填饲期朗德鹅血浆生化指标变化规律及其与产肝性能关系

以朗德鹅为试验对象,探讨填饲期血浆生化指标的变化规律及血浆生化指标与产肝性能的关系.结果表明:随填饲时间的延长,朗德鹅有关血浆生化指标显著升高,填饲组血浆生化指标显著高于对照组,禁食24 h后血浆总胆固醇(CHO)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)浓度显著上升;公鹅胴体重和肝重极显著高...     

朗德鹅THRSPα基因PCR-SSCP分析及与产肝性能的相关性

THRSPα参与脂肪合成限速酶基因的转录调控,在脂肪生成过程中发挥重要作用.该研究采用PCR-SSCP法检测朗德鹅群体中THRSPα基因的多态性,并分析基因多态性与产肝性能的关系.结果表明,在THRSPα基因第1外显子编码区216 bp处存在1个新的突变位点即C→T碱基突变,其中C碱基的基因频率为0.90,为优势等位基因. χ2检验结果显示:该群体处于Hardy-Weinberg 平衡状态;THRSPα第一外显子编码区SSCP多态位点只有2种基因型AA和AB,没有BB,其中AB型朗德鹅肝重和肝脏指数(肝重/体重)均显著高于AA型(P＜0.05).     

朗德鹅的屠宰取肝及加工

填饲后合格的朗德鹅要送到屠宰场集中宰杀取肝。屠宰前的肥肝鹅要停食12～18小时,但要供给充足的饮水。如用车辆运输,应把鹅放在运输笼中,每笼放鹅4只,笼里多铺垫草。决不能将肥鹅放在车斗中运输,否则车子启动后肥鹅堆集一起,会造成大批死亡。车辆的颠簸也会使鹅腹腔的肥肝受损伤。因此,无论装车还是卸车,操作都要轻捉轻放,避免不必要的损失。     

填饲鹅肝脏组织中脂肪酸沉积与FAS基因mRNA的表达丰度

【目的】研究不同填饲期肥肝鹅肝脏组织中不同脂肪酸沉积与脂肪酸合成酶（fatty acid synthetase,FAS）基因mRNA的表达丰度及相关性。【方法】对200只100日龄青农灰鹅进行填饲,从填饲0 d起,每隔6 d屠宰1次,共6次。每次随机选取10只,每只为1个重复,屠宰测定肥肝重、肝中脂肪含量、各种脂肪酸含量和FAS基因mRNA的表达丰度。【结果】①肥肝重随填饲时间的延长而增加,肝中粗脂肪含量（ether extract,EE）随肝重的增加而增加,以填饲18-24 d鹅的肥肝增重最快（504.67 g/6 d）,12-18 d的次之。②肝中饱和脂肪酸（saturated fatty acid,SFA）和单不饱和脂肪酸（monounsaturated fatty acid,MUFA）的含量随着填饲时间的延长而增加,尤其是在12-18和18-24 d这两个阶段的沉积最为明显,而多不饱和脂肪酸（polyunsaturated fatty acid,PUFA）主要是在填饲后期（18-30 d）沉积;在整个填饲过程中,各种脂肪酸的沉积表现为填饲后期显著大于填饲前期（P＜0.05或P＜0.01）;填饲30 d时沉积量较大的脂肪酸为肉豆蔻酸（C14﹕0）、棕榈酸（C16﹕0）、硬脂酸（C18﹕0）、棕榈油酸（C16﹕1）、油酸（C18﹕1）、二十碳烯酸（C20﹕1）和亚油酸（C18﹕2）,每100 g组织中的含量分别为0.6028 、17.72、7.25、2.75、37.42、0.3078和0.43 g。③FAS基因mRNA的表达丰度随肝脏增重和脂肪沉积速度的增加呈现出先增加后迅速降低的趋势,填饲24 d时极显著高于其它时期（P＜0.01）;0-24 d鹅肝脏组织中FAS基因mRNA表达丰度与肥肝重、EE、SFA和MUFA存在极显著正相关（P＜0.01）,而与PUFA存在弱负相关且差异不显著（P＞0.05）,30 d时相关性不显著（P＞0.05）。【结论】①鹅肝中EE、SFA和MUFA的含量随填饲时间和肝重的增加而增加;填饲18-24 d鹅肝脏增重和EE、SFA和MUFA的沉积速度最快;②FAS基因mRNA的表达对肥肝鹅肝脏中脂肪的沉积具有填饲前、中期快速增加,填饲后期下降的调控作用。     

不同日粮对朗德鹅生长性能的影响

研究了不同日粮对朗德鹅生长性能的影响。结果表明：试验Ⅱ组效果最佳。     

填饲期肥肝鹅脂肪沉积、血脂成分和脂类代谢酶的变化规律

【目的】通过对不同填饲期肥肝鹅体内脂肪沉积、血脂成分和脂类代谢酶等指标的测定分析,探讨肥肝鹅脂肪代谢规律。【方法】选取同批孵化、相同饲养条件下育成的85日龄体重差异不显著（P＞0.05）的肝用型公鹅200只进行填饲,填饲期30 d。从预试期结束起,分别于填饲0、6、12、18、24、30 d取血、屠宰1次;每次随机选取30只体重相近的试验鹅,每只为1个重复,以填饲0 d作为对照。分别测定肝重、皮脂重、腹脂重、肠脂重、皮脂率、腹脂率、肠脂率、血脂成分和脂类代谢相关指标。所有试验鹅填饲同一种饲粮,填饲量定量一致。将经过筛选的玉米粒倒入水锅内,煮沸5-10 min后,捞出沥干,趁热加入1%鹅油、0.3%的食盐并充分拌匀,冷却后作为填饲饲粮;采用双人机械填饲方法。试验鹅采用地面圈养填饲,分栏饲养。【结果】①腹脂重、皮脂重、肠脂重随着填饲时间的延长而增加,填饲12-18 d腹脂、皮脂、肠脂、肥肝脂肪沉积增重最快,填饲30 d时皮脂重＞腹脂重＞肠脂重;②除了填饲6 d皮脂率与肥肝重呈显著负相关（r=-0.869）外,不同填饲期肥肝鹅腹脂重、皮脂重、肠脂重、腹脂率、皮脂率、肠脂率与肝脏重均呈极显著正相关（P＜0.01）。③填饲显著改变游离脂肪酸（non-estesterified fatty acid,NEFA）和载脂蛋白A（apolipoprotein- A,Apo-A）的含量;在整个填饲过程中,载脂蛋白B（apolipoprotein- B,Apo-B）的含量随着填饲时间的延长有下降的趋势,但各填饲阶段之间差异均不显著（P＞0.05）;随着填饲时间的延长,甘油三酯（Triglyceride,TG）、总胆固醇（total cholesterol,TC）、高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein-cholesterol,HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein-cholesterol,LDL-C）和极低密度脂蛋白胆固醇（very low density lipoprotein-cholesterol,VLDL-C）的含量逐渐增加。④胆碱酯酶（cholinesterase,CHE）、脂肪酶（lipase,LPS）、脂蛋白脂酶（lipoprotein lipase,LPL）和肝脂酶（lipoprotein lipase,HL）和总脂酶（LPL+HL）活性最大值分别出现在填饲18-24 d,并呈先升高后降低趋势。【结论】填饲显著改变肥肝鹅的机体脂肪组成;填饲能够显著改变肥肝鹅血脂成分含量,肝重与机体脂肪沉积均呈极显著正相关（P＜0.01）;填饲12-24 d是机体脂肪代谢最旺盛的时期,沉积量最多,肥肝增重最快。     

填饲期内肥肝鹅A-FABP与MSTN基因 同步表达规律与相关性

【目的】研究与脂肪沉积有关基因在不同填饲阶段鹅组织中的表达规律及其相关性,对实施肝用型鹅新品种（系）标记辅助选择具有重要意义。重点探讨脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白（adipocyte fatty acid-binding protein,A-FABP）基因与肌肉生长抑制素（myostatin,MSTN）基因在不同填饲日龄鹅组织中的表达规律及两基因的表达相关性。【方法】选取200只体重相近的12周龄健康青农灰鹅进行填饲。分别采集不同填饲时间里鹅肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胸肌、腿肌和腹脂样品,提取总RNA后,利用实时荧光定量PCR技术测定A-FABP与MSTN基因的表达量,并研究不同组织中这两个基因的表达相关性。对填饲期内肝脏重量进行研究,结合乙醚浸提法和气相色谱法测定肝脏中脂肪和总不饱和脂肪酸、总饱和脂肪酸的含量,并研究其与A-FABP与MSTN基因表达量的关系。【结果】①A-FABP基因在肝用型鹅的肝脏、腹脂、腿肌、胸肌、脾脏、肺脏和肾脏中均有表达。肝脏、腹脂、腿肌和胸肌中A-FABP基因表达量变化呈现先升高后下降的趋势,分别在填饲24、12、18和24 d达到最大值（15.90±0.04、12.72±0.12、8.88±0.06、6.33±0.13）。MSTN基因在肝用型鹅的腿肌、胸肌、肾脏、肺脏、腹脂、肝脏和脾脏中均进行了表达,MSTN基因在腿肌和胸肌中的表达呈现先升高后下降的趋势,而在肝脏、腹脂、肺脏、肾脏中MSTN基因表达量变化不显著（P＜0.01）。②鹅肝脏组织中A-FABP基因表达量与肝重、肝内脂肪、总不饱和脂肪酸及总饱和脂肪酸含量呈正相关,相关系数分别为0.576、0.510、0.463、0.501,差异均极显著（P＜0.01）;MSTN基因表达量与肝重、肝内脂肪、不饱和脂肪酸及总饱和脂肪酸含量相关性不显著（P＞0.05）。【结论】A-FABP与MSTN基因在肝用型鹅组织中的表达多呈负相关,且各自在不同填饲阶段、不同组织中的表达规律具有一定差异性,肝脏中A-FABP基因对肥肝性状的调控起一定作用。     

添加油脂填饲对骡鸭肥肝生成中脂蛋白脂酶的影响

脂蛋白脂酶(LPL)催化肝脏所分泌甘油三酯(TG)的脂解,部分地调节脂肪在肝内外的贮存.骡鸭经添加4%玉米油或鸭油填饲2周后,血浆LPL活性、TG浓度及腹脂率、皮脂率均较添加油脂填饲前低,但肥肝率却较高,分别达到9.63%和7.43%,差异显著(P＜0.05).同时,肝素后LPL活性与肝重率、肝脂率、皮脂率显著相关的程度略低.表明添加玉米油和鸭油填饲有利于骡鸭肥肝生成,其原因之一可能是LPL酶活性较低.     

填饲对黑羽番鸭产肝性能、组织营养成分、肝脏组织学及脂调控基因表达水平的影响

通过对不同填饲期黑羽番鸭产肝性能测定、肌肉和肝脏营养成分分析、肝脏组织学观察,以及脂调控基因的表达检测,探讨黑羽番鸭肝脂肪代谢规律。选取140只体质量相近的12周龄健康黑羽番鸭(公母各半)作为试验动物,其中40只作为对照。填饲期为16 d,采用单人机械填饲方法。填饲饲粮选用煮至6~7成熟的陈年玉米,沥干后趁热拌入12 g·kg-1油脂、7.5 g·kg-1食盐和1 g·kg-1复合维生素,对照组正常饲喂。结果表明:黑羽番鸭填饲16 d后,公番鸭肝质量平均为308.91 g,母番鸭肝质量平均为135.86 g,差异极显著(P0.01);填饲组肝脏的脂肪含量为51.83%,对照组为8.36%,填饲极显著提高了黑羽番鸭肝脏的脂肪水平(P0.01);填饲黑羽番鸭肝脏细胞膨大,肝细胞质内充满大小不等的脂肪滴;填饲显著提高了黑羽番鸭肝脏中脂肪酸合成酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)和甘油磷酸酰基转移酶(GPAT)基因的相对表达量(P0.05),显著降低了微粒体甘油三酯转运蛋白(MTTP)和载脂蛋白B(ApoB)基因的相对表达量(P0.05);随着填饲的进程,检测到肝脏中的FAS、ACC、MTTP、ApoB、GPAT等脂调控基因的相对表达量均有所提升。结论:番鸭具有良好肥肝生产性能;填饲使黑羽番鸭肝脏脂肪水平极显著升高;在填饲过程,肝脏中FAS、ACC、MTTP、ApoB和GPAT基因的表达对黑羽番鸭脂代谢网络调控发挥作用。     

柑橘CitCEP基因家族的鉴定及对逆境和激素的响应

【目的】基于全基因组鉴定分析柑橘CEP基因(CitCEPs)家族成员,了解各成员的分类进化关系,研究各基因成员在不同组织中的表达特异性以及对激素和非生物胁迫的响应,为进一步研究CEP基因家族的生物学功能打下基础。【方法】利用BLASTp基于Phytozome数据库鉴定柑橘CEP家族成员,采用GSDS、Prot Scale Tool、EXPASY、CLUSTALX、MEGA6.0、plant CARE、Cello等软件绘制家族成员基因结构图;分析预测蛋白的相对分子质量与等电点等理化性质;构建系统进化树及亚细胞定位预测等,利用实时荧光定量PCR技术(q RT-PCR)检测柑橘CEP基因家族各成员在‘资阳香橙’(‘Citrus junos Ziyang’)不同处理下的瞬时表达情况。【结果】柑橘CEP基因家族由11个成员组成,其中CitCEP10和CitCEP11含1个内含子,其余成员均无内含子;该基因家族成员均含有SPGV/IGH保守结构域序列,其预测蛋白均为亲水性蛋白,亲水性最强的氨基酸其值为3.711,亲水性最弱的氨基酸其值为-2.778;亚细胞定位预测结果显示该基因家族成员位于细胞不同位置,其中CitCEP1、CitCEP2、CitCEP4、CitCEP5、CitCEP6、CitCEP8定位于细胞外,CitCEP3和CitCEP7在细胞外和线粒体中均存在,CitCEP9位于细胞核中,CitCEP10在细胞质膜上,而CitCEP11位于线粒体和细胞核中;聚类分析发现,该家族成员分布于不同的分支中,分别与拟南芥CEP不同成员聚在一起,表明柑橘CEP成员间具有不同生物功能。表达分析显示,CitCEP2主要在茎、叶和子叶中表达,CitCEP3主要在根和子叶中表达,而CitCEP10和CitCEP11主要在果皮中表达,其余成员在上述组织中表达极低或不表达,体现了不同成员间组织特异性的差异。在干旱条件下,CitCEP2表达下调,CitCEP3、CitCEP10和CitCEP11的相对表达量均逐渐上调;而在盐胁迫下,CitCEP2、CitCEP10的响应模式与其所对应的干旱胁迫类似,CitCEP3和CitCEP11则呈现先升后降趋势。在乙烯(ETH)、脱落酸(ABA)处理下,CitCEP2的表达量明显受到抑制,而在茉莉酸甲酯(Me JA)、水杨酸(SA)、生长素(IAA)、赤霉素(GA3)处理下均表现为先上升、后下降的趋势;在6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)、IAA、GA3、ABA处理下CitCEP3也表现出类似趋势。CitCEP10在ETH处理下表达量显著上升,在6-BA、SA、ABA处理下表达量呈现先下降后上升趋势,而在Me JA、IAA、GA3处理中无明显规律。CitCEP11在ETH、Me JA、SA、IAA、GA3、ABA处理下表达均呈现下调趋势,与CitCEP3在ETH、SA处理下的表达模式类似。在6-BA处理下,CitCEP11表达呈现先下降后上升趋势。【结论】从柑橘全基因组上鉴定出了11个CitCEP基因成员,各成员均为亲水蛋白,并含有SPGV/IGH保守结构域,位于细胞中不同位置。在不同逆境和激素处理下,CitCEP2、CitCEP3、CitCEP10和CitCEP11呈现不同程度的响应,而其余成员响应不明显或未响应。推测CitCEP2、CitCEP3、CitCEP10与CitCEP11在柑橘生长发育和逆境响应过程中可能起着重要作用。     

Performance of Fatty Liver Development in Response to Brown Rice and Corn-Based Diets in Overfed Landes Geese(Anser anser)

The effect of brown rice and corn-based diets on fatty liver weight, carcass traits, lipids accumulation and liver composition of Landes geese (Anser anser) after feeding the same amount of each diet was investigated. After 2 weeks overfeeding,besides body weight and body weight gain increased significantly, the fatty liver weights were increased dramatically from 94.67 to 554.67 and 754.00 g in corn treatment and rice treatment, respectively, and the accumulation lipids in adipose tissues reached up to or close to 2 folds of initial weight in both treatments. Liver weight was greater in brown rice group than in corn group(P＜0.05). Compared to before overfeeding, triacylglycerols (TG) in geese fatty liver increased dramatically and predominated (from 9.08% to close to or more than 90% of hepatic lipids), whereas phospholipids (PL) and cholesteryl esters (CE) decreased sharply in both treatments (P＜0.05). However, the percentages of lipids, TG and PL in fatty liver were higher in brown rice treatment than in corn treatment, and that of CE was lower (P＜0.05). It indicates that overfeeding chiefly results in lipids accumulation in goose fatty liver and adipose tiss ues. Brown rice-based diet induces greater fatty liver, and brown rice is one of high quality overfeeding ingredients instead of corn.     

不同硒源对鹅早期生产性能、屠宰性能、肉品质、肌肉常规养分、免疫与抗氧化功能的影响

 【目的】研究不同硒源对鹅生产性能、屠宰性能、肉品质、肌肉常规养分、免疫和抗氧化功能的影响。【方法】试验选用1日龄健康、体重相近的肉鹅96只（P＞0.05）,按单因素完全随机设计分为对照组、亚硒酸钠组、酵母硒组和纳米硒组4组,每组3个重复,每个重复8只;对照组饲喂基础日粮,其它3组分别在基础日粮中添加0.3 mg&;#8226;kg-1水平的亚硒酸钠、酵母硒和纳米硒。【结果】除9周龄酵母硒组胸肌率、腿肌率显著高于对照组外（P＜0.05）,4、9周龄其余各试验组鹅的体增重、料重比、屠宰性能指标均与对照组差异不显著（P＞0.05）,且不同硒源间对鹅的生产性能也无显著性影响（P＞0.05）。9周龄肌肉失水率、硬度、水分、粗脂肪、灰分含量各试验组显著低于对照组（P＜0.05）,不同硒源间差异不显著（P＞0.05）;各试验组滴水损失显著低于对照组（P＜0.05）,且酵母硒组显著低于亚硒酸钠组（P＜0.05）;肌红蛋白含量各试验组显著高于对照组（P＜0.05）,酵母硒组显著高于亚硒酸钠组（P＜0.05）;各试验组粗蛋白含量显著高于对照组（P＜0.05）,且酵母硒和纳米硒组显著高于对照组（P＜0.05）,但不同硒源间差异不显著（P＞0.05）。除9周龄亚硒酸钠组、纳米硒组脾脏指数与对照组差异不显著外（P＞0.05）,第4、9周龄其余各试验组胸腺指数、脾脏指数、法氏囊指数均显著高于对照组（P＜0.05）,但不同硒源间差异不显著（P＞0.05）;第4、9周龄T淋巴细胞转化率与对照组相比,亚硒酸钠组、纳米硒组均显著提高（P＜0.05）,酵母硒组极显著提高（P＜0.01）,且酵母硒组显著高于亚硒酸钠组（P＜0.05）。各试验组4、9周龄血清与肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）,总超氧化物歧化酶（T-SOD）和总抗氧化能力（T-AOC）活力均显著高于对照组（P＜0.05）;各试验组4、9周龄血清与肝脏中丙二醛（MDA）和过氧化氢（H2O2）均显著低于对照组（P＜0.05）;不同硒源的4周龄试验肉鹅血清中GSH-PX活力差异不显著（P＞0.05）,4周龄肝脏、9周龄血清和肝脏酵母硒组均显著高于亚硒酸钠组（P＜0.05）;4、9周龄试验肉鹅血清与肝脏中的T-SOD活力差异不显著（P＜0.05）;4、9周龄血清,4周龄肝脏酵母硒组T-AOC均显著高于亚硒酸钠组（P＜0.05）,9周龄肝脏纳米硒组显著高于亚硒酸钠组（P＜0.05）;MDA含量,4、9周龄血清与肝脏酵母硒组均显著低于亚硒酸钠组（P＜0.05）;4、9周龄血清与肝脏H2O2含量差异不显著（P＜0.05）。亚硒酸钠和纳米硒组cGPx基因在肝脏中的表达量显著高于对照组（P＜0.05）;酵母硒组极显著高于对照组（P＜0.01）,酵母硒组显著高于亚硒酸钠和纳米硒组（P＜0.05）。【结论】日粮中添加不同硒源对鹅的生产性能和屠宰性能无显著性影响（P＞0.05）,但是能够改善鹅的肉品质和鹅肌肉的营养成分含量,增加机体免疫功能和抗氧化能力;酵母硒比亚硒酸钠和纳米硒的作用更为显著。     

饲料碳水化合物水平对南方鲇(Silurus meridionalis)幼鱼肝脏、胰脏和肾脏的组织学影响

为研究饲料碳水化合物对南方鲇（Silurus meridionalis）的组织结构的影响,配制分别含0%,15%,30%糊化玉米淀粉的等能饲料分别作为对照、中水平和高水平碳水化合物（CHO）饲料,观察以3种饲料喂养8周后南方鲇鱼体肝脏、胰脏和肾脏的组织形态学.结果发现：中水平碳水化合物和高水平碳水化合物组的肝细胞多发生肿胀和空泡化,部分肝细胞膜破裂.中水平碳水化合物和高水平碳水化合物组的肝细胞密度差异不显著,二者均显著低于对照组（p〈0.05）.高水平碳水化合物组肝细胞短径显著大于对照组（p〈0.05）,二者均与中水平碳水化合物组无显著差异.中水平碳水化合物和高水平碳水化合物组肝细胞核多移至细胞边位,大小无明显变化.中水平碳水化合物和高水平碳水化合物组的胰脏和肾脏组织结构与对照组相比没有明显变化.结果表明：摄食过高水平碳水化合物饲料对南方鲇幼鱼的肝脏组织结构有一定程度的损害,验证了饲料碳水化合物对肉食性鱼类在组织学水平上的营养胁迫.     

日粮添加壳聚糖对鹅生长性能、血脂及脂代谢相关基因表达的影响

为研究日粮中添加不同剂量的壳聚糖对肉仔鹅生长性能、血脂成分、肝脏脂代谢关键酶及其mRNA表达的影响,探讨壳聚糖调控鹅脂质代谢的机理。选取14日龄扬州鹅公仔鹅360只,随机分为5组各6个重复,每个重复12只。即基础饲粮组(对照组,C),基础饲粮+250 mg/kg(Ⅰ),基础饲粮+500 mg/kg(Ⅱ)、基础饲粮+1 000mg/kg(Ⅲ)及基础饲粮+2 000mg/kg(Ⅳ)壳聚糖组,试验期56d。结果表明:1)饲粮中添加250和500mg/kg的壳聚糖均能显著提高试验鹅日采食量(ADFI)、日增重(ADG)及70日龄体重(P0.05);2)在250~1 000mg/kg范围内,和对照组相比,试验组血清总胆固醇(TC)及低密度脂蛋白(LDL)浓度显著降低(P0.05);不同处理组间血清甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)差异不显著(P0.05);3)饲粮中添加250和500mg/kg的壳聚糖能够显著降低肝脏乙酰辅酶A羧化酶(ACC)活性,并抑制ACC和脂肪酸合成酶(FAS)mRNA的表达(P0.05)。试验鹅肝脏过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)mRNA表达水平随着壳聚糖水平提高,显著上调;4)在250~2 000mg/kg范围内,壳聚糖添加量不影响试验鹅肝脏FAS及LPL活性(P0.05)。但500和1 000mg/kg壳聚糖能显著降低其肝脏HL活性。综上所述,壳聚糖能够通过影响肝脏脂肪代谢酶活性及脂代谢相关基因的表达,调控试验鹅血脂代谢,提高其生长性能,添加量以250~500mg/kg效果最佳。     

金针菇JA/SA信号通路基因鉴定及其对外源JA/SA应答

本研究鉴定了金针菇茉莉酸(JA)信号通路的4个关键基因:COI1、PDF1.2、MYC2-1、MYC2-2与水杨酸(SA)信号通路的4个关键基因:PR1-1、PR1-2、NPR1-1、NPR1-2。NBT染色法和荧光定量结果表明,金针菇JA/SA信号通路可应答外源JA/SA,50μmol·L~(-1)外源JA和500μmol·L~(-1)外源SA处理金针菇菌丝12h可显著提高JA/SA信号通路基因的转录水平,基因PDF1.2响应JA诱导最明显,可作为JA信号通路标记基因;JA/SA信号转导途径间存在协同或拮抗作用:SA信号转导通路中NPR1蛋白对JA信号转导通路中PDF1.2基因表达有抑制作用,外源JA/SA的相对浓度决定其作用的强弱。     

棉花3个脂肪酸碳链延长基因的cDNA克隆和表达分析

【目的】克隆棉花脂肪酸合成碳链延长的3个重要基因,分析它们的基因表达及其对逆境胁迫的反应,为棉花高油分育种和抗逆育种提供候选基因。【方法】采用同源克隆的方法,克隆陆地棉脂肪酸合成碳链延长3个重要基因GhKAR、GhHAD和GhENR的cDNA全长;应用生物信息学方法,分析克隆基因编码蛋白的特性;通过RT-PCR,分析目标基因的组织表达特征、时空表达水平和非生物胁迫条件下的表达特性。【结果】GhKAR和GhENR属于NADB Rosemann超基因家族,GhHAD属于hotdog超基因家族;GhKAR、GhHAD和GhENR的cDNA全长分别为1 119、906和1 318 bp,分别编码283、221、394个氨基酸;它们在根、茎、叶及胚珠发育不同时期均有表达。3个基因在高油材料中的基因表达水平都高于低油材料;20DPA（days post anthesis）到30DPA是高低油材料油分积累的主要时期,而30DPA到成熟期是高低油材料油分含量差距产生的关键时期。20DPA低油材料3个基因均有一个表达低值,高油材料基因表达量则持续升高;30DPA时表达量达到最高,其中,对于GhHAD和GhENR的表达量,棉花高油材料为低油材料2倍以上。不同非生物胁迫的诱导表达分析表明,GhKAR、GhHAD和GhENR都不同程度地受低温诱导,GhKAR和GhHAD在ABA诱导时上调表达,但都不受MeJA诱导表达;而GhENR在MeJA诱导2 h时上调表达,之后逐渐下调,受ABA诱导不明显。【结论】获得了GhKAR、GhHAD、GhENR 3个基因cDNA全长,通过基因表达特征分析,3个基因的表达可能对种子油分积累起着重要作用,同时在棉花抗逆方面也起一定的生理作用。