枯草芽孢杆菌STO-12脂肽类物质抑菌活性及其特性分析

为了探索植物病害生物防治的新途径,对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)STO-12的脂肽类物质的抑菌活性和特性进行分析,采用滤纸片法、排油试验、乳化试验和表面张力测试检测脂肽类物质的抑菌活性和特性。研究结果表明,枣缩果病菌(Alternaria tenuissima)、杨树炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides)和杨树腐烂病菌(Cytospora chrysosperma)的生长受到脂肽类物质的强烈抑制,最小抑菌浓度(MIC)分别为0.02,0.04和0.02 mg·disc-1;分别在高温处理、强酸强碱处理、蛋白酶处理、紫外线处理及室温保存条件下,STO-12的脂肽类物质仍能保持其抑菌活性的稳定;另外,通过3种不同的检测试验,发现STO-12的脂肽类物质还具有较好的表面活性剂的特性。综上所述,研究表明枯草芽孢杆菌STO-12分泌的脂肽类物质具有高效的抗真菌活性,较好的抑菌活性稳定性和较强的表面活性的特性,作为生防制剂和生物表面活性剂,在工业和田间应用中具有较大的应用潜力。     

多粘类芽孢杆菌对木麻黄青枯病的抑菌防病作用

室内测定了商品化生物农药多粘类芽孢杆菌可湿性粉剂对木麻黄青枯病病原菌的毒力。采用打孔法结果表明,多粘类芽孢杆菌对木麻黄青枯病病原菌具有良好的拮抗作用,其抑菌圈的平均直径达到9.4 mm。采集4个品系的木麻黄小枝水培生根后进行温室盆栽,采用改进的伤根淋菌法进行接种,以只施多粘类芽孢杆菌可湿性粉剂(CK1)和只接种青枯菌(CK2)为对照,施用多粘类芽孢杆菌可湿性粉剂后接种青枯菌为处理进行实验。结果表明,在两个时间点,湛江-3的防效达到了60.8%和51.6%;湛江-2的防效达到了41.5%和40.3%;广东A14的防效达到了28.8%和23.3%,差异均显著(α=0.05);广东701-3的防效为16.3%和26.8%,差异不显著,出现此原因是广东701-3抗性强于其他3个品系。综上所述,在盆栽试验中,多粘类芽孢杆菌可湿性粉剂对木麻黄青枯病有显著的防治效果,品系本身越感病,防效越高。     

毛竹根际分离的地衣芽孢杆菌固氮特性研究

从毛竹根际分离到36株固氮菌，经初步镜检其中17株菌为芽孢杆菌，进一步鉴定确定其主要为多粘芽孢杆菌（Bacilluspolymyxa）和地衣芽孢杆菌（Bacilluslicheniformis），本文主要就其中菌号为G－8、G－12、G－14、G－17四株地衣芽孢杆菌的鉴定及固氮特性进行研究。结果显示：四株菌均为杆状，具芽孢孢孢囊稍膨大，它们的生理生化特性相同，但菌落形态有一些差异。G－8和G－17的最佳固氮温度为35℃左右，G－12和G－14的最佳固氮温度为30℃左右；G－12、G－8和G－14的最适固氮pH为6．0左右，G－17的最适固氮pH为6.0～7.5；四株菌都可利用碳源固氮，但均以葡萄糖为碳源时的固氮活性最高，依次为64．76、437．23、65．42、90．91nmolC2H4h-1，瓶-1。G－12在培养48h，G－8、G－14在培养96h，G－17在培养60h的固氮活性最高分别为138．50、122．01、170．87、109．81nmolC2H4．h-1.瓶-1。     

芽孢杆菌产纤维素酶的研究

对芽孢杆菌 (Bacillussp.ZU 0 4 )产纤维素酶的工艺参数进行了优化 ,研究结果表明 :木糖渣和豆饼粉分别是该菌合成纤维素酶的适宜碳源和氮源 ,NaCl和KH2 PO4对纤维素酶的合成具有重要作用 ,其适宜质量用量分别为 0 .5%～ 1.0 %及 0 .1% ,麸皮的添加可明显提高发酵液中的酶活力 ;3L发酵罐中的适宜发酵条件为 :搅拌速度 30 0r/min ,通气量 0 .3L/(L·min) ,培养温度 37℃ ,中性和碱性纤维素酶活力分别达到了2 57.6和 12 5.6U/mL ,显示了良好的工业应用前景。     

毛竹根际分离的多粘芽孢杆菌固氮特性的研究

对从毛竹根际分离到的菌号ＧＷ１,ＧＷ－５,ＧＷ－１０,ＧＷ－１６的４株菌进行鉴定和固氮特性研究,从其菌体形态及生理化特性确定为多粘芽孢杆菌。它们固氮的最适温度,ＧＷ－１为３０－３５℃,ＧＷ－５,ＧＷ－１６为３０℃,ＧＷ－１０为３５℃,最适固氮ｐＨＧＷ－１,ＧＷ－１０为７．５左右,ＧＷ－５为７．０左右,ＧＷ－１６为６．０－７．５之间。     

贝莱斯芽孢杆菌12-5B的石油烃降解特性研究

由北京某加油站柴油污染土壤中筛选出一株高效石油烃降解菌12-5B,经16S rDNA序列对比分析,鉴定该菌株为贝莱斯芽孢杆菌(B.velezensis)。在目标污染物正十六烷或柴油初始浓度约为8000 mg/L的无机盐培养基中,贝莱斯芽孢杆菌12-5B对上述2种石油烃污染物均具有较好的降解能力,7 d去除率达到90%以上。其最佳培养条件为温度30℃、pH=7和外加有机氮源。贝莱斯芽孢杆菌12-5B可在LB培养基中快速生长,高营养培养后可保持较高的石油烃降解能力,具备开展现场微生物修复的潜力。     

一种芽孢杆菌的新用途

芽孢杆菌为杆菌科的一属细菌,为好氧或兼性厌氧的杆菌,广泛分布在水、空气和土壤中。芽孢杆菌在菌体生长及代谢过程中产生多种活性物质和酶,合成多种维生素和植物生长素,何月秋等(2009)报道:解淀粉芽孢菌9601-Y2具有非常好的促进植物插条生根和生长的作用。在进行春兰等种子萌发特性研究时发现,Bs芽孢杆菌在国兰种子萌发中具有较强的促进作用,即被该菌感染的春兰种子萌发率特别高,萌发整齐,萌发持续时间短。对该菌分离培养、再接种实验证明,春兰种子萌发率高出无菌萌发的10倍以上,且实验证明,该菌不仅对春兰种子有效,而且对多种莲瓣兰、墨兰、寒兰等种子的萌发同样有效,有效率达95%以上。研究发现的芽孢杆菌这一新用途对保护中国兰花(春兰)资源和新品种培育具十分重要意义。     

苏云金芽孢杆菌83016菌株的研究

通过对83016菌株生理生化特性、不同培养和发酵条件下制备物室内毒力测定方法比较及小试产品对松毛虫等5种森林害虫林间防治试验结果表明,该菌株属苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种;三种不同制备方法的室内生测比较,以光密度测定法较其它两种方法简便可靠,适用于进行大量菌株筛选;83016菌株发酵产物和小试产品对马尾松毛虫等害虫有较高的毒性。     

苏云金芽孢杆菌的H-血清型鉴定

<正> 苏云金芽孢杆菌发现于二十世纪初期,但由于该菌在变种间鉴定和分类学中出现一些混乱现象,使之做为害虫生物防治手段发展缓慢。这里介绍的血清学方法是以苏云金芽孢杆菌的鞭毛抗原(H 抗原)为基础。利用血清学方法辅助于生物化学特性,对苏云金芽孢杆菌进行清晰的鉴定和分类。该方法的主要优点是敏感,特异性强,可靠和迅速。一、H—血清型方法1.H—抗原悬浮液的制备该方法依赖于细菌的鞭毛(细菌营养细胞     

苏芸金芽孢杆菌孢子囊超微结构的研究

用电子显微镜观察了分属于苏芸金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)23个 H-血清型的30个亚种和3株新分离菌株孢子囊超薄切片的超微结构。结果表明苏芸金杆菌30个亚种的芽孢和伴孢晶体在孢子囊中形成的部位、形状及数量有所不同。大部分亚种的伴孢晶体位于孢子囊的一端,以单个晶体存在于孢外膜之外,只有幕虫亚种(Subsp.finitimus)的伴孢晶体位于孢外膜之内。在孢子囊中晶体的形状分别为菱形、方形、圆形、不规则形。其数量大多数为一个。从不同森林土壤中分离到的87052、85020、85040三株菌,其中87052菌株伴孢晶体为圆形,与已知圆形伴孢晶体的亚种形态特征相似,其它两株菌在形态特征上与已知 30个亚种在孢子囊的超微结构上有着一定的差异。     

一种芽孢杆菌的植物安全性评价

指出了拮抗细菌B是实验室从种植小麦的土壤中分离和筛选出来的对小麦纹枯病菌具有良好拮抗作用的生物防治菌种,通过室内防效盆栽试验,证明了拮抗细菌B有很好的抵抗禾谷丝核菌的能力。同时根据形态学特征、生理生化特性测定和16SrDNA序列分析将拮抗细菌B鉴定为枯草芽孢杆菌。试验采用拮抗细菌B的发酵液、三唑酮,多菌灵,井冈·蜡芽菌(井岗霉素蜡样芽孢杆菌)处理小麦种子,萌发后测量小麦的种子萌发率,小麦生长到一定时间后测株高及鲜重,从而评价了拮抗细菌发酵液的植物安全性。结果表明:拮抗细菌B发酵液对小麦种子的萌发和幼苗的生长具有促进作用。同时与市面上常用杀菌剂三唑酮等进行对比,分析了其对小麦萌发和生长改善的影响。探讨了验证拮抗细菌B的实际效用,以期为小麦纹枯病的有效防治和微生物生防杀菌剂的开发奠定基础。     

两株芽孢杆菌产纤维素酶的研究

通过对筛选得到的两株高产纤维素酶的芽孢杆菌X18和X10-1-2的发酵条件进行优化,得出以下结论:麸皮作为天然纤维素可较大幅度地提高纤维素酶的产量,X18的最佳麸皮质量分数为2.5%,X10-1-2的最佳麸皮质量分数为3%。两株菌的最佳氮源均为豆饼,X18的最佳豆饼质量分数为4%,而X10-1-2的最佳豆饼质量分数为1%。产酶的最佳温度均为30℃。X10-1-2的最佳产酶pH值为5,而X18的Cx酶在pH值6~8范围内产酶最高,本实验采用pH值8。最佳产酶时间X18为20 h,而X10-1-2为60 h。     

坚强芽孢杆菌的筛选及抗菌活性

采用三层琼脂法初选对枯斑盘多毛孢P esta lotia funerea有抗生作用的细菌菌株共10株,4株P seudom onas spp.对枯斑盘多毛孢的抗生作用小于6株B acillus spp.;在B acillus spp.中,以B5菌株拮抗带最大,初步鉴定该菌株为芽孢杆菌属的坚强芽孢杆菌B acillus f irm us,对峙培养显示B5对枯斑盘多毛孢有明显的抑菌圈(平均6 mm);B5产生的非挥发性物质对枯斑盘多毛孢菌落的抑制总的表现为稀释度越小,菌落直径生长越小,抑制作用越大,抑制中量为1∶1 000~1∶10 000;B5产生的多糖、粗脂肪、蛋白质对枯斑盘多毛孢孢子萌发有抑制作用,粗脂肪可完全抑制枯斑盘多毛孢的孢子萌发(抑制率为100%),多糖在24 h可完全抑制孢子萌发,蛋白质相对较差,48~72 h抑制率为85%左右.     

竹叶提取物抑菌特性的研究

测定了竹叶提取物对食品常见污染菌的抑制效果，采用平板菌落计数测定了浓度、温度、pH值对其抑菌效果的影响。结果显示竹叶提取物对细菌有较好的抑制效果，而热处理对其抑菌效果有加强作用。     

低温条件下苏云金芽孢杆菌增效剂的研究

通过向Bt制剂中添加蔗糖、糖精、维生素C和几丁质酶等物质后发现,以上这些物质在一定的浓度范围内,均有不同程度的刺激昆虫取食及提高Bt制剂杀虫效果的作用。其中糖精0.2g·L-1试验所设置的15、20、25℃条件下,刺激昆虫取食及提高Bt制剂杀虫效果的作用明显好于其它物质,与单用Bt相比,杀虫效果分别提高了39.9%、42.8%和29.4%。此外,增效剂的加入有利于加快Bt制剂的杀虫速度,提高害虫的早期死亡率。     

地衣芽孢杆菌对麦麸降解作用的研究

通过测定发酵过程中发酵液的纤维素酶活、半纤维素酶活、可溶性总糖和还原糖浓度以及底物残渣质量、残渣结晶度、傅立叶红外光谱和表面结构的变化来研究地衣芽孢杆菌(Bacillus sp. X18)对麦麸的降解作用.发现在发酵过程中此菌体产酶的过程也就是木质纤维素的降解糖化过程.上清液中的纤维素酶活和半纤维素酶活分别在发酵进行到第96和 48 h 时达到最高峰.发酵液中总糖和还原糖含量分别于4和 48 h 达到最高值5 257.79和 1 363.94 mg/L,然后下降到一定程度后保持恒定.该菌株对麦麸长达 5 d 的降解过程中结晶度未发生明显变化.底物残渣傅立叶红外光谱分析表明,此菌株对麦麸中的纤维素、半纤维素和木质素都有不同程度的降解,但以纤维素降解为主.纤维素、半纤维素和木质素的降解率分别为 37.03 %、15.86 % 和 17.03 %.利用扫描电镜对底物残渣表面结构进行观察,可看到该菌株主要降解麦麸内表面蜂巢结构边缘骨架中起支撑作用的成分.     

解磷芽孢杆菌的筛选及其解磷能力的测定

对鄂尔多斯沙漠中几种典型固沙植物根际分离所得的95株芽孢杆菌利用溶磷圈法初步筛选,得到具有解磷能力的菌株有41株,其中26株具有较高溶磷能力的菌株,经过钼蓝比色法测定其溶磷量,获得3株高效溶磷菌:NTGB-Ⅱ-GM-2,NTBB-Ⅳ-GM-3和NTGB-Ⅲ-G-11,其解磷能力分别为对照的9.25倍,7.48倍和7.2倍,明显高于其他菌株.通过分析发现这3株菌的溶解磷能力与pH值显著相关。相关方程式为Y溶磷量=-4203.893XPH 34426.346(n=15,0.05>P=0.038>0.01,r=0.54)。另外,综合分析两种方法测定芽孢杆菌溶解无机磷的能力发现,在固体培养基上生长出溶磷圈的菌株,都表现出了不同的溶解磷的能力,但是在液体培养基摇床振荡培养条件下测得的菌株溶解磷的能力与在固体培养基上采用透明圈观察法测定的结果不完全相同,液体培养可能更合理。     

地衣芽孢杆菌YB15发酵培养优化的研究

采用单因素试验和正交试验对地衣芽孢杆菌(Bacillus lincheniformis)YB15发酵培养基的碳源、氮源、无机盐进行研究,得出该菌的最适培养基组分为葡萄糖5 g,酵母浸膏7.5g,蛋白胨7.5g,硫酸铵5.0g.在此基础上运用正交试验对地衣芽孢杆菌YB15发酵的最适条件进行研究,得到的最适培养条件为温度25℃,pH 6.5,瓶装量100 mL,接种量4 mL;地衣芽孢杆菌生长曲线的结果表明12 h～18 h时为菌体收集的最佳时间.     

两株芽孢杆菌产纤维素酶的诱导机理研究

通过测定各种酶活性研究了不同碳源对两株芽孢杆菌产纤维素酶的诱导作用,发现,这两株芽孢杆菌不能由纤维素材料作单一碳源诱导产纤维素酶,而仅由带有还原基团的单糖或双糖诱导产酶,且纤维素酶系各组分的合成表达是协同发生的。并根据这些结果对芽孢杆菌产纤维素酶的机制进行了假设。