶和转移因子混合,制备铝胶盐佐剂疫苗、蜂胶佐剂疫苗和转移因子佐剂疫苗,免疫泌乳期奶山羊,免疫剂量为2mL,共免疫2次,免疫间隔14d。分别在免疫前及每次免疫后第10天采集血样和乳样,ELISA测定抗体效价,用快速诊断液检测隐性乳房炎,统计隐性乳房炎检出率。结果显示,铝胶盐佐剂疫苗刺激机体产生的抗体水平在首免和二免后均显著高于对照组(P0.05);3个免疫组中,铝胶盐组抗体水平最高,转移因子组次之,蜂胶组则不显著;铝胶盐佐剂疫苗还能显著降低隐性乳房炎的检出率,使隐性乳房炎检出率由免疫前的60%下降至二免后的30%。结果表明,同蜂胶和转移因子相比,铝胶盐佐剂能刺激机体产生更强的体液免疫应答,对隐性乳房炎的治疗效果更显著。     

小鹅瘟蜂胶灭活疫苗的研究

以蜂胶为佐剂制备小鹅瘟蜂胶佐剂灭活苗,将病毒液灭活后按一定比例加入蜂胶佐剂制备疫苗,并进行疫苗安全性、免疫持续期、效力对比、保存期及区域应用试验,结果表明小鹅瘟蜂胶灭活疫苗安全性好,第5天即产生抗体且抗体持续时间长（90d）,免疫效果远好于油乳剂灭活苗,推广试验也取得了令人满意的结果。     

H5亚型禽流感灭活疫苗免疫后鸡血凝抑制抗体动态变化观察

选择国家指定的两个厂家生产的禽流感灭活疫苗(H5亚型,N28株)进行无母源抗体来航鸡的免疫试验.通过鸡免疫后血凝抑制(HI)抗体的动态性检测,对两个疫苗的免疫效果进行了观察.研究结果表明,两个疫苗均具有良好的免疫效果,但也存在一定程度的差异;加强免疫可以明显提高抗体水平,延长免疫保护时间.     

副猪嗜血杆菌Plp4蛋白的原核表达及免疫原性分析

为原核表达副猪嗜血杆菌P1p4蛋白,本研究通过PCR方法扩增P1p4全长基因并克隆于pET-28a(+)载体中,将重组质粒转化BL21(DE3)感受态中,采用0.4 mM IPTG经22℃诱导表达了35 ku的重组蛋白.经western blot试验证明Plp4蛋白具有良好的反应原性,免疫6周龄昆明小鼠制备免疫血清,ELISA检测表明制备的抗血清效价在1∶15000以上,表明P1p4蛋白具有良好的免疫原性.     

禽流感油乳剂灭活疫苗的研究

将6种不同亚型的禽流感病毒（AIVH2N9、H3N8、H5N1、H5N2、H7N1、H9N2）分别接种鸡胚,收获尿囊液,经甲醛灭活,以矿物油为佐剂制成油乳剂灭活疫苗。疫苗接种4和8周龄SPF鸡,注苗后均无不良反应。每种亚型疫苗免疫后14天和21天攻毒保护率均达90％-100％。分别用H5N1和H9N2亚型灭活疫苗免疫8周龄SPF鸡、25和28周龄健康商品蛋鸡,免疫后7天产生免疫力,14天保护率达100％,21天后抗体达高峰,仔鸡接苗后最高血凝抑制（HI）几何平均滴度（GMT）为7.3-8.0log2,蛋鸡为8.0-10.5log2。免疫后180天,抗体效价不低于6.5log2。免疫后180天分别以AIV攻击,H5亚型疫苗组,用强毒攻击无一发病和死亡,对照鸡全部发病死亡;H9亚型疫苗组,对照鸡在攻毒后72小时停产,免疫鸡无一发病且产蛋正常,对同源攻毒的保护率达100％。     

禽流感(H9亚型)油乳剂灭活疫苗的血凝抑制(HI)抗体动态变化的研究

从市场上随机购得不同厂家各两批次的商品化禽流感(H9)油乳剂灭活疫苗，按瓶签说明免疫禽流感母源抗体为阴性的蛋鸡。当疫苗抗体下降至5log2左右时部分鸡再二免，并做田间试验。结果表明，免疫1周出现血清抗体，并逐日上升，3周达高峰。首次免疫8周后抗体下降至5log2左右，二次免疫15周后抗体下降至5log2左右。这四批疫苗的免疫原性较高，安全可靠，两次免疫保护期可保护至开产后。     

禽霍乱、大肠杆菌病蜂胶二联灭活疫苗中大肠杆菌凝集抗体消长规律的研究

应用改良大肠杆菌凝集试验对禽霍乱、大肠杆菌病蜂胶二联灭活疫苗中大肠杆菌凝集抗体消长规律的监测表明：3 d的抗体效价为2-3 Log2,5 d达到6 Log2以上,30 d达到高峰8.5-9.5 Log2,6个月仍可达到6 Log2。3批成品监测结果基本一致,表明禽霍乱、大肠杆菌病蜂胶二联灭活疫苗生产工艺已相当成熟,完全适合工厂化大规模生产。     

Immunization of broiler breeder chickens against Newcastle disease with an oil-emulsion vaccine

Antibody response was rapid and high in broiler breeder chickens receiving 1 or 2 vaccinations with oil-emulsion vaccine against Newcastle disease at 23 or at 23 and 26 weeks old. The antibody titers remained high during the 41-week experimental period. At 64 weeks old, about 41 weeks after vaccination, the geometric mean hemagglutination-inhibition antibody titer was 67 from the single vaccination, and 103 from the double vaccination. The immune response to live-virus vaccine given at 2, 9, 20, 30, 42, or 54 weeks of age via the drinking water was high, but uniformity was lacking in the antibody response in the breeders and maternal antibody response in the progeny. Maternal antibody levels in one-day-old chicks were related to the titers of antibody in the dams. Maternal antibody titers of chicks originated from breeder flocks that were vaccinated with the oil-emulsion vaccine remained high for all hatches.     

鸡IBD蜂胶囊毒灭活苗的制备及其最佳用量的筛选

以典型发病鸡群的法氏囊为组织源，以蜂胶为佐剂，按病毒性动物组织灭活疫苗制造基本程序制备灭活苗；以不同的剂量皮下接种．GIBD母源抗体的10日龄AA肉鸡，按常规方法检测其不同免疫期的AGP抗体阳性率、AGP效价和对强毒攻击的保护率。结果显示：0．5mL／只剂量组的受试鸡AGP抗体的阳性率在免疫后10d达到60％，20d上升到100％，90d仍有80％的阳性率。在免疫后第20、50d的攻毒试验中，保护率均为100％。     

PRRSV重组N蛋白的抗原性分析及其特异性抗体制备

利用大肠杆菌表达技术和亲和层析法纯化出重组PRRSV N蛋白 ,用间接ELISA法和Western blot分析 ,证明其具有较好的抗原性。将该纯化蛋白采用大剂量长程免疫法免疫家兔 ,制备了兔抗重组N蛋白抗体 ,用Western blot分析和竞争抑制试验证明其具有很高的特异性 ,ELISA效价达 1∶32 0 0以上。     

关中奶山羊乳房炎灭活菌苗的制备及其免疫效果测定

对自制乳房炎疫苗免疫后的抗体效价进行评估.用甲醛37℃过夜灭活大肠埃希菌、葡萄球菌,分别制备蜂胶灭活疫苗、转移因子灭活苗及无佐剂疫苗,接种泌乳期奶山羊后,分别在不同时间采集免疫羊的血清和乳汁,ELISA测定血清大肠埃希菌和葡萄球菌的抗体效价.研究结果显示,大肠埃希菌和葡萄球菌经甲醛灭活彻底;与免疫前相比,血清和乳汁中的...